動物墊料中志賀菌檢測方法編制說明-內蒙古

編制說明項目名稱：動物墊料中志賀氏菌檢測方法項目編號：內質監(jiān)標函（ 2018）154號-108編制單位：呼和浩特海關編制時間：2018.6-2019.12一、工作簡況本標準根據(jù)《局關于下達2018年第一批內蒙古自治區(qū)地方標準制修訂項目計劃的通知》[內質監(jiān)標函（2018）154號]，本標準是由呼和浩特海關提出并歸口，項目計劃編號為108。呼和浩特海關牽頭成立由相關領域的專業(yè)技術人員和具有標準化專業(yè)知識的人員組成的標準起草組。起草組在充分調查研究、綜合分析和試驗驗證的基礎上，起草標準初稿和編制說明，并廣泛征求意見。對意見進行匯總整理，修改完善標準初稿，形成地方標準征求意見稿。第一起草單位：中華人民共和國呼和浩特海關；第二起草單位：內蒙古自治區(qū)農牧業(yè)科學院。主要起草人：趙治國、延涵、盛萬里、王海艷、陳林軍、崔強、敖威華、李軍燕、羅曉平、韓祎陟。二、標準制定的背景及意義動物墊料與動物關系密切。近年來隨著生物科學研究的飛速發(fā)展，動物作為其研究中不可缺少的重要組成部分，備受各國政府的重視和科學家的關注。墊料是為動物營造舒適的人工環(huán)境，進行環(huán)境控制的基礎條件和必要材料，是對動物產生直接作用和影響的環(huán)境因素。動物墊料與動物健康、福利息息相關，同時也對養(yǎng)殖業(yè)、動物及其相關科研方面甚至社會經濟發(fā)展有十分重大的影響。因此，墊料的質量評定與控制非常必要。我國動物墊料標準化、商品化尚處于初級階段。歐美等發(fā)達國家早已實行墊料商品化生產，有專業(yè)的工廠，并且各道工序的質量要求非常嚴格。但我國對動物墊料的研究還處于初級階段，與墊料相關的文獻報道甚少，墊料生產監(jiān)管環(huán)節(jié)薄弱，檢測標準缺乏。近年來我國政府及從業(yè)人員逐漸認識到動物墊料中存在的問題，開始對墊料質量評價方面的問題進行改進。因此要想使動物的質量管理與國際接軌，動物墊料生產的標準化、商品化就變得至關重要。我國動物墊料標準化和質量管理相對滯后，影響相關行業(yè)發(fā)展。我國對動物墊料的研究才剛剛起步，現(xiàn)行的國家標準和實驗動物相關管理條例中，對動物墊料的標準化規(guī)定幾乎空白，稀數(shù)資料對于墊料的規(guī)定只有：應選用吸濕性好、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂的材料；須經消毒、滅菌后方可使用。如此籠統(tǒng)的規(guī)定在一定程度上制約了我國動物墊料標準不能緊跟國際標準， 同時限制了藥品、生物制品、動物等產品的出口，還使科研論文將不能被同行接受。因此要想提高相關學科競爭力，就必須加強墊料標準化和質量管理，從動物墊料微生物指標監(jiān)測入手。我國動物墊料微生物檢測標準幾乎空白， 亟待建立相關標準。近年來，我國政府及從業(yè)人員逐漸認識到動物墊料對動物健康及下游產業(yè)的重大意義，墊料相關研究報道逐年增多，積累了一定的理論基礎。但目前，我國尚未對國內墊料質量建立統(tǒng)一評價體系、風險分析、國家標準及配套法規(guī)。其中，墊料中微生物特別是致病微生物的含量對動物健康、福利和產品等影響重大，但目前動物墊料中微生物檢測標準屬于空白，亟待建立科學完善的動物墊料微生物檢測標準，該工作將對國內墊料建立統(tǒng)一質量評價體系、風險分析及產品標準等有力促進。動物墊料中志賀氏菌對動物的危害極大。 動物墊料志賀氏菌是影響動物健康和動物實驗結果的國際公認的重要環(huán)境因素之一， 因此動物墊料中志賀氏菌的檢測十分重要。志賀氏菌屬的細菌，是細菌性痢疾的病原菌，屬于腸桿菌科，分4個群：痢疾志賀氏菌、福氏志賀氏菌、鮑氏志賀氏菌、宋內氏志賀氏菌。由志賀氏菌引起的細菌性痢疾是最為常見的，它不僅可以通過食物和水源傳播，也可以通過糞口傳播和接觸傳播。造成志賀氏菌感染的大多數(shù)原因是由環(huán)境衛(wèi)生惡劣、食材或者人類、動物攜帶志賀氏菌等原因造成的，也通常通過水源污染和接觸傳播引起。人和靈長類動物是志賀氏菌的最宜寄主，但是近年來我國也有養(yǎng)雞場大規(guī)模爆發(fā)志賀氏菌感染的事件。 據(jù)世界衛(wèi)生組織報告，全球每年約有1.2億志賀氏菌引起嚴重腸道感染的病例，估計造成 60余萬死亡病例。10—100個志賀氏菌，經口投喂即可造成腸道感染。根據(jù)流行病學調查，在志賀氏菌流行的季節(jié)，養(yǎng)殖場周圍的床鋪、桌椅、門把手等生活用具，甚至是感染者的手指上都可以檢出志賀氏菌。志賀氏菌引起的疾病不論在發(fā)達國家還是在發(fā)展中國家都嚴重地損害著動物及人類的健康，也給養(yǎng)殖業(yè)造成了重大經濟損失。我國食源性致病菌中，由志賀氏菌引起的感染人數(shù)占細菌性食源性疾病總病例的 8.5%。志賀氏菌病的危害如此之大，使用志賀氏氏菌污染的墊料容易引起動物發(fā)病及攜帶病菌， 含有志賀氏菌的動物產品又會導致公共衛(wèi)生事件的發(fā)生。動物體內排出的志賀氏菌，即可能污染食物導致人的食物中毒，也可能由于人類接觸而造成的疾病的發(fā)生。因此檢測墊料中志賀氏菌成為重中之重。建立動物墊料志賀氏菌檢測標準，保障動物健康急不可待。動物墊料與動物糞便直接接觸，容易滋生細菌，尤其是腸道致病微生物，致使墊料被志賀氏菌污染，從而威脅動物的健康與福利，并且對養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展與國際間動物及產品貿易帶來巨大的影響，甚至威脅到人類社會的生產與生活。但是對于動物墊料志賀氏菌檢測標準幾乎空白，還沒有統(tǒng)一的標準和方法，所以建立動物墊料志賀氏菌檢測標準已刻不容緩。本實驗室具有多年微生物檢測的經驗，本方法的開發(fā)和應用，在檢測技術方面填補我區(qū)的空白、彌補了自治區(qū)沒有現(xiàn)行標準的不足，能夠使動物墊料中志賀氏菌的檢測更加高效、準確、安全。本方法的開發(fā)和應用將會使我區(qū)在動物墊料中志賀氏菌的檢測先進性方面達到國內領先水平，為我區(qū)動物墊料質量安全管理部門更快更好的管控提供可靠保障。因此，加強動物墊料中志賀氏菌的檢測對確保全區(qū)農業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展具有重要的現(xiàn)實意義。三、主要起草過程2018.06-2018.08 地標前期基礎工作：收集動物墊料樣本，查閱志賀氏菌資料，檢索志賀氏菌檢測的相關文獻及標準。2018.10-2019.09 前期實驗條件的摸索：包括前處理方法的優(yōu)化、對照，不同墊料中志賀氏菌的檢出率，最終確定實驗方案，編寫編制說明。2019.10-2019.11 驗證單位進行驗證。2019.12 編寫地標并定初稿。四、現(xiàn)行法律、法規(guī)和強制性標準的關系本標準遵循GB/T1.1-2009《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》和GB/T20001.4-2015《標準編寫規(guī)則第4部分：試驗方法標準》的規(guī)則編寫。還參照相關國家標準編寫指南的要求。在編制本標準的過程中參考了以下標準： ISO21567：2004《Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Horizontalmethodforthedetectionofshigellaspp.》、《美國FDA細菌學分析手冊第八版（BAM）志賀氏菌》、GB14925-2010《實驗動物環(huán)境及設施》、 GB4789.5-2012《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗志賀氏氏菌檢驗》、GB4789.31-2013《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗沙門氏菌、志賀氏菌和致瀉大腸埃希氏菌的腸桿菌科噬菌體診斷檢驗》、GB/T14926.47-2008《實驗動物 志賀菌檢測方法》、GB/T8381.2-2005《飼料中志賀氏菌的檢測方法》。綜合參考了國內外與志賀氏菌檢測相關的檢測標準，力求該標準能夠高效準確的檢測墊料中志賀氏菌，同時兼顧標準的廣泛應用。本標準完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準規(guī)定，不存在任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準相違背之處。相關強制性標準2項：GB14925-2010《實驗動物環(huán)境及設施》，本標準規(guī)定了實驗動物及動物實驗設備和環(huán)境的技術要求及檢測方法，同時規(guī)定了墊料、飲水和籠具的原則要求。但針對墊料該標準僅規(guī)定了“墊料的材質應符合動物的健康和福利要求，應滿足吸濕性好、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂、耐高溫、耐高壓等條件；墊料必須經滅菌處理后方可使用”。本地標適用于墊料中志賀氏菌檢測，明確規(guī)定了不同類別墊料取樣方法，標準中志賀氏菌鑒定過程增加了新的鑒定手段，確保檢測結果更加準確。五、主要內容及檢測方法的確定5.1取樣方法的確定及優(yōu)化根據(jù)動物墊料的物理性狀將其分為顆粒狀 /粉末狀墊料和平面狀墊料，針對不同性狀的墊料采取不同的取樣方法。顆粒狀或粉末墊料樣品取樣方法國內外食品和飼料中志賀氏菌檢測法中常用的取樣方法為稱取法， 本標準中針對顆粒狀或粉末墊料樣品（木屑、玉米芯、秸稈、紙屑等）參考通用做法采用稱取25g的方法進行取樣。平面墊料樣品取樣方法針對平面墊料（膠墊、托盤等）采用表面涂抹取樣法，無菌操作將涂抹 25cm2-100cm2平面樣品的棉拭子置入裝有 25m