第5章分子發(fā)光分析法

第五章分子發(fā)光分析法MolecularLuminescence第一節(jié)熒光分析法第二節(jié)磷光分析法

第三節(jié)化學發(fā)光分析

分子發(fā)光分析法

基態(tài)分子吸收了一定能量后，躍遷到激發(fā)態(tài)，當激發(fā)態(tài)分子以輻射躍遷形式將其能量釋放返回基態(tài)時，便產生分子發(fā)光。依據激發(fā)的模式不同，分子發(fā)光分為光致發(fā)光、熱致發(fā)光、場致發(fā)光和化學發(fā)光。光致發(fā)光按激發(fā)態(tài)的類型不同又分為熒光和磷光兩種。本章主要討論

分子熒光(MolecularFluorescence)、

分子磷光(MolecularPhosphorescence)

化學發(fā)光分析法(Chemiluminescence)第一節(jié)熒光分析法一、概述

分子熒光分析法是根據物質的分子熒光光譜進行定性，以熒光強度進行定量的一種分析方法。

熒光分析法的最大優(yōu)點是靈敏度高，選擇性也比較好，檢測限通常比分光光度法低2-4個數量級。雖然應用不如分光光度法廣泛，但在微量、痕量分析及生命科學研究等中具有重要意義。二、基本原理（一）分子熒光的產生

在單重激發(fā)態(tài)中，兩個電子自旋配對，單重態(tài)分子具有抗磁性，其激發(fā)態(tài)的平均壽命大約為10-8s，而三重態(tài)分子具有順磁性，其激發(fā)態(tài)的平均壽命為10-4~1s以上（通常用S和T分別表示單重態(tài)和三重態(tài)）。

處于分子基態(tài)單重態(tài)中的電子對，其自旋方向相反，當其中一個電子被激發(fā)時，通常躍遷至第一激發(fā)態(tài)單重態(tài)軌道上，也可能躍遷至能級更高的單重態(tài)上。這種躍遷是符合光譜選律的，如果躍遷至第一激發(fā)三重態(tài)軌道上，則屬于禁阻躍遷。單重態(tài)與三重態(tài)的區(qū)別在于電子自旋方向不同，激發(fā)三重態(tài)具有較低能級。分子能級=電子能級(Ee)+振動能級(Ev)+轉動能級(Er)。二、基本原理（一）分子熒光的產生S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄躍內轉化振動弛豫能量l2l1l

3

外轉換l

3T2內轉化振動弛豫分子熒光、分子磷光是如何產生的？振動弛豫：指

在同一電子能級中，電子由高振動能級轉至低振動能級，而將多余的能量以熱的形式發(fā)出。發(fā)生振動弛豫的時間為10-12s數量級。內轉化:

相同多重態(tài)的兩個電子態(tài)之間的非輻射躍遷。當兩個電子能級非?？拷灾疗湔駝幽芗売兄丿B時，常發(fā)生電子由高能級以無輻射躍遷方式轉移至低能級。處于高激發(fā)單重態(tài)的電子，通過內轉移及振動弛豫，均躍回到第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級。體系間竄躍：指不同多重態(tài)間的無輻射躍遷，例如S1→T1就是一種系間竄躍。通常，發(fā)生系間竄躍時，電子由S1的較低振動能級轉移至T1的較高振動能級處。外轉移:指激發(fā)分子與溶劑分子或其它溶質分子的相互作用及能量轉移，使熒光或磷光強度減弱甚至消失。這一現象稱為“熄滅”或“猝滅”。S0S1S2T1吸光1吸光2熒光3熒光能級圖熒光熒光發(fā)射

處于第一激發(fā)單重態(tài)最低振動能級中的電子躍回至基態(tài)各振動能級時，將得到最大波長為λ3的熒光。注意:激發(fā)態(tài)中存在振動馳豫和內轉化躍遷。很明顯，熒光的光子能量比其分子受激發(fā)所吸收的光子能量低，因此熒光波長λ3>激發(fā)波長λ2或λ1，而且不論電子開始被激發(fā)至什么高能級，最終將只發(fā)射出波長為λ3的熒光。熒光的產生在10-6-10-9s內完成。磷光發(fā)射處于第一激發(fā)單重態(tài)最低振動能層的電子，經體系間竄躍躍遷到第一激發(fā)三重態(tài)，并經振動弛豫至最低振動能層，然后躍遷回到基態(tài)各振動能級,發(fā)射波長為′3的磷光。磷光波長′3＞熒光波長λ3＞激發(fā)波長λ1或λ2。磷光的產生在10-3-10s內完成。S0吸光1吸光2S2S1T1磷光′3熒光3磷光熒光在光照停止后，仍可持續(xù)一段時間。磷光與熒光的區(qū)別:兩長一低：波長、壽命、強度

電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài)，返回基態(tài)時，通過輻射躍遷(發(fā)光)和無輻射躍遷等方式失去能量；傳遞途徑輻射躍遷熒光磷光內轉化外轉化系間竄躍振動弛預無輻射躍遷

激發(fā)態(tài)停留時間短、返回速度快的途徑，發(fā)生的幾率大，發(fā)光強度相對大；熒光：10-7～10-9s,第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級→基態(tài)；磷光：10-4～10s；第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級→基態(tài)；各種躍遷方式發(fā)生的可能性及程度，與熒光物質本身的結構及激發(fā)時的物理和化學環(huán)境等因素有關。（二）熒光效率及其影響因素

分子產生熒光必須具備兩個條件:①分子必須具有與所照射的輻射頻率相適應的結構，才能吸收激發(fā)光；②吸收了與其本身特征頻率相同的能量之后，必須具有一定的熒光量子產率（即熒光效率）。1、熒光效率

熒光效率也叫熒光量子產率或量子效率，它表示物質發(fā)射熒光的能力，通常用下式表示

f

=發(fā)射熒光的分子數/激發(fā)態(tài)分子的總數

熒光的量子產率，將與上述每一個過程（熒光發(fā)射、內轉化，系間竄躍等）的速率常數有關。若用數學式來表達這些關系，得到

f=

kf

/（kf+ki）

式中kf為熒光發(fā)射過程的速率常數，ki為其它有關過程的速率常數的總和。

凡是能使kf

值升高而使其它ki值降低的因素，都可增強熒光。一般來說，kf主要取決于化學結構，而ki則主要取決于化學環(huán)境，同時也與化學結構有關。f在0.1—1之間有應用價值2、熒光與分子結構的關系躍遷是產生熒光的主要躍遷類型。實驗證明，對于大多數熒光物質，首先經歷或n激發(fā)，然后經過振動弛豫或其他無輻射躍遷，再發(fā)生或n躍遷而得到熒光。在這兩種躍遷類型中，躍遷常能發(fā)出較強的熒光（較大的量子產率,躍遷是產生熒光的主要躍遷類型。共軛效應:

增加體系的共軛度，熒光效率一般也將增大。1)

分子中必須具有大的共軛鍵結構。如:芳香族化合物有熒光。單個雜環(huán)芳烴無熒光，而其與苯環(huán)共軛就有熒光。

非熒光性:

熒光性:

吡啶呋喃噻吩吡咯喹啉吲哚2)具有剛性平面性結構的分子熒光量子產率高?？山档头肿诱駝雍团鲎踩セ畹目赡苄?，故具有很強的熒光。絡合劑與金屬絡合后，剛性增強，熒光也增強:3)取代基的影響芳環(huán)上有供（給）電基，使熒光增強。如烷基、-OH、-OCH3、-NH2、-CN等使熒光強度增加。

吸電子取代基使熒光強度降低。如-COOH、RCO-、-NO2取代，猝滅熒光。

鹵素原子取代

重原子效應的影響，熒光減弱，磷光增強。鹵素取代基隨原子序數的增加而熒光降低。這可能是由所謂“重原子效應”使S1→T1系間跨越速率增加所致。3、環(huán)境因素對熒光的影響①溶劑對熒光強度的影響

。

由于溶質分子與溶劑分子間的作用，使同一種熒光物質在不同的溶劑中的熒光光譜可能會有顯著不同。一般情況，增大溶劑的極性，將使n躍遷的能量增大，躍遷的能量減小，而導致熒光增強，熒光峰紅移。

熒光強度對溫度變化敏感，溫度增加，外轉換去活的幾率增加。溫度上升使熒光強度下降。②溫度對熒光強度的影響④表面活性劑和溶液中溶解氧的影響。

溶液中含有表面活性劑，減小非輻射躍遷的概率，提高熒光效率。溶液中有溶解的氧，使激發(fā)單重態(tài)分子向三重態(tài)的體系間竄躍速率加大，熒光效率降低。③溶液pH值對熒光強度的影響

帶有酸性或堿性官能團的大多數芳香族化合物的熒光與溶液的pH值有關。（三）熒光強度與溶液濃度的關系

熒光強度If正比于吸收的輻射強度Ia與熒光效率f

。

If=f

Ia

式中f為熒光量子效率，又根據Beer定律

Ia=I0-It=I0(1-10-A)

I0和It分別是入射光強度和透射光強度。代入上式得

If=f

I0(1-10-A)=fI0(1-e–2.3A)在濃度很低(A小于0.05)時整理得:

If=2.3f

I0

A=2.3f

I0bc泰勒級數展開當入射光強度I0

和其他條件一定時，上式為:

If=K

c

即熒光強度與熒光物質的濃度成正比，但這種線性關系只有在極稀的溶液中，當lc0.05時才成立。對于較濃溶液，由于猝滅現象等原因，使熒光強度和濃度不呈線性關系。圖5－2熒光強度與溶液濃度的關系標準曲線法：

配制一系列標準濃度試樣測定熒光強度，繪制標準曲線，再在相同條件下測量未知試樣的熒光強度，在標準曲線上求出濃度；熒光猝滅

熒光物質分子與溶劑分子或其它溶質分子的相互作用引起熒光強度降低的現象稱為熒光猝滅。能引起熒光強度降低的物質稱為猝滅劑。

導致熒光猝滅的主要類型:1.產生“自吸收”

一部分熒光發(fā)射被自身吸收，產生“自吸收”現象而降低了溶液的熒光強度。2.碰撞猝滅

處于激發(fā)單重態(tài)的熒光分子與猝滅劑分子相碰撞，使激發(fā)單重態(tài)的熒光分子以無輻射躍遷的方式回到基態(tài)，產生猝滅作用。與溶液濃度有關，濃度較大易發(fā)生熒光猝滅（四）熒光的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜

1.激發(fā)光譜:

熒光為光致發(fā)光，因此必須選擇合適的激發(fā)光波長，可根據它們的激發(fā)光譜曲線來確定。繪制激發(fā)光譜曲線時，固定測量波長為熒光最大發(fā)射波長，然后改變激發(fā)波長，根據所測得的熒光強度與激發(fā)光波長的關系，即可繪制激發(fā)光譜曲線。

如果固定激發(fā)光波長為其最大激發(fā)波長，然后測定不同的波長時所發(fā)射的熒光或磷光強度，即可繪制熒光或磷光光譜曲線。

即熒光發(fā)射光譜或磷光光譜。

2.發(fā)射光譜

三、熒光分析儀器用于測量熒光的儀器由激發(fā)光源、樣品池、用于選擇激發(fā)光波長和熒光波長的單色器以及檢測器和顯示系統五部分組成。特殊點：有兩個單色器，光源與檢測器通常成直角。（2）樣品池熒光用的樣品池須用低熒光的材料制成，通常用石英，形狀以方形和長方形為宜。（3）單色器兩個單色器(光柵)（4）檢測器由光電管和光電倍增管作檢測器，并與激發(fā)光成直角。（1）激發(fā)光源激發(fā)光源一般要求比吸收測量中的光源有更大的發(fā)射強度，因此，熒光分光光度計通常的光源是氙燈、高壓汞燈、染料激光器(可見與紫外區(qū))

與分光光度計的主要差別①垂直測量方式,消除透射光影響②兩個單色器，激發(fā)和發(fā)射，常用光柵光源：高發(fā)射強度。常用氙燈。高靈敏度原因：測量I非A，提高激發(fā)光強度，現代技術測弱光信號㈠、無機物的分析無機離子本身能發(fā)熒光的很少，但很多能與一些有機化合物形成熒光物質進行分析；目前能進行熒光分析的元素已近70種，較常采用熒光法測定的元素有鈹、鋁、硼、鎵、硒、鎂、鋅、鎘等。⑴、能同金屬離子形成熒光絡合物的有機試劑絕大多數是芳香族化合物。⑵、熒光分析中常用的另一類絡合物是三元離子締合物。⑶、熒光猝滅法也是常用的方法。四、熒光分析法的應用㈡、有機化合物的分析⑴、脂肪族有機化合物的分子結構較為簡單,本身能發(fā)生熒光的很少,一般需要與某些試劑反應后才能進行熒光分析,如丙三醇與苯胺在濃硫酸介質中反應生成發(fā)射藍色熒光的喹啉，據此可以測定0.1~2μg?mL?1的丙三醇.⑵、芳香族化合物因具有共軛的不飽和體系,多數能發(fā)生熒光,可直接用熒光法測定。⑶、在生化分析等領域，如維生素等可以用熒光法分析維生素B2的測定:

維生素B2（核黃素）在430~440nm藍光照射下會發(fā)出綠色熒光，λem為535nm。核黃素

黃光素第二節(jié)磷光分析法一、概述磷光是分子從亞穩(wěn)態(tài)的三重態(tài)躍遷至基態(tài)時產生的輻射。磷光在藥物分析、有機分析等方面有重要的應用。二、基本原理（一）磷光的強度IP=2.3P

I0bc=Kc在室溫條件下，溶劑分子的劇烈運動會與激發(fā)三重態(tài)的分子碰撞而導致失活，磷光很難產生，通常應在低溫下測量磷光。低溫磷光分析中，液氮是最常用的合適的冷卻劑。在低溫（77K）下，形成透明的剛性玻璃體，某些物質有強烈的磷光。(二）溫度對磷光強度的影響

（三）重原子效應使用含有重原子溶劑或在磷光物質中引入重原子取代基(當分子中引入重原子取代基，例如，當芳烴分子中引入雜原子或重原子取代基時)，都可以提高磷光物質的磷光強度，這種效應稱為重原子效應。前者稱為外部重原子效應。后者稱為內部重原子效應。重原子效應的機理是，重原子的高核電荷使得磷光分子的電子能級交錯，容易引進或增強磷光分子的自旋軌道偶合，從而使S1→T1的體系間竄躍概率增大，有利于增大磷光效率。（四）室溫磷光由于低溫磷光需要低溫實驗裝置，溶劑選擇的限制等因素，從而發(fā)展了多種室溫磷光法（RTP）。（1）固體基質室溫磷光法（SS-RTP）

此法基于測量室溫下吸附于固體基質上的有機化合物所發(fā)射的磷光。（2）膠束增穩(wěn)的溶液室溫磷光法（MS-RTP）

三、磷光分析儀磷光分析儀與熒光分析儀結構相似，也是由光源、激發(fā)單色器，液槽、發(fā)射單色器、檢測器和放大顯示裝置所組成。在熒光分光光度計上配上磷光配件后，即可用于磷光測定。1、將樣品放在盛有液氮的石英杜瓦瓶內，即可用于低溫磷光測定。2、磷光鏡的機械切光裝置。四、應用磷光分析主要用于測定有機化合物，如石油產品、多環(huán)芳烴、農藥、藥物等方面。它與熒光法互相補充，已成為痕量有機物分析的重要手段。第三節(jié)化學發(fā)光分析一、概述某些物質在進行化學反應時，由于吸收了反應時產生的化學能，而使反應產物分子激發(fā)至激發(fā)態(tài)，受激分子由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時，便發(fā)出一定波長的光。這種吸收化學能使分子發(fā)光的過程稱為化學發(fā)光。利用化學發(fā)光反應而建立起來的分析方法稱為化學發(fā)光分析法?；瘜W發(fā)光也發(fā)生于生命體系，這種發(fā)光稱為生物發(fā)光(螢火蟲、海洋發(fā)光生物)

。二、基本原理（一）化學發(fā)光的條件化學發(fā)光是吸收化學反應過程產生的化學能，而使反應產物分子激發(fā)所發(fā)射的光。

A+B=C+D*D*→D+h反應必須滿足如下條件：（1）化學反應必須提供足夠的激發(fā)能?；瘜W發(fā)光反應多為氧化還原反應，（2）化學反應有利于激發(fā)態(tài)產物的形成。（3）激發(fā)態(tài)能釋放光子或能夠轉移它的能量給另一個分子，而使另外的分子激發(fā)而發(fā)光?；瘜W反應發(fā)光效率CL，又稱化學發(fā)光的總量子產率。它決定于生成激發(fā)態(tài)產物分子的化學激發(fā)效率r和激發(fā)態(tài)分子的發(fā)射效率f。定義為：

發(fā)射光子的分子數

CL=－－－－－－－－－－=rf

參加反應的分子數

化學反應的發(fā)光效率、光輻射的能量大小以及光譜范圍，完全由參加反應物質的化學反應所決定。每個化學發(fā)光反應都有其特征的化學發(fā)光光譜及不同的化學發(fā)光效率。（二）化學發(fā)光效率和發(fā)光強度

化學發(fā)光反應的發(fā)光強度Icl以單位時間內發(fā)射的光子數表示。它與化學發(fā)光反應的速率有關，而反應速率又與反應分子濃度有關。即

Icl

（t）=cl

dc/dt式中

Icl（t）表示t時刻的化學發(fā)光強度，是與分析物有關的化學發(fā)光效率dc/dt是分析物參加反應的速率。（三）化學發(fā)光反應類型(9.26)

按反應體系的狀態(tài)分類，如化學發(fā)光反應在氣相中進行稱為氣相化學發(fā)光；在液相或固相中進行稱為液相或固相化學發(fā)光；在兩個不同相中進行則稱為異相化學發(fā)光。

主要有O3、NO、S的化學發(fā)光反應，可用于監(jiān)測空氣中的O3、NO、SO2、H2S、CO、NO2等。一氧化氮與O3的發(fā)光反應

NO+O3

→NO2*NO2*→NO2+h

發(fā)射的光譜范圍：600～875nm，靈敏度1ng?L-1；（1）氣相化學發(fā)光

乙烯與O3的發(fā)光反應

CH2O*→CH2O+h最大發(fā)射波長：435nm；對O3的特效反應；線性響應范圍1ng

?L-1

～1g?L-1

；（2）液相化學發(fā)光用于此類化學發(fā)光分析的發(fā)光物質有魯米諾、光澤堿洛粉堿等。例如，利用發(fā)光物質魯米諾（3-氨基苯二甲酰肼），可測定痕量的H2O2以及Cu、Mn、Co、V、Fe、Cr、Ce等金屬離子。三、化學發(fā)光分析的儀器

發(fā)光反應室光檢測器信號放大器顯示與記錄（一）分立取樣式儀器（二）流動注射式儀器光檢測器為光電倍增管兩種儀器主要的區(qū)別是：分立取樣式儀器是手工進樣，將試劑與試樣同時加入貯液管中，然后由人工開啟旋塞使溶液流入反應池混合。這種進樣方式重復性差，測定的精密度不高。流動注射式儀器是自動進樣，由進樣閥自動把一定體積的試樣注射到連續(xù)流動的載體中（試劑就分散在載體）。此種進樣方式重復性很高。四、化學發(fā)光分析的應用生化反應測氨基酸

AA＋O2

酮酸＋H2O2

＋NH3

＋魯米諾

hν化學發(fā)光分析的特點:

1、靈敏度高。離子的檢出限低至10-12

g/mL，有的甚至低至10-17

g/mL。

2、測定的線性范圍寬。一般有5~6個數量級。

3、儀器設備簡單。無需激發(fā)光源和單色器。

4、分析速度快。缺點：可供發(fā)光用的試劑少；發(fā)光反應效率低（大大低于生物體中的發(fā)光）；機理研究少。作業(yè)：Ｐ66：3、58.同一熒光(磷光)物質的最大激發(fā)波長，最大熒光發(fā)射波長，最大磷光發(fā)射波長的大小順序為：9.分子熒光與化學發(fā)光均為第一激發(fā)態(tài)的最低振動能級躍遷至基態(tài)中各振動能級產生的光輻射，它們的主要區(qū)別在于（）

A、分子的電子層不同

B、無輻射弛豫的途徑不同

C、產生的光輻射的能源不同10.下列那種化合物的熒光量子產率可能最大：（）A、B、C、

熒光分析法的靈敏度高比吸光法高得多，更適合于低濃度物質的分子。這兩種方法在靈敏度方面的差別主要是由于同濃度相關的參數的測量方式不同。在光度計中，同濃度相關的參數A是I0

、It比的對數。在測低濃度液時，檢測器必須能區(qū)分I0、It訊號的微小差別，故在低A時測量的精確度迅速降低。

而熒光強度F（或磷光強度P）直接同熒光（磷光）物質的濃度成正比。同濃度相關的參數是在很小噪聲背景上的熒光（磷光）發(fā)射訊號本身，可用增強入射光強度I0或增大熒光訊號的放大倍數來提高靈敏度。而在光度法中,若檢測器放大倍數↑，I0及It同時↑，A值不變。故熒光法靈敏度常比相應光度法高2-4個數量級。Ａ、Ｂ分別為電子基態(tài)和第一電子激發(fā)態(tài)；Ｖ為振動能級；j為轉動能級．光譜選擇定則

不是原子中任何兩個能級之間都能夠發(fā)生躍遷，只有符合下列光譜選擇定則的躍遷才是允許的：

①△L=±1；②△S=0,即單重態(tài)到單重態(tài)，雙重態(tài)到雙重態(tài)，不重態(tài)之間的躍遷是禁戒躍遷；③△J=0、±1

，但當J=0時，△J=0的躍遷是不允許的。

同時符合以上三個條件的躍遷，躍遷概率大，譜線強。不符合光譜選擇定則的躍遷叫禁戒躍遷。注意：禁戒躍遷不是不能躍遷，只是躍遷的概率較小，譜線強度較弱。

試從和儀器兩方面比較吸光光度法和熒光分析法的異同，說明為什么熒光法的檢出能力優(yōu)于吸光光度法。答：原理比較（1）相同點：兩者均屬于分子光譜。（2）不同點：前者為吸收光譜，測定吸光度A信號。后者為發(fā)光光譜，測定熒光強度I信號.

儀器比較（1）相同點：都有五個基本部件，光源、樣品池、單色器、檢測器和顯示系統。（2）不同點：

a.光路不同，前者為光源與檢測器在同一直線光路，比色皿有兩個透光面。后者光源與檢測器在相互垂直的光路上，比色皿為四面透光。

b.單色器數量不同，前者有一個單色器，在光源后面。后者有兩個單色器，光源后面及比色皿后面各一個。由于吸光光度法測定吸光度A，信號與光源的強度無關，而熒光分析法測定熒光強度I，信號與激發(fā)光源的強度有關，可用增強入射光強度I來提高靈敏度，同時在暗處檢測、增大熒光訊號的放大倍數也可提高靈敏度。因而熒光法的檢出能力優(yōu)于吸光光度法。

如何區(qū)別熒光和磷光？其依據是什么？熒光磷光波長不同λ(熒光)<λ(磷光)壽命不同10-7-10-9s10-4-10s影響因素不同重原子效應，順磁性離子不利重原子效應，順磁性離子有利依據原因激發(fā)單重態(tài)→基態(tài)單重態(tài)激發(fā)三重態(tài)→基態(tài)單重態(tài)諾貝爾化學獎得主主要成果：發(fā)現綠色熒光蛋白GreenFluorescentProtein

2008年度諾貝爾化學獎授予美國科學家下村修、美國科學家馬丁·查爾菲，美國華裔化學家錢永健

10月8日，瑞典皇家科學院在瑞典首都斯德哥爾摩宣布，日本科學家下村修、美國科學家馬丁?沙爾菲和美籍華裔科學家錢永健獲得2008年諾貝爾化學獎。他們三人在發(fā)現和研究綠色熒光蛋白(GFP)方面有突出成就。

GFP是綠色熒光蛋白(GreenFluorescentProtein)的英文名稱的縮寫。是從水母中克隆出的能發(fā)綠色熒光的蛋白質的基因，表達出來的蛋白質，現在被廣泛用于生物學中研究。比如將GFP基因與我們要研究的蛋白質的基因連接在一起,轉入

動物或植物體內,這個融合基因被表達了的話，我們就可以觀察到細胞里綠色的熒光，而我們要研究的蛋白質就連在這個GFP上，所以綠色熒光分布的位置也就是我們要研究的蛋白質分布的位置。

GFP綠色熒光蛋白測定儀和GFP綠色熒光蛋白成像系統可在野外田間方便、無損、高效地測量植物葉片的綠色熒光蛋白GFP。主要應用于植物GFP測量，植物基因研究，生物有機體遺傳變化，農作物轉基因研究等。發(fā)現“綠色熒光蛋白”生物學有了“北斗星”

在沒有導航設備的古代，人們走夜路往往需要依靠北斗星判斷方向。綠色熒光蛋白正是生物化學中的“北斗星”。在它的指引下，科學家在21世紀初深入大片未知的科學處女地，成果層出不窮。幻燈片5教學目標與要求：掌握分子發(fā)光分析法（熒光分析法、磷光分析法