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文檔簡介

干細胞標志物如何鑒定各種類型的干細胞?間充質(zhì)干細胞胚胎干細胞的鑒定1人胚胎干細胞表面標志物鑒定和基因表達:是否表達SSEA-3、SSEA-4、TRA1-60、TRA1-81、堿性磷酸酶等,檢測是否表達OCT-4、Sox2、Fgf4、Rex1等的基因。2人胚胎干細胞體內(nèi)分化能力:注射至免疫缺陷小鼠觀察是否產(chǎn)生畸胎瘤,若畸胎瘤含有3個胚層來源的細胞,可基本證明具有體內(nèi)分化的潛能。3人胚胎干細胞體外分化能力:用特異抗體檢測4人胚胎干細胞核型:是否為兩倍體的正常核型5類胚體形成法6端粒酶的高表達造血干細胞的鑒定1自我更新能力、增殖潛能檢測細胞所生成的總細胞數(shù)2多向分化潛能在所生成的所有細胞中不同系的細胞數(shù)量3表型特征是否表達CD34、CD133、Sca-1等4細胞周期的特性如絕大多數(shù)干細胞是否處于靜止期5排出染料的特性如對活體染料羅丹明123拒染或染色較輕神經(jīng)干細胞的鑒定1自我更新能力2多向分化潛能3Nestin、NCAM的表達間充質(zhì)干細胞的鑒定1一般生物學特性2細胞表面標記SH2(CD105、內(nèi)皮糖蛋白)、SH3(CD166,白細胞活化黏附分子)等3多系分化潛能(成骨、成軟骨、成脂肪)4支持造血功能5低免疫原性和免疫調(diào)節(jié)功能干細胞鑒定一般生物學特性細胞標志物增殖能力分化能力干細胞標志物有哪些?細胞表面分子細胞內(nèi)特異基因的表達細胞內(nèi)特殊物質(zhì)的表達其他細胞膜表面分子又被稱為膜抗原或者表面標記分子(surfacemarker),大多數(shù)為跨膜(糖)蛋白,結構上分為膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū),胞質(zhì)區(qū)執(zhí)行信號轉(zhuǎn)導功能。少數(shù)膜分子并非跨膜蛋白,而是以糖基磷脂酰肌醇(GPI)方式連接錨固在細胞膜上。根據(jù)膜分子氨基酸序列和結構同源性,將膜分子分為不同的家族和超家族,包括免疫球蛋白超家族、細胞因子受體家族、C型凝集素超家族、整合素家族和腫瘤壞死因子受體超家族。細胞表面分子分類白細胞分化抗原黏附分子細胞因子受體細胞膜受體MHC免疫球蛋白Fc段受體B細胞識別抗原的膜免疫球蛋白結合促分裂素的分子其它受體和分子白細胞分化抗原

(leukocytedifferentiationantigen,LDA)定義:白細胞分化抗原是指白細胞、血小板、血管內(nèi)皮細胞等在分化發(fā)育不同階段以及活化過程中,出現(xiàn)或消失的細胞表面標志。多是跨膜蛋白或糖蛋白,少數(shù)為碳水化合物半抗原。舉例:如T細胞分化

1.最早期前體T細胞在胸腺上檢測到的特異標志是CD1和TdT

2.成熟T細胞則不表達這兩種抗原。

3.當胸腺前體細胞進入下一分化階段,這兩種標志消失,而HLA-1類抗原和CD2分子在I細胞膜上表達

4.在分化的第三階段T細胞上開始出現(xiàn)CD4和CD8抗原CD:clusterofdifferentiationCD:應用以單克隆抗體鑒定為主的方法,將來自不同實驗室的單克隆抗體所識別的同一分化抗原稱CD。多克隆抗體----單克隆抗體(1975,Kohle和Milstein)---不同實驗室獲得相同抗體但命名為不同---IWHLDA統(tǒng)一名稱IWHLDA:人類白細胞分化抗原的國際協(xié)作組會議(Internationalworkshoponhumanleukocytedifferentiationantigens)至2010年已被確定人類CD抗原共363群(CD1-CD363),許多群中還包括若干個亞群;根據(jù)分布的細胞系分為T細胞、B細胞、髓細胞、NK細胞、血小板、活化細胞、粘附分子、內(nèi)皮細胞、細胞因子受體、紅細胞、樹突狀細胞、干細胞/祖細胞、碳水化合/凝集素等CD抗原,共13組。動物的白細胞分化抗原也逐漸地采用CD命名法,與人類CD相同的,加上與人類相同的編號。為了與人的CD相區(qū)別,在CD前加上動物種類的的縮寫,例如BoCD,表示牛的白細胞分化抗原。綿羊、山羊、馬的分別表示為OvCD、CpCD、EpCD。CD常用克隆抗體或代號主要表達細胞分子量(kDa)和結構功能CD294B4,(integrinβ1,FNRβ)廣泛分布gp130,GPⅡa與ECM粘合,細胞間粘附,結合VCAM-1(CD106)CD30Ki-1

Ta,Ba,Rsgp105,NGF受體家族與淋巴細胞存活和增殖有關CD31SG134,TM3,HEC-75;(PECAM)

Pt,M,G,Bgp140,血小板GPⅡa粘附CD32CIKM5,41H16(FcγRⅡ)

Mac,G,B,Eogp40凝聚IgGFcR,吞噬,ADCCCD33MY9,H153,L4F3

M,BMgp67CD34MY10,ICH3

BMgp105~120生長因子受體,調(diào)控早期造血CD35TO5,E11,(CR1)

G,M,B,NKsub,RBCp160~260結合C3b,調(diào)理吞噬CD365E1,ESIVC7,OKM5

M,Pt,(B)gp88,血小板GPⅢb結合ECM,血小板粘附CD37HD28,HH1

Bm,(T,M)gp40~52CD38Leu17,T16,OKT10

PC,Ta,Thy,p45CD39AC2,G28-10

Bm,(M),FDCgp70~100一些常見的CD分子及其分布和主要功能CD常用克隆抗體或代號()主要表達細胞分子量(kDa)和結構功能CD120aMR-1(TNFR;55kD)

廣泛55,NGF受體家族TNF受體,與Fas抗原共調(diào)變CDw120bMR2-1(TNFR;75kD)

T,B,M75,NGF受體家族TNF受體CDw121ahIL-1R1-M1(IL-1RⅠ型)廣泛,T,B,En,Eb,上皮80IL-1受體CDw121bhIL-1R2-M22(IL-1RⅡ型)廣泛68IL-1受體,T細胞活化CD1222RB(IL-2R,75kD,IL-2Rβ)

T,B,NK75IL-2受體,激活T、B和MCDw124hIL-4R-M57(IL-4R)

造血細胞,F(xiàn)b,上皮140IL-4受體,細胞生長、分化CD126B-C22(IL-6R)

T,Bac80(與gp130組成高親和力受體)IL-6受體,細胞生長、分化CDw127H2,hIL-7R-M20(IL-7R)

淋巴樣,髓樣細胞75IL-7受體,細胞生長CDw128GB20(IL-8R)

PMN,Eo,B,M58~67IL-8受體,趨化和活化PMNCDw130AM64(IL-6R-gp130SIG)

廣泛130(與IL-6R,IL-11R,LIFR、OSMR和CNTFR組成高親和力受體)IL-6受體gp130,轉(zhuǎn)導信號注:Thy:胸腺細胞;DC:樹突狀細胞:FDC:濾泡樹突狀細胞;B:B細胞;Bsub:B亞群;Pre-B,前B細胞;Bm:成熟B細胞;Ba:活化B細胞;T:T細胞;Tsub:T亞群;Ta:活化T細胞;M:Ma:活化單核細胞;Mac:巨噬細胞;Mas:肥大細胞;PC:漿細胞;G:粒細胞;PMN:多形核細胞;My:髓樣細胞;NK:自然殺傷細胞;NKsub:NK亞群;LHC:表皮郎罕氏細胞;RS:Reed-Srtenterg細胞;NEC:神經(jīng)內(nèi)分泌細胞;RBC:細細胞;Pt:血小板;Eo:嗜酸性粒細胞;BM:骨髓細胞;Meg:巨核細胞;Fb:成纖維細胞;En:內(nèi)皮細胞;Leu:白細胞;gp:糖蛋白;p:蛋白質(zhì);VLA:很晚出現(xiàn)在抗原;CALLA:共同型急性淋巴母細胞白血病抗原;LAMP:溶酶體相關膜蛋白;MCP:膜輔蛋白;MAC:膜攻擊單位;LFA:淋巴細胞功能相關抗原;CR:補體受體;3FAL:3-fucosyl-N-acetyl-lactosamine;PECAM:血小板內(nèi)皮細胞粘附分子;ECMR:細胞外基質(zhì)受體;LCA:淋巴細胞共同抗原;PTPase:磷酸酪氨酸磷酸酯酶;ICAM:細胞間粘附分子;N-CAM:神經(jīng)細胞粘附分子;TAP:T細胞活化蛋白;Tyr-P:磷酸化酪氨酸;VCAM:血管細胞粘附分子;GPI:糖基磷脂酰肌醇;AIM:活化誘導分子;LIF:白血病抑制因子;OSM:抑瘤素-M;CNTF:睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子;CA:膠原蛋白;LM:層粘連蛋白;FN:纖粘連蛋白;FB:血纖維蛋白原;vWF:vonWillbrand因子;TM-4:四次跨膜家族。一種膜分子常常既有抗原名稱,又有功能和結構名稱。如CD4能與自身MHCI類分子的C區(qū)結合,既可作為黏附分子,又是協(xié)同受體和協(xié)同刺激分子,而在結構上屬于免疫球蛋白超家族成員。黏附分子AdhesionMolecules定義:是介導細胞與細胞之間,細胞與細胞外基質(zhì)間相互接觸、識別、結合和激活等分子的統(tǒng)稱。特點:位于細胞表面或細胞基質(zhì)中的糖蛋白;以配體-受體結合的形式發(fā)揮作用;參與細胞的識別、活化和信號轉(zhuǎn)導等。命名:以功能命名:如細胞間黏附分子(ICAM),血管細胞黏附分子(VCAM),LFA-1等以CD命名:統(tǒng)稱為CD抗原/分子,大部分黏附分子已有CD編號分類:1.整合素家族(integrinfamily)包括LFA-1、LFA-2、LFA-3、ICAM-1、ICAM-2和一些補體受體等。2.選擇素家族(selectinfamily)主要包括白細胞-選擇素、血小板-選擇素和內(nèi)皮細胞-選擇素3種,即CD62L、CD62P和CD63E。3.免疫球蛋白超家族(Igsuperfamily)共15個,主要有主要有CD2、CD4、CD8、CD28、CD31、CD54、CD58、CD80、CD86。4.鈣黏蛋白家族(cadherinfamily):指在Ca2+參與下使細胞間相互聚集的細胞粘附分子,又稱鈣粘著蛋白(C-adherin)。已知該家族有3個成員,分布在上皮組織的P-鈣粘著蛋白、主要分布在神經(jīng)組織的N-鈣粘著蛋白、分布在胎盤和間皮組織的P-鈣粘著蛋白。5.未歸類的黏附分子作用:1.參與細胞間的識別、細胞的活化和信號轉(zhuǎn)導、細胞的增殖與分化、細胞的伸展與移動2.免疫應答、炎癥發(fā)生、凝血、腫瘤轉(zhuǎn)移、創(chuàng)傷愈合細胞膜受體受體:(receptor)是一種能夠識別和選擇性結合某種配體(信號分子)的大分子物質(zhì)。配體(ligand):指細胞外的信號分子,包括激素,神經(jīng)遞質(zhì),抗原,藥物以及其他有生物活性的化學物質(zhì)。細胞膜受體(membranereceptor)是存在于細胞膜上的一類特殊的膜內(nèi)在蛋白,能與配體特異性結合,并在細胞內(nèi)引起特定的生物學效應.細胞因子受體細胞因子(cytokine):指由免疫細胞和某些非免疫細胞(如血管內(nèi)皮細胞、表皮細胞和成纖維細胞等)經(jīng)刺激而合成分泌的一類生物活性分子,它們介導免疫細胞之間的信息交換與相互調(diào)節(jié),參與免疫應答和炎癥反應過程。國際細胞因子學會(InternationalCytokineSociety,ICS)根據(jù)功能能分為:促炎因子、趨化因子、生長因子、Th1細胞因子、Th2細胞因子。白細胞介素(interleukin,IL)干擾素(interferon,IFN)腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor,TNF)集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF)趨化性細胞因子(chemokine)生長因子(growthfactor,GF)細胞因子受體的分類I型細胞因子受體家族(紅細胞生成素受體超家族)

II型細胞因子受體家族

Ⅲ型腫瘤壞死因子受體超家族

Ⅳ型趨化性細胞因子受體家族(G-蛋白偶聯(lián)受體)MHC在誘導移植排斥反應過程中發(fā)揮主要作用的組織抗原被稱為主要組織相容性抗原(majorhistocompatibilityantigen)。主要組織相容性抗原高表達于白細胞(主要是淋巴細胞和單核-巨噬細胞),因此又被成為白細胞抗原(Leukocyteantigen,LA)。編碼主要組織相容性抗原的基因是主要組織相容性(基因)復合體(majorhistocompatibility-litycomplex,MHC),因此主要組織相容性抗原通常又被稱為MHC分子。根據(jù)血清學(抗原)和生物化學(分子結構)特點,將MHC分子分為I類、II類。MHC通常代表基因,而MHC分子或主要組織相容性抗原是基因編碼產(chǎn)物MHC的分布MHC-I主要表達于:幾乎所有有核細胞表面;不表達于:神經(jīng)細胞、胰島外分泌細胞、心肌細胞、精細胞MHC-II主要表達于:活化B細胞巨噬細胞樹突細胞胸腺上皮細胞主要內(nèi)容2干細胞標志物檢測的方法1干細胞標志物分類3常見的干細胞標志物干細胞標志物作用分離鑒定干細胞的參考依據(jù)干細胞內(nèi)分類的依據(jù)

各種腫瘤干細胞均具有不同的腫瘤干細胞標志物,如CD34<‘+>CD38<’->Thy<‘->是白血病干細胞的表面標志;Lin<’->ESA<‘+>B38.1<’+>CD44<‘+>CD24<’-/low>被認為是乳腺癌干細胞的特征;Singh等分離出了具CD133<‘+>的腦腫瘤干細胞等等參與干細胞的分化調(diào)控維持干細胞的自我更新和多能性參與機體重要的生理和病理過程

干細胞標志物檢測的方法熒光標記細胞分選(FACS)免疫磁珠分離(MACS)親和吸附柱分離(CEPRATE)探針技術生物素-親和素系統(tǒng)的ABC法酶免疫法各種干細胞的篩選標志匯總名稱篩選標志胚胎干細胞

造血干細胞

骨髓間充質(zhì)干細胞表皮干細胞神經(jīng)干細胞

肝干細胞

胰島干細胞小腸干細胞脂肪干細胞

角膜干細胞

精原干細胞鼠SSEA-1、ALP、Oct-4、laminA-;人:SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-81、GCTM-2、Oct-4和ALP、端粒酶、laminA-CD34、CD14、CD45、CD133(或AC133)、KDR、c-kit、Thy、CD38-、Lin-、HLA-、DR-、CD45RA-、CDT1-SH2(CD105)、SH3、SH4、STROL-1、SB10(CD-166)、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120A、CD124、CD45-、CD34-、CD14-β1Integrin、α6Integrin、CK19、CK18-、CK20-、CK15(毛囊干細胞)Nestin、EGF受體、FGF-2受體、α6Integrin、β1Integrin、prominin-1、波形蛋白、RNA結合蛋白、Musashi、RC1抗原AFP、albumin、CK19、CK17、CK18、α6Integrin、β1Integrin、Thy-1、c-kit、CD34、TO-、G6P-PDX-1、HNF3β、Ngn3、IS1-1、THTcf4、Ifs、CK8、CK19CD10、CD13、CD29、CD49、CD55、CD59、CD105、CD166、CD14-、CD16-、CD45-、CD56-、CD61-、CD62E-、CD104-、CD106-、HLA-DR-p63、ABCG2、β1Integrin、EGF受體、CK19、α-enolase、Cx43-、CK3-、CK12-、involucrin-、nestin-、E-cadherin-Kit配體/c-Kit受體系統(tǒng)、α6Integrin、β1Integrin及其抗體常見的干細胞標志物Oct-4SSEAAKPTRACD34CD133(或AC133)Sca-1KDRc-kitThySTRO-1CD105CD166CD44CD29ABCG-2NestinABCG2(ATP-bindingcassettesuperfamilyGmember2)ABCG2是ABC轉(zhuǎn)運體家族的成員,廣泛存在于各種干細胞上,其特異性表達決定了SP(sidepopulation)細胞的Hoechst陰性染色表型。ABCG2是首先定位在乳腺癌細胞系上。ABCG2在CD34陰性細胞上出現(xiàn)的幾率最大,但細胞表達CD34后,ABCG2下調(diào)。ABCG2的下調(diào)也表現(xiàn)在很多造血祖細胞上。因此在原始HSC的分離鑒定上,ABCG2比CD34更有希望做為較好的標志物。ABCG2在SP細胞上的專一表達提示ABCG2可能成為是成體多能干細胞陽性篩選的潛在標志物。ABCG2在干細胞發(fā)育生物學里也扮演著一定的功能上的角色。Oct-4Oct-4(也叫Oct-3或Oct3/4)屬POU轉(zhuǎn)錄因子一員,由Pou5fl基因編碼產(chǎn)生,目前被廣泛的應用于鑒定ES細胞是否處于未分化狀態(tài)。最初鑒定為DNA結合蛋白,可通過順式元件活化基因轉(zhuǎn)錄。它在全能胚胎干細胞(ES)和生殖細胞表達。ES的分化導致Oct-4的下調(diào)。Oct-4可能是所有哺乳動物體內(nèi)多能細胞發(fā)育階段的調(diào)節(jié)分子,因此也成為檢測細胞是否具有多能行的一個標志分子。SSEAs(stage-specificembryonicantigens)SSEAs即階段特異性胚胎抗原,是一種糖蛋白,常表達于胚胎發(fā)育早期,在未分化的多能干細胞中SSEA也常為陽性。在鼠和人的ES細胞之間它的表達存在種屬差異性。小鼠ES:SSEA-1+,SSEA3-,SSEA4-源于IPM的人ES:SSEA-1-,SSEA3+,SSEA4+源于PGC的人ES:SSEA-1+,SSEA3+,SSEA4+輸卵管上皮、子宮內(nèi)膜、附睪,成年鼠腦和腎小管區(qū)域也發(fā)現(xiàn)和SSEA-1抗體反應。SSEA-3和4在卵子發(fā)生時合成,在卵母細胞、受精卵和早期卵裂球細胞膜上存在。堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)一種單脂磷酸水解酶,能在堿性條件下水解磷酸單脂釋放出磷酸。AKP的高表達與未分化的多能干細胞相關,如在桑葚胚和胚泡中均有AKP的表達。未分化的ES細胞中也表達豐富的AKP,而在已分化的ES細胞中AKP則呈弱陽性或陰性。CD34(細胞表面的唾液粘蛋白)CD34分子是I型跨膜糖蛋白,選擇性地表達于早期造血干細胞(HSCs)、造血祖細胞、小血管內(nèi)皮細胞和胚胎纖維母細胞表面。從骨髓和外周血來源的CD34陽性富集的細胞群體顯出大部分的造血活性。CD34被認為是造血干/祖細胞的標志物,CD34在原始細胞分化為成熟細胞后表達下降,這點也發(fā)現(xiàn)在克隆的祖細胞和一些細胞系的干細胞。CD34隨著細胞的分化逐漸減少直至消失,盡管CD34功能未知,但現(xiàn)在認為它參與早期造血。CD34是HSCs標志物?質(zhì)疑1:Osawa等人首先證明擁有完全的再建能力的小鼠HSCs可以是CD34陰性。質(zhì)疑2:人的CD34陰性細胞也有低水平的嫁接和造血能力。總的說來,HSCs可能是CD34+或CD34-。CD133120kDa糖基化蛋白,包括5個跨膜結構域,最初是通過AC133單抗鑒定的,它能識別人HSCs的CD34+亞類。一種CD133異構體AC133-2,最近已經(jīng)被克隆并鑒定為可被AC133抗體識別的原始表面抗原。CD133可以作為用CD34篩選HSC和體外擴增的補充。CD133+富集的亞群與CD34+富集的亞群擴增方式相似,可保留多系增殖的能力。最近的研究為CD133的表達不限于原始血細胞提供了證據(jù),同時也確定了非造血組織中一類獨特的細胞群體。來源于外周血的CD133+祖細胞可被體外誘導分化為內(nèi)皮細胞。

Sca-1(stemcellantigen1,Ly-6A/E)即干細胞抗原1,是18kDa磷脂酰肌醇錨定蛋白,屬Ly-6抗原家族成員。Sca-1被廣泛認為和Ly-6半抗原一起,是小鼠HSC標志分子,它在多能HSCs上表達。一種抗Sca-1抗體經(jīng)常和一些細胞表面標志分子表達的陰性選擇一起用來鑒定和分離小鼠HSCs。Sca-1+HSCs可在成年骨髓、胎兒肝臟、成年動物流動的外周血和脾臟中被找到。Sca-1在幾種非造血組織中也被發(fā)現(xiàn),可用來富集HSCs之外的祖細胞。Sca-1可能參與調(diào)節(jié)B細胞和T細胞活化。c-kit即CD117,為一原癌基因,可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細胞膜上,其后證明它的配體分子是造血干細胞因子(stemcellfactor,SCF)。它是信號傳導分子,對造血干細胞的分化具有重要作用??乖肿覥Dl3、CD44、CD54、CD5(LFA一3)、CD71、CD73、CD90(thy一1)、CDl02、CDwll9、CDl20a,b、CDl23、CDl26,CDl27、CDl40a,CD9、P75、轉(zhuǎn)化生長因子B受體I和Ⅱ、人類白細胞抗原ABC、早期特異性胚胎抗原1,3,4(SSEA一1、SSEA一3、SSEA--4)、D7生長因子與細胞因子受體IL一11R、IL一23R、lIAR(CDl24)、IL一6R、IL-7R、堿性成纖維細胞生長因子受體、血小板源性生長因子受體細胞外基質(zhì)細胞間黏附分子l、細胞間黏附分子2、血管內(nèi)皮細胞黏附分子1即CDl06、白細胞活化黏附因子即CDl66、endoglin(CDl05)、透明質(zhì)酸受體、α-整合素(CD49b、CD49d、CD51)、β-整合素(CD29)、β4整合素(CDl04)、I型、Ⅲ型、Ⅵ型膠原、纖維連接蛋白和層粘連蛋白等趨化因子受體及配體趨化因子受體(CCR1、CCR7、CCR9、CXCR4、CXCR5和CXCR6)、趨化因子配體(CCL2、CCL4、CCL5、CCL20、CXCLl2、CXCL8和CX3CLl)其他受體干擾素γ受體、腫瘤壞死因子受體、神經(jīng)核苷素2Title間充質(zhì)干細胞常見的標志物①分化相關的標志:I,Ⅱ,Ⅲ型膠原、堿性磷酸酶、骨橋接素。②典型的造血干細胞標志:CD3(T3)、CD7(sp40)、CDll、CDl4、CD30、CD34、CD45(淋巴細胞共有抗原)、CDll7(c-kit)、CDl35。③基質(zhì)受體:CD31(PECAM一1)、CD62E,L,S、HLA-DR。④共刺激分子:B7-1(CD80)、B7-2(CD86)。⑤其他:CD4、CD6、CDl0、CDl8、CD21、CD25、CD33(P67)、CD36、CD38、CD50、CD95。MSCs不表達的抗原主要有以下幾類:1991年,Simmoms首次鑒別了BMSC的抗體STRO-1SH2(CD105,內(nèi)皮糖蛋白)、SH3(CD166,白細胞活化黏附分子ALCAM)、SH4(CD73)

CD13、

CD29、CD44、CD105、CD166不表達內(nèi)皮細胞特征性的標志分子CD31,造血細胞的表面標志分子CD34、CD45、CD14,不表達MHC-Ⅱ分子和FasL,或極低水平表達MHC-Ⅰ分子,也不表達B7-1、B7-2、CD40及其配體。不同來源的間充質(zhì)干細胞表型不同臍帶MSC:表達CD29、CD44、CD51、CD105、SH2、SH3,不表達CD34、CD45胎盤MSC:表達CD105、SH2、SH3、SH4、SSEA-4、TRA-1-61、TRA-1-80,不表達造血細胞、內(nèi)皮細胞及滋養(yǎng)層細胞的特殊標志物脂肪MSC:表達CD29、CD44、CD105、CD166、CD49等,不表達CD31、CD106、CD3、CD4、CD8、CD14等骨髓MSC:表達CD105、CD106、不表達CD49STRO-1Stro-1+細胞是MSC中更原始的亞群,含量極少,但在體外卻具有更強的免疫抑制作用。用CD34陽性骨髓細胞進行免疫產(chǎn)生的小鼠IgM單抗STRO-1,能識別一種人骨髓基質(zhì)成分表達的表面抗原。在骨髓細胞中,STRO-1+/血型糖蛋白A-細胞群中的纖維母細胞集落形成細胞富集的頻率約100倍于STRO1+/GlycophorinA+群體。STRO-1+富集的骨髓細胞亞群有能力分化為各間質(zhì)細胞系,包括帶有血管平滑肌樣表型的支持造血的基質(zhì)細胞、脂肪細胞、成骨細胞和軟骨細胞。有研究證明人Stro-1+MSC在小鼠體內(nèi)有著較Stro-1-MSC明顯增強的組織器官歸巢能力,而Stro-1-MSC造血支持能力更強。在體外擴增MSC前首先篩選其中的Stro一1十MSC再行體內(nèi)輸注,僅以少量細胞便可發(fā)揮更為顯著的免疫調(diào)節(jié)作用,特別適合應用于GVHD發(fā)生率較高的移植類型,如無關供體移植、半相合移植等。STRO-1作為一種有價值的抗體,可用來鑒定、分離和功能檢測人骨髓基質(zhì)祖細胞,這些細胞和原始的HSCs有明顯區(qū)別。CD105【SH2(en

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