雙氯酚酸鉀醇質(zhì)體的研究

雙氯酚酸鉀醇質(zhì)體的研究班級(jí)姓名氯芬酸鉀又名凱扶蘭，凱扶蘭是新一代強(qiáng)力非甾體抗炎藥，為苯乙酸的衍生物。雙氯酚酸鉀醇質(zhì)體的研究醇質(zhì)體醇質(zhì)體是一種新型經(jīng)皮給藥載體，可以認(rèn)為是一種特殊的脂質(zhì)體。與普通脂質(zhì)體相比，醇質(zhì)體中添加了較高濃度（20%~45%）的醇（乙醇、異丙醇），形成滲透性和包封率更好的脂質(zhì)囊泡，并具有優(yōu)良的穩(wěn)定性和皮膚耐受性。因此醇質(zhì)體成為經(jīng)皮給藥研究的熱點(diǎn)。雙氯芬酸鉀化學(xué)名，結(jié)構(gòu)圖，英文名，藥理作用鄰-（2，6-二氯苯胺基）-苯乙酸鉀DiclofenacPotassium藥理作用是抑制環(huán)氧化酶，減少前列腺素的生物合成，而前列腺素在疼痛、炎癥及發(fā)熱過程中起重要作用。對下列急癥的短期治療可迅速起效，如創(chuàng)傷后的痛性炎癥、手術(shù)后炎癥和疼痛、婦科疼痛和（或）炎癥、各種脊柱疾病疼痛綜合征、關(guān)節(jié)和非關(guān)節(jié)的風(fēng)濕和類風(fēng)濕性病變；也可作為耳鼻喉科嚴(yán)重感染性痛性炎癥的輔助治療（如扁桃體炎、中耳炎等）。但對單純發(fā)熱病人不適用。藥物不良反應(yīng)（1）偶見胃腸道上腹疼痛，各種胃腸道紊亂如惡心、嘔吐、腹瀉、腸道痙攣、消化不良、脹氣厭食等；（2）罕見消化道出血；（3）偶見頭痛、頭昏、眩暈，罕見嗜睡；（4）偶見有皮疹，罕見有蕁麻疹；（5）偶見血清轉(zhuǎn)氨酶升高，罕見黃疸性肝炎；（6）個(gè)別病人出現(xiàn)血小板、白細(xì)胞減少注意事項(xiàng)和禁忌證[注意事項(xiàng)]對患有胃腸道疾病包括消化性質(zhì)瘍、潰瘍性結(jié)腸炎以及嚴(yán)重肝功能損害的病人禁用。禁忌癥：（1）對曾有潰瘍病史的老年病人，即使在治療中并無明顯先兆癥狀，仍有可能發(fā)生消化道出血。因此，必須嚴(yán)密觀察和慎用或禁用，治療亦應(yīng)用最低有效劑量；（2）由于前列腺素對維持腎血流有重要作用，因而對老年病人、心腎功能損害者、服用利尿劑以及由于其它原因如接受大手術(shù)或術(shù)后發(fā)生細(xì)胞外液丟失的病人，在服用本品時(shí)應(yīng)特別小心；（3）本品通常只用數(shù)日，如需延長治療期，應(yīng)注意血像改變；（4）對其它NSAID有過敏史者應(yīng)禁用；（5）妊娠期特別在臨產(chǎn)前服藥有可能引起宮縮無力，故不宜服用本品內(nèi)外有關(guān)該藥物（含各種劑型）的研究報(bào)道及應(yīng)用情況【新雙氯芬酸鉀凝膠劑】的臨床療效和安全性：方法:采用多中心的隨機(jī)對照,使用雙氯芬酸鉀凝膠劑治療各種急性疼痛患者104例,其中63例與扶他林乳膠劑治療同類患者,63例進(jìn)行隨機(jī)對照,另設(shè)開放組41例。結(jié)果:雙氯芬酸鉀凝膠劑對疼痛的總臨床控制率為57.69%,總有效率為82.69%,與對照組比較無顯著性差異。其不良反應(yīng)發(fā)生率為4.81%。結(jié)論:雙氯芬酸鉀凝膠劑是安全有效的外用鎮(zhèn)痛消炎藥。總體研制和檢驗(yàn)所用儀器材料儀器ＬＣ－１０ＡＴＶＰ高效液相色譜儀（日本島津公司）；ＺｅｔａｓｉｚｅｒＮａｎｏＺＳ９０激光粒度儀（英國馬爾文公司）；Ｈ－６００透射電子顯微鏡（日本日立）；ＦＡ２５均質(zhì)機(jī)（德國Ｆｌｕｋｏ公司）；ＴＫ－６Ｈ型透皮擴(kuò)散試驗(yàn)儀（上海鍇凱科技有限貿(mào)易有限公司）。試藥雙氯芬酸鉀（武漢圣天宇科技有限公司，批號(hào)１００６２０，含量：９９．５％，）；注射用大豆磷脂（上海太偉藥業(yè)有限公司，批號(hào)０９０３０９）；維生素Ｅ（康普達(dá)生物科技有限公司）；甲醇為色譜級(jí)；其余化學(xué)試劑為市售分析純。動(dòng)物大鼠，♂，體質(zhì)量（１９０±２０）ｇ。雙氯芬酸鉀醇質(zhì)體的制備采用乙醇注入均質(zhì)法制備。稱取處方量雙氯芬酸鉀、維生素Ｅ、大豆卵磷脂于燒杯中，加無水乙醇使其溶解并將其轉(zhuǎn)至１０ｍＬ針筒中。另取處方量磷酸緩沖液（ｐＨ６．８）于三頸燒瓶中，水?。常怠妫瑱C(jī)械攪拌７００ｒ·ｍｉｎ－１，密封條件下，將針筒中的液體緩慢滴加到三頸瓶中，待滴加完后再持續(xù)攪拌５ｍｉｎ。冷卻至室溫，均質(zhì)１ｍｉｎ。最后過０．２２μｍ微孔濾膜，將得到的樣品充氮后４℃保存?zhèn)溆谩Ａ鞒虉DA:處方量雙氯芬酸鉀+維生素Ｅ+大豆卵磷脂于燒杯中+無水乙醇→溶解１０ｍＬ針筒中。B:處方量磷酸緩沖液（ｐＨ６．８）于三頸燒瓶中，水浴３５℃，機(jī)械攪拌７００ｒ·ｍｉｎ－１，

A密封條件B持續(xù)攪拌5min將針筒中的液體緩慢滴加到三頸瓶中冷卻至室溫，均質(zhì)１ｍｉｎ過０．２２μｍ微孔濾膜得到的樣品充氮后４℃保存?zhèn)溆谜辉囼?yàn)設(shè)計(jì)與處方優(yōu)選確定影響醋氯芬酸醇質(zhì)體包封率與累積滲透百分率［累積滲透百分率＝累積滲透量／（給藥劑量×藥物含量）×１００％］的主要因素：醋氯芬酸量（Ａ）、乙醇用量（Ｂ）、大豆卵磷脂用量（Ｃ）、均質(zhì)轉(zhuǎn)速（Ｄ）。上述４種因素各取３個(gè)水平，按Ｌ９（３４）進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化處方。因素水平見表１。包封率測定ＨＰＬＣ分析條件色譜柱：Ａｇｉｌｅｎｔ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流動(dòng)相：甲醇－水－冰醋酸（７５∶２５∶０．１）；流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１；檢測波長：２７６ｎｍ；柱溫：２８℃；進(jìn)樣量：２０μＬ。在此條件下醋氯芬酸與空白輔料色譜峰能很好分離，專屬性良好，方法可行。圖１高效液相色譜圖Ａ．空白醇質(zhì)體；Ｂ．醋氯芬酸對照品；Ｃ．醋氯芬酸醇質(zhì)體標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取干燥至恒重的醋氯芬酸對照品２０．３ｍｇ，置于２５０ｍＬ量瓶中，加適量甲醇溶解，并加流動(dòng)相稀釋至刻度配成質(zhì)量濃度為８１．２μｇ·ｍＬ－１的儲(chǔ)備液。分別精密量?。埃玻埃?，１，２，４，６，８ｍＬ于１０ｍＬ量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度。搖勻，過０．４５μｍ微孔濾膜，?。玻唉蹋汤m(xù)濾液進(jìn)樣測定。以峰面積（Ａ）為縱坐標(biāo)，以雙氯芬酸鉀濃度（Ｃ）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線：Ａ＝３１６４．３Ｃ＋６９３．７７（ｒ＝０．９９９９），結(jié)果表明雙氯芬酸鉀在１．６２４～６４．９６μｇ·ｍＬ－１范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好。雙氯芬酸鉀體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)離體鼠皮的制備：取雄性大鼠，斷頸處死，剔除腹毛，剝離腹部皮膚在玻璃板上小心擦除皮下脂肪，用新鮮生理鹽水洗凈，-20°C保存，備用。將解凍的大鼠皮膚固定在水平擴(kuò)散池的2個(gè)半池之間，角質(zhì)層朝向供給池，擴(kuò)散池的有效神偷面積是0.785平方厘米，供給池和接受池容積均為5ml。接受池中加入20%乙醇緩沖液5ml，供給池中加入制備的載藥醇質(zhì)體（0.35%,W/V)或與其投藥量相當(dāng)?shù)暮幰掖季彌_液（0.35%，W/V)5ml,與皮膚緊密接觸，無間隙，溫度設(shè)定為32°C，轉(zhuǎn)速穩(wěn)定在200r/min。分別于1,2,4,6,8,10,12,24h取樣3ml(同時(shí)補(bǔ)充等量接受液3ml），過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液進(jìn)樣測定，計(jì)算取樣溶液的濃度C1。按照以下計(jì)算單位面積藥物累計(jì)透過量Q：觀察醇質(zhì)體將以制備的雙氯芬酸醇質(zhì)體稀釋一定倍數(shù)后，滴至專用銅網(wǎng)上，用1%磷鎢酸負(fù)染，待自然揮干后用透射電鏡觀察醇體質(zhì)形態(tài)。

體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)流程圖

式中Q:單位面積藥物累積透過量（μg·/cm2），Ci:第i次取樣時(shí)釋放介質(zhì)中的藥物質(zhì)量濃度(μg·ml