NY/T 577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴散試驗方法

1C5.11.220B41NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴散試驗方法Agargelimmunodiffusiontestforcaprinearthritis/encephalitis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎（caprinearthritis/encephalitis,簡稱CAE)是由山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎病毒（CAEV）引起的山羊的一種慢性病毒性傳染病，其主要特征是成年的羊墾緩饅發(fā)展的關(guān)節(jié)炎，間或伴有間質(zhì)性肺炎和間質(zhì)性乳房炎。羔羊表現(xiàn)為上行性麻牌的神經(jīng)癥狀，被世界動物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth（英）OfficeInternationaldesEpizooties(法），TEJ列為B類疾病，我國農(nóng)業(yè)部把該病列為二類動物疫病。本病的診斷方法為瓊脂凝膠免疫擴散(ACID）試驗，是根據(jù)（IE《診斷試驗的疫苗標準手冊》2000版)和我國的實際情況制定的。技術(shù)上與OIE保持一致，該法簡便、特異，在國際貿(mào)易中為指定的診斷方法本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧魯醫(yī)局提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱魯醫(yī)研究所、新疆畜牧科學院本標準主要起草人：相文華、王治才。

NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴散試驗方法1范圍本標準規(guī)定了山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴散試驗的技術(shù)要求。本標準適用于山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎的診斷和檢疫脂凝膠免波擴做試驗2.1材料準備2.1.1試劑及器血：氯化鈉(NaCI)，疊氮鈉(NaN.),1mol/l.三羥甲基氨基甲燒-鹽酸(Tris-HCI)瓊脂精，移液器(50L～100%I.)及吸嘴，外徑7mm薄壁金屬打孔器,直徑9.5cm平咀。2.1.2抗原、標準陽性血清、陰性血清。2.2操作方法2.2.1瓊脂精凝膠板制備稱瓊脂糖1.0g、氟化鈉8g暨100ml.三角瓶中，加入pH8.00.05mol/.Tris-HCl100ml.隔水煮沸至全部溶化。將其自然冷卻至60C左右時.倒人平血。每只平血加15mL.·待其凝因后加蓋，置濕盒內(nèi)·放4（待用。2.2.2打孔將瓊脂板放于打孔模式圖上（見圖1)，用打孔器按圖樣打梅花型孔,孔徑7mm,孔距2.5mm.打完孔后，挑出孔中瓊脂塊，再用溶化的瓊脂封底。圖1AGID打孔模式圖2.2.3加樣按圖上中心孔加入抗原,2、4、6孔滴加陽性血清,1、3、5孔滴加被檢血清，加滿樣品后，置37℃溫金內(nèi)。2.3結(jié)果判定2.3.1于24h、48h及72h觀察是香有沉淀線出現(xiàn),終判時間為72h。