微生物檢驗質(zhì)量控制

微生物檢驗的質(zhì)量控制實(shí)驗室的質(zhì)量管理體系

微生物檢測實(shí)驗室的質(zhì)量控制不僅僅是對檢測過程本身簡單的控制，而是貫穿于實(shí)驗室全部質(zhì)量活動的始終。要獲得可靠的檢測結(jié)果，實(shí)驗室必須建立一套全面的質(zhì)量管理體系。實(shí)驗室建立質(zhì)量管理體系的依據(jù)食品微生物檢測實(shí)驗室質(zhì)量控制規(guī)范

CNALAC23-2003食品微生物檢測實(shí)驗室認(rèn)可準(zhǔn)則GB19489-2004實(shí)驗室生物安全通用要求GB/T15481—2000檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗室能力的通用要求全國疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)工作規(guī)范2001版省、地、縣級疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗室建設(shè)指導(dǎo)意見省、地、縣級疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗室建設(shè)指導(dǎo)意見

縣級：血清學(xué)檢測實(shí)驗室，食源性病原菌及腸道菌分離鑒定實(shí)驗室，HIV初篩實(shí)驗室，結(jié)核病實(shí)驗室，地方病實(shí)驗室，寄生蟲病實(shí)驗室，食品、化妝品、水質(zhì)、涉水產(chǎn)品等健康相關(guān)產(chǎn)品微生物實(shí)驗室，職業(yè)衛(wèi)生和放射防護(hù)檢測室，理化實(shí)驗室，生化實(shí)驗室。

省、地、縣級疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗室建設(shè)指導(dǎo)意見

縣級：開展免疫學(xué)、生物化學(xué)實(shí)驗，細(xì)菌培養(yǎng)分離鑒定，常見中毒事件微生物培養(yǎng)初步分離，食品、水、空氣、涉水產(chǎn)品、化妝品等的微生物檢測，寄生蟲病原學(xué)檢測，寄生蟲病中間宿主的種群鑒定和密度測定，作業(yè)場所、公共場所、生活居住環(huán)境有毒有害因素的相關(guān)實(shí)驗，飲用水和水源水質(zhì)分析，常見毒物和化學(xué)污染因素的初步分析。

縣級疾控機(jī)構(gòu)涉水微生物

主要儀器裝備標(biāo)準(zhǔn)空氣微生物采樣器1+2生化培養(yǎng)箱1+2水微生物膜過濾裝置1恒溫水浴箱4+5超凈工作臺2+3純水處理器1生物安全柜1+2紫外線強(qiáng)度分析儀1+1生物顯微鏡2+5恒溫培養(yǎng)箱5+10概念質(zhì)量控制（Qualitycontrol）

實(shí)驗室為了保證檢驗結(jié)果實(shí)事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。食品微生物檢測實(shí)驗室

foodmicrobiologicallaboratory以質(zhì)量管理、衛(wèi)生以及監(jiān)控HACCP計劃的有效性進(jìn)行評價為目的，進(jìn)行檢測、鑒定或描述食品中致病微生物存在與否的實(shí)驗室。實(shí)驗室可以提供其檢查范圍內(nèi)的咨詢性和技術(shù)性服務(wù)，包括結(jié)果解釋和為進(jìn)一步適當(dāng)檢查提供建議以及相應(yīng)的措施。

微生物實(shí)驗室質(zhì)控的重要性

產(chǎn)品微生物檢驗，在預(yù)防疾病及研究工作中發(fā)揮越來越重要的作用，為了保障檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，日常工作中應(yīng)注意開展質(zhì)量控制。微生物檢驗的質(zhì)控

微生物學(xué)檢驗的質(zhì)量控制也分為室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價兩個組成部分。

微生物學(xué)檢驗的質(zhì)量控制是保證微生物檢驗的直接涂片染色、培養(yǎng)、鑒定、藥敏試驗及血清學(xué)分析等的準(zhǔn)確性，避免因操作變化導(dǎo)致檢驗結(jié)果錯誤，造成經(jīng)濟(jì)損失。內(nèi)容室內(nèi)質(zhì)量控制實(shí)驗室內(nèi)部質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)。室間質(zhì)量控制評價外部組織或機(jī)構(gòu)質(zhì)量評價。實(shí)驗室質(zhì)量控制

實(shí)驗室內(nèi)質(zhì)控自我控制發(fā)現(xiàn)隨機(jī)誤差和新出現(xiàn)的系統(tǒng)誤差評價檢驗質(zhì)量的穩(wěn)定性是檢驗的基礎(chǔ)、必需、常規(guī)

實(shí)驗室間質(zhì)控外部質(zhì)控發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差和實(shí)驗室間數(shù)據(jù)的可比性評價實(shí)驗室的測試系統(tǒng)和分析能力有效的校核是參加與標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗室的比對實(shí)驗室質(zhì)量控制示意圖內(nèi)部質(zhì)量控制外部質(zhì)量評估能力驗證實(shí)驗室間比對計量認(rèn)證/審查認(rèn)可（驗收）評審表

2007年12月31日廢止-人員-設(shè)施和環(huán)境-設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

-量值溯源和校準(zhǔn)

-校準(zhǔn)和檢測方法-樣品管理-記錄-證書和報告-校準(zhǔn)或檢測的分包

-外部供給驗收實(shí)驗室資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則

2007年1月1日實(shí)施-人員-設(shè)施和環(huán)境條件-校準(zhǔn)和檢測方法-設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

-量值溯源-抽樣和樣品處置-結(jié)果質(zhì)量控制-結(jié)果報告第一部分內(nèi)部質(zhì)量控制（IQC）

實(shí)驗室內(nèi)為達(dá)到質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動。其目的在于監(jiān)測實(shí)驗室分析測試過程，以評價檢驗結(jié)果是否可靠，并查找和排除質(zhì)量環(huán)節(jié)中所有階段中導(dǎo)致不滿意的原因。實(shí)驗室的內(nèi)部質(zhì)量控制適用于整個檢測過程的所有活動，包括收集樣品、檢測直至報告檢測結(jié)果。室內(nèi)質(zhì)量控制

做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗工作的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控主要包括幾個方面：實(shí)驗前的質(zhì)量控制（主要是操作人員、常用儀器設(shè)備、實(shí)驗材料如培養(yǎng)基、試劑、診斷血清、染色液、標(biāo)準(zhǔn)菌株等）、樣本檢驗過程的質(zhì)量控制（主要是環(huán)境條件和監(jiān)督），及發(fā)報告前的質(zhì)量控制。都要保證量值溯源。內(nèi)部質(zhì)量體系包括以下所有的環(huán)節(jié)：選擇樣本；收集樣本；將樣本送到試驗室；試驗室接受樣本；試驗室測試樣本；樣本測試報告 解釋樣本的報告結(jié)果。從第一步到第三步，必須按照將樣本送到試驗室的正確步驟進(jìn)行操作。從第四步到第七步，為了保證好的有效結(jié)果，必須按照良好的、規(guī)范的試驗室操作！

人員

良好的管理完整、有效、適應(yīng)的質(zhì)量體系訓(xùn)練有素遵守規(guī)程,職責(zé)分工明確使實(shí)驗室的質(zhì)量活動處于受控具有與從事工作相關(guān)部門銜接協(xié)調(diào)狀態(tài)，而不是隨意而為相符合的素質(zhì)和技能

設(shè)備校準(zhǔn)和檢定

實(shí)驗室質(zhì)量控制的目的設(shè)備、量具、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)常年處于受控狀態(tài)是獲得有把握的可靠結(jié)果溯源到國家基準(zhǔn)

設(shè)施和環(huán)境校準(zhǔn)和檢測方法文件化符合檢測要求處于完全受控狀態(tài)樣品管理保證樣品數(shù)據(jù)處理、記錄、外部服務(wù)質(zhì)量的完整性和安全性證書、報告正確采購物品的質(zhì)量質(zhì)量手冊的規(guī)定各級人員的職責(zé)和權(quán)限實(shí)驗室生物安全措施樣品采集和處理指南微生物學(xué)檢驗項目培養(yǎng)基和試劑的配制方法室內(nèi)和室間質(zhì)量控制參考數(shù)據(jù)室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求特別強(qiáng)調(diào)高度的主觀判斷力

個人的技能、經(jīng)驗微生物學(xué)的專業(yè)水平培訓(xùn)班專業(yè)實(shí)驗室進(jìn)修學(xué)術(shù)會議交流專業(yè)期刊檢驗人員的培養(yǎng)

檢驗質(zhì)量可以通過正確的操作來體現(xiàn)，例如革蘭氏染色，可以通過對標(biāo)準(zhǔn)菌株的染色來反映操作和試劑的質(zhì)量，這是有形的、看得見的。檢驗人員的培養(yǎng)

然而，質(zhì)量保證更依賴檢驗者的認(rèn)知能力。一個能夠嚴(yán)謹(jǐn)?shù)胤治鰧?shí)驗結(jié)果的檢驗者，不僅僅忠實(shí)地記錄實(shí)驗數(shù)據(jù)，而是可以實(shí)施更加嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。配有一名經(jīng)嚴(yán)格訓(xùn)練并長期從事于微生物檢驗的技術(shù)人員，全面負(fù)責(zé)實(shí)驗室的工作。檢驗人員的培養(yǎng)

當(dāng)遇到一些不常見檢驗結(jié)果或一些散發(fā)的錯誤，例如，試驗中發(fā)現(xiàn)的少見菌、從未見過的藥敏表型、污染率的增加等，往往通過一些質(zhì)控方法難以檢查出來，但具有質(zhì)量意識的微生物技術(shù)人員能對這些現(xiàn)象質(zhì)疑，及時糾正，保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

檢驗人員的培養(yǎng)1.定期進(jìn)行新理論、新技術(shù)和新方法的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)。尤其是對于最新的檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)的培訓(xùn)。2.定期進(jìn)行理論考核和操作技能考核。3.相互監(jiān)督檢驗工作。4.編寫原始記錄表格、操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書的過程，就是一次重新學(xué)習(xí)的過程。檢驗人員能力的確認(rèn)

檢驗人員應(yīng)考核后按檢驗項目上崗。上崗證上面應(yīng)該寫明具體項目，而非“微生物檢驗”。校核者應(yīng)為從事該工作五年以上的同科室檢驗人員。保密原則。室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制參考資料GB/T4789－2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗GB/T8538－1995飲用天然礦泉水檢驗方法生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范2001年版消毒技術(shù)規(guī)范2002年版化妝品衛(wèi)生規(guī)范2002年版伯杰氏細(xì)菌學(xué)手冊……操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書國家標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范中沒有明確說明的步驟，或者不夠明確的判斷指標(biāo)。國家標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范中出現(xiàn)錯誤的部分。本實(shí)驗室改進(jìn)的、獨(dú)特的處理方法。比如新儀器的應(yīng)用，其實(shí)這是一種偏離。不過，通過驗證，完全可以使用。沒有標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范可以參照的。新的檢驗方法的確認(rèn)

開展一項新的檢驗項目，必須進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。全部參加該檢驗項目的人員共同仔細(xì)學(xué)習(xí)試驗步驟，統(tǒng)一操作程序和實(shí)驗結(jié)果的判斷指標(biāo)。按要求的步驟進(jìn)行實(shí)驗，詳細(xì)記錄每一步結(jié)果，同時用已知陽性對照進(jìn)行參比。實(shí)驗結(jié)果綜合分析，組織專家評價。室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存生物安全的質(zhì)量控制常用儀器質(zhì)量控制

通常包括對冰箱、恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、電熱恒溫水浴箱、厭氧培養(yǎng)箱等基本設(shè)備溫度的監(jiān)控記錄。每日（多少次？）觀測記錄溫度，可繪制溫度曲線圖。如超出規(guī)定范圍馬上找原因，及時糾正。在儀器的旁邊置一記錄本，每次使用、保養(yǎng)、維修都要記錄，便于出現(xiàn)故障時尋找原因。這些儀器設(shè)備都必須檢定并進(jìn)行期間核查。常用儀器質(zhì)量控制

為避免偶然發(fā)生的交叉污染，實(shí)驗室的儀器不應(yīng)頻繁移動。

已經(jīng)移動了儀器，應(yīng)記錄。常用儀器質(zhì)量控制

對于箱式設(shè)備還要定期清理消毒，冰箱定期化霜。厭氧培養(yǎng)箱或厭氧罐必須進(jìn)行厭氧環(huán)境監(jiān)控。可以使用美蘭指示條或者刃天青指示劑（化學(xué)法）。也可以使用銅綠假單胞菌培養(yǎng)（生物法）。如果是CO2培養(yǎng)箱，還需要每天檢查、記錄箱內(nèi)的CO2含量。儀器設(shè)備的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

設(shè)備

控制標(biāo)準(zhǔn)

允許范圍高壓滅菌器121℃

≥121℃培養(yǎng)箱

36℃

±1℃水浴箱

46℃

±0.5℃冰箱

4℃

±2℃低溫冰箱－20℃

±5℃CO2培養(yǎng)箱5%～10%＜10%高壓滅菌鍋的質(zhì)量控制

對于消毒滅菌器械，首先要求檢定。對于日常的滅菌效果定期監(jiān)測（每月一次）或者期間核查，可以使用化學(xué)指示劑膠帶或者嗜熱脂肪芽胞桿菌生物指示菌片，選擇較低的滅菌溫度時，采用枯草桿菌芽胞指示菌片。這些產(chǎn)品，除了美國3M公司，還有一些國產(chǎn)貨。高壓滅菌鍋的質(zhì)量控制高壓滅菌鍋由專人按作業(yè)指導(dǎo)書操作，并做好每一次的作業(yè)記錄。應(yīng)包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時間、壓力/溫度、取出時間、高壓滅菌指示膠帶的顏色變化（常用無菌培養(yǎng)代替）。高壓滅菌鍋溫度波動范圍：110，115和121±2℃。高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。干熱滅菌器的質(zhì)量控制干燥滅菌箱日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息：開始的時間、到達(dá)滅菌溫度時的時間、取出的時間（或關(guān)閉時間）。干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計進(jìn)行溫度測試。干燥滅菌箱溫度要求與精確度：160±5℃滅菌2h。干燥滅菌箱校準(zhǔn)時間一般為一年。培養(yǎng)基配制用純凈水的控制對于純凈水器來說：按設(shè)備說明，定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。檢測要求：按照國家標(biāo)準(zhǔn)飲用純凈水GB17323－1998電導(dǎo)率為≤

10ms/cm。檢測頻率：每次出水。購買定點(diǎn)供應(yīng)蒸餾水，應(yīng)做好相應(yīng)的質(zhì)量控制，記錄檢測結(jié)果。天平的管理天平放置要求：無振動、無氣流影響及水平臺面上。天平要有使用及運(yùn)行檢查記錄。天平作為計量儀器是列入國家強(qiáng)制檢定的范圍，一般1次/年進(jìn)行檢定。運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對照。pH計pH計使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。緩沖液使用有效期：pH4.00約1年。pH7.00，約6個月。pH9.00，約6個月。pH計的維護(hù)：電極外表的定期清洗；電極敏感性檢測及極性恢復(fù)。專用儀器設(shè)備的質(zhì)量控制

專用微生物生化鑒定儀等儀器的使用、保養(yǎng)、維修也都必須記錄。使用細(xì)菌鑒定儀要注意維持環(huán)境清潔，制作懸濁液、從鑒定儀中取、放鑒定條都要小心，以免打翻溢出。專用儀器的質(zhì)量控制舉例全自動微生物生化鑒定儀：

a.及時更新系統(tǒng)操作軟件。

b.定期請工程師對儀器的探測部位進(jìn)行清潔。c.校對比色、比濁系統(tǒng)，也可用標(biāo)準(zhǔn)菌株對每批號的鑒定卡、條和板作質(zhì)控對照。為了保證鑒定結(jié)果準(zhǔn)確，可在全自動細(xì)菌鑒定儀自動鑒定后，再用肉眼核對一次每個比色反應(yīng)結(jié)果。專用儀器的質(zhì)量控制

目測看看鑒定板上各個生化反應(yīng)的判斷是否妥當(dāng)。比如單核細(xì)胞增生李斯特菌在API鑒定條上的生化反應(yīng)結(jié)果多半是相同的，區(qū)別主要在第1組，所以，我們要特別留意這3組生化反應(yīng)的判斷。室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制衛(wèi)生檢驗中常用的培養(yǎng)基水質(zhì)檢測用培養(yǎng)基：7種化妝品檢驗用培養(yǎng)基：8種食品檢驗用培養(yǎng)基：常用的有37種，110種被列入了GB/T4789中，其中生化試驗培養(yǎng)基23種，一般和專用培養(yǎng)基89種。食品、化妝品及涉水產(chǎn)品等產(chǎn)品微生物檢驗常規(guī)項目中所用的增菌分離培養(yǎng)基有所不同。對于菌種鑒定所用的培養(yǎng)基，各類產(chǎn)品分離的菌種其鑒定所用的培養(yǎng)基基本相同。培養(yǎng)基質(zhì)量控制培養(yǎng)基質(zhì)量控制包括三方面。

一是原料選擇；

二是配制方法；

三是質(zhì)量檢查。培養(yǎng)基質(zhì)量控制

原料選擇：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基一定要挑選優(yōu)質(zhì)品牌，如Oxoid、Difco

、生物梅里埃產(chǎn)品等。即使在國內(nèi)的產(chǎn)品中，也有明顯的差異。可以用好的產(chǎn)品作為比對材料。培養(yǎng)基質(zhì)量控制

配制方法：每次配制均按生產(chǎn)廠家提供的說明書上的方法與分量，記錄品名、干粉的批號、稱取份量、加水量、配制規(guī)格、使用的天平、高壓鍋、滅菌時間、pH計與最初最終的pH、操作者、操作日期，并于包裝上標(biāo)明品名、使用期限。培養(yǎng)基質(zhì)量控制實(shí)驗室要確保所有的試劑（包括儲存溶液）、培養(yǎng)基、稀釋劑和其它的懸浮液都貼上標(biāo)簽，標(biāo)明其適用性、特性、濃度、儲存條件、準(zhǔn)備日期、有效期和（或）推薦的儲存時期。負(fù)責(zé)微生物檢驗準(zhǔn)備的試驗人員可以從記錄中確認(rèn)。

培養(yǎng)基質(zhì)量控制制作過程必須固定統(tǒng)一。不得隨意變化。嚴(yán)格遵守并執(zhí)行產(chǎn)品說明書上標(biāo)明的培養(yǎng)基或添加劑的劑量、pH值、滅菌處理時間及溫度。培養(yǎng)基名稱、批號、配制量、規(guī)格、配方、配制日期和配制人員姓名都必須詳細(xì)記錄。培養(yǎng)基外觀檢查新配制或新購入的培養(yǎng)基必須先以肉眼檢查其外觀，顏色、透明度等等，無開裂和皺褶。培養(yǎng)基應(yīng)測pH值，不得超過所預(yù)期值的±0.2。平板培養(yǎng)基最易脫水，應(yīng)放在嚴(yán)密的有蓋容器內(nèi)或塑料袋內(nèi)。這樣平板內(nèi)培養(yǎng)基可在4℃冰箱內(nèi)避光保存兩周左右，試管內(nèi)培養(yǎng)基可保存1～2個月。我們使用橡膠塞的生理鹽水瓶包裝的瓊脂，可以維持更長的時間。培養(yǎng)基的使用量平板培養(yǎng)基厚度一般3mm（90mm平皿＋15～20mL培養(yǎng)基）。藥敏試驗用2mm（90mm平皿＋10mL培養(yǎng)基）斜面不超過試管的2/3。以免產(chǎn)氣的時候涌出試管。培養(yǎng)基的有效性試驗的判斷指針

檢查實(shí)驗室內(nèi)制備的培養(yǎng)基、稀釋劑和其它懸浮液的性質(zhì)是否合適，可參照以下幾項進(jìn)行：

a)目標(biāo)微生物的恢復(fù)或生活力的維持；

b)非目標(biāo)微生物的抑制；

c)生化（區(qū)別的和診斷的）性質(zhì)；

d)理化性質(zhì)（例如pH，體積）。

培養(yǎng)基的有效性試驗

每一批新制或新購的培養(yǎng)基，使用前均須取已知性質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株試驗是否能支持，區(qū)分或選擇某類細(xì)菌的生長。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制生長率測試適用于液體培養(yǎng)基：將菌培養(yǎng)液，用生理鹽水做倍比稀釋，取合適稀釋度進(jìn)行平板計數(shù)，同時以按相關(guān)的培養(yǎng)基配方新鮮配制的培養(yǎng)基進(jìn)行對照。不低于10%。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制菌落大小測試：劃線分離測試菌，取10個菌落測量直徑大小，其直徑均值與新鮮配制的培養(yǎng)基無統(tǒng)計學(xué)差異。培養(yǎng)基的有效性試驗

培養(yǎng)基的試驗結(jié)果需要加以記錄，項目包括試驗日期、試驗結(jié)果以及實(shí)驗者的簽名等。此記錄本需便于檢驗室人員的查看，以便能隨時解決任何發(fā)生的難題。培養(yǎng)基的有效期

配制好的培養(yǎng)基有效期的長短，應(yīng)參考相應(yīng)的書籍。若購買現(xiàn)用的培養(yǎng)基，均應(yīng)注意有效期的標(biāo)示是否正確。如血平板的有效期為3星期，厭氧菌分離培養(yǎng)基為1～2星期等。培養(yǎng)基的無菌試驗

每批配好的培養(yǎng)基須進(jìn)行無菌試驗?？山Y(jié)合空白檢驗進(jìn)行。隨機(jī)選取5～10%的量，如果配制大量的培養(yǎng)基，則任意選取10個平板或管裝培養(yǎng)基，35℃過夜培養(yǎng)，證明無菌生長為合格。培養(yǎng)基質(zhì)量控制1.日常檢驗時進(jìn)行的空白對照，可以證明培養(yǎng)基已經(jīng)達(dá)到滅菌效果。2.用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種，以保證各種培養(yǎng)基能培養(yǎng)分離出相應(yīng)的致病菌，提高分離率。3.玻璃器具：注意殘留消毒劑或者其他抑菌物質(zhì)對微生物生長的影響。培養(yǎng)基質(zhì)量控制a.基礎(chǔ)培養(yǎng)基：要求微生物生長良好，并表現(xiàn)其典型的特征。如血瓊脂平板接種金黃色葡萄球菌和溶血鏈球菌。b.選擇性培養(yǎng)基：要求被抑制的細(xì)菌不生長或生長較弱，而被選擇生長的細(xì)菌生長良好。同時看其長勢是否符合規(guī)定，如SS平板接種沙門氏菌、志賀氏菌、大腸埃希氏菌。c.生化反應(yīng)培養(yǎng)基：要求用標(biāo)準(zhǔn)陽性和陰性菌株進(jìn)行質(zhì)量控制。培養(yǎng)基質(zhì)量控制

可以按照衛(wèi)生部的WS/T232－2002《商品性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗規(guī)程》進(jìn)行培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。

如果有條件可參照國際食品微生物與食品衛(wèi)生委員會（ICFMH）提供的關(guān)于培養(yǎng)基質(zhì)控方法進(jìn)行質(zhì)控。培養(yǎng)基名稱菌株名稱預(yù)期結(jié)果普通瓊脂大腸埃希氏菌生長表皮葡萄球菌生長血瓊脂平板乙型溶血性鏈球菌生長、乙型溶血甲型溶血性鏈球菌生長、甲型溶血伊紅美藍(lán)瓊脂大腸埃希氏菌生長、發(fā)酵乳糖鼠傷寒沙門氏菌生長、不發(fā)酵乳糖金黃色葡萄球菌不生長SS瓊脂大腸埃希氏菌生長不良鼠傷寒沙門氏菌生長金黃色葡萄球菌不生長尿素培養(yǎng)基普通變形桿菌陽性（紅色）志賀氏菌陰性（不變色）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制沒有列在WS/T232－2002《商品性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗規(guī)程》中的培養(yǎng)基，必須自行制定質(zhì)量控制作業(yè)指導(dǎo)書。注意必須區(qū)分定性培養(yǎng)基或者定量培養(yǎng)基的質(zhì)控要求不同。培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

購置培養(yǎng)基時，要求供應(yīng)商提供產(chǎn)品質(zhì)控證書，選擇通過ISO9001的生產(chǎn)廠家。培養(yǎng)基使用前必須用對照菌株進(jìn)行評估。按照培養(yǎng)基和試劑標(biāo)簽說明的貯藏條件保存。培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

Oxoid出產(chǎn)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株Quanti-Cult，含有指定數(shù)目的微生物，用于質(zhì)量控制工作。在定義的程序和生長條件下，形成指定數(shù)目的菌落單位；如果在其它條件下，或者培養(yǎng)基含有更多的抑制劑（選擇劑），或者培養(yǎng)基的營養(yǎng)不良，則不能保證形成指定數(shù)目的菌落單位。培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

2006年，國家質(zhì)檢總局批準(zhǔn)49種國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其中包括用作食品微生物菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

此次批準(zhǔn)的食品微生物菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，一種是以模擬食品實(shí)物，添加芽胞桿菌、腸桿菌、沙雷氏菌等菌株經(jīng)冷凍干燥制成，另一種是以魚粉為基質(zhì)與細(xì)菌混合經(jīng)冷凍干燥制成。這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在控制食品中細(xì)菌總數(shù)的測量中起著測量標(biāo)準(zhǔn)的作用，有利于食品中細(xì)菌數(shù)量測量方法的核準(zhǔn)和量值統(tǒng)一，更有利于保證檢驗質(zhì)量。

室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制試劑的質(zhì)量控制注意有效期。監(jiān)控貯存條件，并定時記錄。用陽性和陰性標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行核查。血漿凝固酶—金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌氧化酶試劑—銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌靛基質(zhì)試劑—大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌常用試劑的陽性、陰性對照菌株常用試劑陽性對照菌株陰性對照菌株血漿凝固酶試劑金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌觸酶試驗用試劑金黃色葡萄球菌化膿鏈球菌V-P試驗用試劑陰溝腸桿菌大腸埃希氏菌靛基質(zhì)試劑大腸埃希氏菌陰溝腸桿菌氧化酶試劑銅綠假單胞菌大腸埃希氏菌

試劑的質(zhì)量控制各類試劑，在配制或購入后均應(yīng)進(jìn)行“有效”試驗，用已知陽性及陰性菌株進(jìn)行試驗。試劑須根據(jù)標(biāo)示的配制要領(lǐng)或制造者的要求適當(dāng)?shù)膬Υ妗^穩(wěn)定的試劑，如靛基質(zhì)試劑應(yīng)在配制時及每周予以檢測核對，凡不穩(wěn)定的試劑每天使用時均應(yīng)檢測，合格后才能使用。染色液質(zhì)量控制

染色液必須按標(biāo)準(zhǔn)方法與分量配制，過濾后使用，每次記錄并且標(biāo)明配制量、操作者以及購入或者配制日期。染色方法質(zhì)量控制

染色方法也必須進(jìn)行染色步驟質(zhì)控。如革蘭氏染色在一張玻片上同時涂有金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌等等，每次質(zhì)控與檢品同步進(jìn)行，以保證染色性判斷準(zhǔn)確無誤。購買現(xiàn)成的試劑盒，則使用標(biāo)準(zhǔn)菌株作為參照。各種常用染色液的質(zhì)控菌株——————————————————————————染色液陽性對照菌陰性對照菌監(jiān)控頻度——————————————————————————革蘭氏染色液金黃色葡萄球菌大腸埃希氏菌每批莢膜染色液肺炎克雷伯菌每批鞭毛染色液普通變形桿菌福氏志賀氏菌每次——————————————————————————診斷血清的質(zhì)控

對待診斷血清，因為容易變質(zhì)，所以需要經(jīng)常進(jìn)行質(zhì)量控制。原理與培養(yǎng)基的質(zhì)量控制相同。在購入新的批號或者期間核查的時候，必須記錄日期、觀察澄清度、顏色和是否有沉淀物，然后置4℃冰箱保存。診斷血清的質(zhì)控

使用標(biāo)準(zhǔn)菌株來核查血清的凝集情況，測試其敏感性和特異性。注意有效期和效價的變化，尤其是接近保質(zhì)期的時候。每次使用前應(yīng)注意檢查診斷血清的批號、有效期，如發(fā)現(xiàn)渾濁或有絮狀沉淀物時，很可能系污染所致，不能再繼續(xù)使用。微生物實(shí)驗室診斷血清質(zhì)控記錄表

名稱檢測頻率質(zhì)控物質(zhì)控鑒定記錄日期操作者沙門氏菌屬診斷血清每月傷寒沙門氏菌大腸埃希氏菌（ATCC25922）鼠傷寒沙門氏菌無菌鹽水

傷寒沙門氏菌鼠傷寒沙門氏菌ATCC25922無菌鹽水

A-F多價（）（）（）（）Vi（）（）（）（）Hd（）（）（）（）

Hi（）（）（）（）O4（）（）（）（）O9（）（）（）（）

志賀氏菌屬診斷血清

每月福氏志賀菌宋內(nèi)志賀菌大腸埃希氏菌（ATCC25922）無菌鹽水

福氏志賀菌宋內(nèi)志賀菌ATCC25922無菌鹽水

多價血清（）（）（）（）福氏志賀氏菌血清（）（）（）（）宋內(nèi)志賀氏菌血清（）（）（）（）

致病性大腸埃希氏菌診斷血清每月EPECO126B16大腸埃希氏菌（ATCC25922）

EPECO126B16ATCC25922OK1（）（）OK2（）（）OK3（）（）

室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制樣本檢驗過程的質(zhì)量控制培養(yǎng)前選擇合理的檢驗項目。樣本采集、運(yùn)送（早期采集、無菌采集、即時送檢）。樣本的合理保存。送檢樣本的登記：三查、三對。不符合檢驗要求的樣本登記：注明原因退回。樣本檢驗過程的質(zhì)量控制培養(yǎng)中：直接診斷：直接涂片非常必要和重要。分離培養(yǎng)：使用多種適合于可疑病原菌生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。鑒定：按鑒定程序執(zhí)行，正確引導(dǎo)下一步鑒定。樣本檢驗過程的質(zhì)量控制

在檢驗過程中還要注意三點(diǎn)：（1）做平行樣，以保證結(jié)果的可比性；（2）設(shè)立空白對照，以防止其他污染而導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確；（3）設(shè)計合適的質(zhì)控頻率，進(jìn)行質(zhì)控試驗。將質(zhì)控菌株與常規(guī)工作一起進(jìn)行，不能為質(zhì)控菌株設(shè)計單獨(dú)操作程序，更不能專人專做。當(dāng)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株的內(nèi)在敏感性發(fā)生改變時，要更換新的菌種。

樣本檢驗過程的質(zhì)量控制培養(yǎng)后：結(jié)果復(fù)核：計算是否正確。確定病原菌的證據(jù)是否充足。報告單的原始信息復(fù)核。陽性結(jié)果及時通知受檢單位。特別結(jié)果提示。重視樣品的運(yùn)輸

樣品采集后，應(yīng)盡量減少運(yùn)輸和儲存時間，盡快處理并檢測，時間耽擱得越少，檢驗結(jié)果的可靠性就越高。因為標(biāo)本儲存時，微生物的各種代謝活動均直接影響標(biāo)本的質(zhì)量。因此，檢測非定型包裝產(chǎn)品時，應(yīng)在采樣后立刻送到微生物實(shí)驗室，檢驗工作在4h內(nèi)完成。重視樣品的儲存

短期內(nèi)置于室溫不影響細(xì)菌檢出，無需冷藏。如果不能及時檢測，在送往實(shí)驗室之前不得已需放置一段時間，應(yīng)置于2～8℃冰箱中保存。室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源標(biāo)準(zhǔn)菌株要求必須是形態(tài)、染色反應(yīng)、生理生化及血清學(xué)特性典型而穩(wěn)定的菌株。實(shí)驗結(jié)果重復(fù)性好，極少發(fā)生變異。國際社會認(rèn)可。來源于專門的菌種保藏機(jī)構(gòu)。標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源標(biāo)準(zhǔn)菌株的主要來源：美國典型菌種保藏中心ATCC（AmericanTypeCultureCollection）中科院微生物研究所衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存法之冷凍干燥法

最理想的保存方法，不改變菌種性狀，保存時間長。手續(xù)繁瑣，需專門的冷凍干燥設(shè)備。再放在液氮罐或－80度低溫冰箱。菌種保存中心均采用此法。標(biāo)準(zhǔn)菌株保存法之冰凍保存法

此法較簡單，將細(xì)菌混懸于脫纖維羊血或脫脂牛奶中，置液氮或－20℃冰箱保存。但細(xì)菌最終經(jīng)多次轉(zhuǎn)種，性狀可能發(fā)生變異。標(biāo)準(zhǔn)菌株保存法之培養(yǎng)基保存法簡便易行的方法，適用于一般實(shí)驗室。（1）普通瓊脂斜面保存法：適于一般細(xì)菌的保存，置4℃冰箱可保存1～3個月。（2）血瓊脂斜面保存法：適于鏈球菌，可半月轉(zhuǎn)種一次。腦膜炎奈瑟氏菌應(yīng)用巧克力斜面，若加液體石蠟，可延長保存期。（3）半固體穿刺法：配合液體石蠟，置4℃冰箱可保存3～6個月，適用于腸桿菌科細(xì)菌。標(biāo)準(zhǔn)菌株的應(yīng)用用于實(shí)驗室的內(nèi)部控制用于實(shí)驗室間的質(zhì)量控制（外部質(zhì)量評價）用于評價檢測方法的準(zhǔn)確度實(shí)施合作項目時使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用于評價和仲裁用于制備實(shí)驗室的內(nèi)質(zhì)控樣品實(shí)驗室必備質(zhì)控菌株大腸埃希氏菌ATCC25922銅綠假單胞菌ATCC27853金黃色葡萄球菌ATCC25923糞腸球菌ATCC29212腸炎沙門氏菌志賀氏菌溶血性鏈球菌室內(nèi)質(zhì)量控制對微生物檢驗人員的要求操作規(guī)程、作業(yè)指導(dǎo)書、質(zhì)量手冊儀器設(shè)備的質(zhì)量控制培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試劑、染色液及診斷血清的質(zhì)控樣本檢驗過程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存環(huán)境條件（生物安全）的質(zhì)量控制檢驗環(huán)境的質(zhì)量控制

微生物檢驗實(shí)驗室重點(diǎn)控制的是空氣污染。實(shí)際上，光照、風(fēng)速等等也有限制。近年對于清潔區(qū)、污染區(qū)的標(biāo)識也有明確的要求。檢驗環(huán)境的質(zhì)量控制

由于受經(jīng)濟(jì)和技術(shù)條件限制，目前不少微生物實(shí)驗室仍將實(shí)驗用房分隔成操作間和緩沖間，操作間又分隔成許多小隔離區(qū)，并依靠數(shù)盞紫外燈，以達(dá)到隔離的目的。這種實(shí)驗室格局在大部分檢驗單位還在使用，并以沉降菌數(shù)參數(shù)為控制指標(biāo)。在檢驗標(biāo)準(zhǔn)沒有明確限制的時候，仍可以使用。檢驗環(huán)境的質(zhì)量控制

較完善的微生物實(shí)驗室具備無菌實(shí)驗室、凈化實(shí)驗室、生物安全實(shí)驗室等，凈化實(shí)驗室應(yīng)采用封閉過濾除菌，通風(fēng)方式、吊頂、隔墻、圍護(hù)全部采用彩鋼板，地面作環(huán)氧樹脂自流平處理，并設(shè)置非凈化區(qū)、更衣區(qū)、凈化區(qū)。凈化實(shí)驗室應(yīng)定期進(jìn)行風(fēng)速監(jiān)測和及時更換過濾層罩。

環(huán)境設(shè)施的相關(guān)技術(shù)指標(biāo)凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測?？諝鉂崈舳戎笜?biāo)：檢測頻率及方法。2次/月；空氣細(xì)菌檢測（沉降法）。有條件的，增加浮游菌。級別≥0.5mm塵粒(個/L)≥5mm塵粒(個/L)活菌顆粒平均數(shù)(cfu/平板)100≤3.5≤0.0≤1.010000≤350.0≤2.5≤3.0檢驗環(huán)境的質(zhì)量控制

條件有限的實(shí)驗室可使用超凈工作臺；無菌室應(yīng)配臭氧/紫外線消毒裝置，在使用前后都應(yīng)開啟紫外線燈消毒，并定期進(jìn)行紫外線強(qiáng)度和空氣質(zhì)量監(jiān)測；生物安全實(shí)驗室除了正常管理、維護(hù)之外，要注意空氣過濾的質(zhì)量和工作人員的隔離防護(hù)。

凈化工作臺的控制水平流凈化工作臺工作區(qū)域，要求潔凈度為100級。空氣沉降30min，沉降菌數(shù)＜1cfu/皿。垂直流凈化工作臺，沉降菌數(shù)＜0.49cfu/皿.凈化工作臺運(yùn)行檢查頻次：2次/月，主要是細(xì)菌沉降檢測。凈化工作臺高效過濾膜一般為一年更換一次，并同時進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測。實(shí)驗室環(huán)境的控制

1.防塵源性污染措施：定期進(jìn)行實(shí)驗室的熏蒸消毒，工作前后消毒液噴霧降塵，擦拭工作臺面。超凈工作臺、生物安全柜應(yīng)根據(jù)其功能定期檢測其工作能力，清洗更換濾網(wǎng)。紫外燈的控制儀器測試法：紫外線燈每三月檢查紫外線強(qiáng)度。通過專用儀器檢測紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。消毒技術(shù)規(guī)范中規(guī)定在距離1m處，要求其強(qiáng)度為90。生物測試法：殺菌效果的檢查采用大腸桿菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定比例稀釋，菌量控制在200～250個/0.5mL，涂布平板在紫外燈下照射2min，同時設(shè)置普通光源的對照組，培養(yǎng)48h，計算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。實(shí)驗室環(huán)境的控制

2.防人源性污染措施：換鞋、帶口罩、帽子、手套，穿隔離衣。這些材料的消毒措施。3.防實(shí)驗動物和實(shí)驗材料自身的污染：注意無菌操作，要防止動物體表和體內(nèi)正常存在的微生物污染樣本，干擾病原微生物的檢出。實(shí)驗室內(nèi)部質(zhì)量控制措施

系統(tǒng)使用一式雙份的細(xì)菌總數(shù)測定；系統(tǒng)使用接種了某種培養(yǎng)物(標(biāo)準(zhǔn)菌株)的樣品，用于定性測定，用于培養(yǎng)基、配套試劑、血清的性能確認(rèn)；同時使用陽性對照、陰性對照、基質(zhì)對照、空白對照；由同幾個檢驗人員同時平行地進(jìn)行一次以上的平板計數(shù)；系統(tǒng)使用盲樣。菌落總數(shù)測定質(zhì)控方法菌落計數(shù)精密度控制直接計數(shù)選擇同一標(biāo)本，要求多名檢驗人員進(jìn)行菌落計數(shù)。將大腸桿菌ATCC25922或經(jīng)檢定標(biāo)化的菌片，通過合適的梯度稀釋，選擇合適的稀釋度進(jìn)行菌落計數(shù)實(shí)驗操作。36±1℃培養(yǎng)24h進(jìn)行菌落計數(shù)。菌落總數(shù)測定質(zhì)控方法計數(shù)精密度控制重復(fù)計數(shù)法選擇十個平板，每個平板具有合適的菌落數(shù)（100以內(nèi)）。將平板編號，由實(shí)驗人員進(jìn)行計數(shù)并記錄結(jié)果。去掉平板編號，將平板置冰箱保存過夜，次日取出，重新給予編號，由實(shí)驗人員重復(fù)計數(shù)并記錄。計算每位實(shí)驗人員每對結(jié)果的平均數(shù)（X）。菌種、毒種的管理生物安全管理制度定期核查——相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。病原微生物危害等級及對應(yīng)防護(hù)水平級別病原微生物危害等級操作準(zhǔn)則安全防護(hù)(一級屏障)設(shè)施(二級屏障)1（低個體危害，低群體危害）不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作不要求要求有開放的實(shí)驗臺面和洗手池2（中等個體危害，有限群體危害)能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險有限。生物安全1級加限制進(jìn)入、生物危險警示標(biāo)志；“銳器”安全操作策略；有關(guān)廢棄物凈化處理及醫(yī)學(xué)監(jiān)測政策的生物安全手冊一級屏障：Ⅰ型或Ⅱ型BSCs或其它用于操作可能產(chǎn)生感染性氣溶膠或飛濺物的個人防護(hù)裝備或物理防護(hù)設(shè)施；個人防護(hù)裝置：實(shí)驗服、手套、面罩生物安全1級加高壓滅菌設(shè)備生物安全水平分級

根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護(hù)措施，將生物安全防護(hù)水平（biosafetylevel，BSL）分為4級，I級防護(hù)水平最低，IV級防護(hù)水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示醫(yī)學(xué)或生物實(shí)驗室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平；以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動物實(shí)驗室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平。一級生物安全防護(hù)水平（BSL－1）

BSL－1適合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、對實(shí)驗室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子（對應(yīng)于我國的第四類危害的微生物）的工作。BSL－1不需要特殊的一級和二級屏障、除需要洗手池外，依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作即可獲得基本的防護(hù)水平。BSL－1實(shí)驗室無需特殊選址，普通建筑物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進(jìn)入的設(shè)計。每個實(shí)驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處（？）。在實(shí)驗室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個人便裝與實(shí)驗室工作服分開放置。實(shí)驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、易清潔、不滲水、耐腐蝕。地面應(yīng)防滑，不得鋪設(shè)地毯。實(shí)驗臺面應(yīng)防水，耐腐蝕、耐熱。實(shí)驗室中的廚柜和實(shí)驗臺應(yīng)牢固。廚柜、實(shí)驗臺彼此之間應(yīng)保持一定距離，以便于清潔。實(shí)驗室如有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。實(shí)驗室內(nèi)應(yīng)保證工作照明，避免不必要的反光和強(qiáng)光。應(yīng)有適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備（高壓、浸泡或煮沸）。BSL－1實(shí)驗室設(shè)施(二級屏障)BSL-1個人防護(hù)二級生物安全防護(hù)水平（BSL－2）二級生物安全防護(hù)水平是指實(shí)驗室的操作、安全設(shè)備、和設(shè)施適用于操作我國的第三類（少量二類）危害的致病微生物。二級生物安全防護(hù)水平適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織的檢測和研究（可能含有高致病微生物）。BSL-2實(shí)驗室設(shè)施要求滿足BSL-1的要求，如有緩沖區(qū)更好。實(shí)驗室門應(yīng)帶鎖并可自動關(guān)閉。實(shí)驗室的門應(yīng)有可視窗。應(yīng)有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實(shí)驗室工作區(qū)域外還應(yīng)當(dāng)有供長期使用的存儲空間。在實(shí)驗室內(nèi)應(yīng)使用專門的工作服；應(yīng)戴乳膠手套。在實(shí)驗室的工作區(qū)域外應(yīng)有存放個人衣物的條件。應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。實(shí)驗室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨認(rèn)的標(biāo)識。BSL-2實(shí)驗室設(shè)備要求實(shí)驗室內(nèi)必須配備生物安全柜（一級或二級）。根據(jù)需要（切片或離心）設(shè)置負(fù)壓罩。應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。有紫外消毒設(shè)備。在實(shí)驗室所在的建筑內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。BSL－2：實(shí)驗室設(shè)施(二級屏障)生物安全柜（BSC）生物安全柜作用：①樣品的保護(hù)；②操作者保護(hù)；③環(huán)境保護(hù)。II級生物安全柜設(shè)備、器材的布置BSL-2必要時加面部防護(hù)BSL－3：實(shí)驗室設(shè)施(二級屏障)BSL-3特殊防護(hù)BSL－4實(shí)驗室（正壓型）BSL－4正壓防護(hù)服實(shí)驗室安全防護(hù)培訓(xùn)與告知實(shí)驗室管理人員及實(shí)驗人員必須了解相關(guān)工作有關(guān)的危險。對招收新職工、工作開始發(fā)生變化或使用新方法，啟用新的設(shè)備時，這點(diǎn)尤為重要。所有工作人員，包括清潔和服務(wù)人員都要知道。需要進(jìn)行口頭和書面兩種方式的通知。有關(guān)儀器必須要有字跡清楚的其安全使用的書面說明。實(shí)驗室安全防護(hù)標(biāo)志在進(jìn)行致病性微生物工作的房間人口處必須要有警示標(biāo)志。實(shí)驗室的房間必須以使與微生物有關(guān)的危險得以過免的方式裝置，以使微生物的傳播得到限制，房間還應(yīng)便于清潔和消除污染．工作臺必須由光滑的、耐消毒劑的材料制成。難以清潔的角落、彎頭及管道應(yīng)盡可能地避免污染。檢驗質(zhì)量失控后的處理1.分析原始數(shù)據(jù)及初步估計失控原因。2.對具體檢測過程進(jìn)行回顧性分析。3.通過選擇性復(fù)查，進(jìn)一步分析判斷失控原因和決定處理方法。分析原始數(shù)據(jù)及推測失控原因

原始數(shù)據(jù)指未經(jīng)計算或換算的檢測數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)是最直接、最真實(shí)地反映檢測情況的第一手資料。當(dāng)發(fā)生失控時，對同批實(shí)驗檢測的全部原始數(shù)據(jù)結(jié)合近期室內(nèi)質(zhì)量控制情況和平時經(jīng)驗進(jìn)行分析，往往有助于推測失控原因的大體方向，提示誤差類型和失控原因，使查找原因的工作更有重點(diǎn)?；仡櫡治鼍唧w檢測過程

發(fā)現(xiàn)檢驗質(zhì)量失控后，應(yīng)對該次實(shí)驗的全過程進(jìn)行迅速、仔細(xì)的回顧，分析有無特殊情況出現(xiàn)。當(dāng)暴露問題后，檢驗責(zé)任人往往急于出具“正確”的結(jié)論，早早結(jié)束調(diào)查，但這時更應(yīng)該控制進(jìn)度，避免矯枉過正。失控原因的分析實(shí)驗室有無新的變化如儀器和試劑有無針對性檢查這些變化對檢測的影響重測同一質(zhì)控樣品開一瓶新的質(zhì)控重測重測原因找到?jīng)]找到檢查儀器狀態(tài)和試劑是否過期進(jìn)行選擇性復(fù)查

選擇性復(fù)查時應(yīng)包括下述材料，以便快速找出原因，及時進(jìn)入正常的檢驗。監(jiān)督員的重要性。

⑴失控時使用的全部培養(yǎng)材料。

⑵重新開啟相同批號的檢驗材料。

⑶包括已知陽性、陰性菌株，近期曾做過該項目檢測的陽性、陰性樣本。進(jìn)一步分析判斷，決定處理方法

通過對復(fù)查結(jié)果的分析，查明失控原因，制訂相應(yīng)解決方案，使實(shí)驗室工作重新在控。并將失控情況、具體原因和解決方案在記錄表格中作詳細(xì)記錄。室內(nèi)質(zhì)控失控報告單日期：年月日編號：□□□□項目：儀器型號：質(zhì)控依據(jù)：質(zhì)控菌株：ATCC25923ATCC25922ATCC27853失控原因：1）試劑□2）診斷血清□3）環(huán)境條件□4）儀器□5）檢驗標(biāo)準(zhǔn)6）人員操作過程7）8）其它（請詳述）：失控判斷及處理建議：失控前測定數(shù)據(jù)：處理后測定數(shù)據(jù)：操作者：監(jiān)督員：質(zhì)量負(fù)責(zé)人：實(shí)驗室外部質(zhì)量評估（EQA）實(shí)驗室外部質(zhì)量評估(EQA)：由第三方機(jī)構(gòu)采取一系列的方式連續(xù)地、客觀地評價各實(shí)驗室的檢驗結(jié)果，并發(fā)現(xiàn)實(shí)驗室本身不易發(fā)現(xiàn)的不準(zhǔn)確性；了解實(shí)驗室之間結(jié)果的差異，幫助其校正，使其結(jié)果具有可比性。這是對實(shí)驗室操作和實(shí)驗方法的回顧性評價，而不是用來決定在實(shí)時的測定結(jié)果的可接受性。室間質(zhì)量控制

室間質(zhì)量控制是各地實(shí)驗室之間進(jìn)行質(zhì)量控制的一種方式，也是上一級實(shí)驗室對下級各實(shí)驗室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段。參加室間質(zhì)控，常常會遇見一些平時罕見或未見過的菌株，對它們的生長條件、菌落形態(tài)、染色、顯微形態(tài)等有了較深的感性認(rèn)識。以后倘若再遇見這些微生物，就會心中有數(shù)。各級實(shí)驗室可同時接受國內(nèi)、國際多個質(zhì)量控制機(jī)構(gòu)或參考實(shí)驗室的質(zhì)量評價。室間質(zhì)量控制目的

按照全國疾病預(yù)防控制工作規(guī)范（微生物學(xué)檢驗）進(jìn)行實(shí)驗室間的質(zhì)量控制的目的，就是使各實(shí)驗室之間能達(dá)到一致的質(zhì)量水平，保證各實(shí)驗室間的微生物檢驗質(zhì)量，獲得具有可比性的檢驗結(jié)果。室間質(zhì)量控制的內(nèi)容

按照全國疾病預(yù)防控制工作規(guī)范（微生物學(xué)檢驗）進(jìn)行實(shí)驗室間質(zhì)量控制的內(nèi)容：a．逐級對檢驗人員進(jìn)行培訓(xùn)，統(tǒng)一檢驗方法和操作規(guī)程，培訓(xùn)結(jié)束時進(jìn)行考核。b．各實(shí)驗室所使用的各種試劑、培養(yǎng)基以及各種診斷用品等應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化。c．建立質(zhì)量控制考核制度。各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)每年對下級機(jī)構(gòu)的微生物檢驗工作進(jìn)行考核。d．每年進(jìn)行一次質(zhì)量控制樣品的考核，評定實(shí)驗室間的偏差、尋找原因，加以糾正。室間質(zhì)量控制的內(nèi)容

按照全國疾病預(yù)防控制工作規(guī)范（微生物學(xué)檢驗）進(jìn)行實(shí)驗室間的質(zhì)量控制的結(jié)果與評價：

a．培訓(xùn)及其考核的資料；

b．質(zhì)量控制樣品考核的結(jié)果和評價；

c．檢查中發(fā)現(xiàn)的問題及整改措施。

按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個或多個實(shí)驗室對相同或類似檢測物品進(jìn)行檢測的組織、實(shí)施和評價。

實(shí)驗室間比對的概念實(shí)驗室間比對目的A、確定某各實(shí)驗室進(jìn)行某項特定檢測的能力，以及監(jiān)測實(shí)驗室的持續(xù)能力；B、識別實(shí)驗室的問題并制定相應(yīng)的糾正措施，可能與人員的能力或一起的校準(zhǔn)有關(guān)；C、向?qū)嶒炇业目蛻籼峁└叩目尚哦?；D、確定和監(jiān)控新方法的有效性和可比性；E、確定某種方法的性能特征，通常成為共同試驗；F、為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)賦值，并評估其適用性；G、鑒別實(shí)驗室間的差異。

能力驗證的概念

能力驗證是為確定某個實(shí)驗室進(jìn)行某項特定檢測的能力而進(jìn)行的實(shí)驗室間比對，以及監(jiān)控實(shí)驗室的持續(xù)能力的實(shí)驗室間比對。

GB/T15483－1999利用實(shí)驗室間比對的能力驗證第1部分：能力驗證計劃的建立和運(yùn)作和第2部分：實(shí)驗室認(rèn)可機(jī)構(gòu)對能力驗證計劃的選擇和使用

CNAL規(guī)定：獲得其認(rèn)可前參加一次能力驗證活動；已認(rèn)可實(shí)驗室在其認(rèn)可范圍內(nèi)的每個主要領(lǐng)域每4年至少參加一次能力驗證活動；當(dāng)認(rèn)可實(shí)驗室的關(guān)鍵技術(shù)人員或認(rèn)可范圍發(fā)生變化時，認(rèn)可委員會將縮短實(shí)驗室參加能力驗證的時間間隔。能力驗證類型a)定性計劃：如要求實(shí)驗室識別檢測物品的某個組分；

b)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換演練：如提供給實(shí)驗室多組數(shù)據(jù)要求進(jìn)行處理，以獲得進(jìn)一步的信息；c)單件物品檢測：一件物品按順序送往若干個實(shí)驗室，并按時返還組織者；d)單項演練：就單一事件向?qū)嶒炇野l(fā)送一個檢測物品：e