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指導(dǎo)教師:白鳳翎組員:付緒磊、高子媛、呂佳煜副溶血性弧菌概況1分布與季節(jié)性2Contents

致病性和致病因子3檢測(cè)方法4預(yù)防和治療5副溶血性弧菌概況副溶血性弧菌(Vibrio

parahaemolyticus,Vp)又名腸炎弧菌,系弧菌科弧菌屬,革蘭氏染色陰性,兼性厭氧菌,為多形態(tài)桿菌或稍彎曲弧菌。大多數(shù)菌體在液體培養(yǎng)基中有單端鞭毛、能運(yùn)動(dòng)。Vp嗜鹽畏酸,當(dāng)在pH6以下即不能生長,在普通食醋中1—3min即死亡。對(duì)高溫抵抗力小,50℃20min,65℃5min或80℃1min條件下即可被殺死。本菌對(duì)常用消毒劑抵抗力很弱,可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。最適宜的培養(yǎng)條件:溫度為30℃—37℃,含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低于0.5%則不能生長),pH值為8.0—8.5。在固體培養(yǎng)基上菌落隆起,圓形,表面光滑,較濕潤,邊緣不整齊。Vp在科瑪嘉培養(yǎng)基上的菌落特征(紫色為Vp)副溶血性弧菌的分布及季節(jié)性Vp主要分布在海洋環(huán)境中,尤其是沿海地區(qū)的海水、海底沉積物和海產(chǎn)品中。世界各地溫暖的海洋、河口均有分布,如地中海、亞德里亞海、黑海、波羅的海、南太平洋、印度洋、墨西哥彎等海洋,都是Vp分布的地點(diǎn)。而當(dāng)?shù)夭东@的魚、貝、甲殼類當(dāng)中均有Vp檢出報(bào)告,尤其是貝類(例如蠔),因?yàn)橐詾V食方式攝食,容易檢出菌體。在海水溫度不低于10℃的地區(qū),季節(jié)變化不會(huì)對(duì)菌株的數(shù)量產(chǎn)生影響。但分布于溫度變化較大的地區(qū)的菌株則有明顯的季節(jié)性。當(dāng)水溫低于13-15℃時(shí),附著于水產(chǎn)品上的Vp檢出數(shù)明顯減少,水樣中的菌含量減少到幾乎可以忽略,但沉淀物中的菌數(shù)較為穩(wěn)定。為了避免低溫造成傷害,Vp附著于浮游生物上,沉降至水底越冬,至隔年溫度上升之后再度隨著季節(jié)性水流四處分布,形成年周期的循環(huán)。

副溶血弧菌的致病性、致病因子所致疾?。罕静《嘣谙那锛景l(fā)生于沿海地區(qū),常造成集體發(fā)病。由于海鮮空運(yùn),內(nèi)地城市病例也逐漸增多。人類食用被致病性Vp污染的或未煮熟的海產(chǎn)品會(huì)引起急性腸胃炎。通常發(fā)病的潛伏期為1h至4d不等,大多為10h左右?;颊叱霈F(xiàn)腹瀉、腹部痙攣、惡心、嘔吐和發(fā)熱現(xiàn)象,嚴(yán)重時(shí)甚至出現(xiàn)脫水、昏迷等癥狀。Vp引起的中毒比例很高,僅次于沙門氏菌和大腸桿菌。媒介:Vp食物中毒,是進(jìn)食含有該菌的食物所致,主要來自海產(chǎn)品,如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇,以及含鹽分較高的腌制食品,如咸菜、腌肉等。本菌存活能力強(qiáng),在抹布和砧板上能生存1個(gè)月以上,海水中可存活47天。在中國,由于從業(yè)人員衛(wèi)生意識(shí)不強(qiáng),交叉污染和再次污染的現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生,引起Vp中毒的食物除海產(chǎn)品外,還有涼拌菜和熟食制品等。致病因子:一般認(rèn)為Vp的致病因子有黏附因子、侵襲力、溶血性毒素、尿素酶、脂多糖、外膜蛋白、蛋白酶、三型分泌系統(tǒng)和攝鐵系統(tǒng)等。副溶血弧菌的檢測(cè)方法傳統(tǒng)方法:目前,我國對(duì)Vp的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)為:國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.7—2008《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)副溶血弧菌檢驗(yàn)》。Vp的傳統(tǒng)檢測(cè)方法,操作比較繁瑣,包括細(xì)菌分離培養(yǎng)、革蘭氏染色鏡檢、生化鑒定、動(dòng)力、血清學(xué)分型、溶血及毒力實(shí)驗(yàn)等步驟,完成鑒定工作一般需要5-7d,檢測(cè)周期長,工作量大并且操作復(fù)雜,靈敏度有限,不適合快速檢測(cè)。Vp檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)程序免疫學(xué)方法:免疫學(xué)方法是利用抗原抗體反應(yīng)的顯著特異性來進(jìn)行細(xì)菌鑒別和血清型定性的方法,該項(xiàng)技術(shù)已有半個(gè)多世紀(jì)的歷史。該技術(shù)具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、易于觀察等優(yōu)點(diǎn)。目前已建立的Vp的免疫學(xué)檢測(cè)方法有:酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、免疫熒光抗體技術(shù)和膠體金技術(shù)等。分子生物學(xué)技術(shù):對(duì)于Vp的檢測(cè),傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法具有明顯的局限性,如檢測(cè)周期長、操作繁瑣、準(zhǔn)確度低和許多難以控制的因素等,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和完善以及技術(shù)服務(wù)的市場(chǎng)化,越來越多的分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用到Vp的檢測(cè)中。對(duì)Vp檢測(cè)來說現(xiàn)有的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)有多重PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、有擴(kuò)增內(nèi)標(biāo)的PCR技術(shù)、基于DNA染料EMA和PMA的PCR技術(shù)、納米金PCR技術(shù)、免疫捕獲PCR技術(shù)、免疫磁珠-多重PCR技術(shù)、Real-timePCR技術(shù)、分子信標(biāo)real-timePCR技術(shù)、TaqMan探針技術(shù)、MPN-PCR、PCR-ELISA、DNA指紋圖譜技術(shù)、變形高效液相色譜技術(shù)等。傳感器技術(shù):生物傳感器是將生物感應(yīng)元件的敏感性、專一性與一個(gè)能夠產(chǎn)生和待測(cè)物濃度成比例的信號(hào)傳導(dǎo)器結(jié)合,利用各種生物材料或生物代謝產(chǎn)物如酶、抗體等做成的用于檢測(cè)、識(shí)別生物與食品的化學(xué)成分的傳感器。目前利用傳感技術(shù)對(duì)Vp檢測(cè)的研究主要集中在利用電子化學(xué)技術(shù)和電子鼻技術(shù)對(duì)食品中Vp的檢測(cè)。研究表明生物傳感器的應(yīng)用提高了檢測(cè)的速度和靈敏度,使Vp檢測(cè)過程變得更為簡單,便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。其它方法:目前檢測(cè)Vp的方法還有噬菌體法、Vp快速測(cè)試片、免疫磁性分離技術(shù)、吖啶橙染色法、高通量微生物鑒定儀等技術(shù)。綜合來看以上介紹的各種方法各有其優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),在快速檢測(cè)、定性和精確定量方面難以兼顧。因此實(shí)際操作中常將幾種方法融合在一起使用。預(yù)防和治療預(yù)防:要有效預(yù)防和控制由該菌引起的食物中毒,主要應(yīng)采取防止污染、控制繁殖和殺滅病原菌等措施,并且這些措施應(yīng)貫穿于“從農(nóng)田到餐桌”,即采收、加工、貯運(yùn)、銷售和消費(fèi)等所有環(huán)節(jié)。治療:①發(fā)生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品,并到醫(yī)院醫(yī)治。②嘔吐、腹瀉嚴(yán)重

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