第二節(jié)病原微生物實驗室生物安全要求

第二節(jié)

病原微生物實驗室生物安全重要意義建立病原微生物研究安全平臺的需要生物防護（國際）的需要傳染病預防與控制的需要動物防疫的需要出入境檢驗檢疫的需要醫(yī)院感染控制的需要GOARN檢測網(wǎng)絡離不開生物安全實驗室病原微生物實驗室標準和指南《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》WS233-2002《生物安全實驗室建筑技術規(guī)范》GB50346-2004《人間傳染的病原微生物名錄〉衛(wèi)生部《可感染人類的高致病性病原微生物（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》衛(wèi)生部第45號令《實驗室生物安全通用要求》GB19489-2008病原微生物危害評估確定生物安全防護水平依據(jù)危害評估制定微生物操作、儀器設備操作程序與管理規(guī)程評價微生物實驗室安全狀況的依據(jù)病原微生物危害程度分類病原微生物危害程度分類的主要依據(jù)微生物的致病性微生物的傳播方式和宿主范圍當?shù)厮邆涞挠行ьA防措施當?shù)厮邆涞挠行е委煷胧┎≡⑸镂：Τ潭确诸悺恫≡⑸飳嶒炇疑锇踩芾項l例》

4類第四類：危險程度最低第三類：第二類：第一類：危險程度最高

《實驗室生物安全通用要求》和WHO《生物安全手冊》4級Ⅰ級：危險程度最低

Ⅱ級：

Ⅲ級：

Ⅳ級：危險程度最高高致病性病原微生物國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2004)WHO《生物安全手冊》(第三版，2004)四類在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。

Ⅰ級（低個體危害，低群體危害）不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。Ⅰ級（無或極低的個體和群體危險）不太可能引起人或動物致病的微生物。

病原微生物的危害等級劃分和標準

三類能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。

Ⅱ級(中等個體危害，有限群體危害)能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原微生物。實驗室感染不導致嚴重疾病，具備有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。

Ⅱ級（個體危險中等，群體危險低）病原微生物能夠對人或動物致病，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染，但對感染有有效的預防和治療措施，并且疾病傳播的危險有限。管理條例 通用要求 WHO安全手冊國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較

國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較二類能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。Ⅲ級（高個體危害，低群體危害）能引起人類或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原微生物。Ⅲ級（個體危險高，群體危險低）病原微生物通常能引起人或動物的嚴重疾病，但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播，并且對感染有有效的預防和治療措施。管理條例 通用要求 WHO安全手冊

國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較一能夠引起人類或動物嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

Ⅳ級(高個體危害，高群體危害)能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，人與動物，動物與動物間傳播的病原微生物。Ⅳ級（個體和群體的危險均高）病原微生物通常能引起人或動物的嚴重疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播，對感染一般沒有有效的預防和治療措施。管理條例 通用要求 WHO安全手冊《人間傳染的病原微生物名錄》介紹病毒160類細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體155類真菌59類朊病毒6種

生物安全實驗室主要設備紫外燈高壓滅菌器生物安全柜生物安全柜概念超凈工作臺生物安全柜生物安全柜的分級Ⅰ級生物安全柜Ⅱ級生物安全柜Ⅲ級生物安全柜Ⅰ級生物安全柜可開啟前窗在負壓下操作表面風速在75-100fpm排出的氣體經(jīng)HEPA過濾保護操作人員和環(huán)境適用于要求生物安全等級1、2、3的工作適用于樣品不需保護的實驗工作Ⅱ級生物安全柜可開啟前窗從前開口向內(nèi)的氣流用于保護人員經(jīng)HEPA過濾后向下送的層流，以保護樣品排出的氣體采用HEPA過濾器過濾則用于保護環(huán)境表面風速在75-100fpm

適用于要求生物安全等級為(Ⅰ-Ⅲ）的工作Ⅱ級生物安全柜的分類B1TypeBB2ClassIITypeAA1A2Ⅱ級生物安全柜分類II級A1型生物安全柜

70%柜內(nèi)循環(huán)，30%空氣排出，工作窗口流速75fpmII級A2型生物安全柜

70%柜內(nèi)循環(huán)，30%空氣排至室外，工作窗口流速100fpmII級B1型生物安全柜

30%柜內(nèi)循環(huán)，70%空氣排出,工作窗口流速100fpmII級B2型生物安全柜

100%空氣排出,工作窗口流速100fpmⅢ級生物安全柜箱體完全封閉，將微生物與人完全隔離；通過手套箱操作。保護工作人員、產(chǎn)品和環(huán)境。一般無定型產(chǎn)品，需特殊定貨?？蓪⑷舾蒊II級生物安全柜連在一起使用全部生物流程的操作均在柜內(nèi)完成，以確保安全。各級生物安全柜之間的差別生物安全柜級別正面氣流速度（m/s）氣流循環(huán)量(%)是否需要排風管道

室內(nèi)循環(huán)排出室外量Ⅰ級0.381000否Ⅱ級A2型0.517030否Ⅱ級B2型0.510100需要Ⅲ級NA0100需要不同保護類型及生物安全柜的選擇保護類型生物安全柜的選擇個體防護，針對危害程度二、三、四類的病生物個體防護，針對一類病原微生物，手套箱型實驗室個體防護，針對一類病原微生物，防護服型實驗室實驗對象保護少量揮發(fā)性放射性核素/有毒化學品的防護揮發(fā)性放射性核素/有毒化學品的防護Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級

Ⅲ級Ⅰ級、Ⅱ級Ⅱ級、Ⅲ級Ⅱ級A2型、Ⅱ級B1型Ⅰ級、Ⅱ級B2、Ⅲ級生物安全柜安裝使用維護定期監(jiān)測并及時更護過濾器生物安全實驗室分級生物安全一級(BSL-1)生物安全二級(BSL-2)生物安全三級(BSL-3)生物安全四級(BSL-4)生物安全二級(BSL-2)

適合于對人和環(huán)境有中度潛在危險的病源，與BSL—1的區(qū)別在于：

(1)有門禁裝置，進行實驗時，限制進入實驗室；

(2)實驗人員均接受過病原處理方面的特殊培訓;(3)配備高壓滅菌鍋，二級生物安全柜；

(4)門外必須貼生物危險標識.

生物安全三級(BSL-3)

在該級別中開展有關內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源。會引發(fā)嚴重的、可能致死的疾病。（1）實驗室經(jīng)過特殊設計和施工；（2）實驗人員應在處理致病性的和可能使人致死的病源方面受過專業(yè)訓練，并由對該病源工作有經(jīng)驗的、有資格的科學工作者監(jiān)督；（3）所有與傳染源操作有關的步驟，都在生物安全柜中進行；（4）配備雙扉高壓滅菌鍋并要求帶有高效過濾裝置；二級生物安全實驗室P2實驗室，又稱BSL-2，是生物實驗室安全等級的一個分類。在現(xiàn)在各類實驗室當中，P2實驗室是使用最為廣泛的生物安全等級實驗室。BSL-2實驗室示意圖無需特殊選址，普通建筑物即可，但應有防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進入的設計。每個實驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。在實驗室門口處應設掛衣裝置，個人便裝與實驗室工作服分開放置。實驗室的墻壁、天花板和地面應平整、易清潔、不滲水、耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑，不得鋪設地毯。BSL－1實驗室設施和施設備（一）實驗臺面應防水，耐腐蝕、耐熱。實驗室中的廚柜和實驗臺應牢固。廚柜、實驗臺彼此之間應保持一定距離，以便于清潔。實驗室如有可開啟的窗戶，應設置紗窗。實驗室內(nèi)應保證工作照明，避免不必要的反光和強光。應有適當?shù)南驹O備。BSL－1實驗室設施和施設備（二）

在實驗室所在的建筑內(nèi)應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。應在實驗室內(nèi)配備生物安全柜。應設洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置。應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。有可靠的電力供應和應急照明。必要時，重要設備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應設備用電源。實驗室出口應有在黑暗中可明確辨認的標識。

BSL－2實驗室設施和施設備（二）與微生物危險度等級相對應的

生物安全水平、操作和設備不同生物安全水平對設施的要求病原微生物實驗室個人防護要求BSL-1工作服手套BSL-2防護服手套帽子口罩護目鏡BSL-3兩層防護服兩層手套專業(yè)口罩BSL-4正壓工作服面部防護器具廢棄物的處理處理原