干細(xì)胞標(biāo)志物

干細(xì)胞標(biāo)志物如何鑒定各種類(lèi)型的干細(xì)胞？間充質(zhì)干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞的鑒定1人胚胎干細(xì)胞表面標(biāo)志物鑒定和基因表達(dá)：是否表達(dá)SSEA-3、SSEA-4、TRA1-60、TRA1-81、堿性磷酸酶等，檢測(cè)是否表達(dá)OCT-4、Sox2、Fgf4、Rex1等的基因。2人胚胎干細(xì)胞體內(nèi)分化能力：注射至免疫缺陷小鼠觀察是否產(chǎn)生畸胎瘤，若畸胎瘤含有3個(gè)胚層來(lái)源的細(xì)胞，可基本證明具有體內(nèi)分化的潛能。3人胚胎干細(xì)胞體外分化能力：用特異抗體檢測(cè)4人胚胎干細(xì)胞核型：是否為兩倍體的正常核型5類(lèi)胚體形成法6端粒酶的高表達(dá)造血干細(xì)胞的鑒定1自我更新能力、增殖潛能檢測(cè)細(xì)胞所生成的總細(xì)胞數(shù)2多向分化潛能在所生成的所有細(xì)胞中不同系的細(xì)胞數(shù)量3表型特征是否表達(dá)CD34、CD133、Sca-1等4細(xì)胞周期的特性如絕大多數(shù)干細(xì)胞是否處于靜止期5排出染料的特性如對(duì)活體染料羅丹明123拒染或染色較輕神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定1自我更新能力2多向分化潛能3Nestin、NCAM的表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定1一般生物學(xué)特性2細(xì)胞表面標(biāo)記SH2（CD105、內(nèi)皮糖蛋白）、SH3（CD166，白細(xì)胞活化黏附分子）等3多系分化潛能（成骨、成軟骨、成脂肪）4支持造血功能5低免疫原性和免疫調(diào)節(jié)功能干細(xì)胞鑒定一般生物學(xué)特性細(xì)胞標(biāo)志物增殖能力分化能力干細(xì)胞標(biāo)志物有哪些？細(xì)胞表面分子細(xì)胞內(nèi)特異基因的表達(dá)細(xì)胞內(nèi)特殊物質(zhì)的表達(dá)其他細(xì)胞膜表面分子又被稱(chēng)為膜抗原或者表面標(biāo)記分子（surfacemarker），大多數(shù)為跨膜（糖）蛋白，結(jié)構(gòu)上分為膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)，胞質(zhì)區(qū)執(zhí)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。少數(shù)膜分子并非跨膜蛋白，而是以糖基磷脂酰肌醇（GPI）方式連接錨固在細(xì)胞膜上。根據(jù)膜分子氨基酸序列和結(jié)構(gòu)同源性，將膜分子分為不同的家族和超家族，包括免疫球蛋白超家族、細(xì)胞因子受體家族、C型凝集素超家族、整合素家族和腫瘤壞死因子受體超家族。細(xì)胞表面分子分類(lèi)白細(xì)胞分化抗原黏附分子細(xì)胞因子受體細(xì)胞膜受體MHC免疫球蛋白Fc段受體B細(xì)胞識(shí)別抗原的膜免疫球蛋白結(jié)合促分裂素的分子其它受體和分子白細(xì)胞分化抗原

(leukocytedifferentiationantigen,LDA)定義：白細(xì)胞分化抗原是指白細(xì)胞、血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞等在分化發(fā)育不同階段以及活化過(guò)程中，出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志。多是跨膜蛋白或糖蛋白，少數(shù)為碳水化合物半抗原。舉例：如T細(xì)胞分化

1.最早期前體T細(xì)胞在胸腺上檢測(cè)到的特異標(biāo)志是CD1和TdT

2.成熟T細(xì)胞則不表達(dá)這兩種抗原。

3.當(dāng)胸腺前體細(xì)胞進(jìn)入下一分化階段，這兩種標(biāo)志消失，而HLA-1類(lèi)抗原和CD2分子在I細(xì)胞膜上表達(dá)

4.在分化的第三階段T細(xì)胞上開(kāi)始出現(xiàn)CD4和CD8抗原CD：clusterofdifferentiationCD：應(yīng)用以單克隆抗體鑒定為主的方法，將來(lái)自不同實(shí)驗(yàn)室的單克隆抗體所識(shí)別的同一分化抗原稱(chēng)CD。多克隆抗體----單克隆抗體（1975，Kohle和Milstein）---不同實(shí)驗(yàn)室獲得相同抗體但命名為不同---IWHLDA統(tǒng)一名稱(chēng)IWHLDA：人類(lèi)白細(xì)胞分化抗原的國(guó)際協(xié)作組會(huì)議（Internationalworkshoponhumanleukocytedifferentiationantigens)至2010年已被確定人類(lèi)CD抗原共363群（CD1-CD363），許多群中還包括若干個(gè)亞群；根據(jù)分布的細(xì)胞系分為T(mén)細(xì)胞、B細(xì)胞、髓細(xì)胞、NK細(xì)胞、血小板、活化細(xì)胞、粘附分子、內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)胞因子受體、紅細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、干細(xì)胞/祖細(xì)胞、碳水化合/凝集素等CD抗原，共13組。動(dòng)物的白細(xì)胞分化抗原也逐漸地采用CD命名法，與人類(lèi)CD相同的，加上與人類(lèi)相同的編號(hào)。為了與人的CD相區(qū)別，在CD前加上動(dòng)物種類(lèi)的的縮寫(xiě)，例如BoCD，表示牛的白細(xì)胞分化抗原。綿羊、山羊、馬的分別表示為OvCD、CpCD、EpCD。CD常用克隆抗體或代號(hào)主要表達(dá)細(xì)胞分子量（kDa)和結(jié)構(gòu)功能CD294B4,(integrinβ1,FNRβ)廣泛分布gp130,GPⅡa與ECM粘合，細(xì)胞間粘附，結(jié)合VCAM-1（CD106）CD30Ki-1

Ta,Ba,Rsgp105,NGF受體家族與淋巴細(xì)胞存活和增殖有關(guān)CD31SG134,TM3,HEC-75;(PECAM)

Pt,M,G,Bgp140,血小板GPⅡa粘附CD32CIKM5,41H16(FcγRⅡ)

Mac,G,B,Eogp40凝聚IgGFcR，吞噬，ADCCCD33MY9,H153,L4F3

M,BMgp67CD34MY10,ICH3

BMgp105～120生長(zhǎng)因子受體，調(diào)控早期造血CD35TO5,E11,(CR1)

G,M,B,NKsub,RBCp160～260結(jié)合C3b，調(diào)理吞噬CD365E1,ESIVC7,OKM5

M,Pt,(B)gp88，血小板GPⅢb結(jié)合ECM，血小板粘附CD37HD28,HH1

Bm,(T,M)gp40～52CD38Leu17,T16,OKT10

PC,Ta,Thy,p45CD39AC2,G28-10

Bm,(M),FDCgp70～100一些常見(jiàn)的CD分子及其分布和主要功能CD常用克隆抗體或代號(hào)（）主要表達(dá)細(xì)胞分子量（kDa)和結(jié)構(gòu)功能CD120aMR-1(TNFR;55kD)

廣泛55，NGF受體家族TNF受體，與Fas抗原共調(diào)變CDw120bMR2-1(TNFR;75kD)

T，B，M75，NGF受體家族TNF受體CDw121ahIL-1R1-M1(IL-1RⅠ型）廣泛，T，B，En,Eb,上皮80IL-1受體CDw121bhIL-1R2-M22(IL-1RⅡ型)廣泛68IL-1受體，T細(xì)胞活化CD1222RB(IL-2R,75kD,IL-2Rβ)

T，B，NK75IL-2受體，激活T、B和MCDw124hIL-4R-M57(IL-4R)

造血細(xì)胞，F(xiàn)b，上皮140IL-4受體，細(xì)胞生長(zhǎng)、分化CD126B-C22(IL-6R)

T,Bac80（與gp130組成高親和力受體）IL-6受體，細(xì)胞生長(zhǎng)、分化CDw127H2,hIL-7R-M20(IL-7R)

淋巴樣，髓樣細(xì)胞75IL-7受體，細(xì)胞生長(zhǎng)CDw128GB20(IL-8R)

PMN，Eo,B,M58～67IL-8受體，趨化和活化PMNCDw130AM64(IL-6R-gp130SIG)

廣泛130（與IL-6R，IL-11R，LIFR、OSMR和CNTFR組成高親和力受體）IL-6受體gp130，轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)注：Thy：胸腺細(xì)胞；DC：樹(shù)突狀細(xì)胞：FDC：濾泡樹(shù)突狀細(xì)胞；B：B細(xì)胞；Bsub:B亞群；Pre-B，前B細(xì)胞；Bm：成熟B細(xì)胞；Ba:活化B細(xì)胞；T：T細(xì)胞；Tsub：T亞群；Ta：活化T細(xì)胞；M：Ma：活化單核細(xì)胞；Mac：巨噬細(xì)胞；Mas：肥大細(xì)胞；PC：漿細(xì)胞；G：粒細(xì)胞；PMN：多形核細(xì)胞；My：髓樣細(xì)胞；NK：自然殺傷細(xì)胞；NKsub:NK亞群；LHC：表皮郎罕氏細(xì)胞；RS：Reed-Srtenterg細(xì)胞；NEC：神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞；RBC：細(xì)細(xì)胞；Pt：血小板；Eo：嗜酸性粒細(xì)胞；BM：骨髓細(xì)胞；Meg:巨核細(xì)胞；Fb：成纖維細(xì)胞；En：內(nèi)皮細(xì)胞；Leu：白細(xì)胞；gp：糖蛋白；p：蛋白質(zhì)；VLA：很晚出現(xiàn)在抗原；CALLA：共同型急性淋巴母細(xì)胞白血病抗原；LAMP：溶酶體相關(guān)膜蛋白；MCP：膜輔蛋白；MAC：膜攻擊單位；LFA：淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原；CR：補(bǔ)體受體；3FAL：3-fucosyl-N-acetyl-lactosamine;PECAM:血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子；ECMR：細(xì)胞外基質(zhì)受體；LCA：淋巴細(xì)胞共同抗原；PTPase：磷酸酪氨酸磷酸酯酶；ICAM：細(xì)胞間粘附分子；N-CAM：神經(jīng)細(xì)胞粘附分子；TAP：T細(xì)胞活化蛋白；Tyr-P：磷酸化酪氨酸；VCAM：血管細(xì)胞粘附分子；GPI：糖基磷脂酰肌醇；AIM：活化誘導(dǎo)分子；LIF：白血病抑制因子；OSM：抑瘤素-M；CNTF：睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子；CA：膠原蛋白；LM：層粘連蛋白；FN：纖粘連蛋白；FB：血纖維蛋白原；vWF：vonWillbrand因子；TM-4：四次跨膜家族。一種膜分子常常既有抗原名稱(chēng)，又有功能和結(jié)構(gòu)名稱(chēng)。如CD4能與自身MHCI類(lèi)分子的C區(qū)結(jié)合，既可作為黏附分子，又是協(xié)同受體和協(xié)同刺激分子，而在結(jié)構(gòu)上屬于免疫球蛋白超家族成員。黏附分子AdhesionMolecules定義：是介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞之間，細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間相互接觸、識(shí)別、結(jié)合和激活等分子的統(tǒng)稱(chēng)。特點(diǎn)：位于細(xì)胞表面或細(xì)胞基質(zhì)中的糖蛋白；以配體-受體結(jié)合的形式發(fā)揮作用；參與細(xì)胞的識(shí)別、活化和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。命名：以功能命名：如細(xì)胞間黏附分子(ICAM),血管細(xì)胞黏附分子（VCAM），LFA-1等以CD命名：統(tǒng)稱(chēng)為CD抗原/分子，大部分黏附分子已有CD編號(hào)分類(lèi)：1.整合素家族（integrinfamily）包括LFA-1、LFA-2、LFA-3、ICAM-1、ICAM-2和一些補(bǔ)體受體等。2.選擇素家族（selectinfamily)主要包括白細(xì)胞-選擇素、血小板-選擇素和內(nèi)皮細(xì)胞-選擇素3種，即CD62L、CD62P和CD63E。3.免疫球蛋白超家族(Igsuperfamily)共15個(gè)，主要有主要有CD2、CD4、CD8、CD28、CD31、CD54、CD58、CD80、CD86。4.鈣黏蛋白家族(cadherinfamily)：指在Ca2+參與下使細(xì)胞間相互聚集的細(xì)胞粘附分子，又稱(chēng)鈣粘著蛋白（C-adherin）。已知該家族有3個(gè)成員，分布在上皮組織的P-鈣粘著蛋白、主要分布在神經(jīng)組織的N-鈣粘著蛋白、分布在胎盤(pán)和間皮組織的P-鈣粘著蛋白。5.未歸類(lèi)的黏附分子作用：1.參與細(xì)胞間的識(shí)別、細(xì)胞的活化和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的增殖與分化、細(xì)胞的伸展與移動(dòng)2.免疫應(yīng)答、炎癥發(fā)生、凝血、腫瘤轉(zhuǎn)移、創(chuàng)傷愈合細(xì)胞膜受體受體：（receptor）是一種能夠識(shí)別和選擇性結(jié)合某種配體（信號(hào)分子）的大分子物質(zhì)。配體(ligand)：指細(xì)胞外的信號(hào)分子，包括激素，神經(jīng)遞質(zhì)，抗原，藥物以及其他有生物活性的化學(xué)物質(zhì)。細(xì)胞膜受體(membranereceptor)是存在于細(xì)胞膜上的一類(lèi)特殊的膜內(nèi)在蛋白，能與配體特異性結(jié)合，并在細(xì)胞內(nèi)引起特定的生物學(xué)效應(yīng).細(xì)胞因子受體細(xì)胞因子（cytokine）：指由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞（如血管內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等）經(jīng)刺激而合成分泌的一類(lèi)生物活性分子，它們介導(dǎo)免疫細(xì)胞之間的信息交換與相互調(diào)節(jié)，參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)過(guò)程。國(guó)際細(xì)胞因子學(xué)會(huì)（InternationalCytokineSociety，ICS）根據(jù)功能能分為：促炎因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子、Th1細(xì)胞因子、Th2細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）干擾素（interferon，IFN）腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor，TNF）集落刺激因子（colonystimulatingfactor，CSF）趨化性細(xì)胞因子（chemokine）生長(zhǎng)因子（growthfactor，GF）細(xì)胞因子受體的分類(lèi)I型細(xì)胞因子受體家族（紅細(xì)胞生成素受體超家族）

II型細(xì)胞因子受體家族

Ⅲ型腫瘤壞死因子受體超家族

Ⅳ型趨化性細(xì)胞因子受體家族（G-蛋白偶聯(lián)受體）MHC在誘導(dǎo)移植排斥反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮主要作用的組織抗原被稱(chēng)為主要組織相容性抗原（majorhistocompatibilityantigen）。主要組織相容性抗原高表達(dá)于白細(xì)胞（主要是淋巴細(xì)胞和單核-巨噬細(xì)胞），因此又被成為白細(xì)胞抗原（Leukocyteantigen，LA）。編碼主要組織相容性抗原的基因是主要組織相容性（基因）復(fù)合體（majorhistocompatibility-litycomplex，MHC），因此主要組織相容性抗原通常又被稱(chēng)為MHC分子。根據(jù)血清學(xué)（抗原）和生物化學(xué)（分子結(jié)構(gòu)）特點(diǎn)，將MHC分子分為I類(lèi)、II類(lèi)。MHC通常代表基因，而MHC分子或主要組織相容性抗原是基因編碼產(chǎn)物MHC的分布MHC-I主要表達(dá)于：幾乎所有有核細(xì)胞表面；不表達(dá)于：神經(jīng)細(xì)胞、胰島外分泌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、精細(xì)胞MHC-II主要表達(dá)于：活化B細(xì)胞巨噬細(xì)胞樹(shù)突細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞主要內(nèi)容2干細(xì)胞標(biāo)志物檢測(cè)的方法1干細(xì)胞標(biāo)志物分類(lèi)3常見(jiàn)的干細(xì)胞標(biāo)志物干細(xì)胞標(biāo)志物作用分離鑒定干細(xì)胞的參考依據(jù)干細(xì)胞內(nèi)分類(lèi)的依據(jù)

各種腫瘤干細(xì)胞均具有不同的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物,如CD34<‘+>CD38<’->Thy<‘->是白血病干細(xì)胞的表面標(biāo)志；Lin<’->ESA<‘+>B38.1<’+>CD44<‘+>CD24<’-/low>被認(rèn)為是乳腺癌干細(xì)胞的特征；Singh等分離出了具CD133<‘+>的腦腫瘤干細(xì)胞等等參與干細(xì)胞的分化調(diào)控維持干細(xì)胞的自我更新和多能性參與機(jī)體重要的生理和病理過(guò)程

干細(xì)胞標(biāo)志物檢測(cè)的方法熒光標(biāo)記細(xì)胞分選（FACS）免疫磁珠分離（MACS）親和吸附柱分離（CEPRATE）探針技術(shù)生物素-親和素系統(tǒng)的ABC法酶免疫法各種干細(xì)胞的篩選標(biāo)志匯總名稱(chēng)篩選標(biāo)志胚胎干細(xì)胞

造血干細(xì)胞

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表皮干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞

肝干細(xì)胞

胰島干細(xì)胞小腸干細(xì)胞脂肪干細(xì)胞

角膜干細(xì)胞

精原干細(xì)胞鼠SSEA-1、ALP、Oct-4、laminA-；人：SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-81、GCTM-2、Oct-4和ALP、端粒酶、laminA-CD34、CD14、CD45、CD133（或AC133）、KDR、c-kit、Thy、CD38-、Lin-、HLA-、DR-、CD45RA-、CDT1-SH2(CD105)、SH3、SH4、STROL-1、SB10(CD-166)、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120A、CD124、CD45-、CD34-、CD14-β1Integrin、α6Integrin、CK19、CK18-、CK20-、CK15（毛囊干細(xì)胞）Nestin、EGF受體、FGF-2受體、α6Integrin、β1Integrin、prominin-1、波形蛋白、RNA結(jié)合蛋白、Musashi、RC1抗原AFP、albumin、CK19、CK17、CK18、α6Integrin、β1Integrin、Thy-1、c-kit、CD34、TO-、G6P-PDX-1、HNF3β、Ngn3、IS1-1、THTcf4、Ifs、CK8、CK19CD10、CD13、CD29、CD49、CD55、CD59、CD105、CD166、CD14-、CD16-、CD45-、CD56-、CD61-、CD62E-、CD104-、CD106-、HLA-DR-p63、ABCG2、β1Integrin、EGF受體、CK19、α-enolase、Cx43-、CK3-、CK12-、involucrin-、nestin-、E-cadherin-Kit配體/c-Kit受體系統(tǒng)、α6Integrin、β1Integrin及其抗體常見(jiàn)的干細(xì)胞標(biāo)志物Oct-4SSEAAKPTRACD34CD133（或AC133）Sca-1KDRc-kitThySTRO-1CD105CD166CD44CD29ABCG-2NestinABCG2（ATP-bindingcassettesuperfamilyGmember2）ABCG2是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體家族的成員，廣泛存在于各種干細(xì)胞上，其特異性表達(dá)決定了SP（sidepopulation）細(xì)胞的Hoechst陰性染色表型。ABCG2是首先定位在乳腺癌細(xì)胞系上。ABCG2在CD34陰性細(xì)胞上出現(xiàn)的幾率最大，但細(xì)胞表達(dá)CD34后，ABCG2下調(diào)。ABCG2的下調(diào)也表現(xiàn)在很多造血祖細(xì)胞上。因此在原始HSC的分離鑒定上，ABCG2比CD34更有希望做為較好的標(biāo)志物。ABCG2在SP細(xì)胞上的專(zhuān)一表達(dá)提示ABCG2可能成為是成體多能干細(xì)胞陽(yáng)性篩選的潛在標(biāo)志物。ABCG2在干細(xì)胞發(fā)育生物學(xué)里也扮演著一定的功能上的角色。Oct-4Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4）屬POU轉(zhuǎn)錄因子一員，由Pou5fl基因編碼產(chǎn)生，目前被廣泛的應(yīng)用于鑒定ES細(xì)胞是否處于未分化狀態(tài)。最初鑒定為DNA結(jié)合蛋白，可通過(guò)順式元件活化基因轉(zhuǎn)錄。它在全能胚胎干細(xì)胞(ES)和生殖細(xì)胞表達(dá)。ES的分化導(dǎo)致Oct-4的下調(diào)。Oct-4可能是所有哺乳動(dòng)物體內(nèi)多能細(xì)胞發(fā)育階段的調(diào)節(jié)分子，因此也成為檢測(cè)細(xì)胞是否具有多能行的一個(gè)標(biāo)志分子。SSEAs（stage-specificembryonicantigens）SSEAs即階段特異性胚胎抗原，是一種糖蛋白，常表達(dá)于胚胎發(fā)育早期，在未分化的多能干細(xì)胞中SSEA也常為陽(yáng)性。在鼠和人的ES細(xì)胞之間它的表達(dá)存在種屬差異性。小鼠ES：SSEA-1+，SSEA3-，SSEA4-源于IPM的人ES：SSEA-1-，SSEA3+，SSEA4+源于PGC的人ES：SSEA-1+，SSEA3+，SSEA4+輸卵管上皮、子宮內(nèi)膜、附睪，成年鼠腦和腎小管區(qū)域也發(fā)現(xiàn)和SSEA-1抗體反應(yīng)。SSEA-3和4在卵子發(fā)生時(shí)合成，在卵母細(xì)胞、受精卵和早期卵裂球細(xì)胞膜上存在。堿性磷酸酶（alkalinephosphatase，AKP）一種單脂磷酸水解酶，能在堿性條件下水解磷酸單脂釋放出磷酸。AKP的高表達(dá)與未分化的多能干細(xì)胞相關(guān)，如在桑葚胚和胚泡中均有AKP的表達(dá)。未分化的ES細(xì)胞中也表達(dá)豐富的AKP，而在已分化的ES細(xì)胞中AKP則呈弱陽(yáng)性或陰性。CD34（細(xì)胞表面的唾液粘蛋白）CD34分子是I型跨膜糖蛋白，選擇性地表達(dá)于早期造血干細(xì)胞（HSCs）、造血祖細(xì)胞、小血管內(nèi)皮細(xì)胞和胚胎纖維母細(xì)胞表面。從骨髓和外周血來(lái)源的CD34陽(yáng)性富集的細(xì)胞群體顯出大部分的造血活性。CD34被認(rèn)為是造血干/祖細(xì)胞的標(biāo)志物，CD34在原始細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞后表達(dá)下降，這點(diǎn)也發(fā)現(xiàn)在克隆的祖細(xì)胞和一些細(xì)胞系的干細(xì)胞。CD34隨著細(xì)胞的分化逐漸減少直至消失，盡管CD34功能未知，但現(xiàn)在認(rèn)為它參與早期造血。CD34是HSCs標(biāo)志物？質(zhì)疑1：Osawa等人首先證明擁有完全的再建能力的小鼠HSCs可以是CD34陰性。質(zhì)疑2：人的CD34陰性細(xì)胞也有低水平的嫁接和造血能力。總的說(shuō)來(lái)，HSCs可能是CD34+或CD34-。CD133120kDa糖基化蛋白，包括5個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，最初是通過(guò)AC133單抗鑒定的，它能識(shí)別人HSCs的CD34+亞類(lèi)。一種CD133異構(gòu)體AC133-2，最近已經(jīng)被克隆并鑒定為可被AC133抗體識(shí)別的原始表面抗原。CD133可以作為用CD34篩選HSC和體外擴(kuò)增的補(bǔ)充。CD133+富集的亞群與CD34+富集的亞群擴(kuò)增方式相似，可保留多系增殖的能力。最近的研究為CD133的表達(dá)不限于原始血細(xì)胞提供了證據(jù)，同時(shí)也確定了非造血組織中一類(lèi)獨(dú)特的細(xì)胞群體。來(lái)源于外周血的CD133+祖細(xì)胞可被體外誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮細(xì)胞。

Sca-1(stemcellantigen1，Ly-6A/E)即干細(xì)胞抗原1，是18kDa磷脂酰肌醇錨定蛋白，屬Ly-6抗原家族成員。Sca-1被廣泛認(rèn)為和Ly-6半抗原一起，是小鼠HSC標(biāo)志分子，它在多能HSCs上表達(dá)。一種抗Sca-1抗體經(jīng)常和一些細(xì)胞表面標(biāo)志分子表達(dá)的陰性選擇一起用來(lái)鑒定和分離小鼠HSCs。Sca-1+HSCs可在成年骨髓、胎兒肝臟、成年動(dòng)物流動(dòng)的外周血和脾臟中被找到。Sca-1在幾種非造血組織中也被發(fā)現(xiàn)，可用來(lái)富集HSCs之外的祖細(xì)胞。Sca-1可能參與調(diào)節(jié)B細(xì)胞和T細(xì)胞活化。c-kit即CD117，為一原癌基因，可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應(yīng)用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細(xì)胞膜上，其后證明它的配體分子是造血干細(xì)胞因子（stemcellfactor，SCF）。它是信號(hào)傳導(dǎo)分子，對(duì)造血干細(xì)胞的分化具有重要作用?？乖肿覥Dl3、CD44、CD54、CD5(LFA一3)、CD71、CD73、CD90(thy一1)、CDl02、CDwll9、CDl20a，b、CDl23、CDl26，CDl27、CDl40a，CD9、P75、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子B受體I和Ⅱ、人類(lèi)白細(xì)胞抗原ABC、早期特異性胚胎抗原1，3，4(SSEA一1、SSEA一3、SSEA--4)、D7生長(zhǎng)因子與細(xì)胞因子受體IL一11R、IL一23R、lIAR(CDl24)、IL一6R、IL-7R、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體、血小板源性生長(zhǎng)因子受體細(xì)胞外基質(zhì)細(xì)胞間黏附分子l、細(xì)胞間黏附分子2、血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1即CDl06、白細(xì)胞活化黏附因子即CDl66、endoglin(CDl05)、透明質(zhì)酸受體、α-整合素(CD49b、CD49d、CD51)、β-整合素(CD29)、β4整合素(CDl04)、I型、Ⅲ型、Ⅵ型膠原、纖維連接蛋白和層粘連蛋白等趨化因子受體及配體趨化因子受體(CCR1、CCR7、CCR9、CXCR4、CXCR5和CXCR6)、趨化因子配體(CCL2、CCL4、CCL5、CCL20、CXCLl2、CXCL8和CX3CLl)其他受體干擾素γ受體、腫瘤壞死因子受體、神經(jīng)核苷素2Title間充質(zhì)干細(xì)胞常見(jiàn)的標(biāo)志物①分化相關(guān)的標(biāo)志：I，Ⅱ，Ⅲ型膠原、堿性磷酸酶、骨橋接素。②典型的造血干細(xì)胞標(biāo)志：CD3(T3)、CD7(sp40)、CDll、CDl4、CD30、CD34、CD45(淋巴細(xì)胞共有抗原)、CDll7(c-kit)、CDl35。③基質(zhì)受體：CD31(PECAM一1)、CD62E，L，S、HLA-DR。④共刺激分子：B7-1(CD80)、B7-2(CD86)。⑤其他：CD4、CD6、CDl0、CDl8、CD21、CD25、CD33(P67)、CD36、CD38、CD50、CD95。MSCs不表達(dá)的抗原主要有以下幾類(lèi)：1991年，Simmoms首次鑒別了BMSC的抗體STRO-1SH2（CD105，內(nèi)皮糖蛋白）、SH3（CD166，白細(xì)胞活化黏附分子ALCAM）、SH4（CD73）

CD13、

CD29、CD44、CD105、CD166不表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特征性的標(biāo)志分子CD31，造血細(xì)胞的表面標(biāo)志分子CD34、CD45、CD14，不表達(dá)MHC-Ⅱ分子和FasL，或極低水平表達(dá)MHC-Ⅰ分子，也不表達(dá)B7-1、B7-2、CD40及其配體。不同來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞表型不同臍帶MSC：表達(dá)CD29、CD44、CD51、CD105、SH2、SH3，不表達(dá)CD34、CD45胎盤(pán)MSC：表達(dá)CD105、SH2、SH3、SH4、SSEA-4、TRA-1-61、TRA-1-80，不表達(dá)造血細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及滋養(yǎng)層細(xì)胞的特殊標(biāo)志物脂肪MSC：表達(dá)CD29、CD44、CD105、CD166、CD49等，不表達(dá)CD31、CD106、CD3、CD4、CD8、CD14等骨髓MSC：表達(dá)CD105、CD106、不表達(dá)CD49STRO-1Stro-1+細(xì)胞是MSC中更原始的亞群,含量極少,但在體外卻具有更強(qiáng)的免疫抑制作用。用CD34陽(yáng)性骨髓細(xì)胞進(jìn)行免疫產(chǎn)生的小鼠IgM單抗STRO-1，能識(shí)別一種人骨髓基質(zhì)成分表達(dá)的表面抗原。在骨髓細(xì)胞中，STRO-1+/血型糖蛋白A-細(xì)胞群中的纖維母細(xì)胞集落形成細(xì)胞富集的頻率約100倍于STRO1+/GlycophorinA+群體。STRO-1+富集的骨髓細(xì)胞亞群有能力分化為各間質(zhì)細(xì)胞系，包括帶有血管平滑肌樣表型的支持造血的基質(zhì)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。有研究證明人Stro-1+MSC在小鼠體內(nèi)有著較Stro-1-MSC明顯增強(qiáng)的組織器官歸巢能力，而Stro-1-MSC造血支持能力更強(qiáng)。在體外擴(kuò)增MSC前首先篩選其中的Stro一1十MSC再行體內(nèi)輸注，僅以少量細(xì)胞便可發(fā)揮更為顯著的免疫調(diào)節(jié)作用，特別適合應(yīng)用于GVHD發(fā)生率較高的移植類(lèi)型，如無(wú)關(guān)供體移植、半相合移植等。STRO-1作為一種有價(jià)值的抗體，可用來(lái)鑒定、分離和功能檢測(cè)人骨髓基質(zhì)祖細(xì)胞，這些細(xì)胞和原始的HSCs有明顯區(qū)別。CD105【SH2（en