GB/T 38740-2020實驗動物猴馬爾堡病毒檢測方法

ICS6502030

B44..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38740—2020

實驗動物猴馬爾堡病毒檢測方法

Laboratoranimal—MethodforexaminationofsimianMarburvirusMARV

yg()

2020-04-28發(fā)布2020-08-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T38740—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC281)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位海南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心中華人民共和國福州海關(guān)中華人民

:、、

共和國成都海關(guān)中華人民共和國?？诤ｊP(guān)中華人民共和國濟(jì)南海關(guān)北京腦科學(xué)與類腦研究中心

、、、、

中華人民共和國?？诤ｊP(guān)中華人民共和國昆明海關(guān)

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人李丹丹張體銀安微王綏家凌宗帥李文龍陳平亞艾軍

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38740—2020

實驗動物猴馬爾堡病毒檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了猴馬爾堡病毒實時熒光檢測的操作方法

RT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于猴馬爾堡病毒的檢測

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

出入境動物檢疫采樣

GB/T18088

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

馬爾堡病毒Marburgvirus

一種高致病性病毒屬絲狀病毒科單股負(fù)鏈病毒基因組約為已知的

,(Filoviridae),RNA,19.1kb,

最大的負(fù)鏈病毒

RNA。

32

.

逆轉(zhuǎn)錄實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainre-

actionreal-timeRT-PCR

;

將逆轉(zhuǎn)錄為后再作為模板進(jìn)行實時熒光擴(kuò)增反應(yīng)體系中加入一對引

mRNAcDNAPCR。PCR

物的同時加入一條特異性的熒光探針該探針為一寡核苷酸片段兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一

,,

個淬滅熒光基團(tuán)探針完整時報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收特異性擴(kuò)增時Taq酶

。,;PCR,

的外切酶活性將探針酶切降解使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收

5'-3',,

到熒光信號實現(xiàn)了熒光信號的累積與產(chǎn)物形成完全同步

,PCR。

33

.

噪音noise

熒光儀在僅僅使用管和水的狀態(tài)下的本底熒光強(qiáng)度

PCRPCR。

34

.

Ct值cyclethresholdvalue

從基線到指數(shù)增長的拐點所對應(yīng)的反應(yīng)循環(huán)次數(shù)