中藥制劑分析第二章、中藥制劑的分析課件

第二章中藥制劑的鑒別1.性狀鑒別2.顯微鑒別法3.理化鑒別法目的：檢定制劑的真實性。方法1）化學(xué)反應(yīng)法2）升華法3）光譜法4）色譜法第一節(jié)性狀鑒別

中藥制劑的性狀是指除去包裝后的性狀鑒別的內(nèi)容。第二節(jié)顯微鑒別定義:

利用顯微鏡來觀察中藥制劑中原藥材的組織碎片、細(xì)胞或內(nèi)容物等特征，從而鑒別制劑處方的組成.凡以藥材粉碎后細(xì)粉直接制成制劑或添加有部分藥材粉末的制劑，具可用顯微鑒別。操作簡單，準(zhǔn)確可靠，耗費少鑒別中藥制劑的常用方法(一)特點制劑鑒別比單味中藥粉末鑒別復(fù)雜原中藥材經(jīng)制成制劑后，有些原有的組織結(jié)構(gòu)已不存在要對處方中各藥味逐一分析比較，選用能相互區(qū)別，互不干擾，能表明該藥味存在的顯微特征作為鑒別的依據(jù)一味藥多用一個最主要的特征作為鑒別指標(biāo)

3．水丸、錠劑研成粉末后取少量直接透化裝片。4．蜜丸取蜜丸切碎，加水?dāng)嚢?，洗滌后，置離心管中離心分離沉淀。反復(fù)處理以除去蜂蜜后透化裝片。

固定標(biāo)本片制片方法取中成藥粉末置離心管中,加乙醇浸過上面,玻棒攪拌5～10min后離心使粉末沉積,傾去稀醇液,再加無水乙醇二次,丙酮一次,丙酮、二甲苯等量混合液一次,如前操作,每次10～20min；最后加入純二甲苯,略加攪拌,取處理后的樣品微量置載玻片上,滴加中性樹膠,加蓋玻片封藏,貼標(biāo)簽.[顯微鑒別]

1)薄壁組織(熟地黃)2)果皮表皮細(xì)胞(山茱萸)3)淀粉粒(山藥)4)草酸鈣簇晶(牡丹皮)5)薄壁細(xì)胞(澤瀉)例六味地黃丸的顯微定性鑒別應(yīng)該注意：

(1)慎重使用專屬性不好的分析反應(yīng)。(2)在分析前對樣品進行分離、精制，除去干擾分析反應(yīng)的物質(zhì)，借此改善鑒別方法的專屬性。(3)采用陰性對照和陽性對照的方式，對擬定的鑒別方法進行反復(fù)驗證，防止出現(xiàn)假陽性。

(1)取本品約0.1g，研細(xì)，加氯仿5ml，浸泡1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初顯藍紫色，漸變?yōu)樗{綠色。（蟾蜍）例牙痛一粒丸中蟾蜍、朱砂、雄黃鑒別反應(yīng)(2)取本品約0.2g,研細(xì),加水濕潤后,加氯酸鉀的硝酸飽和溶液2ml,振搖,放冷,離心,取上清液,加氯化鋇試液0.5ml,搖勻,溶液呈白色渾濁,離心,棄去上層酸液,再加水2ml,振搖,沉淀不溶解。（雄黃）(3)取本品適量,研細(xì),用鹽酸濕潤后,在光潔的銅片上摩擦,銅片表面即顯銀白色光澤,加熱烘烤后,銀白色消失.(朱砂）操作方法：取金屬片,安放在圓孔的石棉網(wǎng)上,在金屬片上放一小金屬圈,對準(zhǔn)石棉網(wǎng)的圓孔,圈內(nèi)放預(yù)先研細(xì)成粉末的中藥制劑一薄層,圈上放一載玻片,在石棉網(wǎng)下圓孔處用酒精燈慢慢加熱,火焰距離石棉網(wǎng)約4cm,加熱至粉末開始變焦,即去火冷卻,可見有升華物附著在載玻片上,將載玻片取下,顯微鏡下觀察性狀,色澤,或加試劑觀察其顏色變化例：牛黃解毒片中冰片的鑒別

【鑒別】(2)取本品1片，研細(xì)，進行微量升華，所得的白色升華物，加新配制的1%香草醛硫酸溶液1～2滴，液滴邊緣漸顯玫瑰紅色。

三、光譜法

(一)熒光法中藥材中含有能產(chǎn)生熒光的化學(xué)成分，可在可見或紫外關(guān)照射下能發(fā)出熒光，有的須經(jīng)試劑處理后發(fā)出熒光方法為：取制劑的提取液點在濾紙或試制上，紫外燈（365nm或254nm）下觀察，有的加一定試劑后在觀察.常用的鑒別方法有：規(guī)定吸收波長法對照品對比法規(guī)定吸收波長和吸收度法規(guī)定吸收波長和吸收比值法多溶劑光譜法

四、色譜法

（一）紙色譜法（二）薄層色譜法（三）薄層掃描（四）氣相色譜法（五）高效液相色譜法(二)薄層色譜法使用本法鑒定中藥制劑，通常是在同一塊薄層板上點入樣品和適宜的對照物，采用同一條件依法層析展開，經(jīng)顯色或用其他方法檢出色譜斑點后，將樣品與對照物所得的色譜圖進行對比，作出鑒定。2.薄層色譜法使用的材料（1）薄層板（2）涂布器（3）點樣器材（4）展開箱（5）顯色與檢測儀器加油石膏作黏合劑的硅膠G，或加有熒光劑的硅膠G2543.操作方法（1）薄層板的制備將一份吸附劑（如硅膠G）加3份左右的水在研缽中用研杵沿一個方向充分研磨，調(diào)節(jié)成均勻糊狀物，倒入已準(zhǔn)備好的涂布器中，在玻璃板平穩(wěn)地以直線方向移動涂布器，使硅膠漿均勻涂布。6.對照品的選擇（1）對照品對照（2）陰陽對照（3）采用對照藥材和對照品同時對照1）供試液制備

取各樣品適量，加甲醇20ml浸漬1h，過濾，取濾液5ml,蒸干,加水10ml使溶解,再加HCl1ml,水浴加熱30min,立即冷卻，乙醚提取兩次，20ml/次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿溶解成1ml

例大黃及含大黃的成藥2）對照液制備

取大黃對照藥材0.1g．按供試液制備作為對照藥材溶液；另取蘆薈大黃素，大黃酸，大黃素，大黃素甲醚，大黃酚對照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作為對照品溶液。3）薄層板

硅膠H加0.3％CMC-Na溶液的自制板；厚度：300μm4）點樣

分別點樣4μL。5）展開劑

石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)放置后的上層溶液。6）展開方式

上行展開；展距：7cm。

7）顯色

置紫外光燈(365nm)下檢視。8）色譜識別

供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的五個橙黃色熒光主斑點。9）備注

在部分成藥樣品的色譜中，除大黃的五個蒽醌成分的斑點外，尚有其它熒光斑點，為處方中的其它成分。1234567891011121314151617樣品：1．蘆薈大黃素；2．大黃酸；3．大黃素；4．大黃素甲醚；5．大黃酚；6．大黃(掌葉大黃)對照藥材；7．大黃(唐古特大黃)對照藥材；8．大黃流浸膏；9．小兒化毒散；10．檳榔四消丸；11．木香檳榔丸；12．枳實導(dǎo)滯丸；13．牛黃上清丸；14．清寧丸；15．一捻金；16．牛黃解毒片；17．牛黃解毒丸1）供試液制備

取各品種藥粉適量，加甲醇5ml，置水浴回流15min，過濾，濾液濃縮至1ml。2）對照液制備

取鹽酸香檳酒小檗堿，硫酸黃連堿，硫酸表小檗堿，非洲防己堿，藥根堿，鹽酸巴馬汀對照品，加甲醇制成每0.5mg/ml的溶液，作為對照品溶液。

例黃連,黃柏及含黃連,黃柏的成藥3）薄層板硅膠G自制板；厚度：500μm4）點樣

分別點樣1-2μl5）展開劑

苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(6∶3∶∶1.5∶1.5∶0.5)；另槽中加入與展開劑等體積濃氨試液。6）展開方式

展開箱預(yù)平衡15分鐘,上行展開,展距:8cm7）顯色

置紫外光燈(365nm)下檢視。8）色譜識別

黃連可見4～5個主要的黃色熒光斑點黃柏主要檢出巴馬汀及小檗堿123456789101112131415161718

樣品：1.黃連(味連);2.黃連;3.黃連(雅連);4.黃連(云連);5.黃連(野連);6.黃連(日本黃連);7.小兒化毒散;8.萬應(yīng)錠;9.大補陰丸;10.木香檳榔丸;11.香連丸;12.黃柏;13.非洲防己堿;14.藥根堿;15.巴馬汀;16.小檗堿;17.表小檗堿;18.黃連堿。(四)氣相色譜法氣相色譜法的分離效能高，檢測器種類多而且靈敏