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果蠅綜合大實驗--性狀觀察及雜交實驗設(shè)計綜合實驗內(nèi)容:實驗一、果蠅性別鑒定、性狀觀察與飼養(yǎng)方法實驗二、果蠅分離定律的實驗分析實驗三、果蠅自由組合的實驗分析實驗四、果蠅的伴性遺傳實驗分析實驗五、果蠅的三點測驗實驗分析實驗六、果蠅的連鎖與交換實驗分析實驗一果蠅性別鑒定、性狀觀察與飼養(yǎng)方法實驗?zāi)康?、了解果蠅的生活史;3、通過實驗學(xué)習(xí)掌握果蠅性別的鑒定方法;4、了解果蠅的飼養(yǎng)方法;5、仔細(xì)觀察并記錄實驗室各品系果蠅的性狀。2、掌握果蠅的麻醉及觀察方法;(一)果蠅的生活史果蠅屬于昆蟲綱,雙翅目,與家蠅是不同的種。它的生活史包括:卵→幼蟲→蛹→成蟲。受精卵一齡幼蟲二齡幼蟲三齡幼蟲蛹成蟲圖一、果蠅生活史圖解果蠅的生活周期長短與溫度關(guān)系很密切,30℃以上的溫度能使果蠅不育和死亡,低溫則使它生活周期延長,同時生活力也減低,果蠅培養(yǎng)的最適溫度20—25℃。10℃15℃20℃25℃卵幼蟲8天5天幼蟲成蟲57天18天6.3天4.2天從表中可以看出25℃時,從卵到成蟲約10天;在25℃時成蟲約活15天。果蠅一般是培養(yǎng)在恒溫箱內(nèi),盛夏時,要注意降溫。生長迅速,生活史較短,短時間內(nèi)可獲得大量子代;容易飼養(yǎng),在常溫下以玉米粉做飼料就可使之生長繁殖;染色體數(shù)目少,加之唾腺染色體巨大,是細(xì)胞學(xué)觀察的好材料;突變性狀多,且多數(shù)是形態(tài)突變,便于觀察。(二)果蠅是遺傳學(xué)分析的好材料對果蠅進(jìn)行檢查時,可用乙醚麻醉,使它保持靜止?fàn)顟B(tài)。因果蠅對乙醚很敏感,易麻醉,麻醉的深度看實驗要求而定(作種蠅以輕度麻醉為宜,做觀察可深度麻醉,致死也無妨。果蠅翅膀外展45℃角表示已死)。麻醉時將乙醚(2-3滴)滴到麻醉瓶塞的綿球上(注意不要讓乙醚流到瓶內(nèi)),同時麻醉瓶要保持干燥,否則會粘住果蠅翅膀。將培養(yǎng)瓶倒置,讓果蠅向瓶底部運動,然后打開麻醉瓶和培養(yǎng)瓶塞,迅速將兩者瓶口相接(麻醉瓶在上,培養(yǎng)瓶在下),輕拍培養(yǎng)瓶壁使果蠅落入麻醉瓶中,迅速蓋好兩個瓶塞,并倒置麻醉瓶,一分鐘后果蠅即處于昏迷狀態(tài)。麻醉后的果蠅放在白瓷板上,用毛筆輕輕撥動進(jìn)行觀察。必要時可進(jìn)行第二次麻醉。觀察完畢后倒入煤油或酒精瓶中(死蠅盛留器)。(三)果蠅的麻醉及觀察方法(四)果蠅的雌雄鑒別果蠅有雌雄之分,幼蟲期區(qū)別較難,成蟲區(qū)別容易。

雄性體型較小,腹部環(huán)紋5節(jié),末端鈍而圓,顏色深。第一對腳的跗節(jié)前端表面有黑色鬃毛流蘇,稱性梳(sexcombs)。

雌性體型較大,腹部環(huán)紋7節(jié),末端尖,顏色淺,跗節(jié)前端無黑色鬃毛流蘇。圖2、一對雌雄果蠅(左雄,右雌)下一張另一對雌雄果蠅(左雌,右雄)1下一張另一對雌雄果蠅(左雌,右雄)2返回圖3、性梳性梳下一張下一張性梳(五)果蠅的培養(yǎng)果蠅在水果攤或果園里??梢姷剑⒉皇且运麨樯?,而是食生長在水果上的酵母菌,因此實驗室內(nèi)凡能發(fā)酵的基質(zhì),均可作為果蠅飼料。

目前本實驗室所用的果蠅培養(yǎng)基配方如下:A:蔗糖13克,瓊脂1.3克,加水100毫升,煮沸溶解。B:玉米粉17克,加水80毫升,混合均勻。將B慢慢倒入A中,并不停攪動混合,加熱成糊狀后,再加1.4克酵母粉,混合均勻,稍冷卻后加入1毫升丙酸,調(diào)勻后即可分裝到培養(yǎng)瓶中。A、培養(yǎng)基的制備返回除了以上的飼料外,常用的還有米粉飼料和香蕉飼料:1.米粉飼料的配制:瓊脂0.9—2.5克加入100毫升水中,加熱煮沸溶解;再加10克紅糖,待溶解后將8克米粉(或麩皮)倒入正在煮沸的瓊脂—紅糖溶液中去,不斷攪拌煮沸數(shù)分鐘,待成稀粥狀后即可分裝使用。2.香蕉飼料配制:將熟透的香蕉搗碎,制成香蕉漿(約50克)。將1.5克瓊脂加到48毫升的水中煮沸,溶解后拌入香蕉漿,再煮沸后即可分裝。

以上兩種飼料容易生霉菌,必要時需加少量防霉劑。返回培養(yǎng)果蠅的飼養(yǎng)瓶,常用的有牛奶瓶,大中型指管,用紗布包裹的棉花球作瓶塞(有條件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞)。飼養(yǎng)瓶先消毒,然后倒入飼料(2厘米厚),待冷卻后,用酒精棉擦瓶壁,然后滴入酵母菌液數(shù)滴,再插入消毒過的吸水紙,作為幼蟲化蛹時的干燥場所。B、培養(yǎng)容器返回C、原種培養(yǎng)在作為新的留種培養(yǎng)時,事先檢查一下果蠅有沒有混雜,以防原種丟失。親本的數(shù)目一般每瓶5—10對,移入新培養(yǎng)瓶時,須將瓶橫臥,然后將果蠅挑入,待果蠅清醒過來后,再把培養(yǎng)瓶豎起,以防果蠅粘在培養(yǎng)基上。原種每2-4周換一次培養(yǎng)基(按溫度而定),每一原種培養(yǎng)至少保留兩套。培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽要寫明名稱,培養(yǎng)日期等,作為原種培養(yǎng),可控制到10—15℃,培養(yǎng)時避免日光直射。返回(六)果蠅的性狀果蠅的性狀主要從以下四個方面進(jìn)行觀察:體色翅型眼剛毛每個方面都有不同的性狀:灰體黑體b(2)黑檀體e(3)黃體y(1)紅眼白眼w(1)棒眼B(1)長翅短翅m(1)卷翅Cy(2)殘翅vg(2)直剛毛卷剛毛sn(1)返回1、體色灰體果蠅下一張黑檀體果蠅下一張黃體果蠅返回2、眼色紅眼下一張白眼下一張棒眼返回3、翅型長翅下一張下一張短翅卷翅下一張下一張卷翅殘翅返回4、剛毛直剛毛(七)實驗室果蠅品系性狀觀察品系體色眼色翅型剛毛346182226認(rèn)真觀察實驗室果蠅品系的性狀,完成下表顯示答案返回(七)實驗室果蠅品系性狀觀察品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白短卷18灰紅長直22灰白長直26黑檀紅長直認(rèn)真觀察實驗室果蠅品系的性狀,完成下表(八)思考題1、如何準(zhǔn)確鑒定果蠅的雌雄個體?最主要特征是什么?2、果蠅的生活史分幾個階段?3、果蠅作為遺傳學(xué)模式材料的優(yōu)點有哪些?附:果蠅綜合大實驗雜交設(shè)計1、果蠅分離定律的實驗分析2、果蠅自由組合的實驗分析3、果蠅的伴性遺傳實驗分析4、果蠅的三點測驗實驗分析5、果蠅的連鎖與交換實驗分析利用實驗室保存的哪兩個果蠅品系進(jìn)行雜交,一次實驗即可驗證前述四個遺傳基本定律??思考體色翅型眼剛毛灰體黑體b(2)黑檀體e(3)黃體y(1)紅眼白眼w(1)棒眼B(1)長翅短翅m(1)卷翅Cy(2)殘翅vg(2)

直剛毛卷剛毛sn(1)品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白短卷18灰紅長直22灰白長直26黑檀紅長直品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白w(1)短m(1)卷sn(1)18灰紅長直22灰白長直26黑檀e(3)紅長直正交:6(♀)×26(♂)反交:26(♀)×6(♂)

設(shè)計果蠅雜交實驗(PPT及紙質(zhì))一、實驗?zāi)康亩?、實驗原理三、實驗材?/p>

1、果蠅材料;

2、實驗器具與藥品四、實驗步驟(技術(shù)路線)正交:6(♀)×26(♂)

反交:26(♀)×6(♂)

用箭頭短線逐步示出實驗流程,并注明每步驟所需的時間及注意事項。自行設(shè)計果蠅培養(yǎng)瓶標(biāo)簽。以8人為小組,提交PPT;紙質(zhì)設(shè)計報告每人一份。正交組講臺反交組正交組反交組五、實驗結(jié)果記錄表格參考實驗指導(dǎo)書,自行設(shè)計實驗記錄表格。六、預(yù)期的實驗結(jié)果及統(tǒng)計學(xué)分析方法

正交組:1、分離定律;2、自由組合定律;

3、伴性遺傳;4、三點測驗

反交組:1、分離定律;2、自由組合定律;

3、伴性遺傳;

自行設(shè)計卡方檢測表。七、實驗中可能存在的困難、問題及解決方法親本雌蠅為何一定要選用處女蠅?怎樣才能保證所選雌蠅為處女蠅?在進(jìn)行親本雜交或F1自交一定時間后為什么要釋放雜交親本或F1?反交組為何不能直接進(jìn)行三點測驗?如果

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