GB/T 27621-2011馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27621—2011

馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)方法

ProtocolofPCRforequinerhinopneumonitisvirus

2011-12-30發(fā)布2012-04-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T27621—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人冉多良單文魯馬偉王傳鋒張偉

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27621—2011

馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬鼻肺炎病毒的檢測(cè)方法

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于馬匹的流通和進(jìn)出境檢疫實(shí)施馬鼻肺炎的現(xiàn)場(chǎng)檢疫和后續(xù)監(jiān)管工作一步法

。PCR

檢測(cè)技術(shù)適用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞毒樣品檢測(cè)巢式檢測(cè)技術(shù)適用于臨床疑似樣品及細(xì)胞毒樣品檢測(cè)

;PCR。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

馬傳染性鼻肺炎

EHV:equinerhinopneumonitis,。

核糖核酸

RNA:ribonucleicacid,。

細(xì)胞病變

CPE:cytopathiceffect,。

溴化乙錠

EB:ethidiumbromide,。

乙二胺四乙酸

EDTA:ethylenediaminetetraaceticacid,。

十二烷基磺酸鈉

SDS:sodiumdodecylsulfate,。

倉(cāng)鼠幼腎細(xì)胞

BHK-21:babyhamsterkidneycell,。

磷酸鹽緩沖液

PBS:phosphatebuffersodium,。

4試劑和材料試劑不經(jīng)注明均為分析純

(,)

41水符合中一級(jí)水的規(guī)格

.:GB/T6682。

42酶

.RNAA。

43酚三氯甲烷

.-。

44瓊脂糖凝膠見(jiàn)

.2%:A.1。

45溴化乙錠見(jiàn)

.(10μg/μL):A.2。

46聚合酶

.DNA(5U/μL)。

47電泳緩沖液見(jiàn)

.50×TAE(pH8.5):A.3。

482+

.10×PCRBuffer(plusMg)。

49

.2.5mmol/mLdNTP。

410蛋白酶

.K(20mg/mL)。

411細(xì)胞

.BHK