GB/T 36806-2018甘蔗桿狀病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36806—2018

甘蔗桿狀病毒實(shí)時(shí)熒光

PCR檢測方法

DetectionofSugarcanebacilliformvirusbyreal-timePCR

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

甘蔗桿狀病毒實(shí)時(shí)熒光

PCR檢測方法

GB/T36806—2018

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20189

*

書號

:155066·1-61159

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T36806—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位福建農(nóng)林大學(xué)國家甘蔗工程技術(shù)研究中心農(nóng)業(yè)部甘蔗及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試

:、

中心農(nóng)業(yè)部福建甘蔗生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人高三基孫生仁吳小斌黃美婷傅華英王錦達(dá)張慧麗陳如凱

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36806—2018

甘蔗桿狀病毒實(shí)時(shí)熒光

PCR檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗桿狀病

IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus實(shí)時(shí)熒光檢測方法的儀器與設(shè)備試劑與材料

(,SCBMOV)PCR、、

樣品的采集與前處理檢測以及結(jié)果判斷與表述等

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于可能帶有和病毒的活體寄主植物的快速檢測診斷

SCBIMVSCBMOV、。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

十六烷基三甲基溴化銨

CTAB:(cetyltrimethylammoniumbromide)

值實(shí)時(shí)熒光反應(yīng)中每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

Ct:PCR,(cycle

threshold)

脫氧核糖核酸酶

DNase:(deoxyribonuclease)

乙二胺四乙酸二鈉

EDTA-Na2:(edetatedisodium)

羧基熒光素

FAM:6-(6-carboxy-fluorescein)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸酶

RNase:(ribonuclease)

逆轉(zhuǎn)錄酶核糖核酸酶

RT/RNaseH:/H(reversetranscriptase/RNaseH)

甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus

SCBIMV:IM()

甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformMOvirus

SCBMOV:MO()

甘蔗桿狀病毒Sugarcanebacilliformvirus

SCBV:()

羧基四甲基羅丹明

TAMRA:6-(6-carboxytetramethylrhodamine)

三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽

Tris-HCl:[Tris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride]

3甘蔗桿狀病毒基本信息

甘蔗桿狀病毒屬于花椰菜花葉病毒科Caulimiviridae桿狀病毒屬Badnavirus英文名

()DNA(),

稱為Sugarcanebacilliformvirus縮寫為國際病毒分類委員會于年將的

,SCBV。(ICTV)2012SCBV

個(gè)分離物正式定為甘蔗桿狀病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗桿狀病

2IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus兩個(gè)不同的種甘蔗桿狀病毒其他信息參見附錄

(,SCBMOV)。A。

4方法原理

在比對甘蔗桿狀病毒基因組序列的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)一對僅在該病毒基因間保守的特異

,RT/RNaseH

性引物和一條特異性的熒光雙標(biāo)記探針在實(shí)時(shí)熒光擴(kuò)增反應(yīng)中探針的熒光

TaqMan。PCR,TaqMan

信號強(qiáng)度伴隨著目標(biāo)序列