LY/T 2305-2014油茶品種微衛(wèi)星標(biāo)記鑒別技術(shù)規(guī)程

ICS6502020

B61..

中華人民共和國林業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

LY/T2305—2014

油茶品種微衛(wèi)星標(biāo)記鑒別技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationsofCamelliavarietiesidentificationbySSRmarkers

2014-08-21發(fā)布2014-12-01實(shí)施

國家林業(yè)局發(fā)布

LY/T2305—2014

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由國家林業(yè)局提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國林木種子標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC115)。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位南京林業(yè)大學(xué)

:。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位湖北省林業(yè)科學(xué)研究院福建省林木種苗總站

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人尹佟明戴曉港陳贏男李淑嫻史潔張新葉陳偉

:、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2305—2014

油茶品種微衛(wèi)星標(biāo)記鑒別技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以油茶Camellia幼嫩組織葉片芽等為材料利用微衛(wèi)星標(biāo)記法對油茶品

(spp.)(、),

種進(jìn)行分子鑒定的術(shù)語原理主要儀器和設(shè)備試劑與溶液操作程序和鑒定

、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于附錄中所列油茶品種的鑒別

A。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

21

.

微衛(wèi)星microsatellite

簡單重復(fù)序列

simplesequencerepeats;SSR

也稱基因組中由個(gè)個(gè)核苷酸組成的串聯(lián)重復(fù)序列

2~6DNA。

22

.

基因型頻率genotypefrequency

群體中某一位點(diǎn)特定基因型個(gè)體數(shù)占全部個(gè)體數(shù)的比率

。

3原理

微衛(wèi)星廣泛分布于植物基因組的不同位置微衛(wèi)星位點(diǎn)具有高度的遺傳多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記具有高

,,

度的物種特異性和良好的擴(kuò)增重現(xiàn)性是用于植物品種遺傳鑒別的首選標(biāo)記本標(biāo)準(zhǔn)采用高通量測序

,。

獲得了大量微衛(wèi)星標(biāo)記通過實(shí)驗(yàn)檢測篩選了對高度多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記用于油茶品種的遺傳鑒

,,10,

別在檢驗(yàn)過程中我們可采用真實(shí)品種的模板做為標(biāo)準(zhǔn)品從待檢苗木中抽樣做為待檢樣品

。,DNA,。

利用微衛(wèi)星引物進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)若待檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)品在任一引物擴(kuò)增位點(diǎn)上基因型不同則可判定待檢樣

,,

品與標(biāo)準(zhǔn)品不是同一品種當(dāng)不同引物擴(kuò)增位點(diǎn)上基因型都相同時(shí)可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品種在不同位點(diǎn)上的

。,

基因型頻率乘積計(jì)算出待檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)品是同一品種的概率

,。

4主要儀器和設(shè)備

41擴(kuò)增儀

.PCR。

42離心機(jī)

.12000r/min。

43微量可調(diào)移液器

.(2μL、10μL、100μL、1000μL)。

44數(shù)顯式穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀電壓電流

.EPS-300(10V~300V,10mA~400mA)。

45全自動(dòng)數(shù)碼凝膠圖像分析系統(tǒng)透射紫外波長透射紫外面積

.(:302nm,:20cm×20cm)。

46微量核酸蛋白檢測儀波長范圍波長精度檢測范圍

.