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第二章紫外-可見分光光度法
紫外-可見吸收光譜法是根據(jù)溶液中物質(zhì)對紫外和可見光區(qū)輻射能的吸收使分子的價電子發(fā)生電子能級間的躍遷,而產(chǎn)生的吸收光譜.廣泛用于無機和有機物質(zhì)的定性和定量測定。
紫外光區(qū)在200nm-400nm,可見光譜400nm-800nm,因無機物的吸收主要集中在可見光區(qū),故本章節(jié)主要討論可見分光光度法。
第一節(jié)可見分光光度計
物質(zhì)的顏色是由于物質(zhì)對不同波長的光具有選擇性的吸收作用而產(chǎn)生的,物質(zhì)的顏色由透過光的波長決定。例:硫酸銅溶液吸收白光中的黃色光而呈藍色;高錳酸鉀溶液因吸白光中的綠色光而呈紫色。二、分光光度法的基本原理——光的吸收定律I0:入射光強度I:透過光強度c:溶液的濃度b:液層厚度T-透光率(透光度)A-吸光度(二)紫外—可見分光光度計紫外可見光檢測器光源單色器吸收池檢測器和信號顯示系統(tǒng)1、儀器主要部件單光束分光光度計雙光束分光光度計雙波長分光光度計(相互重疊多組分分析)2、儀器類型三分光光度計的測定方法(一)、標準曲線法參比標準溶液待測樣品
顯色劑顯色反應(yīng):將被測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的化學反應(yīng)。顯色劑:能與被測組分反應(yīng)使之生成有色化合物的試劑。四、提高分析方法準確度的因素
選擇性好所用的顯色劑僅與被測組分顯色而與其它共存組分不顯色,或其它組分干擾少。靈敏度足夠高有色化合物有大的摩爾吸光系數(shù),一般應(yīng)有104~105數(shù)量級。
有色配合物的組成要恒定顯色劑與被測物質(zhì)的反應(yīng)要定量進行。
生成的有色配合物穩(wěn)定性好
色差大有色配合物與顯色劑之間的顏色差別要大,這樣試劑空白小,顯色時顏色變化才明顯。1、對顯色反應(yīng)的要求誤差來源:入射光源不穩(wěn)定吸收池玻璃的厚度不均勻池壁不平行,表面有水跡,油污或劃痕光電池不靈敏,光電流測量不準確2、儀器測量的誤差1、物質(zhì)的顏色是由于選擇性地吸收了白光中的某些波長所致,某溶液呈現(xiàn)紅色是由于它吸收了白光中是紅色光波。()自測題2、在實際測定中,應(yīng)根據(jù)光吸收定律,通過改變比色皿厚度或待測溶液濃度,使吸光度的讀數(shù)處于0.2~0.7之間,以減小測定的相對誤差。()3、在吸光光度法中,摩爾吸光系數(shù)的值隨入射光的波長增加而減小。()4、顯色劑用量多,顯色反應(yīng)的完全程度高,故顯色劑用量越多越好。()5.物質(zhì)的顏色與吸收光顏色呈互補關(guān)系。()1、某符合比耳定律的有色溶液,當濃度為c時,其透光度為To,若濃度增大1倍,則此溶液的透光度為A.To/2B.2ToC.1/2lgToD.To22、當某有色溶液用1cm吸收池測得其透光率為T,若改用2cm吸收池,則透光率應(yīng)為A.2TB.2lgTC.T1/2D.T2
3、用分光光度計測量有色物質(zhì)的濃度,相對誤差最小是吸光度為:A.0.343B.0.334C.0.443D.0.4342、測量某有色配合物在一定波長下用2cm比色皿測定時其T=0.60,則A為
;若在相同條件下改用1.0cm比色皿測定,吸光度A為
,T為
。1、分光光度計的種類型號繁多,但都是由下列五大部件組成
、
、
、
、
。3、透光率為50.0%,吸光度為_
計算題1.某有色物
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