槐米中蘆丁的提取分離與鑒定

天然產(chǎn)物(chǎnwù)提純實訓(xùn)

項目一槐米中蘆丁的提取分離(fēnlí)與鑒定精品資料項目一蘆丁的提取分離(fēnlí)與鑒定子項目一槐米中蘆丁的提取子項目二槐米中蘆丁的精制子項目三水解(shuǐjiě)蘆丁得到槲皮素子項目四蘆丁和槲皮素的鑒別精品資料實訓(xùn)目的(mùdì)能夠運用堿溶酸沉法和結(jié)晶法的操作技術(shù)對槐米中的蘆丁進行提取分離能夠運用酸水解的操作技術(shù)對槐米中蘆丁進行水解能夠運用紙色譜、薄層(báocénɡ)色譜法和化學(xué)法鑒別蘆丁、槲皮素和糖類化合物精品資料得到(dédào)兩個單體化合物實訓(xùn)結(jié)果(jiēguǒ)蘆丁槲皮素精品資料相關(guān)內(nèi)容(nèiróng)介紹蘆丁的提取(tíqǔ)分離與鑒定槐花槐米槐花為豆科植物槐SophorajaponicaL．的干燥花及花蕾精品資料相關(guān)內(nèi)容(nèiróng)介紹蘆丁的提取分離(fēnlí)與鑒定性能：苦，性微寒。功效：涼血止血、清肝瀉火應(yīng)用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、衄血、肝熱目赤、頭痛眩暈等。

主要含有蘆丁、槲皮素，還含少量皂苷類及多糖、粘液質(zhì)等。近代研究表明槐米含蘆丁可高達23.5%，槐花開放后降至13.0%。精品資料相關(guān)內(nèi)容(nèiróng)介紹蘆丁的提取分離(fēnlí)與鑒定蘆丁性狀：淺黃色粉末或極細微淡黃色針狀結(jié)晶。溶解度：在冷水中1:10000，沸水中1:200；冷乙醇中1:200，沸乙醇中1:60。沸甲醇中1:7。酸堿性：蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又可析出。精品資料相關(guān)內(nèi)容(nèiróng)介紹蘆丁(lúdīnɡ)的提取分離與鑒定蘆丁用于治療毛細管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。精品資料相關(guān)內(nèi)容(nèiróng)介紹蘆丁的提取(tíqǔ)分離與鑒定槲皮素性狀：黃色針狀結(jié)晶（稀乙醇）。溶解度：冷乙醇中1:300，熱乙醇中1:23?？扇苡诩状肌⒈?、乙酸乙酯、冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙醚、苯和石油醚等。精品資料思考問題1、加入硼砂目的(mùdì)是什么？2、為什么要加入石灰水，在蘆丁的提取中能起到什么作用？3、酸沉pH值為什么不宜過低？子項目一槐米中蘆丁的提取(tíqǔ)精品資料那個天然產(chǎn)物的實驗，要算下得率,粗蘆丁重量/槐米的重量；精制蘆丁的重量/粗蘆丁的重量；并且計算(jìsuàn)下，每克蘆丁分子中槲皮素和糖所占的百分比。精品資料所需的試劑(shìjì)和設(shè)備1、樣品：槐花米試劑：硼砂、CaO、濃鹽酸儀器：每一組需要：電爐、1000ml燒杯、小燒杯、500ml燒杯、玻璃棒、pH試紙、玻璃漏斗(lòudǒu)、滴管公共需要：棉花、天平精品資料子項目一槐米中蘆丁的提取(tíqǔ)攪拌(jiǎobàn)下加入石灰乳加0.4%硼砂沸水200ml槐花米（22g）調(diào)節(jié)pH8-9加熱保持微沸20min趁熱用棉花濾過濾液殘渣在60-70度下，用濃鹽酸調(diào)pH3-4靜置提取蘆丁的提取分離與鑒定補充水分，保證pH值精品資料2010.11月，實驗結(jié)果：食品(shípǐn)091班30克槐米制得的粗蘆丁大約5－8克不等。精品資料思考問題先進行項目二，冷卻后等沉沉(chénchén)析出時候，再討論項目31、以熱水重結(jié)晶法精制蘆丁的依據(jù)是什么？2、重結(jié)晶的操作要點有哪些？子項目二槐米中蘆丁的精制(jīngzhì)和水解精品資料需要(xūyào)的儀器設(shè)備每組需要抽濾設(shè)備（需要1000ml的抽濾瓶）、濾紙、玻璃棒、1000ml燒杯、加熱回流設(shè)備（電熱套、冷凝管、燒瓶(shāopíng)）、小燒杯、濃硫酸、濃鹽酸精品資料第一次實驗所得濾液(lǜyè)濾液(lǜyè)沉淀（粗品蘆?。┲亟Y(jié)晶抽濾，少量水洗滌沉淀至中性取粗制蘆丁3g,加蒸餾水200-250ml,煮沸10分鐘后，趁熱抽濾殘渣濾液冷卻（可以用流動水快速冷卻）靜置精制蘆?。▊溆茫┨J丁的提取分離與鑒定提取與精制抽濾，干燥、稱重精品資料食品091班得到的精制蘆丁(lúdīnɡ)大約（粗蘆丁(lúdīnɡ)4克精制后大約？）精品資料減壓(jiǎnyā)抽濾裝置精品資料減壓過濾操作

/image/cebd00172682f8124a90a731也就是抽濾,利用抽氣泵使抽濾瓶中的壓強降低,達到固液分離的目的.裝置:布式漏斗,抽濾瓶,膠管,抽氣泵,濾紙過程:1、安裝儀器,檢查布式漏斗與抽濾瓶之間連接是否緊密(jǐnmì)，抽氣泵連接口是否漏氣；2、修剪濾紙，使其略小于布式漏斗，但要把所有的孔都覆蓋住，并滴加蒸餾水使濾紙與漏斗連接緊密(jǐnmì)；3、將固液混合物轉(zhuǎn)移到濾紙上；4、打開抽氣泵開關(guān)，開始抽濾。5、過濾完之后，先抽掉抽濾瓶接管，后關(guān)抽氣泵。（防止倒吸）精品資料思考問題1、蘆丁是？苷（N-苷、O-苷、S-苷orC-苷?2、苷鍵的裂解(lièjiě)可以用什么方法？最常用的方法是？影響酸水解速度的因素有哪些？2、蘆丁水解后的產(chǎn)物是什么？3、如何進行苷類酸水解操作，如何分離得到苷元成分？子項目三水解蘆丁(lúdīnɡ)得到槲皮素精品資料精品資料子項目三水解蘆丁(lúdīnɡ)得到槲皮素蘆丁(lúdīnɡ)的提取分離與鑒定精制蘆丁1.5g加入2%硫酸或者(1mol/lHCL)100ml，加熱回流30min(從有液滴滴下開始計時），放冷靜置，抽濾沉淀濾液粗品槲皮素作糖的檢識用注意觀察整個過程的現(xiàn)象！(

溶液澄明度和顏色的變化)為什么出現(xiàn)這種情況？水解抽濾洗滌沉淀干燥稱重精品資料具體做法：蘆丁水解方法：取精制蘆丁1.5g，研細后置于250ml圓底燒瓶中，加入2％硫酸或（1mol/lHCL)100m1，加熱回流30min，瓶中渾濁液逐漸變?yōu)槌吻宓淖攸S色液體(yètǐ)，最后生成鮮黃色沉淀。放冷沉淀，抽濾，保存濾液（應(yīng)為澄清無色液體(yètǐ)），作為糖的檢查，沉淀物為蕓香苷苷元（槲皮素），用蒸餾水洗至中性，抽干水分，晾干，稱量。得粗制槲皮素，再用乙醇重結(jié)晶得精制槲皮素。1mol/lHCL配法:取約90毫升濃鹽酸定容至1000毫升精品資料注意觀察現(xiàn)象：未加熱時，瓶內(nèi)為混懸液（蘆丁不溶于冷水），加熱后，混懸液逐漸變?yōu)槌吻逡海ㄌJ丁易溶于熱水），繼續(xù)(jìxù)加熱，有鮮黃色沉淀析出（槲皮素不溶于水）精品資料濾液處理：取蘆丁水解后的濾液15m1，加氫氧化鋇粉中和至中性（攪拌下進行）濾去白色的硫酸鋇沉淀(漏斗濾紙），濾液在沸水(fèishuǐ)浴上蒸干后，加1－2ml乙醇溶解，作為糖的供試液。（如果加氫氧化鋇加過量后可以加少量的硫酸回調(diào)pH)硫酸可以同時沉淀Ba2+Ba2++SO42-========BaSO4↓使蘆丁水解后的濾液更純凈精品資料學(xué)生做的結(jié)果(jiēguǒ)：蘆丁的得率大約是：20-25%精制蘆丁的得率是大約87%槲皮素占蘆丁分子是：13%到20精品資料蘆丁(lúdīnɡ)的提取分離與鑒定定性(dìngxìng)反應(yīng)蘆丁供試品溶液：取精制蘆丁約5mg，用5ml甲醇（無水乙醇）使溶液，備用。槲皮素供試品溶液：取粗槲皮素約5mg，用5ml甲醇（無水乙醇）使溶液，備用。其余試劑：鎂粉、濃鹽酸、10%α-萘酚溶液、濃硫酸、2%

三氯化鐵乙醇溶液準(zhǔn)備3支試管（一個空白管，樣品用蒸餾水代替，一個是蘆丁、一個是槲皮素）試劑試驗現(xiàn)象結(jié)論及解釋空白蘆丁槲皮素鹽酸-鎂粉反應(yīng)Molish反應(yīng)FeCl3反應(yīng)試驗記錄精品資料定性(dìngxìng)反應(yīng)鹽酸(yánsuān)-鎂粉反應(yīng)

將樣品溶液1ml，先滴加1－2滴濃鹽酸再加入少許鎂粉振搖，1-2min內(nèi)，觀察顏色變化。（注意順序）Molish反應(yīng)

將樣品溶液1ml，加入與樣品等體積10%α-萘酚溶液，傾斜試管，搖勻，沿管壁滴加適量濃硫酸（約2ml），至分層注意觀察兩界面產(chǎn)生的變化。（不要搖動）黃酮母核苷類蘆丁的提取分離與鑒定FeCl3反應(yīng)酚羥基

將樣品溶液1ml，加入1～2滴2%Fecl3溶液，觀察現(xiàn)象。精品資料思考問題1、紙色譜的原理及操作要點？2、黃酮類化合物有哪些顯色方法，各針對哪類黃酮？3、黃酮類薄層(báocénɡ)色譜中，經(jīng)常用到的吸附劑有哪幾類？各自的原理有什么不同？4、黃酮類薄層(báocénɡ)色譜中常用到AlCl3乙醇溶液顯色？顯色后一般呈什么顏色？5、薄層(báocénɡ)色譜的操作要點有哪些？子項目四蘆丁(lúdīnɡ)和槲皮素的鑒別精品資料所需要的藥品和設(shè)備：氫氧化鋇、葡萄糖、鼠李糖、正丁醇、乙酸、苯胺、鄰苯二甲酸(jiǎsuān)鹽、無水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、甲酸(jiǎsuān)、AlCl3、鎂粉、濃鹽酸、α-萘酚溶液、濃硫酸、三氯化鐵、紫外燈、新華1號濾紙、點樣毛細管、水浴鍋、硅膠G預(yù)制板11塊、分液漏斗噴霧器幾個每組需要：1個蒸發(fā)皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml試管8支、2個小燒杯、膠頭滴管精品資料需要配制(pèizhì)的試劑:1苯胺—鄰苯二甲酸試劑配法：苯胺0.93g和鄰苯二甲酸1.66g溶于100ml水飽和的正丁醇中。（我們實驗需要配100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和100ml正丁醇震搖后靜置取上層即為水飽和的正丁醇）210%α-萘酚乙醇溶液25ml32%三氯化鐵乙醇溶液20ml4、展開劑：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我們實驗需要配300ml5、5組配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液漏斗中，平衡后取上層備用配兩瓶6、2%AlCl3乙醇溶液100ml7、硅膠預(yù)制板，用之前105度烘半個小時。精品資料子項目三蘆丁(lúdīnɡ)和槲皮素的鑒別蘆丁(lúdīnɡ)的提取分離與鑒定水解所得濾液20ml用飽和Ba(OH)2調(diào)PH值至中性，折疊濾紙過濾殘渣濾液蒸干，放冷加2-3ml乙醇溶解供試品溶液紙色譜糖的鑒定精品資料糖的紙色譜(sèpǔ)鑒定標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上層液顯色劑：苯胺—鄰苯二甲酸試劑。105℃烘10min顯色(顯棕色或棕紅色斑點)

蘆丁的提取分離與鑒定新華一號濾紙標(biāo)本缸倒入缸內(nèi)約30毫升的展開劑精品資料糖的紙色譜(sèpǔ)鑒定標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)品：葡萄糖、鼠李糖展開劑：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液漏斗中，平衡后取上層備用。顯色劑：苯胺—鄰苯二甲酸試劑。105℃烘10min顯色(顯棕色或棕紅色斑點)

蘆丁的提取分離與鑒定試驗記錄：１２３當(dāng)溶劑走到溶劑前沿6－8cm即可，約需40分鐘粘附紙色譜，并計算斑點的Ｒf值精品資料薄層色譜(sèpǔ)鑒別樣品：分別取精制的蘆丁、槲皮素適量，加95%乙醇溶解成每1ml含1mg的溶液(róngyè)，備用。展開劑：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）顯色劑：2%AlCl3乙醇溶液，105℃加熱至斑點清晰，置紫外燈(365nm)下觀察。顏色直接觀察AlCl3噴霧Rf值日光UV日光UV樣品蘆丁槲皮素蘆丁的提取與定性反應(yīng)實驗記錄精品資料注意：硅膠預(yù)制板，用之前(zhīqián)105度烘半個小時。精品資料實驗(shíyàn)規(guī)則1、預(yù)習(xí)實驗內(nèi)容：要明確實驗?zāi)康呐c要求。對處方中藥物性質(zhì)、配制原理、操作步驟、操作關(guān)鍵等，做到“心中有數(shù)”，并合理安排實驗時間。2、遵守實驗紀(jì)律：應(yīng)保持實驗室內(nèi)肅靜，不得無故遲到或早退，不得擅離實驗操作崗位(gǎngwèi)，甚至高聲談笑。如發(fā)生差錯事故或異?，F(xiàn)象，應(yīng)隨時報告指導(dǎo)教師，查明原因，及時解釋。注意安全，嚴防火災(zāi)、燒傷或中毒事故發(fā)生。精品資料3、杜絕差錯事故：稱取藥品時，要在拿取、稱量和放回時進行核對。稱量完畢(wánbì)應(yīng)蓋好瓶塞，放回原處。實驗成品應(yīng)寫明名稱、規(guī)格、配制者、配制時間及班組號，交實驗指導(dǎo)教師驗收。實驗(shíyàn)規(guī)則精品資料4、愛護儀器藥品：實驗儀器、藥品應(yīng)妥善保管、存放和使用。如有破損缺少，必須立即報告實驗指導(dǎo)教師，并填寫儀器藥品報損表，然后到準(zhǔn)備室補領(lǐng)。實驗小組合用的儀器藥品，每次實驗前應(yīng)檢查核對(héduì)后再取用。實驗指導(dǎo)教師對破損缺少的儀器藥品應(yīng)查明原因，按本院校對儀器藥品破損處理辦法