TGDP 029-2021 草地貪夜蛾人工養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.01B16

T/GDP廣 東 省 農(nóng) 藥 協(xié) 會 團 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/GDP029—2021草地貪夜蛾人工養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)程TechnicalspecificationsforartificialbreedingofSpodopterafrugiperda2021-4-16發(fā)布 2021-4-16實施廣東省農(nóng)藥協(xié)會 發(fā)布T/GDP029—2021T/GDP029—2021II前??言GB/T1.1—20201本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省農(nóng)藥協(xié)會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、廣州市金農(nóng)科技開發(fā)有限公司、廣東宇農(nóng)生物科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)的主要起草人為：徐漢虹、張志祥、吳吉英子、黃長安、張欣倩、章婉賢、楊文。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。T/GDP029—2021T/GDP029—2021PAGEPAGE9草地貪夜蛾人工養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了草地貪夜蛾的室內(nèi)人工養(yǎng)殖技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于草地貪夜蛾卵、幼蟲、蛹、成蟲的室內(nèi)人工批量養(yǎng)殖。規(guī)范性引用文件GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》術(shù)語下列術(shù)語和定義適用于本規(guī)程。Spodopterafrugiperda(Smith)也稱秋黏蟲,隸屬于鱗翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidaeartificialbreeding人工培育和繁殖動植物的過程。本規(guī)程中特指利用人工飼料室內(nèi)養(yǎng)殖草地貪夜蛾的過程。provenanceofinsect5-10rejuvenation通過一定的方法和技術(shù)，使人工養(yǎng)殖數(shù)代后發(fā)生退化的草地貪夜蛾的各項指標(biāo)恢復(fù)到正常水平的過程。飼養(yǎng)場所飼養(yǎng)室要求飼養(yǎng)室應(yīng)配備可調(diào)節(jié)溫度、濕度、光照的設(shè)備和紫外消毒設(shè)備，并能夠保溫、保濕、通風(fēng)、透光、消毒紫外消毒在開始規(guī)?；曫B(yǎng)前，將飼養(yǎng)室內(nèi)其它養(yǎng)殖昆蟲移出，用75%酒精溶液噴灑柜臺、桌面、地面和工具后，進行紫外消毒30-60min。消毒使用的紫外線是C波紫外線，其波長范圍是200～280nm，殺菌作用最強的波段是260～265nm6020253.7nm紫外線強度不70u/cm。注意紫外消毒時人不得進入房間，需等關(guān)閉紫外后開空調(diào)或打開門窗通風(fēng)30min后方可進入。甲醛熏蒸消毒按每103用5L甲醛和1g高錳酸鉀的量，將甲醛和高錳酸鉀分別用10mL或200L的燒杯盛裝，并用雙層紗布蓋住盛裝甲醛的燒杯口。在相對濕度6524-40h，熏蒸結(jié)束后打開所有門窗通風(fēng)24h，待氣體完全散去，再用75%酒精溶液擦拭桌臺、工具后方可使用。飼養(yǎng)盒用于草地貪夜蛾初孵至2齡末幼蟲的飼養(yǎng)以及卵塊、蛹的集中放置，用長15-20cm、寬10-15cm、高5-7cm的透明塑料盒即可，需在蓋子上開10-15個直徑3mm左右的圓孔。飼養(yǎng)盒使用前應(yīng)置于高壓滅菌鍋中121℃高壓滅菌20min，或用75%酒精溶液擦拭。飼養(yǎng)管草地貪夜蛾2齡末以后的幼蟲需要單管飼養(yǎng)，用高6-9cm、直徑3-5cm的透明塑料指形管即可，需在蓋子上開2-7個直徑3mm左右的圓孔。飼養(yǎng)管使用前應(yīng)置于高壓滅菌鍋中121℃高壓滅菌20min，或用75%酒精溶液浸泡1min后晾干。飼養(yǎng)籠草地貪夜蛾成蟲的飼養(yǎng)需用到干凈的長40-80cm、寬40-60cm、高40-60cm的飼養(yǎng)籠。飼養(yǎng)籠其中一個側(cè)面設(shè)置一個可活動的粘貼門（長10-20cm、寬10-20cm），以方便放置玉米葉片、替換食物和收集卵塊，其余各側(cè)面為80-100目紗網(wǎng)，頂部和底部為金屬板或木板。一個飼養(yǎng)籠可飼養(yǎng)40-80頭成蟲。飼養(yǎng)籠使用前用75%酒精溶液擦拭。飼養(yǎng)筒草地貪夜蛾成蟲飼養(yǎng)量不大的情況下，可將干凈的A4紙卷成紙筒（高21cm、直徑9cm），并在兩端蓋上塑料培養(yǎng)皿固定，豎直放置。每個飼養(yǎng)筒可放置1-3頭雄蛹和1-3頭雌蛹，羽化后受精交配產(chǎn)卵。其他工具、儀器和其他相關(guān)用品成蟲飼料器皿1-210%蜂蜜水的脫（鋪滿培養(yǎng)皿底部移動工具不可直接用手接觸蟲體，可用消毒后的鑷子或毛筆移動卵塊、幼蟲和蛹。毛筆或鑷子使用后用75%酒精溶液浸泡1min121℃高壓滅菌儀器電子天平、高速打碎機、高壓滅菌鍋、超凈臺、電磁爐、鍋等。其他用品人工飼料配方成蟲人工飼料（10蜂蜜水脫脂棉）草地貪夜蛾蛹羽化將脫脂棉浸入10%蜂蜜水中，均勻地浸透脫脂棉，以拿起脫脂棉不滴液為宜。幼蟲人工飼料飼料配方表1 草地貪夜蛾人工飼料配方表成分用量成分用量黃豆粉(g) Soymealpowder125肌醇(g) Inose0.1玉米粉(g) Maizepowder225山梨酸(g) Sorbicacid6酵母粉(g) Yeastpowder40氯化膽堿(g) Cholinechloride3瓊脂(g) Agar30復(fù)合維生素(g) Multi-vitamins7干酪素(g) Casein20對羥基苯甲酸甲酯(g) Methylparaben7.5膽固醇(g) Cholesterol0.6蒸餾水(ml) Distilledwater1500飼料制作按表1配方分別稱取黃豆粉和玉米粉于飼料盆中,加入500mL準(zhǔn)確稱取30g瓊脂于鍋中，加入1000mL蒸餾水，在電磁爐上加熱并勻速地攪拌。待瓊脂在水中完全溶化呈透明狀時停止加熱,加入上一步驟中已滅菌的飼料勻速攪拌。60cm厚的飼料，蓋上蓋子，并用保鮮膜封住蓋子上的圓孔，放4℃冰箱冷藏，作為初孵幼蟲的飼養(yǎng)場所備用。飼料從冰箱取出后應(yīng)先等其溫度恢復(fù)至室溫后再使用。人工養(yǎng)殖過程養(yǎng)殖條件16h∶8h、光照強度8000lx。卵的集中放置塊，沿著卵塊邊緣將玉米葉片、保鮮膜或褶皺紅色塑料紙剪下，用鑷子夾住邊緣，將卵塊置于低濃度（0.5%-1%）的次氯酸鈉水溶液中浸泡5s左右取出，用濾紙吸干表面，置于培養(yǎng)皿中，在干燥、陰涼、幼蟲飼養(yǎng)初孵幼蟲的飼養(yǎng)2草地貪夜蛾幼蟲生長至2齡末以后需單管飼養(yǎng)，用消毒的毛筆分裝到消毒的飼養(yǎng)管中，每管一頭，并放置一塊長2-3cm、寬1-2cm、高3-4cm的飼料塊，蓋口封上一層高溫滅菌的廚房紙，確保廚房紙完全蓋住蓋口，蓋上已開好圓孔的蓋。持續(xù)喂養(yǎng)，直到老熟。蛹的集中放置待老熟幼蟲化蛹，隔2天再將蛹挑出，用4%甲醛水溶液浸泡10s左右，進行體表消毒，再用滅菌水將蛹體洗凈后放置于塑料培養(yǎng)皿中，于超凈臺上室溫將蛹晾干。晾干后放入消毒的飼養(yǎng)盒中，每盒放20-40頭。蛹應(yīng)平鋪盒底，不能堆放。成蟲的飼養(yǎng)待蛹變?yōu)榧t褐色即將羽化時，將1-2個盛裝蛹的飼養(yǎng)盒放入飼養(yǎng)籠內(nèi)待其羽化。羽化前先在飼養(yǎng)籠里放入2-3個裝有吸足10%蜂蜜水脫脂棉的培養(yǎng)皿（脫脂棉鋪滿整個培養(yǎng)皿底部），供成蟲食用。在開始羽化后的前5-6天，每天換入長約10cm的新鮮玉米葉片、保鮮膜或褶皺的紅色塑料紙供成蟲產(chǎn)卵。注意每天更換一次糖水和玉米葉片、保鮮膜或褶皺的紅色塑料紙，收集卵塊并清理死成蟲。復(fù)壯26℃±0.5655%、光周期L∶D=16h∶8h、光照強度8000lx的條件下培育，孵化后選擇體壯、個頭大、活動能力強的5-6齡幼蟲作為種蟲，淘汰體瘦、個頭小、活動能力弱或反應(yīng)遲鈍的幼蟲、蛹和成蟲。附 錄 A（資料性附錄）草地貪夜蛾形態(tài)鑒別特征卵圖A.1 草地貪夜蛾卵（章婉賢，2019）幼蟲草地貪夜蛾1齡幼蟲體色為黃色或綠色，頭部青黑色，體長1.7mm左右。2齡幼蟲頭部由青黑色變?yōu)?4個長有剛毛的黑色或黑褐色斑點，從3齡開始，第8、9腹節(jié)背面的斑點顯著大于其他各節(jié)斑點，并表現(xiàn)出特有的排8腹節(jié)49腹節(jié)的4Y”形紋路。圖A.2 草地貪夜蛾幼蟲不同齡期《草地貪夜蛾識別與應(yīng)急防治技術(shù)掛圖，2019）圖A.3 草地貪夜蛾幼蟲（馬千里，2019）蛹14-18mm，寬2至7腹節(jié)氣門呈橢圓形，開口向后方，圍氣門片黑色，第8腹節(jié)兩側(cè)氣門閉合。第5至7腹節(jié)可自由活動，后緣顏色較深，第4至7腹節(jié)前緣具磨砂狀刻點。腹部末節(jié)具兩根臀棘，臀棘基部較粗，分別向外側(cè)延伸，呈“八”字形，臀棘端部無倒鉤或彎曲。圖A.4 草地貪夜蛾蛹《草地貪夜蛾識別與應(yīng)急防治技術(shù)掛圖，2019）成蟲16-8mm10.-