標(biāo)準(zhǔn)解讀
《WS/T 67-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法 硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法》是一項(xiàng)中國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一種用于檢測(cè)全血中膽堿酯酶(ChE)活性的方法。該方法基于酶催化反應(yīng),利用特定底物和顯色劑來定量分析樣品中的ChE活性水平。具體來說,它采用了硫代乙酰膽堿作為底物,在膽堿酯酶的作用下分解產(chǎn)生硫代膽堿;隨后加入聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸與之反應(yīng)生成黃色化合物,通過測(cè)量此化合物在特定波長(zhǎng)下的吸光度變化來間接反映樣本中Ch堿酯酶的活性程度。
本標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)所需材料、儀器設(shè)備要求、操作步驟及結(jié)果計(jì)算等各方面內(nèi)容。其中,關(guān)鍵步驟包括樣本準(zhǔn)備、試劑配制、反應(yīng)條件設(shè)定以及最終的數(shù)據(jù)處理。此外,還提供了質(zhì)量控制措施以確保測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確可靠。采用該方法能夠有效地評(píng)估人體內(nèi)ChE活性狀態(tài),對(duì)于臨床診斷某些疾病或監(jiān)測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥暴露具有重要意義。
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- 1996-10-14 頒布
- 1997-05-01 實(shí)施
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WS/T 67-1996全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法-免費(fèi)下載試讀頁文檔簡(jiǎn)介
VS中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T67-1996全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法Blood-Determinationofcholinesteraseactiyity-Spectrophotometricmethod-Acetylthiocholineanddithio-bis-(nitrobenzoicacid)method1996-10-14發(fā)布1997-05-01實(shí)施中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布
中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法WS/T67-1996Blood-Determinationofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod--Acetylthiocholineanddithio-bis-(nitrobenzoicacid)method主題內(nèi)容與適用范座本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血中膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法硫代乙酰膽堿-聯(lián)硫代雙硝基苯甲酸法。本法最低檢測(cè)濃度為2單位/1ml.血。本標(biāo)準(zhǔn)適用于正常人和接觸有機(jī)磷類及氨基甲酸酯類農(nóng)藥者血中膽堿酯酶活性的測(cè)定。2原理膽堿酯酶水解硫代乙酰膽堿<ASCh,Acetylthiocholine)生成硫代膽堿和乙酸,硫代膽堿與硫基顯色劑5,5'-聯(lián)硫代-雙-2-硝基苯甲酸(DTNB.Dithio-bis-nitrobenzoicacid)反應(yīng)形成黃色化合物5-硫基2-硝基苯甲酸(TNB)。在波長(zhǎng)412nm處比色定嵌。3儀器3.11分光光度計(jì),5mm比色杯。3.2恒溫水浴3.33離心機(jī)。3.4!血紅蛋白吸管,20%L.、3.5刻度吸管0.5ml.,2.0ml..3.6試管10mL。3.77容量瓶10mL.3.81/10萬天平。4試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除另有說明外,均為分析純?cè)噭?.1實(shí)驗(yàn)用水:蒸餡水或具有同等純度的去離子水。4.2磷酸鹽緩沖液(1/15mmol/L·pH7.40):稱取9.07g無水磷酸二氫鉀(KH.PO,)用水溶解并稀釋至1000mL(甲液)稱取23.87g磷酸氫二鈉(Na.HPO,·12H.O)用水溶解并稀釋至1000ml(乙液)。取甲液19.2ml與乙液80.8mL混合即得。4.3生理鹽水:氯化鈉8.5g/L。4.4硫代乙酰膽堿(ASCh):稱取72.3mgASCh(生物試劑)溶于生理鹽水中,并稀釋到10mL;置
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