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試驗一 胞間連絲的觀看一、試驗?zāi)康模河^看植物細(xì)胞間的胞間連絲,進(jìn)一步細(xì)胞間的物質(zhì)運輸與信號傳遞起橋梁作用。二、試驗用具:1、器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子等三、試驗內(nèi)容:1、紅辣椒表皮細(xì)胞臨時裝片制作:觀看胞間連絲,剪取一小塊紅辣椒,用小刀留神刮除果肉,留下一層極薄的表皮,置于載玻片上,滴一滴清水,蓋蓋片,吸水后即可。2、玉米籽粒糊粉層臨時裝片制作:玉米籽粒用鑷子剝?nèi)ケ砥ず螅冻龊蹖?,制把切好的薄片置于載玻片上,加一滴清水后蓋片,即可觀看。3、柿子胚乳細(xì)胞永久裝片的觀看。四、留意事項:光線不要太亮五、作業(yè):1、完成試驗報告,并繪胞間連絲圖。2、胞間連絲屬于哪種細(xì)胞連接,有何生物學(xué)功能?試驗二植物細(xì)胞原生質(zhì)流淌的觀看一、試驗?zāi)康脑诨罴?xì)胞中,原生質(zhì)流淌是細(xì)胞活力強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。通常認(rèn)為,原生質(zhì)流淌是原生質(zhì)中微絲肌動蛋白與肌球蛋白相互滑溫度、滲透壓、機(jī)械損傷等的影響。通過試驗響因素。二、試驗用品:1、材料:黑藻2、器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片等三、試驗內(nèi)容:1、黑藻葉片細(xì)胞質(zhì)流淌的觀看取黑藻葉片制作臨時裝片并觀看,留意流速,并記錄。2、用溫水浸泡,再觀看其流淌速度有無改變,并記錄。3、用照明燈照耀一段時間后再觀看其流淌速度有無轉(zhuǎn)變,并記錄。四、作業(yè):1、如何理解細(xì)胞原生質(zhì)流淌的原理?2、細(xì)胞質(zhì)環(huán)流有何特點?3、圖示細(xì)胞質(zhì)環(huán)流。一、試驗原理:活體染色是指對生活有機(jī)體的細(xì)胞或B可專一性地對線粒體進(jìn)展超活染色,這是由于線粒體內(nèi)的細(xì)胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(tài)〔即有色狀態(tài)〕呈現(xiàn)藍(lán)懸浮綠色,而線粒體四周的細(xì)胞質(zhì)中,這些染料被復(fù)原為無色的色基。二、試驗器材:詹納斯綠B三、試驗內(nèi)容:〔一〕線粒體超活染色1、取清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金2B染色液。2、用牙簽取口腔上皮細(xì)胞放置于染色液的15分鐘〔留意:染色液不能枯燥〕蓋片,吸出多余的染色液即可觀看,線粒體為藍(lán)綠色顆?;蚨贪魻畹臉?gòu)造?!捕秤谰醚b片的觀看1、線粒體 2、中心體四、作業(yè):試驗報告、并繪線粒體形態(tài)圖試驗四 葉綠體的分別與觀看一、試驗原理:組織勻漿后懸浮在等滲介質(zhì)中進(jìn)展差速離心,是分別細(xì)胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小,外形和密度,也同離心力以及懸浮介質(zhì)的粘度有關(guān)。在肯定的離心場中,同一時間內(nèi),密度不同,大小不同、沉降速度不同,細(xì)胞組分。二、材料與用具:離心機(jī)、組織勻漿器、天平、紗布、菠菜等三、試驗內(nèi)容:1、選取穎嫩菠菜葉,洗凈擦干后去除葉30g150ml0.35mol/LNaCl溶液中裝入研缽搗碎;2、將勻漿用紗布過濾于燒杯中;34ml1000r/min2分鐘,棄沉淀;4、將上清液在3000r/min下離心5分鐘,棄上清,沉淀即是葉綠體;50.35mol/L氯化鈉溶液懸浮。6、取葉綠體懸液制臨時裝片觀看。四、作業(yè):完成試驗報告,并繪圖。試驗五 細(xì)胞膜的通透性一、試驗?zāi)康模?、觀看細(xì)胞膜的通透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。2、了解細(xì)胞膜通透性的一般規(guī)律。二、試驗原理:放在低滲溶液中,水分子會大量滲到細(xì)胞內(nèi),使細(xì)胞脹破,血紅細(xì)胞釋放到介質(zhì)中,的透性不同,有的溶質(zhì)可以滲入,有的溶質(zhì)滲透壓,所以促進(jìn)水分進(jìn)入細(xì)胞,隨著水分的不斷進(jìn)入紅細(xì)胞最終裂開,即引起溶血。不同。因此,發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時間長短可作為測量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。三、試驗用品:剪刀,試管等四、試驗材料:兔血五、試驗步驟:1、制備兔紅細(xì)胞懸液取兔靜脈血20ml〔加抗凝劑3.8%檸檬酸鈉,以1份兔血加10份0.17mol/L鈉溶液配制兔紅細(xì)胞懸液。2、低滲溶血的觀看13mL蒸餾水,再參加0.5ml紅細(xì)胞懸液,觀看溶液顏色的變化,100%紅細(xì)胞溶血。3、兔紅細(xì)胞的滲透性取試管1支,參加0.17mol/l氯化鈉3mL,再參加0.5ml象?分析緣由。取試管9支,編號后分別參加其他9種等滲溶液各3ml,再逐一參加0.5ml紅細(xì)胞懸液,分別登記時間,輕輕搖動,觀看溶某種溶液的溶血時間等于自參加紅細(xì)胞懸液到溶液變成紅色透亮所需的時間。4、溶血結(jié)果推斷:不溶血:液體分兩層,上層淺黃色,下層紅色不透亮,鏡檢紅細(xì)胞完好。,鏡檢紅細(xì)胞有局部裂開。完全溶血:液體變紅而透亮,鏡檢紅細(xì)胞全部呈碎片。六、作業(yè):1、統(tǒng)計不同等滲溶液的溶血狀況。2、爭論溶血試驗在爭論中應(yīng)用的可能性。試驗六 相差顯微鏡觀看口腔上皮細(xì)胞帶相板的物鏡,合軸調(diào)中望遠(yuǎn)鏡及濾色片,這些特別裝置能使活細(xì)胞或未經(jīng)染色的標(biāo)生相位差,然后利用光的衍射和干射原理,把相位差變成振幅〔明暗差〕之差,使人的肉眼能夠辯認(rèn)出來。二、試驗用具:相差顯微鏡、一般顯微鏡、解剖器具三、試驗內(nèi)容:理濾光片、調(diào)中望遠(yuǎn)鏡2、口腔上皮細(xì)胞臨時裝片的制備與一般光鏡下的觀看。3四、留意事項:制備樣品時,防止產(chǎn)生氣泡五、作業(yè):調(diào)好口腔上皮細(xì)胞的相差像后,比照一般明視野的像和相差像,畫圖說成像特點。試驗七細(xì)胞熒光染色觀看與熒光顯微鏡的使用一、試驗?zāi)康模?、初步了解熒光顯微鏡的根本組件、位置和根本原理。2、學(xué)習(xí)細(xì)胞熒光染色的根本方法。二、試驗用具:12、用具:熒光顯微鏡、鑷子、蓋玻片等三、試驗內(nèi)容:1P8熒光:物質(zhì)中電子吸取光的能量由低能轉(zhuǎn)變?yōu)楦吣軤顟B(tài),再回到低能狀態(tài)時釋放出的光。熒光顯微鏡組件:光源、激發(fā)濾片、雙色反射鏡、阻斷濾片、物鏡、目鏡等。熒光顯微鏡的成像原理,2蛙血——涂片——晾干——甲醇固定,10分鐘——1%分鐘——水洗——枯燥3撕取內(nèi)表皮——鋪展于玻片上——晾干——1%分鐘——水洗——枯燥4撕取綠色植物葉表皮細(xì)胞制作臨時裝片,即可觀看。四、留意事項:1、熒光顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀看。2五、作業(yè):簡述熒光顯微鏡的主要部件和根本光路。試驗八細(xì)胞融合一、試驗?zāi)康模?PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合的根本原理。2、通過試驗,初步把握細(xì)胞融合的技術(shù)。二、試驗原理:兩個或兩個以上的細(xì)胞合成為一個雙核雜交。常用的誘導(dǎo)方法有病毒誘導(dǎo)融合、化融合,進(jìn)而細(xì)胞質(zhì)溝通,形成一個大的雙核或多核融合細(xì)胞。三、試驗材料與用具:P89四、試驗步驟:1、在公雞翼下靜脈抽取2mL雞血,參加盛有8mL的Alsever液中,使血液與Alsever1:4,混勻。21ml4ml0.85%生理鹽水,充分混勻,800r/min離心3min,棄上清,重復(fù)上述條件離心兩次。最終棄上GKN4ml離心,1000r/min,5min。3、棄上清,加GKN液制成10%細(xì)胞懸液。41ml于離心管中,放入37℃水浴中預(yù)熱,同時將50%PEG液20min。5、200.5ml50%PEG溶液逐1mL細(xì)胞懸液中,邊加邊搖勻,然后放入37℃水浴中保溫20min。620GKN8mL,靜止于水浴中20min。7、800r/min離心3min,棄上清,加GKN1次。8、棄上清,參加GKN液少許,混勻,取少量制臨時裝片觀看細(xì)胞融合狀況。五、作業(yè):1、繪制細(xì)胞融合圖像。2、分析試驗中遇到的問題及其解決方法。試驗九 植物凝集素對紅細(xì)胞的凝集作用一、試驗?zāi)康模?、學(xué)習(xí)植物凝集素的提取方法;2、觀看紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象。二、試驗原理:細(xì)胞外被是指細(xì)胞質(zhì)膜外外表的一層黏多糖物質(zhì),它在細(xì)胞間的聯(lián)系和識別、細(xì)胞發(fā)揮重要作用。向膜的外表,它們是細(xì)胞識別、細(xì)胞免疫及一類含糖的,并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì),集素使細(xì)胞凝集是由于它與細(xì)胞外表的糖分子連接,在細(xì)胞間形成“橋”的結(jié)果。凝集素與糖分子結(jié)合有肯定的專一性和結(jié)合價,并與細(xì)胞膜上受體的分布有關(guān)。三、試驗用具:離心機(jī)、天平、顯微鏡、試管、注射器等四、試驗材料:土豆塊莖或蕓豆粒,家兔1只五、試驗步驟120g,加100mlPBS2出的粗提取液過濾,即為土豆凝集素提取液。2
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