配制溶液的一般實(shí)驗(yàn)步驟

配制溶液的一般實(shí)驗(yàn)步驟配制溶液步驟因配置的溶液不同而有所不同，現(xiàn)舉兩個(gè)例子：舉例1：配置0.05mol/L，400mLNaOH 溶液的步驟：要準(zhǔn)確配置氫氧化鈉的濃度，則要用容量瓶定容，實(shí)驗(yàn)室沒有400毫升的容量瓶，則選用 500毫升的容量瓶。1.計(jì)算需要?dú)溲趸c的質(zhì)量： 克2.稱1.000克氫氧化鈉于燒杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分 3次洗燒杯，將溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀釋至刻度線，搖勻，即，得到 0.05mol/L的氫氧化鈉溶液。如果不需要很準(zhǔn)確的話，可以直接用量筒量 400毫升，稱的時(shí)候只要稱 0.8克就可以了。 舉例2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸200mL步驟：第1步：計(jì)算：根據(jù)C1V1=C2V2，計(jì)算需要濃硫酸的體積；第2步：量取，利用刻度吸管吸取需要濃硫酸的體積；第3步：稀釋，將濃硫酸轉(zhuǎn)移到小燒杯中，加少量水稀釋；第4步：轉(zhuǎn)移,待溶液溫度降低后，將燒杯中的硫酸轉(zhuǎn)移到200mL容量瓶中；第5步：洗滌，洗滌小燒杯，和轉(zhuǎn)移的時(shí)候用到的玻璃棒，至少三次，將洗滌的水一并轉(zhuǎn)移到容量瓶中；第6步：定容，加水定容到刻度線，在距離刻度線一厘米左右改用膠頭滴管定容；第7步：搖勻,將溶液搖勻,如果液面下降也不可再加水定容；第8步：將配得的溶液轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，貼好標(biāo)簽； 舉例3：配制500mL，0.1mol/L碳酸鈉溶液步驟及注意事項(xiàng) 所需的儀器：燒杯、容量瓶、玻璃棒、膠頭滴管、分析天平、藥匙、量筒步驟： 第一步：計(jì)算：所需碳酸鈉的質(zhì)量=0.5*0.1*106=5.3克；第二步：稱量：在天平上稱量5.3克碳酸鈉固體，并將它倒入小燒杯中； 第三步：溶解：在盛有碳酸鈉固體的小燒杯中加入適量蒸餾水，用玻璃棒攪拌，使其溶解； 第四步：移液：將溶液沿玻璃棒注入 500mL容量瓶中； 第五步：洗滌：用蒸餾水洗燒杯 2～3次，并倒入容量瓶中； 第六步：定容：倒水至刻度線 1～2cm處改用膠頭滴管滴到與凹液面平直； 第七步：搖勻：蓋好瓶塞，上下顛倒、搖勻； 第八步：裝瓶、貼簽； 誤差分析： 固體藥品的稱量與液體藥品的量取是否準(zhǔn)確； 把溶液向容量瓶中轉(zhuǎn)移，溶液灑了； 未洗滌燒杯和玻璃棒； 用待配液潤洗了容量瓶； 定容時(shí)水加多了或加少了； 定容時(shí)未平視刻度線。仰視、俯視對(duì)溶液濃度有何影響？ ★俯視刻度線，實(shí)際加水量未到刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度增大； ★仰視刻度線，實(shí)際加水量超過刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度減小。市售鹽酸密度1.19，質(zhì)量分?jǐn)?shù)36%～38%以37%計(jì)算：步驟：1.計(jì)算：假若需要2mol/L的硫酸100mL，則需37%濃硫酸16.6mL；計(jì)算過程如下：假設(shè)鹽酸VmL：0.1L*2mol/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考慮到量筒的精確度0.1mL，故取16.6mL即可。2.量取：16.6mL濃硫酸； 3.溶解：把 16.6mL濃硫酸倒入已經(jīng)加入蒸餾水的小燒杯中，用玻璃棒不斷攪拌。 4.轉(zhuǎn)移：待溶液冷卻后，將溶液沿玻璃棒倒入 100毫升的容量瓶中。 5.洗滌：再用少量蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒 2-3次，并將全部洗液移入容量瓶中。 6.定容：向容量瓶內(nèi)加蒸餾水，當(dāng)液面接近刻度線 1-2厘米處時(shí)，改用滴管滴加蒸餾水到一面恰好與刻度線相切。7.搖勻：塞上瓶塞，反復(fù)顛倒容量瓶數(shù)次，使瓶內(nèi)的溶液均勻，此時(shí)可以把溶液倒入到試劑瓶中貼標(biāo)簽保存。完成配制過程 容量瓶的使用六忌： 1.忌用容量瓶進(jìn)行溶解（體積不準(zhǔn)確） 2.忌直接往容量瓶倒液（灑到外面） 3.忌加水超過刻度線（濃度偏低） 4.忌讀數(shù)仰視或俯視（仰視濃度偏低，俯視濃度偏高） 5.忌不洗滌玻璃棒和燒杯（濃度偏低） 6.忌標(biāo)準(zhǔn)液存放于容量瓶 （容量瓶是量器， 不是容器） 1mol/L的氫氧化鈉溶液 250mL，完成下列步驟： ①用天平稱取氫氧化鈉固體/克。 ②將稱好的氫氧化鈉固體放入燒杯中加少量蒸餾水將其溶解，待完全溶解后將溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶中。 ③用少量蒸餾水沖洗 2～3次，將沖洗液移入容量瓶中，在操作過程中不能損失點(diǎn)滴液體，否則會(huì)使溶液的濃度偏低。④向容量瓶內(nèi)加水至刻度線1～2cm時(shí)，改用膠頭滴管小心地加水至溶液凹液面與刻度線相切，若加水超過刻度線，會(huì)造成溶液濃度偏低應(yīng)該重新配制。⑤最后蓋好瓶蓋，搖勻，將配好的溶液移入試劑瓶中貼好標(biāo)簽。常用貯液與溶液1mol/L亞精胺（Spermidine ）：溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為 10mL。分裝成小份貯存于 -20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10mL。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺ammoniumacetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/mL牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級(jí)，無DNA酶）于9.5mL水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動(dòng)，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4mL水，分成小份貯存于-20℃，或轉(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65mL的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。8mol/L乙酸鉀（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100mL。1mol/L氯化鉀（KCl）：溶解7.46g氯化鉀于足量的水中，加水定容到 100mL。3mol/L乙酸鈉（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90mL水中，用冰乙酸調(diào)溶液的 pH至5.2，再加水定容到100mL。0.5mol/LEDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/LHEPES ：將23.8gHEPES 溶于約 90mL的水中，用NaOH調(diào)pH（6.8～8.2），然后用水定容至 100ml。1mol/LHCl：加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。25mg/mlIPGT ：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份貯存于-20℃。1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100mL。100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中， 定容到 10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20℃。 20mg/mL 蛋白酶 K（proteinaseK）：將 200mg的蛋白酶 L加入到 9.5mL水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶 K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到 10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。10mg/mLR-nase （無D-Nase）（D-Nase－freeR-Nase）：溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA酶于1mL的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl調(diào)pH至7.5，于-20℃貯存。（配制過程中要戴手套） 5mol/L氯化鈉（NaCl）：溶解29.2g（NaOH

氯化鈉于足量的水中， 定容至100mL）：溶解400g氫氧化鈉顆粒于約 0.9L

。10N氫氧化鈉水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌）

，氫氧化鈉完全溶解后用水定容至

1L

。10％SDS（十二烷基硫酸鈉） ：稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使終體積為 100mL。100％三氯乙酸（TCA）：在裝有 500gTCA的試劑瓶中加入 100mL水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。 （稀釋液應(yīng)在臨用前配制）2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-