微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)ppt

微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)ppt第一頁，共八十八頁，2022年，8月28日專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)第二頁，共八十八頁，2022年，8月28日(一)概念、特點(diǎn)：

個(gè)體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統(tǒng)稱。微生物包括細(xì)菌、病毒、真菌、和少數(shù)藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。）結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡單,個(gè)體多數(shù)十分微小.通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有的甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu).且體內(nèi)一般不含有葉綠素.不能進(jìn)行光合作用.第三頁，共八十八頁，2022年，8月28日微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、放線菌、藍(lán)藻個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡單酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：顯微藻類、原生生物（如：草履蟲、變形蟲等）病毒、類病毒、朊病毒◆微生物的共同特點(diǎn)：第四頁，共八十八頁，2022年，8月28日細(xì)菌細(xì)菌：單細(xì)胞不分枝的原核微生物。細(xì)菌細(xì)胞微小而透明，通常用適當(dāng)染料染色后顯微鏡觀察圖1-1常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)A.球菌

B.桿菌C.弧菌第五頁，共八十八頁，2022年，8月28日球菌弧菌桿菌第六頁，共八十八頁，2022年，8月28日細(xì)菌細(xì)菌第七頁，共八十八頁，2022年，8月28日細(xì)菌*細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：堅(jiān)韌且有彈性細(xì)胞壁有哪些功能？①固定細(xì)胞外形；

②保護(hù)細(xì)胞免受外力的損傷；

③阻攔大分子物質(zhì)進(jìn)人細(xì)胞；④使細(xì)胞具有致病性及對(duì)噬菌體的敏感性。傷寒桿菌細(xì)胞壁中含毒素第八頁，共八十八頁，2022年，8月28日芽孢

有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌.第九頁，共八十八頁，2022年，8月28日菌落單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。有鞭毛細(xì)菌常形成邊緣不規(guī)則的菌落；具有莢膜的菌落表面較透明，邊緣光滑整齊；有芽孢的菌落表面干燥皺褶；有些能產(chǎn)生色素的細(xì)菌菌落還顯出鮮艷的顏色。第十頁，共八十八頁，2022年，8月28日幾種菌落及其形態(tài)第十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日菌落細(xì)菌的菌落特征因種而異第十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日細(xì)菌的營養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型。自養(yǎng)菌（autotroph）異養(yǎng)菌（heterotroph）腐生菌寄生菌大部分病原菌第十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日放線菌1、結(jié)構(gòu)：單細(xì)胞原核分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）第十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素

微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的

應(yīng)用:第十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日第十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日第十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日如圖是酵母菌電子顯微鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)酵母菌和霉菌青霉第十八頁，共八十八頁，2022年，8月28日生殖腐生生活孢子生殖第十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日病毒的結(jié)構(gòu)第二十頁，共八十八頁，2022年，8月28日病毒

第二十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日SARS病毒、禽流感病毒第二十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）第二十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日1.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)(1)水(2)碳源(3)氮源(4)無機(jī)鹽（二）培養(yǎng)基第二十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日：凡是能為微生物提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)。①無機(jī)碳源：CO2；NaHCO3等②有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②異養(yǎng)微生物的能源⑴.概念⑵.來源：⑶.作用：1.微生物的碳源第二十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日①無機(jī)氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能夠?yàn)槲⑸锾峁㎞元素的營養(yǎng)物質(zhì)。主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含N的代謝產(chǎn)物。2.微生物的氮源⑴.概念：⑵.來源：⑶.作用：3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。第二十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日(1)特殊營養(yǎng)物質(zhì)----?如：培養(yǎng)乳酸桿菌需要在培養(yǎng)基中添加維生素(2)pH值如:培養(yǎng)霉菌需酸性、培養(yǎng)細(xì)菌需中性或微堿性(3)氧氣的含量如:培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無氧的條件2.培養(yǎng)基內(nèi)所需的其他條件練習(xí)生長因子第二十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日練習(xí)1（多項(xiàng)選擇）1、下列細(xì)菌中，能利用含碳無機(jī)物作碳源的是A光合細(xì)菌B根瘤菌C硝化細(xì)菌D乳酸菌2、培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中，必需含有的碳源和氮源是A糖、有機(jī)酸等B二氧化碳、碳酸鹽C蛋白質(zhì)D無機(jī)氮化物3、下列敘述不正確的是A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基所含的最基本物質(zhì)不相同C微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌A.CA.CB.C.第二十八頁，共八十八頁，2022年，8月28日(1)按物理狀態(tài)分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基3.分類——加入凝固劑（如瓊脂）第二十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日固體培養(yǎng)基：菌落，菌苔第三十頁，共八十八頁，2022年，8月28日液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長第三十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)(是否運(yùn)動(dòng))

第三十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日3.分類(2)按用途分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基------選擇菌種------鑒別菌種第三十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日連線下列選擇培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌：分離金黃色葡萄球菌：分離固氮菌：分離自養(yǎng)型微生物：無氮培養(yǎng)基的培養(yǎng)基不含有機(jī)物的培養(yǎng)基高濃度食鹽培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基第三十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基金屬光澤深紫色菌落第三十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日3.分類(3)按成分分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基------成分未知，來源有限------成分已知第三十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日血清中含有：①多種蛋白質(zhì)（白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等）②多種金屬離子；③激素；④促貼附物質(zhì)，如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分

人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清）。第三十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日（三）無菌技術(shù)1、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵:2、無菌技術(shù)包括的四大方面(參看教材15頁)3、消毒與滅菌(1)消毒：概念：使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物。包括芽孢和孢子嗎？方法:煮沸消毒法巴氏消毒法:如牛奶的消毒化學(xué)藥劑消毒:酒精、氯氣、石碳酸、煤酚皂溶液等紫外線消毒(不包括芽孢和孢子)防止外來雜菌的入侵第三十八頁，共八十八頁，2022年，8月28日（2）滅菌概念：使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法：a

灼燒滅菌b

干熱滅菌c

高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌微生物的接種工具(接種環(huán)、接種針)或其他金屬用具直接在火焰的充分燃燒層灼燒注意適用范圍第三十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日干熱滅菌

160－170℃；1－2h能耐高溫的需要保持干燥的物品(玻璃器皿)高壓蒸汽滅菌100kPa121℃15-30min通常用于培養(yǎng)基的滅菌第四十頁，共八十八頁，2022年，8月28日

請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手（4）注射器（5）新鮮牛奶（6）自來水（7）實(shí)驗(yàn)室的空氣思考第四十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日四、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g將上述物質(zhì)溶解后，添加自來水，定容至1000mL第四十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日1．計(jì)算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟第四十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日8．滅菌:

將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)皿用舊報(bào)紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。第四十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日倒平板技術(shù)1.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手撥出棉塞。1234第四十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日倒平板技術(shù)2.右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰。1234第四十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日倒平板技術(shù)12343.用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~

20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。第四十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日倒平板技術(shù)12344.等待平板冷卻凝固，大約需5~10min。然后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上。第四十八頁，共八十八頁，2022年，8月28日9．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。第四十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。問題討論第五十頁，共八十八頁，2022年，8月28日2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。第五十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。第五十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。第五十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算－稱量－溶化－滅菌－倒平板（二）純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法（三）將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)12h和24h后，觀察并記錄定容—調(diào)PH

第五十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日三、課題延伸：菌種的保藏1、斜面保藏（臨時(shí)保存）2、甘油保藏（長期保存）練習(xí)第五十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日倒平板第五十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？問題討論

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。第五十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。第五十八頁，共八十八頁，2022年，8月28日第四課時(shí)第五十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日1、平板劃線法第六十頁，共八十八頁，2022年，8月28日問題討論

1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？

答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。第六十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。第六十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日2.稀釋涂布平板法:(1)系列稀釋操作:第六十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日問題討論

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？

應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。第六十四頁，共八十八頁，2022年，8月28日涂布平板操作討論:涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。第六十五頁，共八十八頁，2022年，8月28日返回菌落：單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。不同的細(xì)菌的菌落特征不同菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。第六十六頁，共八十八頁，2022年，8月28日(2)碳源可作為碳源的物質(zhì)有:含碳無機(jī)物:

、

、

、

含碳有機(jī)物：蛋白質(zhì)脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同異養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為碳酸鹽碳酸氫鹽二氧化碳糖類（主要）含碳有機(jī)物（有機(jī)碳）含碳無機(jī)物（無機(jī)碳）第六十七頁，共八十八頁，2022年，8月28日(3)氮源可作為氮源的物質(zhì)有:含氮無機(jī)物：、、、含氮有機(jī)物：蛋白胨牛肉膏尿素返回固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獍睔庀跛猁}氨鹽氮?dú)獾诹隧?，共八十八頁?022年，8月28日思考:1)無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？

2)消毒和滅菌有何不同？3)為什么消毒牛奶要用巴氏消毒法?4)請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿②玻棒、試管、燒瓶和吸管③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手消毒滅菌條件溫和強(qiáng)烈作用范圍物體表面或內(nèi)部一部分,不包括芽孢和孢子物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。滅菌滅菌消毒營養(yǎng)成分不被破壞第六十九頁，共八十八頁，2022年，8月28日?思考1溶化時(shí)為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱?

答:②加瓊脂的目的是什么?答:可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中,減少誤差作為凝固劑第七十頁，共八十八頁，2022年，8月28日思考2在滅菌前,用牛皮紙、舊報(bào)紙包緊盛有培養(yǎng)基的錐形瓶的目的是什么？答:

②培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌？答:?在滅菌時(shí)能避免水蒸汽凝結(jié)時(shí)浸濕棉塞,在取出培養(yǎng)基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用不能,因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥,應(yīng)該用干熱滅菌.第七十一頁，共八十八頁，2022年，8月28日練習(xí)2:1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是A將用于微生物培養(yǎng)的器皿.接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌B接種純種細(xì)菌C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D防止外來雜菌的入侵2.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是A接種前用肥皂洗雙手,再用酒精擦拭雙手B接種前用火焰燒灼接種針C培養(yǎng)在50℃左右時(shí)擱置斜面D在酒精燈的火焰旁完成3.外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理,要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)A球菌B桿菌C螺旋菌D芽孢DCD第七十二頁，共八十八頁，2022年，8月28日4.某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地,以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容,首先對(duì)食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理,準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然后從菌種站購來各種食用菌菌種.請(qǐng)回答以下問題:

(1)對(duì)買回來的菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),首先制備試管培養(yǎng)基,寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料

。其中提供氮源的主要

是

；提供能源的主要物質(zhì)是

；瓊脂的作用是

，它不提供營養(yǎng)。(2)微生物在生長過程中對(duì)各種成分所需量不同,故制備培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的

,在燒杯加入瓊脂后要不停地

,防止

.牛肉膏、蛋白胨、水、無機(jī)鹽、瓊脂牛肉膏蛋白胨凝固劑比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂第七十三頁，共八十八頁，2022年，8月28日(3)將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加棉塞后包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入中滅菌,壓力為

,溫度為

,時(shí)間

,滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力

,將試管取出.

(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意,先向鍋內(nèi)倒入

,把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將基中原有冷空氣徹底排除后將鍋密閉.(5)從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意,接種環(huán)要在酒精燈

焰滅菌.并且待接種環(huán)

后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰附近,將接種的試管放入

℃冰箱中保藏.高壓滅菌鍋100KPa121℃自