自考生物工藝學(xué)全

1,近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的保藏菌種的志向且適用范圍最廣的是（④）①沙土管保藏法②斜面冰箱保藏法③石蠟油封存法 ④液氮超低溫保藏法2,保證種子質(zhì)量的限制措施，首先必需保證生產(chǎn)菌種的穩(wěn)定性，其次是保證（①）①無(wú)雜菌侵入 ②溫度恒定 ③通氣充分 ④接種量3,菌種斜面冰箱保藏法一般保存期為（③）①1周 ②1個(gè)月 ③3~6個(gè)月 ④1年以上4,原生質(zhì)體融合通常指在高滲條件下，將兩親本原生質(zhì)體混合，由（①）作為助融劑，使它們相互凝集發(fā)生細(xì)胞融合。①聚乙二醇 ②瓊脂糖 ③病毒粒子 ④半胱氨酸5,培育和分別放線菌，通常采納的培育基為（③）①牛肉膏蛋白胨瓊脂②查氏培育基 ③幾丁質(zhì)培育基 ④馬鈴薯培育基6,給混合菌群供應(yīng)一些有利于某種菌株生長(zhǎng)或不利于其他菌株生長(zhǎng)的條件，從而獲得所需菌種或某些特殊菌種的分別方法為（③）①隨機(jī)分別法②劃線分別法③富集培育分別法 ④平板分別法7,沙土管菌種保藏法是一種工業(yè)生產(chǎn)菌種常用的保藏方法，適合于產(chǎn)孢子或芽孢的微生物，一般保存期為（②）①半年左右 ②一年左右 ③二年左右 ④五年左右8,發(fā)酵過(guò)程中，為了提高青霉素的產(chǎn)量，通常在發(fā)酵中后期補(bǔ)充（①）前體物質(zhì)。①苯乙酰胺 ②肌醇 ③甘氨酸 ④丙酸鹽1,下列不是次級(jí)代謝產(chǎn)物的是（①）①脂肪 ②抗生素③色素④毒素1,保證種子質(zhì)量的限制措施，首先必需保證生產(chǎn)菌種的穩(wěn)定性，其次是保證（①）①無(wú)雜菌侵入 ②溫度恒定 ③通氣充分 ④接種量2,影響種子質(zhì)量的主要因素是（④）①原材料質(zhì)量 ②培育條件 ③斜面冷藏時(shí)間 ④以上都是3,種子制備過(guò)程中，生產(chǎn)車(chē)間種子制備階段是（②）①固體培育基擴(kuò)大培育 ②種子罐擴(kuò)大培育③搖瓶液體種子培育④斜面種子培育1,發(fā)酵過(guò)程中，培育基養(yǎng)分過(guò)于豐富，菌體生長(zhǎng)旺盛，發(fā)酵液粘稠，對(duì)產(chǎn)物的合成（②）①有利 ②不利 ③無(wú)關(guān) ④難以確定2,在微生物深層培育過(guò)程中由于通氣和攪拌,代謝氣體的逸出以及培育基中糖,蛋白質(zhì)等緣由產(chǎn)生大量泡沫，給發(fā)酵帶來(lái)“逃液”及污染雜菌等現(xiàn)象。為了有效地限制泡沫的發(fā)生，生產(chǎn)上采納限制泡沫的方法有（④）①酸法消沫②空氣消沫③壓力消沫④機(jī)械消沫和消沫劑消沫3,種齡是指種子罐中培育的菌體開(kāi)始移入發(fā)酵罐時(shí)的培育時(shí)間。適當(dāng)?shù)姆N齡有利于發(fā)酵，通常，接種齡以菌體的（②）較為合適。①延遲期 ②對(duì)數(shù)期 ③減速期 ④穩(wěn)定期2,酶是一種具有專(zhuān)一催化活性的生物催化劑，它的催化活性主要依靠于其具有特殊的（①）①活性中心 ②金屬離子 ③底物 ④輔基1,氨基酸發(fā)酵工業(yè)中，淀粉水解糖的制備一般采納（③）①堿水解法 ②酸酶水解法 ③酸水解法 ④酶水解法1,目前我們所發(fā)覺(jué)的抗生素產(chǎn)生菌大多來(lái)自于（③）①細(xì)菌②絲狀真菌③放線菌④酵母菌1,誘變育種：用各種物理,化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變進(jìn)行的篩選，稱(chēng)為誘變育種2,自然選育：利用微生物在肯定的條件下自發(fā)變異的原理，通過(guò)分別篩選的方法，解除衰變型菌株，從中選擇維持原菌生產(chǎn)水平的菌株，并得到純種。3,生理堿性物質(zhì)：若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無(wú)機(jī)氮源稱(chēng)為生理堿性物質(zhì)，如硝酸鈉。正確運(yùn)用生理酸堿性物質(zhì)，對(duì)穩(wěn)定和調(diào)整發(fā)酵過(guò)程的pH有主動(dòng)作用。4,生理酸性物質(zhì)：無(wú)機(jī)氮源被菌體作為氮源利用后，培育液中就留下了酸性或堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微生物生理作用（代謝）后能形成酸性物質(zhì)的無(wú)機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì)5,前體：前體指某些化合物加入到發(fā)酵培育基中，能直接被微生物在生物合成過(guò)程中合成到產(chǎn)物物分子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒(méi)有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。7產(chǎn)物促進(jìn)劑：所謂產(chǎn)物促進(jìn)劑是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的養(yǎng)分物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑8,代謝限制發(fā)酵：人為地改變微生物的代謝調(diào)控機(jī)制，是有用的中間代謝產(chǎn)物過(guò)量積累，這種發(fā)酵稱(chēng)代謝限制發(fā)酵。探討內(nèi)容：探討微生物的生理代謝規(guī)律，即生物合成各種代謝產(chǎn)物的途徑和代謝調(diào)整機(jī)制，環(huán)境因素對(duì)代謝方向的影響以及改變微生物代謝方向的措施。9,巴斯德效應(yīng)：在好氣條件下，酵母菌發(fā)酵實(shí)力下降（細(xì)胞內(nèi)糖代謝降低，乙醇積累削減）；不僅存在于酵母中，也存在于具有呼吸和發(fā)酵實(shí)力的其他細(xì)胞中。10,葡萄糖效應(yīng)：又稱(chēng)葡萄糖阻遏。葡萄糖或某些簡(jiǎn)單利用的碳源，其分解代謝產(chǎn)物阻遏某些誘導(dǎo)酶體系編碼的基因轉(zhuǎn)錄的現(xiàn)象。如大腸埃希氏菌培育在含葡萄糖和乳糖的培育基上，在葡萄糖沒(méi)有被利用完之前，乳糖操縱子就始終被阻遏，不能被利用。這是因?yàn)槠咸烟堑姆纸馕镆鸺?xì)胞內(nèi)cAMP含量降低，啟動(dòng)子釋放cAMP–CAP蛋白質(zhì),RNA聚合酶不能與乳糖的啟動(dòng)基因結(jié)合，以致轉(zhuǎn)錄不能發(fā)生，直到葡萄糖被利用完，乳糖操縱子才能被轉(zhuǎn)錄，形成利用乳糖的酶。10,發(fā)酵熱：發(fā)酵熱就是發(fā)酵過(guò)程中釋放出來(lái)的凈熱量。在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生菌分解基質(zhì)產(chǎn)生熱量，機(jī)械攪拌產(chǎn)生熱量，而罐壁散熱,水分蒸發(fā),空氣排氣帶走熱量。這各種產(chǎn)生的熱量和各種散失的熱量的代數(shù)和就叫做凈熱量。12,臨界溶氧濃度：指不影響呼吸所允許的最低溶氧濃度。1,菌株分別：就是將一個(gè)混雜著各種微生物的樣品通過(guò)分別技術(shù)區(qū)分開(kāi)，并依據(jù)實(shí)際要求和菌株的特性實(shí)行快速,精確,有效的方法對(duì)他們進(jìn)行分別,篩選，進(jìn)而得到所需微生物的過(guò)程。2,篩選：是指一種以多數(shù)物質(zhì)中按預(yù)定目標(biāo)就某種具有特定性質(zhì)的物質(zhì)進(jìn)行精選的操作過(guò)程。3,工業(yè)菌種的育種：是運(yùn)用遺傳學(xué)原理和技術(shù)對(duì)某個(gè)用于特定生物技術(shù)目的的菌株進(jìn)行的多方位的改造。通過(guò)改造，可使現(xiàn)存的優(yōu)良性狀強(qiáng)化，或去除不良性質(zhì)或增加新的性狀。4,菌種的復(fù)壯：狹義的復(fù)壯是一消極措施，一般指對(duì)已衰退的菌種進(jìn)行復(fù)壯；廣義的復(fù)壯是一主動(dòng)的措施，即在菌種的生產(chǎn)性狀未衰退前就不斷進(jìn)行純種分別和生產(chǎn)性狀測(cè)定，以在群體中獲得生產(chǎn)性狀更好的自發(fā)突變株。5,種子擴(kuò)大培育：指將保存在砂土管,冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培育,最終獲得肯定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程。6,培育基：是供微生物,植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物,含氮物質(zhì),無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。8,生長(zhǎng)因子：凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物質(zhì)都稱(chēng)為生長(zhǎng)因子。9,分批培育：是指在一個(gè)密閉系統(tǒng)內(nèi)投入有限數(shù)量的養(yǎng)分物質(zhì)后，接入少量的微生物菌種進(jìn)行培育，使微生物生長(zhǎng)繁殖，在特定的條件下只完成一個(gè)生長(zhǎng)周期的微生物培育方法。10,補(bǔ)料分批培育：介于分批培育和連續(xù)培育之間的培育方法。在微生物或動(dòng)植物細(xì)胞培育過(guò)程中，隨著養(yǎng)分物質(zhì)消耗，間歇或連續(xù)地添加養(yǎng)分成分或簇新培育基，但不同時(shí)收獲培育液。11,連續(xù)培育：又稱(chēng)連續(xù)發(fā)酵，指在分批式液體深層培育至微生物對(duì)數(shù)后期時(shí)，以肯定的流速向發(fā)酵罐中連續(xù)添加滅菌的簇新液體培育基，同時(shí)以相同的流速自發(fā)酵罐中排動(dòng)身酵液的發(fā)酵方法。12,發(fā)酵熱：是發(fā)酵過(guò)程中釋放出來(lái)的凈熱量。各種產(chǎn)生的熱量和各種散失的熱量的代數(shù)和就叫做凈熱量。13,初級(jí)代謝產(chǎn)物：微生物從外界汲取各種養(yǎng)分物質(zhì)，通過(guò)分解代謝和合成代謝，生成維持生命活動(dòng)必需的物質(zhì)和能量。如蛋白質(zhì),核酸等。14,次級(jí)代謝產(chǎn)物：是指微生物生長(zhǎng)到肯定階段才產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)非常困難,對(duì)該生物無(wú)明顯生理功能，或并非是微生物生長(zhǎng)和繁殖所必需的物質(zhì)，如抗生素,毒素,激素,色素等。15,淀粉的液化：利用化學(xué)或生物催化劑，在具有肯定量的水和肯定的溫度條件下，使淀粉分子斷裂而變成較小分子，使淀粉糊的粘度顯著下降而成為流淌性較好的流體的過(guò)程。主要有酸法和酶法。16,代謝限制發(fā)酵：用人工誘變的方法，有意識(shí)地改變微生物的代謝途徑，最大限度地積累產(chǎn)物。18,熱原：是在生產(chǎn)過(guò)程中由于被污染后由雜菌所產(chǎn)生的一種內(nèi)毒素。熱原注入體內(nèi)引起惡寒高熱，嚴(yán)峻的引起休克。19,前體：指加入到培育基中的某些化合物能被微生物直接結(jié)合到產(chǎn)物分子中，而自身的結(jié)構(gòu)無(wú)多大變化，且具有促進(jìn)產(chǎn)物合成的作用。20,介質(zhì)過(guò)濾除菌：是使空氣通過(guò)經(jīng)高溫滅菌的介質(zhì)過(guò)濾層，將空氣中的微生物等顆粒阻截在介質(zhì)層中，而達(dá)到除菌的目的。一般是棉花,活性炭，也有采納玻璃纖維,焦炭等。21,同型發(fā)酵：是葡萄糖經(jīng)EMP途徑降解為丙酮酸，丙酮酸在丙酮酸脫氫酶的催化下還原為乳酸的過(guò)程。理論轉(zhuǎn)化率為100%，實(shí)際轉(zhuǎn)化率80%以上。22,異型發(fā)酵：是某些乳酸細(xì)菌利用HMP途徑，分解葡萄糖為5-磷酸核酮糖，再經(jīng)差向異構(gòu)酶作用變成5-磷酸木酮糖，然后經(jīng)磷酸酮解酶催化裂解，生成3-磷酸甘油醛和23.抗生素：是由微生物,動(dòng)物和植物細(xì)胞在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中所產(chǎn)生的，能在低微濃度下有選擇性地抑制或殺滅他種生物或腫瘤細(xì)胞的一類(lèi)有機(jī)化合物。24.半合成抗生素：指用化學(xué)或生物化學(xué)的方法改變已知抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，或引入特定的功能基團(tuán)而獲得的新抗生素或其衍生物的總稱(chēng)。25.生物需氧量：在肯定溫度,肯定時(shí)間內(nèi)微生物利用有機(jī)物進(jìn)行生物氧化所須要氧的量。26.化學(xué)需氧量：指用強(qiáng)氧化劑氧化水中污染物時(shí)所需消耗的氧量。27.種子擴(kuò)大培育：是指將保存在沙土管,冷凍干燥管中處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培育而獲得肯定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程。28.反饋抑制：是一生物合成途徑中的最終代謝產(chǎn)物抑制那一途徑的前面第一個(gè)酶或第二個(gè)酶的作用。29.協(xié)同反饋抑制：指只有一種酶受抑制，但要抑制或阻遏這種酶須要一個(gè)以上的終點(diǎn)產(chǎn)物過(guò)量存在。30.反饋?zhàn)瓒簦菏且种泼傅男纬?，是由途徑中的終點(diǎn)產(chǎn)物或其衍生物實(shí)行的。31.自然突變：是指某些微生物在沒(méi)有人工參加下所發(fā)生的那些突變。32.雜交育種：是指將兩個(gè)基因型不同的菌株經(jīng)吻合使遺傳物質(zhì)重新組合，從中分別和篩選具有新性狀的菌株。33.固定化酶：指在肯定空間內(nèi)受到完全約束或者局部約束的酶。34.酶：指具有生物催化功能的蛋白質(zhì)。1,酶分子構(gòu)象的改變和載體屏障效應(yīng),（安排效應(yīng)）和（擴(kuò)散阻力）是影響固定化酶動(dòng)力學(xué)的主要因素。1自然界分別微生物的一般操作是_土樣的實(shí)行____,__預(yù)處理___,_培育__,__菌落的選擇及鑒定__2從環(huán)境中分別目的微生物時(shí)，進(jìn)行富集的目的是____讓目的微生物在種群中占優(yōu)勢(shì)，使篩選變得可能。3菌種選育分子改造的目的是_防止菌種退化,解決生產(chǎn)實(shí)際問(wèn)題,_提高生產(chǎn)實(shí)力,__提高產(chǎn)品質(zhì)量,開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品。4培育基成分選擇的原則是_菌體的同化實(shí)力____,____代謝的阻遏與誘導(dǎo)_____,__合適的C,N比____,_PH的要求___5種子擴(kuò)大培育的目的是種子量的須要_____,__菌種的馴化______,_縮短發(fā)酵時(shí)間,保證生產(chǎn)水平____與要求__總量與濃度能滿意要求_,_生理狀態(tài)穩(wěn)定____,__活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵后能快速生長(zhǎng)__,___無(wú)雜菌污染____6種子擴(kuò)大培育的一般步驟_斜面菌種制備___,_一級(jí)種子培育,二級(jí)種子培育,發(fā)酵___。7在釀酒過(guò)程中影響雜醇油生成的緣由是____菌種_,___培育基____,_發(fā)酵條件。8谷氨酸發(fā)酵的三個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)是__檸檬酸合成酶___,__烏頭酸梅___異檸檬酸脫氫酶___。9發(fā)酵過(guò)程溫度選擇的依據(jù)有依據(jù)菌種及生長(zhǎng)階段_____,_依據(jù)培育條件__,__依據(jù)菌生長(zhǎng)狀況10設(shè)備滲漏___,__空氣帶菌__,_種子帶菌___,_滅菌不徹底___,_技術(shù)管理部善___是引起雜菌污染的緣由。11.發(fā)酵中泡沫生成的緣由是__通氣攪拌的劇烈程度______,_培育基配比與原料的組成_,__菌種,種子質(zhì)量,接種量__和___滅菌質(zhì)量。12.采納__輻射滅菌___,_加熱滅菌_____,___靜電除菌_____和__介質(zhì)過(guò)濾除菌進(jìn)行空氣除菌。13.發(fā)酵醪中獲得產(chǎn)物分為_(kāi)__菌體__,____酶____和__代謝產(chǎn)物____三大類(lèi)。2,氨基酸生產(chǎn)過(guò)程中一般采納流加（尿素）或（氨水）的方法來(lái)限制pH值變化。1,目前施加選擇壓力的菌種分別方法有（富集液體培育）和（固體培育基的運(yùn)用）。2,目前菌種選育的方法有（自然選育）,（誘變選育）,抗噬菌體菌株的選育,（雜交育種）和原生質(zhì)體融合技術(shù)。3,放線菌染色體結(jié)構(gòu)確定其基因重組過(guò)程的特殊性，其重組過(guò)程大體上有異核現(xiàn)象,（接合現(xiàn)象）,異核系的形成和（重組體的形成）四種遺傳體系。4,含有重組DNA質(zhì)粒的基因工程菌在培育中與一般微生物的最大差別是表現(xiàn)出質(zhì)粒的不穩(wěn)定性。這種不穩(wěn)定性表現(xiàn)為（質(zhì)粒的不穩(wěn)定）和（表達(dá)產(chǎn)物的不穩(wěn)定）兩種形式。1,為了解除基質(zhì)過(guò)濃的抑制,產(chǎn)物的反饋抑制和葡萄糖分解阻遏效應(yīng)，以及避開(kāi)在分批發(fā)酵中因一次性投糖過(guò)多造成細(xì)胞大量生長(zhǎng)，耗氧過(guò)多而供氧不足的狀況，采納（中間補(bǔ)料）是較為有效的。2,在Jacob-Monod模型中，（無(wú)）誘導(dǎo)物時(shí)，調(diào)整基因編碼的阻遏物結(jié)合到操縱基因上，從而抑制結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄；（有）誘導(dǎo)物時(shí)，誘導(dǎo)物與阻遏物結(jié)合，從而使結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄可以進(jìn)行。3,微生物代謝的反饋調(diào)整作用，目前已知的主要有（反饋抑制）和（反饋?zhàn)瓒簦﹥煞N類(lèi)型。1,工業(yè)微生物絕大部分都是異養(yǎng)型微生物，其培育基通常包括（碳源）,（氮源）,（無(wú)機(jī)鹽及微量元素）,（前體促進(jìn)劑）等。2,發(fā)酵工業(yè)上，培育基按其用途可分為（孢子培育基）,（種子培育基）和（發(fā)酵培育基）三種。4,種子制備的工藝過(guò)程大致可以分為（試驗(yàn)室種子制備）和（生產(chǎn)車(chē)間種子制備）兩個(gè)階段。5,種子制備的工藝過(guò)程大致可以分為試驗(yàn)室種子制備和生產(chǎn)車(chē)間種子制備兩個(gè)階段，其中試驗(yàn)室種子制備階段包括（瓊脂斜面）,（固體培育基擴(kuò)大培育）或（搖瓶液體培育）。5,分批培育中，細(xì)胞一般經(jīng)驗(yàn)（延滯期）,（對(duì)數(shù)期）,減速期,（穩(wěn)定期）和衰亡期五個(gè)時(shí)期。3,酶和細(xì)胞的固定化方法主要有（吸附法）,（包埋法）,（交聯(lián)法）,化學(xué)共價(jià)法和逆膠束酶反應(yīng)系統(tǒng)。1,體外培育動(dòng)物細(xì)胞，依據(jù)其生長(zhǎng)性質(zhì)，可分為（貼壁依靠型）和（懸浮型）兩類(lèi)，通常淋巴細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞屬于（懸浮型）。2,采納液體培育方式大量培育植物細(xì)胞的流程為（外植體的選擇和培育）,（愈傷化）,搖瓶培育和（大量懸浮培育）。1,污水處理的基本方法按處理原理可分為（物理法）,（化學(xué)法）和（生化法）三大類(lèi)。3,目前我們所發(fā)覺(jué)的抗生素產(chǎn)生菌大多來(lái)自于（放線菌）綱，其中80%-90%源自于（鏈霉菌）屬。1,生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)和操作的限制因素除傳質(zhì)和傳熱外，還受（酶）或（微生物）等生物催化劑因素的限制。2,依據(jù)能量輸入的方式，發(fā)酵罐可以分為（內(nèi)部機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐）,（外部液體循環(huán)式發(fā)酵罐）和空氣噴射提升式發(fā)酵罐。四,簡(jiǎn)答題16.種子擴(kuò)大培育的目的與要求？目的：接種量的須要菌種的馴化縮短發(fā)酵時(shí)間,保證生產(chǎn)水平要求：1總量及濃度能滿意要求2生理狀況穩(wěn)定，個(gè)體與群體3活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵后，能夠快速生長(zhǎng)4無(wú)雜菌污染17.種子擴(kuò)大培育的一般步驟？休眠孢子→母斜面活化→搖瓶種子或茄子瓶斜面或固體培育基孢子→一級(jí)種子罐→二級(jí)種子罐→發(fā)酵罐18.在大規(guī)模發(fā)酵的種子制備過(guò)程中，試驗(yàn)室階段和生產(chǎn)車(chē)間階段在培育基和培育物選擇上各有何特點(diǎn)？試驗(yàn)室階段在原料方面，試驗(yàn)室種子培育階段，規(guī)模一般比較小，因此為了保證培育基的質(zhì)量，培育基的原料一般都比較精細(xì)。生產(chǎn)車(chē)間階段在原料方面：不照試驗(yàn)室階段則精細(xì)，而是基本接近于發(fā)酵培育基，這有兩個(gè)方面的緣由:1）成本2）馴化9.常用的碳源有哪些？常用的糖類(lèi)有哪些，各自有何特點(diǎn)？碳源：葡萄糖糖蜜淀粉糊精糖類(lèi)：碳源:糖類(lèi)（淀粉,葡萄糖,蔗糖等）,油脂（動(dòng),植物油）,有機(jī)酸（琥珀酸,檸檬酸,乳酸,乙酸等）和低碳醇（甲醇,乙醇等）。葡萄糖，全部的微生物都能利用葡萄糖，但是會(huì)引起葡萄糖效應(yīng)糖蜜，是制糖生產(chǎn)時(shí)的結(jié)晶母液，它是制糖工業(yè)的副產(chǎn)物。主要含有蔗糖，總糖可達(dá)50%～75%。一般糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。除糖份外，含有較多的雜質(zhì)，其中有些是有用的，但是很多都會(huì)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)生不利的影響，須要進(jìn)行預(yù)處理。淀粉,糊精，缺點(diǎn)：難利用,發(fā)酵液比較稠,一般>2.0%時(shí)加入肯定的α-淀粉酶。成分比較困難，有直鏈淀粉和支鏈淀粉等等。優(yōu)點(diǎn)：來(lái)源廣泛,價(jià)格低，可以解除葡萄糖效應(yīng)。

8.什么是培育基發(fā)酵培育基的特點(diǎn)和要求？培育基：廣義上講培育基是指一切可供微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的一組養(yǎng)分物質(zhì)和原料。同時(shí)培育基也為微生物培育供應(yīng)除養(yǎng)分外的其它所必需的條件。發(fā)酵培育基的要求①培育基能夠滿意產(chǎn)物最經(jīng)濟(jì)的合成②發(fā)酵后所形成的副產(chǎn)物盡可能的少③培育基的原料應(yīng)因地制宜，價(jià)格低廉；且性能穩(wěn)定，資源豐富，便于選購(gòu) 運(yùn)輸，適合大規(guī)模貯存，能保證生產(chǎn)上的供應(yīng)。④所選用的培育基應(yīng)能滿意總體工藝的要求，如不應(yīng)當(dāng)影響通氣,提取,純化及廢物處理等。19什么是代謝限制發(fā)酵？代謝限制發(fā)酵的探討內(nèi)容是什么？人為地改變微生物的代謝調(diào)控機(jī)制，是有用的中間代謝產(chǎn)物過(guò)量積累，這種發(fā)酵稱(chēng)代謝限制發(fā)酵。探討內(nèi)容：探討微生物的生理代謝規(guī)律，即生物合成各種代謝產(chǎn)物的途徑和代謝調(diào)整機(jī)制，環(huán)境因素對(duì)代謝方向的影響以及改變微生物代謝方向的措施。20簡(jiǎn)述糖酵解的調(diào)整機(jī)制21什么是巴斯德效應(yīng)？巴斯德效應(yīng)的機(jī)制是什么？在好氣條件下，酵母菌發(fā)酵實(shí)力下降（細(xì)胞內(nèi)糖代謝降低，乙醇積累削減）；不僅存在于酵母中，也存在于具有呼吸和發(fā)酵實(shí)力的其他細(xì)胞中。機(jī)制；第一個(gè)調(diào)整點(diǎn)是磷酸果糖激酶，此酶是變構(gòu)酶，受ATP,檸檬酸及其他的高能化合物抑制，被AMP,ATP,激活。22在釀酒過(guò)程中影響雜醇油生成的緣由是什么？1，酵母菌種，2培育及組成，3發(fā)酵條件44.pH對(duì)發(fā)酵的影響表現(xiàn)在哪些方面？（1）pH影響酶的活性。當(dāng)pH值抑制菌體某些酶的活性時(shí)使菌的新陳代謝受阻。（2）pH影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷。從而改變細(xì)胞膜的透性，影響微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的汲取及代謝物的排泄，因此影響新陳代謝的進(jìn)行。（3）pH值影響培育基某些成分和中間代謝物的解離，從而影響微生物對(duì)這些物質(zhì)的利用。（4）pH值影響代謝方向。pH不同，往往引起菌體代謝過(guò)程不同，使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。例如黑曲霉在pH2~3時(shí)發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸，在pH近中性時(shí)，則產(chǎn)生草酸。谷氨酸發(fā)酵，在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下則簡(jiǎn)單形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。（5）pH在微生物培育的不同階段有不同的影響。45.發(fā)酵過(guò)程的pH限制可以實(shí)行哪些措施？基礎(chǔ)培育基調(diào)整pH在基礎(chǔ)料中加入維持pH的物質(zhì)通過(guò)補(bǔ)料調(diào)整pH當(dāng)補(bǔ)料與調(diào)pH發(fā)生沖突時(shí)，加酸堿調(diào)pH選擇合適的pH調(diào)整劑發(fā)酵的不同階段實(shí)行不同的pH值46.泡沫對(duì)發(fā)酵有哪些有益之處，哪些有害之處？有利之處：氣體分散,增加氣液接觸面積有害之處：降低生產(chǎn)實(shí)力；引起原料奢侈；影響菌的呼吸；引起染菌47.發(fā)酵中泡沫形成的緣由是什么？通氣攪拌；培育基配比與原料組成；菌種,種子質(zhì)量和接種量；滅菌質(zhì)量48.羅氏假說(shuō)對(duì)泡沫穩(wěn)定的條件作了如何假釋?zhuān)吭谌芤褐?，溶解狀態(tài)的溶質(zhì)是穩(wěn)泡劑；不溶狀態(tài)的溶質(zhì)，當(dāng)浸入系數(shù)與鋪展系數(shù)均為正值時(shí)即是消泡劑。49.植物油的消泡機(jī)理是什么？當(dāng)其溶入泡沫液,會(huì)顯著降低該處的表面張力。因?yàn)檫@些物質(zhì)一般對(duì)水的溶解度較小,表面張力的降低僅限于泡沫的局部,而泡沫四周的表面張力幾乎沒(méi)有變化。表面張力降低的部分被劇烈地向四周牽引,延長(zhǎng),最終裂開(kāi)。50.對(duì)消泡劑有哪些要求？（1）在起泡液中不溶或難溶（2）表面張力低于起泡液（3）與起泡液有肯定程度的親和性（4）與起泡液不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)（5）揮發(fā)性小，作用時(shí)間長(zhǎng)51染菌對(duì)發(fā)酵有什么危害，對(duì)提煉有什么危害？染菌對(duì)發(fā)酵的危害：eq\o\ac(○,1)干擾生產(chǎn)菌的正常代謝，降低產(chǎn)量eq\o\ac(○,2)改變pH，降解某些產(chǎn)物eq\o\ac(○,3)污染不同的微生物，不同eq\o\ac(○,4)階段染菌危害eq\o\ac(○,5)染菌對(duì)提煉的危害：eq\o\ac(○,6)過(guò)濾困難而大幅度降低過(guò)濾收率eq\o\ac(○,7)有機(jī)溶劑萃取時(shí)發(fā)生乳化52有哪些緣由會(huì)引起染菌？1設(shè)備滲漏2空氣帶菌3種子帶菌4滅菌不徹底5技術(shù)管理不善53染菌以后應(yīng)實(shí)行什么措施？1發(fā)酵液必需滅菌后才可放下水道2找尋染菌的緣由3染菌厲害時(shí)，車(chē)間環(huán)境要用石灰消毒為什么會(huì)感染噬菌體？感染了噬菌體后應(yīng)實(shí)行哪些措施？產(chǎn)生噬菌體的緣由1活菌體隨意排放，造成噬菌體的感染源2建立工廠環(huán)境清潔衛(wèi)生制度3感染噬菌體的培育物不得帶入菌種室,搖瓶間4發(fā)覺(jué)噬菌體停攪拌,小通風(fēng)，將發(fā)酵液加熱到70~800C殺死噬菌體，才可排放。5環(huán)境用漂白粉消毒6選育抗噬菌體的菌種56.空氣除菌方法有哪些？1高溫除菌2輻射除菌3靜電除菌4介質(zhì)過(guò)濾除菌57.介質(zhì)過(guò)濾的機(jī)理是什么？以棉花，玻璃纖維，尼龍等，纖維類(lèi)或活性炭作為介質(zhì)填充呈肯定厚度的過(guò)濾層，或者將玻璃纖維，聚乙烯醇，聚四氟乙烯，金屬燒結(jié)材料制成過(guò)濾層，其介質(zhì)間的空隙大于被濾出的微生物或塵埃，空氣流過(guò)這種介質(zhì)過(guò)濾層是，借助慣性碰撞，阻截，靜電吸附，擴(kuò)散特作用，將其微生物或塵埃截留在介質(zhì)層內(nèi)，達(dá)到過(guò)濾的目的。58.影響介質(zhì)過(guò)濾效率的因素有哪些？1，介質(zhì)填充厚度與過(guò)濾之間的關(guān)系2，介質(zhì)填充密度與過(guò)濾之間的關(guān)系3，空氣流速與過(guò)濾效率之間的關(guān)系35.為何氧簡(jiǎn)單成為好氧發(fā)酵的限制性因素？氧是需氧微生物生長(zhǎng)所必需的。氧往往簡(jiǎn)單成為限制因素，是因?yàn)檠踉谒械娜芙舛群艿停嘤蚝写罅康挠袡C(jī)和無(wú)機(jī)物質(zhì)，氧的溶解度比水中還要更低。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期即使發(fā)酵液中的氧濃度達(dá)到飽和，若此時(shí)終止供氧，發(fā)酵液中的溶氧可在幾分鐘內(nèi)全部耗盡，使溶氧成為限制因素。

36.比耗氧速度和呼吸強(qiáng)度的概念？比耗氧速度或呼吸強(qiáng)度（QO2）：?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)單位重量的細(xì)胞所消耗的氧氣，mmolO2?g菌-1?h-1

19什么是代謝限制發(fā)酵？代謝限制發(fā)酵的探討內(nèi)容是什么？人為地改變微生物的代謝調(diào)控機(jī)制，是有用的中間代謝產(chǎn)物過(guò)量積累，這種發(fā)酵稱(chēng)代謝限制發(fā)酵。探討內(nèi)容：探討微生物的生理代謝規(guī)律，即生物合成各種代謝產(chǎn)物的途徑和代謝調(diào)整機(jī)制，環(huán)境因素對(duì)代謝方向的影響以及改變微生物代謝方向的措施。21什么是巴斯德效應(yīng)？巴斯德效應(yīng)的機(jī)制是什么？在好氣條件下，酵母菌發(fā)酵實(shí)力下降（細(xì)胞內(nèi)糖代謝降低，乙醇積累削減）；不僅存在于酵母中，也存在于具有呼吸和發(fā)酵實(shí)力的其他細(xì)胞中。機(jī)制；第一個(gè)調(diào)整點(diǎn)是磷酸果糖激酶，此酶是變構(gòu)酶，受ATP,檸檬酸及其他的高能化合物抑制，被AMP,ATP,激活。1,發(fā)酵工業(yè)對(duì)菌種的要求？答：①能在廉價(jià)原料制成的培育基上生長(zhǎng)，且生成目的產(chǎn)物產(chǎn)量高,易于回收；②生長(zhǎng)較快，發(fā)酵周期短；③培育條件易于限制；④抗噬菌體及雜菌污染的實(shí)力強(qiáng)；⑤菌種不易變異退化，以保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定；⑥對(duì)放大設(shè)備的適應(yīng)性強(qiáng)；⑦菌種不是病原菌，不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒素。2,誘變育種步驟答：①動(dòng)身菌株的選擇；②處理菌懸液的制備；③誘變處理；④中間培育；⑤分別和篩選。3,調(diào)整溶氧速率的方法？答：①調(diào)整通氣量；②調(diào)整氧的分壓：富氧，增加空氣壓力；③調(diào)整氣液接觸時(shí)間：增加液位高度，增設(shè)擋板；④調(diào)整氣液接觸面積：提高攪拌速率，空氣分布管及其直徑；⑤調(diào)整培育液的特性：粘度,表面張力,菌體濃度，離子濃度。4,簡(jiǎn)述種子培育基的目的及其特點(diǎn)？答：培育種子的目的：擴(kuò)大培育，增加細(xì)胞數(shù)量；同時(shí)也必需培育出強(qiáng)壯,健康,活性高的細(xì)胞，為了使細(xì)胞快速進(jìn)行分裂或菌絲快速生長(zhǎng)。種子培育基特點(diǎn)：①必需有較完全和豐富的養(yǎng)分物質(zhì)，特殊須要足夠的氮源和生長(zhǎng)因子；②種子培育基中各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度不必太高。供孢子發(fā)芽生長(zhǎng)用的種子培育基，可添加一些易被汲取利用的碳源和氮源；③種子培育基成分還應(yīng)考慮與發(fā)酵培育基的主要成分相近。5,培育基中微量元素的主要作用是什么？答：微量元素(無(wú)機(jī)鹽類(lèi))是微生物生命活動(dòng)所不可缺少的物質(zhì)。主要作用是：①構(gòu)成菌體成分；②作為酶活性基的組成部分或維持酶的活性；③調(diào)整滲透壓,pH值,氧化還原電位等；④作為自養(yǎng)菌的能源。8,引起發(fā)酵液pH上升或者下降的因素有那些？答：（1）引起pH下降的因素：EQ\o\ac(○,1)培育基中碳氮比例不當(dāng)，碳源過(guò)多，特殊是葡萄糖過(guò)量，或者中間補(bǔ)糖過(guò)多加之溶解氧不足，致使有機(jī)酸大量積累。EQ\o\ac(○,2)消泡油加的過(guò)多。EQ\o\ac(○,3)生理酸性物質(zhì)的存在，氨被利用，pH下降。（2）引起pH上升的因素：EQ\o\ac(○,1)培育基中碳氮比例不當(dāng)，氮源過(guò)多，氨基氮釋放，使pH上升EQ\o\ac(○,2)生理堿性物質(zhì)的存在。EQ\o\ac(○,3)中間補(bǔ)料中氨水或尿素等堿性物質(zhì)加入過(guò)多使pH上升。11,化學(xué)消泡的原理？答：①化學(xué)消泡劑是表面活性劑，消泡劑本身的表面張力相對(duì)于發(fā)酵液來(lái)說(shuō)是比較低的，一旦接觸到氣泡的表面，將會(huì)使氣泡膜局部的表面張力降低，力的平衡受到破壞，因而使氣泡裂開(kāi)或合并，最終導(dǎo)致泡沫裂開(kāi)。②當(dāng)泡沫表面層存在著極性的表面活性物質(zhì)而形成雙電層時(shí)，加入帶相反電荷的表面活性劑，可以降低膜的彈性（機(jī)械強(qiáng)度），或加入某些具有強(qiáng)極性的物質(zhì)與起泡劑爭(zhēng)奪液膜上的空間，并使液膜的機(jī)械強(qiáng)度降低，進(jìn)而促使泡沫裂開(kāi)。③當(dāng)泡沫的液膜具有較大的表面黏度時(shí)，加入某些分子內(nèi)聚力較弱的物質(zhì)，可降低膜的表面黏度，從而促使液膜的液體流失而使泡沫裂開(kāi)。26,簡(jiǎn)述抗生素的作用機(jī)制有哪幾類(lèi)？答：①抑制細(xì)胞壁合成的抗生素；②影響細(xì)胞膜功能的抗生素；③抑制核酸合成的抗生素；

④抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素；

⑤抑制生物能作用的抗生素。青霉素發(fā)酵中造成異樣溶氧可能緣由？答：異樣溶氧可能緣由：（1）染菌：溶氧快速下降，鏡檢。（2）染噬菌體：溶氧上升，C下降，發(fā)酵液快速轉(zhuǎn)稀，應(yīng)及早處理，嚴(yán)防擴(kuò)大；（3）代謝異樣：可能是有機(jī)酸大量積累，溶氧不足引起泡沫：27,青霉素和頭孢菌素合成的代謝調(diào)控？答：①碳源分解代謝物阻遏；②賴(lài)氨酸的反饋調(diào)整；③L－甲硫氨酸（調(diào)整物）對(duì)頭孢菌素C形成的促進(jìn)作用；④在頭孢菌素C的合成過(guò)程中，擴(kuò)環(huán)和羥化是其中的關(guān)鍵反應(yīng)和限速階段。⑤纈氨酸是青霉素生物合成的前體物。28,青霉素發(fā)酵中造成異樣溶氧可能緣由？答：①染菌：溶氧快速下降，鏡檢。②染噬菌體：溶氧上升，C下降，發(fā)酵液快速轉(zhuǎn)稀，應(yīng)及早處理，嚴(yán)防擴(kuò)大；③代謝異樣：可能是有機(jī)酸大量積累，溶氧不足引起泡沫：29,青霉素提煉工藝中采納了哪些單元操作，為什么？答：①預(yù)處理：發(fā)酵液加少量絮凝劑沉淀蛋白。緣由：濃度較低，含有大量雜質(zhì)。目的在于濃縮目的產(chǎn)物，去除大部分雜質(zhì)，改變發(fā)酵液的流變學(xué)特征，利于后續(xù)的分別純化過(guò)程。②過(guò)濾:去除蛋白,菌體及其它雜質(zhì)③萃?。赫噍腿。簭臑V液萃取到乙酸丁酯；反相萃?。簭囊宜岫□シ摧腿〉剿嘀?。反復(fù)萃取2~~3次，達(dá)到結(jié)晶要求。④脫色：萃取液中添加活性炭，除去色素,熱源，過(guò)濾，除去活性炭。在提取液中加活性炭150-300g/10億單位。⑤結(jié)晶：萃取液用0.5MNaOH萃取得pH6.4-6.8鈉鹽水濃縮液。加2.5倍體積丁醇，16－26℃，0.67-1.3KPa下真空蒸餾。水和丁醇形成共沸物而蒸出。蒸出餾分中含水達(dá)2-4%時(shí)，停止蒸餾。鈉鹽結(jié)晶析出。結(jié)晶經(jīng)過(guò)洗滌（丁醇4-6L/10億）,干燥后，得到青霉素產(chǎn)品。青霉素游離酸在有機(jī)溶劑中的溶解度很大，當(dāng)它與某些金屬離子或有機(jī)胺結(jié)合后，由于極性增大，溶解度大大降低而自有機(jī)溶劑中析出。30,菌種篩選的方法？答：①透亮圈法：在平板培育基中加入溶解性較差的底物，使培育基混濁。能分解底物的微生物便會(huì)在菌落四周產(chǎn)生透亮圈，圈的大小初步反應(yīng)當(dāng)菌株利用底物的實(shí)力。②變色圈法：對(duì)于一些不易產(chǎn)生透亮圈產(chǎn)物的產(chǎn)生菌，可在底物平板中加入指示劑或顯色劑，使所需微生物能被快速鑒別出來(lái)。③生長(zhǎng)圈法：生長(zhǎng)圈法通常用于分別篩選氨基酸,核苷酸和維生素的產(chǎn)生菌。④抑菌圈法：常用于抗生素產(chǎn)生菌的分別篩選。抑菌圈法是常用的初篩方法，工具菌采納抗生素的敏感菌。21,簡(jiǎn)述賴(lài)氨酸的代謝限制發(fā)酵的方法？答：①優(yōu)先合成的轉(zhuǎn)換—滲漏缺陷型的選育；②切斷支路代謝—養(yǎng)分缺陷型的選育；③選育結(jié)構(gòu)類(lèi)似物抗性突變株；④解除代謝互鎖；⑤增加前體物的合成和堵塞副產(chǎn)物生成；6,用工藝流程圖表述發(fā)酵生產(chǎn)中制備無(wú)菌空氣的過(guò)程？答：空氣→高空取氣管→除塵器→空氣壓縮機(jī)→貯氣罐→一級(jí)冷卻器→油水分別器→二級(jí)分別器→除霧器→加熱器→總過(guò)濾器→分過(guò)濾器→無(wú)菌空氣1,微生物誘變育種的基本步驟有哪些？并列舉1-2種常用的誘變劑及其作用機(jī)制動(dòng)身菌株的選擇斜面活化單孢子懸液制備誘變處理平板涂布初篩復(fù)篩培育基和培育條件篩選中試大試菌種保藏。常用誘變劑：如紫外線：機(jī)理為：使染色體上相鄰的胸腺嘧啶形成二聚體，從而導(dǎo)致發(fā)生錯(cuò)譯，而使微生物發(fā)生變異。亞硝酸：機(jī)理為脫去堿基上的氨基。2,簡(jiǎn)述工業(yè)微生物菌種保藏的原理和意義。原理：依據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，人為地創(chuàng)建條件，使孢子或菌體的生長(zhǎng)代謝活動(dòng)盡量降低，以削減其變異。意義：菌種保藏是進(jìn)行微生物學(xué)探討和微生物育種工作的重要組成部分，為微生物產(chǎn)品的生產(chǎn),科研供應(yīng)菌種，并便于菌種交換，保證菌種不死亡,不污染,不變異。3,在分別篩選規(guī)?；a(chǎn)的工業(yè)微生物菌種時(shí)，需考慮哪些重要的指標(biāo)？（1）菌種能利用廉價(jià)的養(yǎng)分物質(zhì)，并來(lái)源豐富；（2）菌種的生長(zhǎng)溫度應(yīng)高于40℃，可以降低生產(chǎn)成本；（3）菌對(duì)所采納的設(shè)備和生產(chǎn)過(guò)程的適應(yīng)性；（4）菌的穩(wěn)定性；（5）菌的產(chǎn)物得率和產(chǎn)物在培育液中的濃度；（6）簡(jiǎn)單從培育液中回收產(chǎn)物。4,利用原生質(zhì)體融合技術(shù)可以大大提高重組頻率，擴(kuò)大重組幅度，因而已廣泛應(yīng)用于工業(yè)新菌株的培育。請(qǐng)簡(jiǎn)述原生質(zhì)體融合技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)。（1）去除了原生質(zhì)體的障礙，親株基因組直接融合,交換，實(shí)現(xiàn)重組；（2）原生質(zhì)體融合后兩親株的基因組之間有機(jī)會(huì)發(fā)生多次交換，產(chǎn)生各種各樣的基因組合而得到多種類(lèi)型的重組子；（3）重組頻率高；（4）可以和其他育種方法相結(jié)合；（5）可以用溫度,紫外線等處理,鈍化親株的一方或雙方，然后使之融合，再在再生菌落中篩選重組子。5,簡(jiǎn)述DNA重組技術(shù)的基本操作過(guò)程。（1）含目的基因DNA片斷的獲得；（2）載體的選擇；（3）含目的基因DNA片斷與載體的連接；（4）將重組分子送入受體細(xì)胞，并于其中復(fù)制,擴(kuò)增；（5）篩選出帶有重組DNA分子的轉(zhuǎn)化細(xì)胞；（6）鑒定外源基因的表達(dá)產(chǎn)物。6,試簡(jiǎn)單說(shuō)明防止或降低基因工程菌表達(dá)不穩(wěn)定性的主要措施。（1）組建合適載體；（2）選擇適當(dāng)宿主；（3）施加選擇壓力；（4）限制基因過(guò)量表達(dá)；（5）限制培育條件。7,土壤是微生物生活的大本營(yíng)，生活著各種各樣的微生物。目前工業(yè)上所利用的微生物大多是從土壤中分別獲得的。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一種從土壤中分別固氮菌的分別方法。（1）培育基的選擇：配制完全無(wú)氮的培育基作為分別固氮菌的選擇性培育基。（2）取樣：選擇比較肥沃的菜園土作為分別固氮菌的土樣。（3）土壤懸浮液的制備：稱(chēng)取10克土樣置于100mL帶有玻璃珠的無(wú)菌水中，充分搖勻。（4）稀釋?zhuān)阂罁?jù)10倍稀釋法將土壤懸浮液稀釋到肯定的稀釋度。（5）涂布：分別取最終三個(gè)不同的稀釋度的稀釋液于完全無(wú)氮的選擇性培育基平板中央，用滅菌的涂布器涂布勻稱(chēng)，置于37℃恒溫箱中培育至長(zhǎng)出單菌落。（6）分別純化：挑取單菌落于完全無(wú)氮選擇性培育基平板用劃線的方法劃線純化，直到菌體形態(tài)完全一樣為止，接種于斜面保藏。8,利用微生物生產(chǎn)抗生素,氨基酸,釀造等都離不開(kāi)菌種，因而菌種保藏是微生物探討和育種工作的重要組成部分。要讓菌種不致死亡，同時(shí)還要盡可能將其優(yōu)良特性保持下來(lái)。試說(shuō)明菌種保藏的原理，依據(jù)不同的生產(chǎn),試驗(yàn)條件，闡述1~2種常用的菌種保藏方法。原理：依據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，人為地創(chuàng)建條件，使孢子或菌體的生長(zhǎng)代謝活動(dòng)盡量降低，以削減其變異。1.斜面低溫保藏法將菌種接種在相宜的固體斜面培育基上，待菌充分生長(zhǎng)后，棉塞部分用油紙包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。保藏時(shí)間依微生物的種類(lèi)而有不同，霉菌,放線菌及有芽孢的細(xì)菌保存2—4個(gè)月，移種一次。酵母菌兩個(gè)月，細(xì)菌最好每月移種一次。此法為試驗(yàn)室和工廠菌種室常用的保藏法，優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，運(yùn)用便利，不需特殊設(shè)備，能隨時(shí)檢查所保藏的菌株是否死亡,變異與污染雜菌等。缺點(diǎn)是簡(jiǎn)單變異，因?yàn)榕嘤奈锢?化學(xué)特性不是嚴(yán)格恒定的，屢次傳代會(huì)使微生物的代謝改變，而影響微生物的性狀；污染雜菌的機(jī)會(huì)亦較多。2．沙土保藏法（1）取河沙加入10％稀鹽酸，加熱煮沸30分鐘，以去除其中的有機(jī)質(zhì)。（2）倒去酸水，用自來(lái)水沖洗至中性。（3）烘干，用40目篩子過(guò)篩，以去掉粗顆粒，備用。（4）另取非耕作層的不含腐植質(zhì)的瘦黃土或紅土，加自來(lái)水浸泡洗滌數(shù)次，直至中性。（5）烘干，碾碎，通過(guò)100目篩子過(guò)篩，以去除粗顆粒。（6）按一份黃土,三份沙的比例（或依據(jù)須要而用其他比例，甚至可全部用沙或全部用土）摻合勻稱(chēng)，裝入10×100mm的小試管或安瓿管中，每管裝1g左右，塞上棉塞，進(jìn)行滅菌，烘干。（7）抽樣進(jìn)行無(wú)菌檢查，每10支沙土管抽一支，將沙土倒入肉湯培育基中，37℃培育48小時(shí)，若仍有雜菌，則需全部重新滅菌，再作無(wú)菌試驗(yàn)，直至證明無(wú)菌，方可備用。（8）選擇培育成熟的（一般指孢子層生長(zhǎng)豐滿的，養(yǎng)分細(xì)胞用此法效果不好）優(yōu)良菌種，以無(wú)菌水洗下，制成孢子懸液。（9）于每支沙土管中加入約0．5ml（一般以剛剛使沙土潤(rùn)濕為宜）孢子懸液，以接種針拌勻。（10）放入真空干燥器內(nèi)，用真空泵抽干水分，抽干時(shí)間越短越好，務(wù)使在12小時(shí)內(nèi)抽干。（11）每10支抽取一支，用接種環(huán)取出少數(shù)沙粒，接種于斜面培育基上，進(jìn)行培育，視察生長(zhǎng)狀況和有無(wú)雜菌生長(zhǎng)，如出現(xiàn)雜菌或菌落數(shù)很少或根本不長(zhǎng)，則說(shuō)明制作的沙土管有問(wèn)題，尚須進(jìn)一步抽樣檢查。（12）若經(jīng)檢查沒(méi)有問(wèn)題，用火焰熔封管口，放冰箱或室內(nèi)干燥處保存。每半年檢查一次活力和雜菌狀況。（13）須要運(yùn)用菌種，復(fù)活培育時(shí)，取沙土少許移入液體培育基內(nèi)，置溫箱中培育。此法多用于能產(chǎn)生孢子的微生物如霉菌,放線菌，因此在抗生素工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用最廣，效果亦好，可保存2年左右，但應(yīng)用于養(yǎng)分細(xì)胞效果不佳。菌種保藏的方法有那些？答：冷凍保藏（液氮-196或低溫冰箱-70）

干燥保藏（沙土管保藏，冷凍真空保藏）

低溫保藏（4℃短時(shí)間）

傳代保藏懸液保藏發(fā)對(duì)于重要的菌種，應(yīng)當(dāng)選用不同的保藏方法保藏，以避開(kāi)菌種丟失，其主要保藏原理降低微生物的代謝水平或使其處于休克狀態(tài)，所以低溫，少水環(huán)境均可或者兩者兼用.3,什么是選擇性培育基？它在工業(yè)生產(chǎn)中有何重要性？試舉一例說(shuō)明。（1）選擇性培育基：指適合于某種微生物或某類(lèi)微生物生長(zhǎng)，但不適合于其他微生物生長(zhǎng)的培育基。（2）重要性：利用選擇性培育基可以分別采納常規(guī)方法分別不到的工業(yè)微生物菌種。（1）培育基的選擇：配制完全無(wú)氮的培育基作為分別固氮菌的選擇性培育基。（2）取樣：選擇比較肥沃的菜園土作為分別固氮菌的土樣。（3）土壤懸浮液的制備：稱(chēng)取10克土樣置于100mL帶有玻璃珠的無(wú)菌水中，充分搖勻。（4）稀釋?zhuān)阂罁?jù)10倍稀釋法將土壤懸浮液稀釋到肯定的稀釋度。（5）涂布：分別取最終三個(gè)不同的稀釋度的稀釋液于完全無(wú)氮的選擇性培育基平板中央，用滅菌的涂布器涂布勻稱(chēng)，置于37℃恒溫箱中培育至長(zhǎng)出單菌落。（6）分別純化：挑取單菌落于完全無(wú)氮選擇性培育基平板用劃線的方法劃線純化，直到菌體形態(tài)完全一樣為止，接種于斜面保藏。6,簡(jiǎn)述作為發(fā)酵種子的主要準(zhǔn)則。（1）菌種生活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵罐后能快速生長(zhǎng)，延滯期縮短。（2）生理性狀穩(wěn)定。（3）菌體總量濃度能滿意大容量發(fā)酵罐的要求。（4）無(wú)雜菌污染。（5）保持穩(wěn)定的生產(chǎn)實(shí)力。1,簡(jiǎn)述發(fā)酵過(guò)程中引起發(fā)酵液pH值上升的因素。（1）培育基中碳氮比例不當(dāng)，氮源過(guò)高，氨基氮釋放，使pH上升。（2）生理堿性物質(zhì)的存在。（3）中間補(bǔ)料中氨水或尿素等堿性物質(zhì)加入過(guò)多，使pH上升。2,簡(jiǎn)述發(fā)酵過(guò)程中引起發(fā)酵液pH值下降的因素。（1）培育基中碳氮比例不當(dāng)，碳源過(guò)多，特殊是葡萄糖過(guò)量，或者中間補(bǔ)糖過(guò)多，加之溶解氧不足，致使有機(jī)酸大量積累，使pH下降。（2）消沫油加量過(guò)多。（3）生理酸性物質(zhì)的存在，NH3被利用，使pH下降。3,試論溫度對(duì)發(fā)酵的影響。（1）從酶的動(dòng)力學(xué)來(lái)看，溫度上升，反應(yīng)速率加大，生長(zhǎng)代謝加快，生產(chǎn)周期提前，但因酶本身很簡(jiǎn)單因熱而失去活性，溫度越高，酶的失活也越快，表現(xiàn)為菌體簡(jiǎn)單蒼老，發(fā)酵周期縮短，影響產(chǎn)物的最終產(chǎn)量。（2）溫度除直接影響反應(yīng)速率外，還通過(guò)改變發(fā)酵液的物理性質(zhì)間接影響菌的生物合成。（3）溫度影響生物合成方向。如四環(huán)素發(fā)酵中，金色鏈霉菌能同時(shí)產(chǎn)生金霉素。溫度小于30℃，合成金霉素實(shí)力較強(qiáng)，溫度大于30℃，則合成四環(huán)素的實(shí)力較強(qiáng)。4,發(fā)酵要求在沒(méi)有雜菌污染的狀況下進(jìn)行，因而滅菌是微生物工業(yè)生產(chǎn)的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。試論述生產(chǎn)過(guò)程中被雜菌污染后產(chǎn)生的不良后果和實(shí)行哪些措施來(lái)防止雜菌污染。不良后果（1）由于雜菌的污染，使生物化學(xué)反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物消耗，造成產(chǎn)率下降。（2）由于雜菌所產(chǎn)生的某些代謝產(chǎn)物，或染菌后發(fā)酵液的某些理化性質(zhì)的改變，使產(chǎn)物的提取變得困難。（3）污染的雜菌可能會(huì)分解產(chǎn)物而使生產(chǎn)失敗。（4）污染的雜菌大量繁殖，會(huì)改變反應(yīng)介質(zhì)的pH值，從而使生物化學(xué)反應(yīng)發(fā)生異樣變化。（5）發(fā)生噬菌體污染，微生物細(xì)胞被裂解而使生產(chǎn)失敗。措施：（1）設(shè)備滅菌并確保無(wú)泄露。（2）所用培育基必需滅菌。（3）通入的氣體應(yīng)經(jīng)除菌處理。（4）種子無(wú)污染，確保純種。（5）培育過(guò)程中加入的物料應(yīng)經(jīng)滅菌處理。3,應(yīng)用植物細(xì)胞培育生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的優(yōu)點(diǎn)有哪些？（1）動(dòng)植物細(xì)胞培育周期長(zhǎng)，生長(zhǎng)緩慢，生產(chǎn)率低；而微生物細(xì)胞培育生長(zhǎng)速度快，周期短，生產(chǎn)率高。（2）動(dòng)植物細(xì)胞培育時(shí)養(yǎng)分要求高，而微生物細(xì)胞養(yǎng)分要求相對(duì)較低。（3）動(dòng)植物細(xì)胞培育液有效成分濃度低，而微生物細(xì)胞培育液中有效成分濃度相對(duì)較高。（4）動(dòng)植物細(xì)胞大量培育時(shí)相對(duì)困難，而微生物細(xì)胞培