生物大分子藥物

生物大分子藥物近年來(lái)，生物大分子藥物發(fā)展迅猛，受到的關(guān)注也越來(lái)越多。與傳統(tǒng)小分子藥物相比，生物大分子藥物具有相對(duì)分子質(zhì)量大、不易透過(guò)生物膜、給藥劑量低、易在體內(nèi)降解等特點(diǎn)，這導(dǎo)致其具有與小分子藥物不同的藥代動(dòng)力學(xué)特征。以蛋白多肽藥物、單克隆抗體藥物、抗體藥物偶聯(lián)物和核酸藥物4類生物大分子藥物為例，綜述近年來(lái)生物大分子藥物的藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展，旨在為生物大分子藥物與生物類似藥的研發(fā)提供參考。[關(guān)鍵詞]生物大分子藥物；蛋白多肽藥物；單克隆抗體藥物；抗體藥物偶聯(lián)物；核酸藥物；藥代動(dòng)力學(xué)生物大分子藥物是指一類利用現(xiàn)代生物技術(shù)方法生產(chǎn)的源自生物體內(nèi)并被用于疾病的診斷、治療或預(yù)防的生物大分子，狹義上也稱為生物技術(shù)藥物。隨著分子生物學(xué)、基因工程和基因組學(xué)的研究發(fā)展，生物技術(shù)藥物得以迅猛發(fā)展，其種類也日趨增多。目前生物技術(shù)藥物包括DNA重組技術(shù)生產(chǎn)的蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、疫苗、單克隆抗體(mono-clonalantibody,mAb)和細(xì)胞因子藥物，也包括蛋白質(zhì)工程技術(shù)生產(chǎn)的上述產(chǎn)品的各類修飾物，還包括用于基因治療的基因、反義寡核苷酸和核酶與病毒和非病毒基因遞送載體等。藥代動(dòng)力學(xué)研究對(duì)于藥物的有效性和安全性評(píng)估非常重要，如選擇合適的給藥途徑，設(shè)定合適的給藥頻率和給藥劑量，明確藥物是否可以到達(dá)相應(yīng)的靶器官等。但不同于傳統(tǒng)的小分子化學(xué)藥物，生物大分子藥物具有相對(duì)分子質(zhì)量大、不易透過(guò)生物膜、給藥劑量低、易在體內(nèi)降解等特點(diǎn)，使其在生物體內(nèi)的處置過(guò)程變得更為復(fù)雜(見(jiàn)表1)，也給藥代動(dòng)力學(xué)研究提出了新的挑戰(zhàn)。本文將分別圍繞蛋白多肽藥物、mAb藥物、抗體藥物偶聯(lián)物(antibody-drugconjugate,ADC)和核酸藥物,對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行分析和討論。1生物大分子藥物的體內(nèi)吸收生物大分子藥物包括蛋白多肽藥物、核酸藥物、ADC藥物和mAb藥物等，與傳統(tǒng)小分子藥物(相對(duì)分子質(zhì)量為200~700)相比,其相對(duì)分子質(zhì)量(1500~150000)較大,不易被吸收,同時(shí)存在口服后易被消化道酶降解破壞的問(wèn)題,各種生物大分子藥物在吸收方面存在許多相似的特點(diǎn),在此一并闡述。給藥方式的選擇由于存在不易被吸收、消化道降解等問(wèn)題,生物大分子藥物口服給藥后生物利用度極低。目前絕大多數(shù)生物大分子藥物均選用腸道外方式給藥,主要以靜脈注射方式給藥,其次是皮下注射給藥,少數(shù)也可以肌肉注射給藥。靜脈注射給藥時(shí),血藥濃度迅速達(dá)到峰值，但易產(chǎn)生安全性問(wèn)題，同時(shí)長(zhǎng)期多次靜脈注射給藥存在患者耐受性不好等問(wèn)題，另外靜脈注射給藥一般需要在醫(yī)療機(jī)構(gòu)完成，容易帶來(lái)較高的費(fèi)用。為了解決生物大分子藥物給藥途徑帶來(lái)的問(wèn)題，研究主要集中在2個(gè)方面：一是如何實(shí)現(xiàn)生物大分子藥物的口服用藥；二是不同給藥方式的藥物吸收機(jī)制研究。大量研究集中在前者，如近期發(fā)現(xiàn)羧甲基纖維素-彈性蛋白（CMC-EIa）作為蛋白酶抑制劑可以很好地抑制胰蛋白酶、彈性蛋白酶等的活性；吸收促進(jìn)劑如脂肪酸、膽鹽等，可以可逆性地打開(kāi)緊密連接而提高胰島素的滲透性。但蛋白酶抑制劑容易造成體內(nèi)蛋白酶的缺乏，而吸收促進(jìn)劑容易損壞生物膜造成局部炎癥。此外，載藥系統(tǒng)如納米、微球、脂質(zhì)體以與衍生化或化學(xué)修飾也是研究如何實(shí)現(xiàn)生物大分子藥物口服用藥的主要方法。環(huán)孢素是一種預(yù)防同種異體器官或組織移植發(fā)生排斥反應(yīng)的藥物，特殊的環(huán)肽結(jié)構(gòu)使得其口服后具有較好的生物利用度。一項(xiàng)meta分析數(shù)據(jù)表明，山地明（環(huán)孢素的普通制劑）是新山地明（環(huán)孢素微乳化口服液）生物利用度的76%,其藥時(shí)曲線下面積（AUC）顯著低于新山地明，提示新型載藥系統(tǒng)可以有效提高蛋白多肽藥物的吸收。但總體上成功案例很少，還處于研發(fā)與探索階段。

褻T生物大分子跖物耳傳統(tǒng)小分于藥物的瑋代動(dòng)力舉特征比較Tabl@1Comparisonofpharmacokineticchaircicteristiesbetweenbiomstcromolsculsirdrugsandsmallmoleculedrugs特性傳統(tǒng)小分子藥軌生物大分子藥物 |塞月孟和白核酸單克隆抗體抗體藥剜偶聯(lián)剜|+n甘為t?頁(yè)呈2□□f7001□□□-70□□□6□□□-18□□□150□□□150□□□物理化學(xué)性嵐涪解性潼昇大，帶電狀態(tài)潼異大水誨性好，帶電狀査潼異大水誼■性好，多帶恍電荷水誨性好，帶電狀態(tài)塗異大水涪性好，帶電狀態(tài)潼異大泊刃」全飪11朋％前脈沖中或丙F給藥?kù)o射:注射■也戌|-‘;盲宇」前脈沖口.|或J7T下-；咅馬舲脈注射■馭收主物利用度豊異大主物利用度極低*存在娜巴卑統(tǒng)吸收限』藝：分?掃L1-血感旨!莊分作展參，M.次是肝泌?-腫泌』腦半分布最少炕仲藥q?.洌用耽芋CDAT??.分布分布』0_肝贓-百贓1?性H=t型分作r^'.'臟?、快?-中樞神經(jīng)妾統(tǒng)等TL乎?-」、于4，爪JmAh—詢：HAK社十4JF舒布1也勺：!，油涂力口快代謝CTF也5。醉克蛋白醉棣酸聲蛋白醉蛋白醉和CYF450^f」：|門(mén)卅存在沖r冋吃i'度『1膽■-腎排泄職氨基酸或小肪的污式重利用或經(jīng)腎排耀朝核釀片段的污式經(jīng)'宵排泄職凱基酸或小號(hào)的右式重利用或經(jīng)阿?III汙包含小分子和mAh2種排血兼蛋白緒臺(tái)率由低到高潼畀犬未經(jīng)倏怖的樓酸1較低J*經(jīng)巾麥怖的核酸CAE5施較高■?半玄期短門(mén)2未經(jīng)彳1珈的核酸:短C：：^.n.u .程住飾的股酸：K(■用鬥、K〔數(shù)天或數(shù)周)抗體魏分半査期左，小■?rTiLu例彼押絞稈於葯物-葯物相互作用廣泛存在無(wú)存在餞性勁尢于帖f正部分藥物高劑雖時(shí)呈現(xiàn)#餞性藥1弋勁尢于特征茍山Tffi-IL餞性藥代創(chuàng)尢于卞山工靶向性幾乎無(wú)靶向免疚厚性罕見(jiàn)常見(jiàn)主物樣本分桁対■象小分于藥物本島或活性代謝產(chǎn)物總蛋白和多號(hào)總核甘酸總抗體連接韌r總抗體r小分子務(wù)物皮下給藥的淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)1958年Malek等首次發(fā)現(xiàn)外源性大分子物質(zhì)可以通過(guò)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)，之后抗體等的淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)也開(kāi)展了相關(guān)研究。研究發(fā)現(xiàn)，皮下注射給藥時(shí)，大分子藥物可以通過(guò)組織間液的對(duì)流運(yùn)輸進(jìn)入淋巴循環(huán)，繼而隨淋巴管中淋巴液的單向流動(dòng)運(yùn)輸至靜脈系統(tǒng)進(jìn)入血液循環(huán)。皮下給藥后藥物的吸收過(guò)程會(huì)受到相對(duì)分子質(zhì)量、分子載電荷量以與給藥體積與給藥部位等許多因素的影響。生理因素如年齡、體質(zhì)量也會(huì)對(duì)同一藥物的生物利用度產(chǎn)生影響，導(dǎo)致出現(xiàn)較大的差異。一項(xiàng)在綿羊體內(nèi)開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)顯示，皮下注射給藥后，不同相對(duì)分子質(zhì)量的藥物（5-氟-2'-脫氧尿苷為246.2,菊粉為5200，細(xì)胞色素C為12300，IFN-a為19000）在綿羊淋巴液中的累積回收率與相對(duì)分子質(zhì)量之間呈現(xiàn)正相關(guān)性。提示，相對(duì)分子質(zhì)量小于1000的藥物，其大部分被吸收后進(jìn)入血液循環(huán)，此時(shí)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)在藥物吸收過(guò)程中的作用暫可忽略不計(jì)。相對(duì)分子質(zhì)量為19000時(shí)，約60%的藥物被吸收進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。這也意味著淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)在常見(jiàn)的蛋白多肽藥物（相對(duì)分子質(zhì)量為1500~70000）和核酸類藥物（相對(duì)分子質(zhì)量為6000~18000）皮下給藥吸收過(guò)程中起重要作用。推測(cè)對(duì)于相對(duì)分子質(zhì)量一般為150000的mAb，皮下給藥時(shí)幾乎都是經(jīng)過(guò)淋巴系統(tǒng)攝取。正常生理情況下，淋巴流量和流動(dòng)速度均不大。人在禁食安靜狀態(tài)下，每分鐘約產(chǎn)生1.0~1.5mL淋巴液。這使得皮下注射給藥需要很長(zhǎng)一段時(shí)間才能被吸收，如mAb通常需6~8d達(dá)到峰濃度。故推測(cè)淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的貢獻(xiàn)率會(huì)對(duì)藥物的達(dá)峰時(shí)間產(chǎn)生影響，這也是生物大分子藥物皮下注射給藥后達(dá)峰時(shí)間存在差異性的原因。同時(shí)有研究指出，由于在皮下給藥部位以與轉(zhuǎn)運(yùn)至淋巴系統(tǒng)的過(guò)程中存在降解，故生物大分子藥物皮下注射給藥后吸收越快，其生物利用度可能越高。2生物大分子藥物的體內(nèi)分布和消除蛋白和多肽藥物蛋白和多肽藥物因相對(duì)分子質(zhì)量大、親水性強(qiáng)，導(dǎo)致其在血管外室分布較低，靜脈注射給藥后大多符合二房室模型特征。和小分子藥物不同，蛋白和多肽藥物存在受體介導(dǎo)的靶器官特異性攝取，會(huì)影響其在體內(nèi)的分布。蛋白和多肽藥物在體內(nèi)不會(huì)經(jīng)歷傳統(tǒng)小分子化合物的藥物代謝反應(yīng)，其主要是在蛋白水解酶的作用下發(fā)生水解反應(yīng)被降解，產(chǎn)生的氨基酸進(jìn)入內(nèi)源性的氨基酸庫(kù)，被重新運(yùn)用。單克隆抗體藥物通過(guò)分子生物學(xué)手段可得到由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一抗體，稱為mAb°20世紀(jì)90年代末，自首個(gè)嵌合mAb獲批后，治療性mAb在自身免疫性疾病和腫瘤治療方面獲得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。mAb藥物的發(fā)展先后經(jīng)歷了鼠源mAb，嵌合mAb,人源化mAb和完全人源化mAb4個(gè)階段。目前已獲批的mAb藥物均屬于人免疫球蛋白IgG家族，其與內(nèi)源性人免疫球蛋白IgG有相似的結(jié)構(gòu)和相近的相對(duì)分子質(zhì)量(150000)。分布mAb極大的相對(duì)分子質(zhì)量和親水性使其體內(nèi)分布呈現(xiàn)2個(gè)特征。一是mAb在體內(nèi)分布多呈現(xiàn)二房室模型，中央室表觀分布容積(<15.7L)均比較低，mAb藥物主要分布于血漿，其次是間質(zhì)液和淋巴液。雖然血漿和間質(zhì)液之間存在對(duì)流運(yùn)動(dòng)，但正常組織中血漿蛋白和mAb藥物的凈流動(dòng)是從血管中流出并進(jìn)入間質(zhì)液。一旦mAb藥物進(jìn)入間質(zhì)液，就可以與細(xì)胞膜上的靶標(biāo)結(jié)合，通過(guò)胞吞進(jìn)入細(xì)胞。同時(shí)，由于淋巴管的直徑遠(yuǎn)大于血管上皮細(xì)胞間隙，不與間質(zhì)中靶標(biāo)結(jié)合的藥物可通過(guò)淋巴系統(tǒng)再循環(huán)至靜脈系統(tǒng)。二是給藥后mAb藥物在不同組織的分布出現(xiàn)差異性。主要的原因有3個(gè)方面：1)不同組織毛細(xì)血管的孔徑和血液灌注存在差異性。如腦組織是藥物最難分布的器官，mAb藥物在腎臟分布最多，其次是肝臟、脾臟，腦中分布最少。2)mAb存在自身靶向性，不同組織靶點(diǎn)的表達(dá)水平會(huì)影響其在體內(nèi)的組織分布。3)mAb藥物相對(duì)分子質(zhì)量的大小、攜帶的電荷量等對(duì)通過(guò)毛細(xì)血管時(shí)的孔徑壓力造成影響。消除mAb藥物在體內(nèi)的清除率(0.066~1.33L?d-1)很低，半衰期為數(shù)小時(shí)或數(shù)天，差異較大。mAb藥物具體的消除機(jī)制尚不清楚，目前討論的消除途徑主要存在3種：1)傳統(tǒng)的蛋白酶水解。mAb藥物因相對(duì)分子質(zhì)量較大不會(huì)在腎臟直接濾過(guò)，可在蛋白酶的作用下降解為肽段，被機(jī)體重新利用。這種水解是非特異性的，在mAb藥物的消除中貢獻(xiàn)率也比較低。2)溶酶體水解。mAb藥物可以與細(xì)胞表面膜結(jié)合型抗原結(jié)合或與細(xì)胞表面Fcy受體結(jié)合后內(nèi)吞至細(xì)胞內(nèi)，也可以非特異性吞飲的方式進(jìn)入細(xì)胞，然后被細(xì)胞內(nèi)的溶酶體降解成肽段和氨基酸。3)免疫系統(tǒng)清除。機(jī)體除了存在膜結(jié)合型抗原外，還存在可溶性抗原?？扇苄钥乖梢耘c單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物，繼而被免疫系統(tǒng)清除。同時(shí)mAb藥物可能在體內(nèi)引起免疫反應(yīng)而產(chǎn)生抗藥物抗體，mAb藥物與之結(jié)合后隨即被免疫系統(tǒng)清除。2.3ADC藥物ADC是一類抗體與小分子藥物通過(guò)連接物相連接的新型藥物。該類藥物可以在保持mAb高度靶向性的同時(shí)，引入小分子藥物的強(qiáng)細(xì)胞毒性。然而實(shí)際研發(fā)過(guò)程中困難重重，目前僅有2種ADC藥物獲批用于臨床，分別是用于人表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER2)陽(yáng)性轉(zhuǎn)移性乳腺癌的曲妥珠單抗(Kadcyla)和治療晚期霍奇金淋巴瘤的本妥昔單抗(Adcetris)，其抗體的藥代動(dòng)力學(xué)特征見(jiàn)表2。一個(gè)理想的ADC藥物應(yīng)具有的特征有：mAb藥物應(yīng)選擇性高、親和力強(qiáng)、人源化、免疫原性低、清除率較慢；連接物應(yīng)在循環(huán)中保持穩(wěn)定，可在腫瘤細(xì)胞內(nèi)部釋放活性藥物，具有合適的結(jié)合位點(diǎn)；小分子藥物應(yīng)具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，在生理pH條件下保持穩(wěn)定，具有合適的藥物代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)行為，具有較好的DAR;抗原應(yīng)具有腫瘤特異性，表達(dá)在細(xì)胞表面，可與抗體形成復(fù)合物并將其胞吞進(jìn)入細(xì)胞。與mAb藥物相比，ADC藥物具有相似的藥動(dòng)學(xué)特征：清除率低、半衰期長(zhǎng)、組織分布有限。但也存在不同點(diǎn)：1)ADC藥物通常是不同偶聯(lián)方式的化合物組成的相對(duì)分子質(zhì)量不同的混合物，這給測(cè)定帶來(lái)了難度。2)ADC藥物由抗體、連接物和小分子藥物3部分組成。這3個(gè)部分在體內(nèi)的分布、消除等需要分別進(jìn)行研究，也就需要建立準(zhǔn)確測(cè)定這3種不同的組分與可能代謝物的分析方法。3)ADC藥物在體內(nèi)常通過(guò)去偶聯(lián)作用分別形成mAb藥物和小分子物質(zhì)，二者分別進(jìn)一步的水解或代謝；也可能直接降解或分解代謝為含片段的小分子藥物，發(fā)生和傳統(tǒng)小分子化合物相似的代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)等體內(nèi)處置行為。由于mAb藥物不發(fā)生CYP450酶系介導(dǎo)的代謝以與轉(zhuǎn)運(yùn)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn),也就不存在和小分子藥物發(fā)生藥物相互作用的可能，而ADC藥物則有可能發(fā)生藥物相互作用。4)對(duì)于ADC藥物而言，在DAR小于4時(shí)，共軛和未共軛抗體之間的組織分布無(wú)顯著差異；然而當(dāng)DAR大于4時(shí)，疏水性增加，共軛會(huì)加速血

漿清除，并且在肝臟中有蓄積的趨勢(shì)。5）理想狀態(tài)下，連接物應(yīng)在腫瘤細(xì)胞內(nèi)釋放小分子化合物。但ADC藥物可以通過(guò)胞飲作用進(jìn)入正常細(xì)胞，導(dǎo)致非靶細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生不需要的藥物釋放，可能導(dǎo)致毒性。寡核苷酸是一類20個(gè)左右堿基的短鏈核苷酸的總稱（包括脫氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA內(nèi)的核苷酸）。寡核苷酸是生物醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)研究中調(diào)節(jié)基因表達(dá)的基本工具，現(xiàn)在已被開(kāi)發(fā)為基因靶向治療藥物，用于治療病毒感染、腫瘤和遺傳病。寡核苷酸藥物主要包括反義寡核苷酸、小干擾RNA(smallinterferingRNA,siRNA)、核酸適配體、核酸疫苗等。分布靜脈注射給藥后寡核苷酸快速分布到組織，游離的寡核苷酸主要是被肝臟和腎臟攝取，然后緩慢地消除(可能數(shù)周)，在體內(nèi)通常呈現(xiàn)多房室模型特征，緩慢消除階段的AUC通常約占總AUC的20%。臨床前研究數(shù)據(jù)顯示，寡核苷酸的體內(nèi)過(guò)程常表現(xiàn)出非線性藥動(dòng)學(xué)的特征。由于靜脈注射給藥后寡核苷酸快速分布到組織，血漿暴露量遠(yuǎn)低于組織，使得血漿中的非線性特點(diǎn)不太明顯，而個(gè)別組織中的非線性特征更為明顯。例如經(jīng)三氨基N-乙酰基半乳糖胺修飾的反義寡核苷酸(ISIS691257)在猴體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究表明，皮下注射給藥后，ISIS691257迅速吸收達(dá)峰后濃度快速衰減并進(jìn)入緩慢的消除階段(消除半衰期約4周)，在1~40mg?kg-1劑量范圍內(nèi)血漿和肝臟的處置過(guò)程呈現(xiàn)出非線性特征。寡核苷酸如反義核苷酸和siRNA在肝臟和腎臟分布濃度均較高，但在其他組織如心臟、胰島、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的分布有限甚至無(wú)分布。有研究人員將小分子甲狀腺激素T3和反義核苷酸結(jié)合，促進(jìn)了T3在肝臟和脂肪組織的攝取，這既保持了寡核苷酸積極的代謝作用，同時(shí)也最大限度地減少了對(duì)腦、心臟和肌肉的副作用。另一方面，寡核苷酸的組織分布具有異質(zhì)性。在肝臟中，與肝細(xì)胞和非實(shí)質(zhì)肝細(xì)胞相比，膽管上皮細(xì)胞中反義核苷酸的攝取量較低。寡核苷酸高劑量時(shí)，肝細(xì)胞中其總濃度與非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中的濃度相似，但低劑量時(shí)非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中的總濃度通常更高。在腎臟中，寡核苷酸主要分布到皮質(zhì)，而腎小球和髓質(zhì)小管的攝取量較低。天然的寡核苷酸血漿蛋白結(jié)合率一般較低，主要經(jīng)全身代謝或腎臟排泄。經(jīng)硫代修飾的反義核苷酸與血漿蛋白廣泛結(jié)合（一般血漿蛋白結(jié)合率高于85%）,其中與白蛋白的結(jié)合占主要部分，其次是與a-巨球蛋白，與al-酸性糖蛋白的結(jié)合可忽略不計(jì)。一項(xiàng)關(guān)于硫代磷酸寡核苷酸（ISIS2302）血漿蛋白結(jié)合率的研究表明，ISIS2302在不同種屬小鼠、大鼠、猴、人體中表現(xiàn)出了極高的血漿蛋白結(jié)合率（97%），其中小鼠的血漿蛋白結(jié)合程度相對(duì)其他種屬較低。消除寡核苷酸的體內(nèi)消除過(guò)程比較簡(jiǎn)單，主要由核酸外切酶和內(nèi)切酶水解成片段化的寡聚體和單核苷酸。雖然核酸酶在體內(nèi)無(wú)處不在，但在不同組織其表達(dá)可能有差別。如一個(gè)命名為HBV263的雙鏈siRNA體外代謝研究顯示，其在血清和肝微粒體中存在不同的代謝模式：在大鼠和人血清中，雙鏈的反義鏈優(yōu)先降解，而在大鼠和人肝微粒體中，雙鏈的有義鏈穩(wěn)定性較差。提示，血清和肝微粒體可能存在不同類型的核酸酶，且其底物特異性可能不同。未經(jīng)修飾的寡核苷酸半衰期很短，只有幾秒或幾分鐘，但經(jīng)修飾后隨著核酸酶抗性的增加與血漿蛋白結(jié)合率的增加，其半衰期可增至數(shù)周或數(shù)月。組織中寡核苷酸的血藥濃度是血漿中的上百倍甚至上千倍。故建議開(kāi)展臨床代謝研究時(shí)同時(shí)搜集血漿和尿液樣品進(jìn)行分析，血漿中的代謝產(chǎn)物多為母體以與從末端消除一個(gè)或幾個(gè)核苷酸形成的代謝產(chǎn)物，尿液中的代謝產(chǎn)物多為較小的可以通過(guò)腎臟有效過(guò)濾的寡核苷酸片段。其他共軛寡核苷酸和ADC藥物相似，現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出共軛寡核苷酸藥物以改善細(xì)胞攝取并增加寡核苷酸活性。共軛寡核苷酸藥物由3部分組成,即攝取增強(qiáng)部分、鏈接部分和寡核苷酸。增強(qiáng)劑一般是親脂性天然內(nèi)源性化合物，例如膽固醇和脂肪酸，幾乎無(wú)安全問(wèn)題。Inclisiran是一種經(jīng)過(guò)修飾的新型siRNA共軛結(jié)合物，用于降低低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）。一項(xiàng)I期臨床研究表明,單次或多次注射inclisiran后，LDL-C水平可顯著降低6個(gè)月。生物分析方法傳統(tǒng)的雜交技術(shù)不能實(shí)現(xiàn)原藥和代謝產(chǎn)物的同時(shí)測(cè)定，因?yàn)榇x物也可與序列特異性分析探針雜交。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）技術(shù)能夠分離組分并提供每種化合物分子質(zhì)量的數(shù)據(jù)。但LC-MS/MS存在幾個(gè)問(wèn)題：一是寡聚核苷酸富含陰離子，易與蛋白質(zhì)強(qiáng)烈結(jié)合，常規(guī)的樣品處理方法提取回收率過(guò)低；二是基于寡核苷酸理化性質(zhì)的特殊性，流動(dòng)相一般比較復(fù)雜；三是寡核苷酸和代謝物的濃度通常在組織中比在血漿中高得多。由于分析靈敏度不足，消除階段的血漿濃度-時(shí)間曲線可能不能表征寡核苷酸藥物在體內(nèi)的真實(shí)過(guò)程。這些問(wèn)題都需要在寡核苷酸藥代動(dòng)力學(xué)研究過(guò)程中引起注意。3結(jié)語(yǔ)近年來(lái)生物大分子藥物得到迅猛發(fā)展，尤其是結(jié)構(gòu)上的保守性使其在動(dòng)物體內(nèi)的研究可以很好地為人體研究提供參考，從而大大地縮短了研發(fā)周期。但與傳統(tǒng)小分子藥物相比，生物大分子藥物具有相對(duì)分子質(zhì)量大、不易透過(guò)生物膜、給藥劑量低、易在體內(nèi)降解等特點(diǎn)，使其在生物體內(nèi)的處置過(guò)程也不同于小分子藥物：皮下給藥后淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)在生物大分子吸收過(guò)程中發(fā)揮了重要作用；體內(nèi)主要由蛋白酶和核酸酶介導(dǎo)發(fā)生降解，產(chǎn)生的多肽或核酸片段重新被吸收利用，極少部分經(jīng)腎排泄；常出現(xiàn)非線性藥代動(dòng)力學(xué)特征等。同時(shí)不同類別的生物大分子藥物作用機(jī)制各有差異而藥代動(dòng)力學(xué)行為也顯示出了不同的特點(diǎn)，這對(duì)生物大分子藥物人體藥代動(dòng)力學(xué)預(yù)測(cè)，生物大分子創(chuàng)新藥物藥代動(dòng)力學(xué)研究和生物類似藥物的藥動(dòng)學(xué)評(píng)價(jià)提出了更多的挑戰(zhàn)。生物大分子研發(fā)趨勢(shì)近期，美國(guó)FDA頒布了“生物類似藥行動(dòng)計(jì)劃”，以加速其研發(fā)和市場(chǎng)化。這個(gè)行動(dòng)計(jì)劃包括成立專門(mén)的機(jī)構(gòu)(OfficeofTherapeuticBiologicsandBiosimilars)，提供專門(mén)的審評(píng)模板以與為生物類似藥開(kāi)發(fā)機(jī)構(gòu)提供詳細(xì)的指導(dǎo)，例如如何判斷相似性的統(tǒng)計(jì)學(xué)工具等。該行動(dòng)計(jì)劃提出的背景是美國(guó)政府的醫(yī)療控費(fèi)，其目的是加速生物類似藥/可替換產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)以與限制原研廠商對(duì)生物類似藥的阻礙。美國(guó)的生物類似藥開(kāi)發(fā)本來(lái)就落后于歐盟。據(jù)FDA的官員透露，美國(guó)獲批上市的11個(gè)生物類似藥只有3個(gè)真正得以銷售，這11個(gè)產(chǎn)品都銷售的話，2017年就可以節(jié)省45億美元醫(yī)療費(fèi)用。和美國(guó)相比，歐盟自2006年起，一共批準(zhǔn)了37個(gè)生物類似藥，但是市場(chǎng)進(jìn)入并沒(méi)有預(yù)期快。2006年批準(zhǔn)的生長(zhǎng)激素，到現(xiàn)在為止，也只是占據(jù)了不到30%的市場(chǎng)，而2013年獲批的類克(Remicade)，降價(jià)2/3，才在北歐四國(guó)獲得推廣。在中國(guó)，生物類似藥指南在2015年頒布，目前還沒(méi)有生物類似藥上市。相比于小分子化藥仿制藥的適應(yīng)證外延和可替換性而言，生物大分子藥物由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，生物類似藥的開(kāi)發(fā)對(duì)于開(kāi)發(fā)者和監(jiān)管機(jī)構(gòu)都是相當(dāng)大的困難和挑戰(zhàn)。此外，大分子藥物由于生產(chǎn)工藝和質(zhì)控復(fù)雜、前期廠房投入大、臨床費(fèi)用高等原因，銷售價(jià)格不會(huì)像化藥仿制藥那么低，在市場(chǎng)推廣方面需要商業(yè)模式的創(chuàng)新。在市場(chǎng)推廣時(shí)，難免會(huì)遭遇原研藥和原研藥改良的阻擊，Herceptin和Rituxan的類似藥很快會(huì)面臨羅氏產(chǎn)品降價(jià)和新獲批的皮下給藥劑型競(jìng)爭(zhēng)。生物類似藥開(kāi)發(fā)不容易，改良創(chuàng)新生物藥更難，原創(chuàng)生物藥成功機(jī)會(huì)更是寥寥。國(guó)內(nèi)的制藥公司和新興的生物技術(shù)公司在立項(xiàng)之時(shí)，有必要進(jìn)行綜合的判斷和評(píng)估。在生物類似藥方面，前幾年已經(jīng)明顯出現(xiàn)了幾個(gè)熱門(mén)單抗品種的扎堆開(kāi)發(fā)現(xiàn)象。但是有一些蛋白類藥物和后續(xù)的單抗品種只有很少的公司開(kāi)發(fā)或者沒(méi)有人開(kāi)發(fā)。生物類似藥的開(kāi)發(fā)也需要前瞻性，需要提前收集不同批次、不同產(chǎn)地的原研藥進(jìn)行結(jié)構(gòu)功能的研究，對(duì)工藝流程和成本有充分的理解，也需要對(duì)市場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查和分析，甚至需要進(jìn)行全球的布局。改良創(chuàng)新生物藥，對(duì)于蛋白質(zhì)藥物而言，是指提高活性、半衰期和穩(wěn)定性等的新一代藥物。對(duì)于抗體類藥物和CAR-T等，其實(shí)是一個(gè)偽命題。這類藥物，除了做臨床的頭對(duì)頭研究，很難說(shuō)是更好還是更壞。再談一下生物大分子新藥。首先生物大分子涵蓋了蛋白、抗體、疫苗、細(xì)胞治療、核酸藥物、基因治療等等。由于單抗熱和CAR-T熱，業(yè)界往往會(huì)誤解生物藥物就這么兩類。這個(gè)誤解導(dǎo)致藥企扎堆研究針對(duì)程序性死亡蛋白-1(PD-1)與其配體(PD-L1)、CD47等靶點(diǎn)的抗體，以與重復(fù)投入研究針對(duì)CD19和B細(xì)胞成熟抗原(BCMA)的CAR-T。在驗(yàn)證的新靶點(diǎn)匱乏的情況下，大分子創(chuàng)新藥可以從這幾個(gè)方面考慮：交叉學(xué)科的新技術(shù)開(kāi)發(fā)，比如人工智能和材料科學(xué)；擴(kuò)大大分子藥物的應(yīng)用空間，比如打破血-腦脊液屏障；蛋白質(zhì)深度工程化，增加成藥性；4）蛋白質(zhì)和基因治療、基因編輯的結(jié)合；5）新組合和多功能大分子藥物。如此種種，受限于個(gè)人經(jīng)驗(yàn)，不一而足。新藥開(kāi)發(fā)的將來(lái)一定是技術(shù)不分新舊，分子不分大小，以解決滿足醫(yī)療需求為主以解決可與性為重，以全球競(jìng)爭(zhēng)力為目標(biāo)。在我國(guó)，生物類似藥的成功與否還取決于3個(gè)關(guān)鍵數(shù)據(jù)：一是臨床開(kāi)發(fā)的成本，二是最終定價(jià)相比于原研藥的折扣有多少，三是生產(chǎn)成本。當(dāng)然由于生物藥的復(fù)雜性，質(zhì)量控制至關(guān)重要。此外