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高效液相色譜儀操作條件選擇組員:魏鵬翔、崔建哲、張龍、韓守印、李淼、孫磊。指導(dǎo)教師:姜洪文目錄實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理儀器與試劑實(shí)驗(yàn)步驟儀器清洗(結(jié)束工作)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆丈V分析的原理掌握高效液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)和工作原理掌握SY-8100高效液相色譜儀的基本操作步驟掌握HPLC條件試驗(yàn)的方法以及分離條件的確定二、實(shí)驗(yàn)原理本次實(shí)驗(yàn)采用ODS-C18色譜柱,以甲醇+水混合液為流動(dòng)相,根據(jù)混合物中萘、聯(lián)苯和菲在固定相與流動(dòng)相間分配性質(zhì)的不同,進(jìn)行分離。不同比例的甲醇+水混合液為流動(dòng)相,流動(dòng)相的極性發(fā)生改變,因此混合液的分離條件也發(fā)生了改變,選擇能將混合液中各組分能充分分離并且相對(duì)分析時(shí)間短的條件,綜合確定HPLC法分析萘、聯(lián)苯、菲的分析條件,完成對(duì)混合液的分析。檢測(cè)器采用紫外分光(UV)檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。三、儀器與試劑儀器:
SY-8100高效液相色譜儀 1臺(tái)
KQ-50B超聲波清洗器 1臺(tái)
AP-01P真空泵 1臺(tái)過(guò)濾裝置 1套微量注射器 50μL 1支容量瓶 50mL 7只藥品:萘(G.R.)、聯(lián)苯(G.R.)、菲(G.R.)、甲醇(G.R.)、二次蒸餾水四、實(shí)驗(yàn)步驟流動(dòng)相的準(zhǔn)備1、流動(dòng)相的過(guò)濾安裝抽濾裝置,選用有機(jī)相過(guò)濾膜,過(guò)濾試劑甲醇;選用無(wú)機(jī)相過(guò)濾膜,過(guò)濾二次蒸餾水。2、流動(dòng)相的脫氣
將盛有過(guò)濾好甲醇、二次蒸餾水的試劑瓶分別放于超聲波清洗器中,進(jìn)行脫氣處理。儀器的準(zhǔn)備1、更換流動(dòng)相將A泵的輸液管放入處理好的甲醇試劑瓶中;B泵的輸液管放入處理好的二次蒸餾水試劑瓶中。2、分別排除A、B兩個(gè)泵輸液管中的氣泡3、開(kāi)啟高壓泵A、高壓泵B、UV檢測(cè)器、混合器的電源,打開(kāi)工作站
分析步驟1、分別設(shè)置兩個(gè)高壓泵的流量,使總流量為F=1.00mL/min,分別啟動(dòng)兩泵2、待基線穩(wěn)定后,完成標(biāo)樣的分析,記錄分析所獲得的各組分的保留時(shí)間、理論塔板數(shù)、分離度。數(shù)據(jù)填表3、選擇最佳流動(dòng)相配比,調(diào)整A、B兩泵的流量。待基線穩(wěn)定后吸取標(biāo)樣,完成分析后建立組分表,再完成試樣的分析,測(cè)得試樣中萘、聯(lián)苯和菲的含量,完成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
保留時(shí)間分離度理論塔板次數(shù)萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲五、儀器的清理(結(jié)束工作)更換流動(dòng)相將流動(dòng)相重新更換為處理過(guò)的甲醇,以利于色譜柱的保護(hù)。清洗“進(jìn)樣閥”用適量的甲醇清洗進(jìn)樣器、進(jìn)樣閥,以避免樣品組分的殘留。THEENDTHANKSPPT模板下載:/moban/行業(yè)PPT模板:/hangye/節(jié)日PPT模板:/jieri/PPT素材下載:/sucai/PPT背景圖片:/beijing/PPT圖表下載:/tubiao/優(yōu)秀PPT下載:/xiazai/PPT教程:/powerpoint/Word教程:/word/Excel教程:/excel/資料下載:/ziliao/PPT課件下載
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