天然藥化黃酮類化合物

黃酮類化合物Flavonoids本章內(nèi)容檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與分類學(xué)習(xí)要求1.掌握黃酮類化合物的主要結(jié)構(gòu)類型，了解結(jié)構(gòu)之間的生物合成關(guān)系；2.掌握黃酮類化合物的理化性質(zhì)和顯色反應(yīng)；3.掌握黃酮類化合物的提取分離方法；4.掌握波譜法在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用，熟悉其色譜鑒定方法。概述5母核：9(8a)10(4a)黃酮類化合物概述經(jīng)典定義：基本母核為2-苯基色原酮的一類化合物現(xiàn)在定義：泛指兩個(gè)苯環(huán)（A與B環(huán)）通過三個(gè)碳原子相互連接而成的一系列化合物生源途徑：莽草酸和乙酸-丙二酸復(fù)合途徑6黃酮類化合物概述黃酮類化合物是一類重要的含氧雜環(huán)天然有機(jī)化合物。分布廣泛：高等植物中常見存在形式：苷元、苷活性多樣：抗氧化、心血管、保護(hù)肝臟、抗炎、抗癌、雌激素作用等生源：

由三個(gè)丙二酸單酰輔酶A和一個(gè)桂皮酰輔酶A生物合成而成.黃酮類化合物生物合成的基本途徑桂皮酰輔酶A丙二酰輔酶A8黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類a.中央三碳鏈的氧化程度b.B-環(huán)聯(lián)接位置（2-或3-位）c.三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀分類標(biāo)準(zhǔn)結(jié)構(gòu)分類黃酮類Flavone黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類異黃酮類高異黃酮查耳酮二氫查耳酮結(jié)構(gòu)分類黃烷-3，4-二醇類黃烷-3-醇類花色素橙酮11黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類木犀草素，抗菌作用黃芩苷，清熱解毒槲皮素：R=H蘆?。篟=蕓香糖最常見的黃酮醇類化合物

黃酮類flavones

黃酮醇類flavonols黃酮黃酮醇12黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類

二氫黃酮類

flavanones二氫黃酮醇類flavanonols橙皮苷Vpp樣作用

甘草素對(duì)潰瘍有抑制作用

水飛薊素保肝作用二氫黃酮二氫黃酮醇13黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類

異黃酮類

isoflavones二氫異黃酮類isoflavanones大豆異黃酮

魚藤酮農(nóng)業(yè)殺蟲劑異黃酮二氫異黃酮高異黃酮類homoisoflavonoids與異黃酮相比：C環(huán)與B環(huán)間多了1個(gè)CH2

查耳酮類chalcones紅花的顏色變化黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類

二氫查耳酮花色素類anthocyanidins矢車菊素：R1=OH,R2=H飛燕草素：R1=R2=OH天竺葵素：R1=R2=H錦葵花素：R1=R2=OCH316

黃烷醇類

黃烷-3-醇R=H黃烷-3,4-二醇R=OH兒茶素：抗癌活性麻黃寧A/B：抗癌活性苯駢色原酮類xanthones異芒果苷：止咳祛痰芒果葉和知母葉黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類17黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類

橙酮類auronesC環(huán)為含氧五元環(huán)較少見黃花波斯菊花：硫黃菊素雙黃酮類biflavonoids裸子植物：銀杏、卷柏18黃酮類化合物的存在形式黃酮苷元取代基：OH，OMe，Me，異戊烯基等黃酮苷氧苷和碳苷19黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類取代基：-OH,-OMe,-Me,以及各種糖等取代基取代位置規(guī)律取代基A環(huán)B環(huán)-OH,-OMe5,7位3’,4’位-Me,6,8位3’位20黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類天然黃酮類化合物多以苷類形式存在。由于糖

的種類、數(shù)量、聯(lián)接位置及聯(lián)接方式不同，組成各種各樣的黃酮苷。組成苷類的糖有：

單糖：D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara、

D-glucuronicacid

雙糖：槐糖（glcβ1-2glc),蕓香糖（rhaα1-6glc)等。

三糖：龍膽三糖（glcβ1-6glcβ1–2fru)

槐三糖（glcβ1-2glcβ1-2glc)黃酮苷第二節(jié)黃酮類化合物的理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)一、性狀1、苷元多呈晶形，苷類為無(wú)定形粉末；2、顏色：多為黃色，與結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系和助色團(tuán)（-OH、-OCH3等）的種類、數(shù)目及取代位置有關(guān)23黃酮類化合物的理化性質(zhì)顏色：

黃酮（醇）及其苷：呈黃色-灰黃色

查耳酮：黃-橙色

二氫黃酮（醇）：無(wú)色

異黃酮：微黃色

花色素可隨著pH值的變化顏色有所不同：

pH<7顯紅色；pH=8.5顯紫色；pH>8.5顯蘭色。性狀24黃酮類化合物的理化性質(zhì)

游離苷元：

二氫黃酮（醇）、黃烷（醇）有旋光性其余黃酮類化合物無(wú)旋光性。

苷類：

因?yàn)樘欠肿拥囊?，具有旋光性，且多為左旋。旋光?5黃酮類化合物的理化性質(zhì)苷元：

難溶或不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑。苷：

可溶于水、乙醇、甲醇中，難溶于苯和氯仿，連糖越多，水溶度越大

溶解性黃酮(醇),查爾酮：平面型分子二氫黃酮(醇)，異黃酮：非平面型分子花色素：離子，具鹽的通性水中溶解度增加26黃酮類化合物的理化性質(zhì)酸性：酚羥基可溶于堿水、吡啶、ＤＭＦ中酸性強(qiáng)弱取決于羥基數(shù)目和位置7、4’－二OH>7－或4’－OH>一般酚OH>5－OH>3－OH應(yīng)用:

提取、分離和鑒定中酸性27黃酮類化合物的理化性質(zhì)

來(lái)源：γ-吡喃酮環(huán)上的1-位氧原子未共用的電子對(duì)，顯微弱堿性，與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸生成yang鹽。堿性堿性黃酮類濃H2SO4/濃HCl鹽H2O分解黃酮類顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)黃酮類化合物的理化性質(zhì)29黃酮類化合物的理化性質(zhì)鹽酸鎂粉反應(yīng)含黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）（+）橙紅色-紫紅色查耳酮、橙酮、黃烷（醇）類（-）不顯色操作方法：1ml樣品+Mg粉+幾滴濃HCl花色素及部分橙酮、查耳酮在濃鹽酸中會(huì)變色，故需做對(duì)照

還原反應(yīng)HCl-Mg反應(yīng)30黃酮類化合物的理化性質(zhì)HCl-Zn反應(yīng)二氫黃酮醇、黃酮醇-3-O-糖苷（+）紅~紫色二氫黃酮醇-3-O-糖苷、黃酮醇（-）不顯色

四氫硼鈉（NaBH4）反應(yīng)二氫黃酮類化合物的專屬性還原劑（+）紫-紫紅色

還原反應(yīng)顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)黃酮類化合物的理化性質(zhì)金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)

反應(yīng)官能團(tuán)：3-OH，4-C=O

5-OH，4-C=O

鄰二酚羥基二氫黃酮、二氫黃酮醇———天藍(lán)色熒光其他黃酮類———黃色～橙黃～褐色

鋁鹽反應(yīng)——三氯化鋁反應(yīng)

與1%AlCl3反應(yīng)顯黃色或黃色加深，UV下熒光增強(qiáng)金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)

鎂鹽反應(yīng)——醋酸鎂反應(yīng)

鉛鹽反應(yīng)——醋酸鉛反應(yīng)與1%醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成黃～紅色沉淀醋酸鉛：鄰二酚羥基，或兼有3-OH，4-C=O5-OH，4-C=O堿式醋酸鉛：一般酚羥基類

金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)

鋯鹽反應(yīng)——鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)

3-OH,4-C=O

5-OH,4-C=O+2%ZrOCl2黃色H+

穩(wěn)定，不退色

不穩(wěn)定分解，顯著褪色

氯化鍶反應(yīng)金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)

三氯化鐵反應(yīng)

鄰二酚羥基SrCl2綠色～棕色～黑色沉淀OH-酚羥基FeCl3在黃酮類化合物中含有氫鍵締合的酚羥基時(shí)顏色才明顯綠色～墨綠～黑色沉淀顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)

硼酸絡(luò)合反應(yīng)硼酸顯色反應(yīng)H+H3BO4亮黃色5-OH-黃酮6’-OH-查兒酮樣品

硼酸草酸枸櫞酸黃色并有綠色熒光黃色，無(wú)熒光丙酮顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)（二）金屬鹽類試劑絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑顯色反應(yīng)黃酮類日光下顯黃色或黃色加深UV下顯熒光或熒光增強(qiáng)黃酮醇類二氫黃酮類OH-顯橙～黃色OH-NaOH引起的色變不退NH4OH引起的色變退去空氣OH-呈黃色空氣棕色用化學(xué)方法鑒別A-G小結(jié)1——概述概念：C6-C3-C6、2-苯基色原酮結(jié)構(gòu)類型：劃分依據(jù)：C環(huán)氧化程度、是否開環(huán)、B環(huán)連接位置重要類型：黃（醇）、二氫黃（醇）、（二氫）異黃查爾酮、橙酮生物合成：B環(huán)的來(lái)源：桂皮酸

A環(huán)的來(lái)源：丙二酸生物活性：主要活性及代表物小結(jié)2——理化性質(zhì)一、性狀：顏色：多黃色影響顏色深淺的主要因素：交叉共軛體系助色團(tuán)及其位置。物態(tài)：多結(jié)晶、無(wú)定型粉末二、溶解性：苷與苷元的區(qū)別

影響苷元水溶性的因素：三、酸性：來(lái)源影響因素及規(guī)律：7,4'>7/4'>一般>5四、堿性：1-O孤對(duì)電子小結(jié)2——理化性質(zhì)三、顯色反應(yīng)：還原反應(yīng)：Mg-HCl反應(yīng)：（二氫）黃（醇）——

橙紅-紫紅-紫-藍(lán)

NaBH4反應(yīng)：二氫黃————————

紅-紫金屬鹽絡(luò)合反應(yīng)：AlCl3反應(yīng)：黃色熒光

Mg(Ac)2反應(yīng)：二氫黃酮（醇）——

天藍(lán)色熒光

Pb(Ac)2反應(yīng)：中性：鄰二酚羥——

黃-紅色沉淀堿式：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)：3-OH,4C=O黃色不退

5-OH,4C=O黃色退去氨性SrCl2反應(yīng)：鄰二酚羥——

綠-黑色

FeCl3反應(yīng)：酚羥基——綠-黑色小結(jié)2——理化性質(zhì)三、顯色反應(yīng)：硼酸絡(luò)合反應(yīng)：5-OH黃酮、2-OH查爾酮——

亮黃色堿性試劑顯色反應(yīng)：黃酮類——

日光下顏色加深，紫外下熒光增強(qiáng)二氫黃酮——

橙-黃色黃酮醇——

黃色，通空氣變棕色第三節(jié)黃酮類化合物的提取與分離47黃酮類化合物的提取和分離原理：黃酮類化合物的溶解性和酸性

相似相溶與酸堿理論提?。很赵簶O性小的溶劑，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取苷及極性大的苷元：

用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加熱提取極性稍大的甙元一般指：羥基黃酮、雙黃酮、橙酮、查爾酮多糖苷類：一般用沸水提取

提取48黃酮類化合物的提取和分離溶劑萃取法（系統(tǒng)分離法）堿提酸沉法炭粉吸附法

粗分49黃酮類化合物的提取和分離藥材水或醇-水，加熱提取提取液濃縮，加3-4倍醇醇水液沉淀（水雜）濃縮，回收醇，加水水液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取石油醚層氯仿層乙酸乙酯層正丁醇層水層葉綠素等脂溶性成分黃酮苷元大極性苷元小極性的苷黃酮苷多糖蛋白質(zhì)原理：利用黃酮類與其它雜質(zhì)極性不同，選不同溶劑進(jìn)行萃取溶劑萃取法50黃酮類化合物的提取和分離原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出堿：常用Ca(OH)2，即石灰乳(石灰水)優(yōu)點(diǎn)

A：使含酚羥基化合物成鹽溶解

B：使含羧基雜質(zhì)（果膠、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等）形成沉淀注意

a：提取時(shí)，堿液濃度不宜過高。

b：加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過強(qiáng)。應(yīng)用：蘆丁和槲皮素的提取、分離和鑒定堿提酸沉法5152黃酮類化合物的提取和分離原理：活性炭吸附黃酮苷類化合物用途：主要用于含量較高的黃酮苷類的精制操作：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭，攪拌，靜置，定性檢查上清液無(wú)黃酮反應(yīng)時(shí)為止。過濾，收集活性炭，依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、

15%酚/醇溶劑進(jìn)行梯度洗脫，對(duì)各部分洗脫液進(jìn)行定性檢查。大部分黃酮苷類可以用7%酚/水洗下?；钚蕴课椒?3黃酮類化合物的提取和分離硅膠是一種高活性吸附材料，其化學(xué)分子式為mSiO2·nH2O

應(yīng)用范圍：主要分離小極性和中等極性的化合物，應(yīng)用最為廣泛。異黃酮、二氫黃酮（醇）、高度甲基化（乙?；┑狞S酮及黃酮醇多羥基黃酮、黃酮醇及其苷類：硅膠加水去活化吸附規(guī)律：

極性大吸附能力強(qiáng)eg：

A苷元B二糖苷C單糖苷

Rf：A>C>B硅膠柱色譜54黃酮類化合物的提取和分離原理：氫鍵吸附（作用）洗脫規(guī)律：（先—后）母核上酚羥基增加，洗脫順序遞減酚羥基數(shù)目相同時(shí)，有締合羥基>無(wú)締合羥基苷元相同：三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元不同類型黃酮類化合物的洗脫先后順序?yàn)椋?/p>

異黃酮＞二氫黃酮醇＞黃酮＞黃酮醇。分子中芳香程度高、共軛雙鍵多，則聚酰胺對(duì)其的吸附力強(qiáng)，故難于洗脫。應(yīng)用范圍：適合各種類型的黃酮類化合物，包括苷、苷元、查耳酮及二氫黃酮聚酰胺柱色譜55黃酮類化合物的提取和分離常用型號(hào)：Sephadex-G和Sephadex-LH20原理：吸附作用和分子篩對(duì)游離黃酮，主要是吸附作用,吸附程度取決于游離酚羥基的數(shù)目，苷元的羥基數(shù)目越多，越難洗脫。對(duì)黃酮苷，主要是分子篩原理,洗脫時(shí)按分子量由大到小先后洗脫下來(lái)。常用洗脫劑：堿性水溶液（0.1mol/LNH4OH），鹽水溶液(0.05mol/LNaCl)

醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。其它溶劑：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝膠會(huì)膨脹，體積變大)。葡聚糖凝膠柱色譜56黃酮類化合物的提取和分離原理：黃酮類化合物具有酸性、且不同數(shù)目和不同位置的酚羥基的酸性強(qiáng)弱不同適用范圍：適用于分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元酸性：7,4′-OH＞7-或4′-OH

＞一般酚OH＞5-OH溶于5%NaHCO3溶于5%NaCO3溶于不同濃度NaOH梯度pH萃取法57黃酮類化合物的提取和分離乙醚液（脂雜）乙醚液乙醚液乙醚液乙醚液堿液(3或5-OH黃酮)堿液(一般酚OH黃酮)堿液(7,4’-二OH黃酮)堿液(7或4’-OH黃酮)5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH梯度pH萃取法58黃酮類化合物的提取和分離原理：利用分子中某些特定官能團(tuán)性質(zhì)進(jìn)行分離具有鄰二酚羥基的成分，用醋酸鉛沉淀不具有鄰二酚羥基的成分，用堿式醋酸鉛沉淀

具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物還可以與硼酸反應(yīng)形成溶于水的硼酸絡(luò)合物，可以與不具有鄰二酚羥基的其它黃酮類化合物分離金屬鹽絡(luò)合法提取分離方法實(shí)例1.黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉分別加10倍、8倍量沸水煎煮兩次，每次1小時(shí)，過濾藥渣濾液加鹽酸調(diào)pH1~2,80℃保溫30min靜置，離心沉淀濾液沉淀依次用水、50%EtOH洗滌95%EtOH重結(jié)晶黃芩苷2.蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例槐花米粗粉加6倍量水和適量的硼砂，煮沸邊攪拌邊加入石灰乳至pH8~9，微沸趁熱抽濾藥渣濾液在60~70℃條件下，加濃鹽酸調(diào)至pH5，靜置抽濾濾液沉淀（蘆丁粗品）第四節(jié)黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定色譜法紫外及可見光譜氫核磁共振譜碳核磁共振譜質(zhì)譜63黃酮類化合物的檢識(shí)顏色：多呈黃色母核檢識(shí)：鹽酸-鎂粉反應(yīng)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇四氫硼鈉反應(yīng)二氫黃酮（醇）類取代基團(tuán)檢識(shí)：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)

3-OH、5-OH黃酮鑒別氨性氯化鍶反應(yīng)鄰二酚羥基色譜檢識(shí):

硅膠TLC聚酰胺TLC紙層析（PC）理化檢識(shí)64黃酮類化合物的檢識(shí)和結(jié)構(gòu)鑒定硅膠TLC：

用于分析與鑒定弱極性黃酮類化合物。展開劑：甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1)，苯-甲醇，氯仿-甲醇等。聚酰胺TLC：

適合于含游離酚OH的黃酮及其苷類的分析。

聚酰胺對(duì)黃酮類化合物吸附能力強(qiáng)，大多數(shù)展開劑中含有醇、酸或水。紙色譜（PC）：適用于各種黃酮類化合物及其苷類的分析色譜法雙向紙層析第一向：醇性溶劑展開，例如BAW系統(tǒng)，化合物極性大，吸附強(qiáng)。第二向：水類溶劑展開，例如2-6%醋酸水，化合物極性大，吸附弱。66黃酮類化合物的檢識(shí)和結(jié)構(gòu)鑒定層析檢查方法：

①觀察熒光,用紫外光燈照射看到有色斑點(diǎn)，NH3處理

產(chǎn)生明顯的色變。

②用2%AlCl3甲醇液噴霧,UV燈下呈亮黃色熒光斑點(diǎn)。紙色譜二、紫外及可見光譜法帶Ⅱ（240-280

nm）由苯甲酰基系統(tǒng)引起反應(yīng)A環(huán)取代情況帶Ⅰ（300-400nm）由桂皮?；到y(tǒng)引起反應(yīng)B環(huán)取代情況（一）在甲醇溶液中的紫外光譜1、黃酮、黃酮醇：相同點(diǎn)：帶I與帶II的吸收峰強(qiáng)度均較大；不同點(diǎn)：帶I位置不同黃酮帶I（304~350nm）黃酮醇帶I（358~385nm）a.b.木犀草素和槲皮素在甲醇溶液中的UV光譜數(shù)據(jù)木犀草素MeOH253（帶II）

349（帶I）槲皮素MeOH256（帶II）

371（帶I）2、異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇：相同點(diǎn)：具有強(qiáng)的帶II吸收，帶I很弱，常為肩峰。不同點(diǎn)：異黃酮帶II（245~270nm）二氫黃酮（醇）帶II（270~295nm）（一）在甲醇溶液中的紫外光譜245-270nm270-295nm異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的UV光譜7-羥基異黃酮4`，7-二羥基二氫黃酮200300400500

總結(jié)二氫黃酮黃酮醇黃酮查耳酮橙酮異黃酮200300400(nm)3、查耳酮及橙酮類：相同點(diǎn)：帶Ⅰ很強(qiáng)，為主峰；帶Ⅱ較弱，為次強(qiáng)峰。不同點(diǎn)：橙酮常顯現(xiàn)3～4個(gè)吸收峰，（一）在甲醇溶液中的紫外光譜查耳酮和橙酮在甲醇溶液中的UV光譜2，3，4—三羥基查耳酮3`，4`--二羥基橙酮200300400500340~390nm370~430nm75黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定一般步驟：

1待測(cè)樣品在甲醇中的UV光譜

2待測(cè)樣品在甲醇中加入各種診斷試劑后的UV光譜

診斷試劑：NaOCH3,NaOAc,NaOAc/H3BO3,AlCl3,AlCl3/HCl3苷類水解后的UV光譜。UV76診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用常用的診斷試劑：甲醇鈉(NaOCH3)

醋酸鈉(NaOCOCH3)

醋酸鈉/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3)

三氯化鋁(AlCl3)

三氯化鋁/鹽酸(AlCl3/HCl)77診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用NaOMe：確定4’-OH

堿性強(qiáng)，黃酮類化合物所有酚OH，均可在NaOMe中成鈉鹽，引起

紅移。78診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用2.NaOAc：確定7-OH

未熔融:含有微量的HOAc,堿性較弱，只能使黃酮母核上酸性較強(qiáng)的酚OH(7-OH)解離而使UV譜紅移。

熔融：堿性,表現(xiàn)出與NaOMe類似的效果。79診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用3.NaOAc/H3BO3：確定鄰二酚OH。

在醋酸鈉堿性下，鄰二酚OH與硼酸絡(luò)合，引起峰帶紅移。80診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用4.AlCl35.AlCl3/HCl：

分子中有3-OH，5-OH，鄰二酚OH時(shí)，可與Al3+絡(luò)合，引起吸收峰紅移。鋁絡(luò)合物穩(wěn)定性：

黃酮醇3-OH＞黃酮5-OH＞二氫黃酮5-OH＞鄰二酚OH81診斷試劑在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用黃酮或黃酮醇AlCl3/HCl與MeOH中光譜比較

相同時(shí)，示無(wú)3-OH或5-OH不同時(shí)，只有5-OH，無(wú)3-OH時(shí)，帶Ⅰ紅移35-55nm

同時(shí)有5-OH，3-OH時(shí)，帶Ⅰ紅移50-60nm

只有3-OH，帶Ⅰ紅移60nmb.AlCl3/HCl與AlCl3中光譜比較相同時(shí)，示無(wú)鄰二酚羥基不同時(shí)，B環(huán)有鄰二酚羥基，帶Ⅰ紅移35-55nm

A，B環(huán)有鄰二酚羥基，帶Ⅰ紅移50-60nm82診斷試劑對(duì)黃酮類化合物UV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系診斷試劑帶II帶I歸屬NaOCH3紅移40-60nm,強(qiáng)度不降示有4’-OH紅移50-60nm,強(qiáng)度下降示有3-OH,

但無(wú)4’-OH吸收譜隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰退示有對(duì)堿敏感的取代方式NaOAc（未熔融）紅移5-20nm在長(zhǎng)波一側(cè)有明顯肩峰示有7-OH示有4’-OH，但無(wú)3或7-OHNaOAc（熔融）紅移40-65nm強(qiáng)度下降示有4’-OH吸收譜隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰退示有對(duì)堿敏感的取代方式83診斷試劑帶II帶I歸屬NaOAc/H3BO3紅移5-10nm示A環(huán)有鄰二酚羥基，但不包括5,6-二羥基紅移12-30nm示B環(huán)有鄰二酚羥基AlCl3及AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖

=AlCl3譜圖

示結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖

≠AlCl3譜圖

示結(jié)構(gòu)中可能有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移30-40nm示B環(huán)有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移50-65nm示A、B環(huán)上均有鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖

=CH3OH譜圖

示無(wú)3-或5-OHAlCl3/HCl譜圖

≠CH3OH譜圖

示可能有3-或5-OH帶I紅移35-55nm示只有5-OH帶I紅移60nm示只有3-OH帶I紅移50-60nm示可能同時(shí)有3-和5-OH帶I紅移17-20nm除5-OH外，還有6-含氧取代診斷試劑對(duì)黃酮類化合物UV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系三、黃酮類化合物的1HNMR譜特征B環(huán)質(zhì)子信號(hào)C環(huán)質(zhì)子信號(hào)A環(huán)質(zhì)子信號(hào)85氫核磁共振基礎(chǔ)知識(shí)10345678910111213H3C-C0.9Ar-O-CH33.86—8.510.5—124.6—5.99—10CR2=CH-RRCOOHRCHO常用溶劑的質(zhì)子的化學(xué)位移值特征質(zhì)子化學(xué)位移22.186氫核磁共振在黃酮類結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用常用溶劑:CDCl3、DMSO-d6、C5H5N;當(dāng)用DMSO-d6

時(shí):

5-OH:δ12.40;7-OH:δ10.93;3-OH:δ9.70。加入D2O交換后，OH信號(hào)消失。87

H-3常作為一個(gè)尖銳的單峰信號(hào)出現(xiàn)在δ6.3處，常會(huì)與H-6或H-8相混，應(yīng)注意區(qū)別H-2常作為單峰出現(xiàn)在較低場(chǎng)區(qū)

δ7.6-7.8(1H,s,CDCl3)

δ8.5-8.7(1H,s,DMSO-d6)C環(huán)黃酮及異黃酮黃酮類C環(huán)1H-NMR譜88黃酮類C環(huán)1HNMR實(shí)例奧洛波爾異黃酮89黃酮類C環(huán)1HNMRH-2δ5.2(1H,dd,Jtrans=11.5,Jcis=5.0Hz)H-3δ2.8(1H,dd,J=17.0Hz,J=11.5Hz)(1H,dd,J=17.0Hz,J=5.0Hz)二氫黃酮90黃酮類C環(huán)1HNMR二氫黃酮醇二氫黃酮醇3-O糖苷H-24.8-5.0,d,J=11Hz5.0-5.6,d,J=11HzH-34.1-4.3,d,J=11Hz4.3-4.6,d,J=11Hz二氫黃酮醇91黃酮類C環(huán)1HNMRH-α

6.7-7.4(1H,d,J=17.0Hz)H-β7.0-7.7(1H,d,J=17.0Hz)芐氫

6.5-6.7(1H,s,CDCl3)6.4-6.9(1H,s,DMSO-d6)查耳酮及橙酮92黃酮類化合物1H-NMR譜6-Hδ5.7－6.9(d,J=2.5Hz)8-H

δ5.7－6.9(d,J=2.5Hz)6-H信號(hào)總比8-H高場(chǎng)H-6H-8黃酮、黃酮醇、異黃酮6.0-6.2,d6.3-6.5,d上述化合物7-O-糖苷6.2-6.4,d6.5-6.9,d二氫黃酮、二氫黃酮醇5.7-6.0,d5.9-6.1,d上述化合物7-O-糖苷5.9-6.1,d6.1-6.4,d5,7-二取代黃酮A環(huán)935-H7.9－8.2(d,J=9.0Hz)6-Hδ6.7－7.1(dd,J=9.0,2.5Hz)8-H

δ6.7－7.0(d,J=2.5Hz)黃酮、黃酮醇、異黃酮二氫黃酮、二氫黃酮醇H-57.9-8.2,d7.7-7.9,dH-66.7-7.1,dd6.4-6.5,ddH-86.7-7.0,d6.3-6.4,d7-取代黃酮A環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜H-5：較低場(chǎng)

（受羰基的負(fù)屏蔽效應(yīng))944’-取代黃酮B環(huán)黃酮類化合物1H-NMR譜H-2’,6’:7.1-8.1，d,J=8HzH-3’,5’:6.5-7.1，d,J=8HzC環(huán)對(duì)H-2’,6’的去屏蔽效應(yīng)95H-2’H-6’黃酮類3’,4’-OH及3’-OH,4’-OMe7.2-7.3,d7.3-7.5,dd黃酮醇類3’,4’-OH及3’-OH,4’-OMe7.5-7.7,d7.6-7.9,dd黃酮醇類3’-OMe,4’-OH7.6-7.8,d7.4-7.6,dd黃酮醇類3’,4’-OH,3-O-糖7.2-7.5,d7.3-7.7,dd對(duì)于黃酮與黃酮醇H-5’作為一個(gè)二重峰(d,J=8.5Hz)出現(xiàn)在6.7-7.1處H-2’(d,J=2.5Hz)出現(xiàn)在7.2及H-6’(dd,J=8.5,2.5Hz)