GB/T 28715-2012飼料添加劑酸性、中性蛋白酶活力的測定分光光度法

ICS65120

B46.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28715—2012

飼料添加劑酸性中性蛋白酶活力的測定

、

分光光度法

Determinationofacidicandneutralproteaseactivityinfeedadditives—

Spetrophotometricmethod

2012-09-03發(fā)布2013-02-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T28715—2012

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC76)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品及轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗測試中心杭州浙江大學(xué)飼料科

:()、

學(xué)研究所武漢新華揚生物有限公司

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人王小驪柳愛春鄒曉庭吳琪趙蕓朱加虹陳小麗周櫻謝紅云

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28715—2012

飼料添加劑酸性中性蛋白酶活力的測定

、

分光光度法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料添加劑酸性和中性蛋白酶活力的測定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料添加劑酸性中性蛋白酶產(chǎn)品中酶活力的測定以及復(fù)合酶產(chǎn)品中中性蛋白酶活

、,

力的測定

。

本標(biāo)準(zhǔn)定量限為

500U/g(U/mL)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

酸性中性蛋白酶活力單位acidicandneutralproteaseactiveunit

、

在一定溫度和相應(yīng)的條件下酸性蛋白酶中性蛋白酶在

(40℃±0.2℃)pH(pH3.0,pH7.2),

內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生相當(dāng)于酚基氨基酸由酪氨酸等同物表示的酶量為個酶活單位

1min1μg(),1,

以表示

U。

4原理

蛋白酶在一定的溫度和條件下水解酪蛋白底物產(chǎn)生含有酚基的氨基酸如酪氨酸色氨酸

pH,(:、),

在堿性條件下可將福林試劑還原生成鉬藍(lán)與鎢藍(lán)其顏色的深淺與酚基氨基酸含量成正比

,(Folin),,。

通過在測定其吸光度得到酶解產(chǎn)生的酚基氨基酸的量進而計算蛋白酶活力

680nm,,。

5試劑和材料

除非另有說明在分析中使用的試劑均為分析純水均為符合規(guī)定的二級水

,,GB/T6682。

51碳酸鈉溶液cNa2CO3=04mol/L

.[().]

稱取無水碳酸鈉用水溶解并定容至

(Na2CO3)42.4g,1000mL。

52三氯乙酸溶液cCCl3—COOH=04mol/L

.[(