艾滋病病毒研究現(xiàn)狀

艾滋病病毒研究現(xiàn)狀2023/2/13前言

在當今社會，嚴重危害人類健康、令人談之色變的傳染性疾病莫過于艾滋病。艾滋病的全名為“獲得性免疫缺陷綜合征”(acquiredimmunodeficiency

syndrome，AIDS)，是由人類免疫缺陷病毒(human

immunodefieiencyvirus，HIV)感染引起的全身性免疫功能喪失綜合征。自美國1981年診斷出首例艾滋病病人以來，艾滋病病毒在全球范圍內(nèi)的傳播速度驚人，已有200余個國家和地區(qū)受到艾滋病的嚴重威脅。因此，國內(nèi)外在艾滋病毒的研究上一直投放大量人力財力，非常重視。2023/2/13HIV結(jié)構(gòu)模式圖2023/2/13HIV的生命周期2023/2/13HIV的生命周期和抗HIV藥物靶向目標2023/2/13根據(jù)HIV-1的生命周期，目前已應(yīng)用或正在研制的抗艾滋病藥物主要針對病毒復制過程的8個重要環(huán)節(jié)：1）HIV對宿主細胞的依附——進入抑制劑；2）輔受體相互作用——進入抑制劑；3）HIV與細胞的融合——進入抑制劑；4）病毒RNA的逆轉(zhuǎn)錄——核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)；5）病毒RNA的逆轉(zhuǎn)錄——非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制(NNRTIs)；6）前病毒DNA的整合——整合酶抑制劑；7）DNA的轉(zhuǎn)錄；8）病毒蛋白質(zhì)的表達，病毒的組裝，以及病毒粒子的發(fā)芽和成熟——蛋白酶抑制劑(PIs)2023/2/13

這些環(huán)節(jié)中所涉及到的酶或受體就成為抗艾滋病藥物設(shè)計的靶向目標，例如病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶、蛋白酶、整合酶、多聚酶、糖蛋白gp41和gpl20，以及宿主細胞的CD4受體和輔受體CCR5和CXCR4等。2023/2/13目前艾滋病的治療方法①、精選出抗病毒中醫(yī)藥隊；②、抗基因突變藥隊及控制轉(zhuǎn)錄因素解胎毒；③、激發(fā)血細胞抗原體系；

A、提高整體免疫水平。

B、多向免疫調(diào)節(jié)。

C、努力增強人體T細胞，消除產(chǎn)生胸腺萎縮因素二者并重。

D、增強吞噬細胞祖系和保護吞噬細胞不受破壞。

E、誘發(fā)和增生人體干擾素。④、補髓并解骨髓中毒，促多能干細胞生成，增強解毒功能，使免疫系統(tǒng)功能有總的源泉和效能發(fā)揮，加強吞噬特異抗原特異突變細胞能力。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀當前用于治療HIV感染的藥物只能控制病毒復制，不能徹底清除病毒，而且抗HIV藥物價格昂貴，具有較嚴重的副作用，藥物使用不當亦會誘發(fā)耐藥株的產(chǎn)生。因此，研制安全、有效的疫苗是控制HIV傳播的重要手段之一。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀疫苗分預(yù)防疫苗和治療疫苗，預(yù)防疫苗的作用是防止感染病毒，針對的是未感染人群。而治療疫苗的作用，則是誘導人體免疫系統(tǒng)發(fā)揮抵抗病毒對人體的損傷，或者增強免疫系統(tǒng)對病毒的抵抗能力，針對的是已經(jīng)感染病毒的人群。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀目前HIV疫苗的研究包括采用傳統(tǒng)疫苗技術(shù)研制的減毒活疫苗和滅活疫苗以及采用現(xiàn)代生物技術(shù)研制的重組蛋白疫苗、DNA疫苗、病毒載體疫苗等，有些疫苗已完成了Ⅲ期臨床研究，有些正在進行Ⅰ或Ⅱ期臨床研究，但大部分仍處在實驗室研究階段。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀一、減毒活疫苗

到目前為止，進行過動物實驗的免疫缺陷病毒疫苗中，減毒活疫苗的保護效果是最好的。早期對SIV的減毒集中于nef基因的部分或全部刪除，使用nef基因缺失的SIV減毒株免疫恒河猴，隨后用野毒株感染恒河猴，較短時期內(nèi)不能檢測到感染。減毒SIV疫苗還具有一定程度的交叉保護能力。

2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀

但經(jīng)過長期觀察，試驗動物全部感染減毒株，并發(fā)展為AIDS樣癥狀，分析病毒基因發(fā)現(xiàn)nef基因修復了12個核苷酸的缺失研究者刪除vpr基因經(jīng)過長期追蹤觀察,也存在同樣的問題。AnitaMilicic等人對nef的三個保守區(qū)進行突變。結(jié)果表明，突變后的基因?qū)Φ鞍酌阁w的表位加工有很大的影響。因此，HIV-1減毒活疫苗的安全性問題制約了它的發(fā)展。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀二、滅活疫苗

Murphey-Corb等使用5%～8%甲醛溶液滅活的SIV病毒免疫9只獼猴，在10倍SID50(50%simianinfectiousdose)劑量滅活病毒原始株攻毒中，全部免于感染。但當使用其他毒株攻擊時，幾乎沒有保護效果，分析表明保護作用與抗體反應(yīng)有關(guān)。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀許多研究人員指出在以上實驗中使用的滅活病毒和攻擊病毒為在人T細胞中培養(yǎng)的SIV，保護作用可能與人源HLAI類分子誘發(fā)的抗體有關(guān)。使用滅活疫苗在HIV-1感染者中進行的早期人體試驗也沒有取得預(yù)防感染和控制病毒復制的效果，同時由于沒有確證病毒滅活完全性的手段，難以保證不會發(fā)生由于病毒滅活不完全而導致感染的情況，滅活疫苗的研究受到了很大的限制。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀三、蛋白疫苗

HIV疫苗設(shè)計的主要困難在于鑒別引起中和抗體的異常表位。目前的研究表明，HIV-1的糖類是主要的抵抗宿主攻擊的物質(zhì)，那么疫苗的設(shè)計就可以針對這些糖類，這個想法通過對HIV-1糖蛋白gp120上的寡聚甘露糖簇的研究得到實，gp120是廣泛的中和抗體2G12的表位，這項研究表明HIV疫苗的研究朝著糖蛋白疫苗的方向發(fā)展著。

2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀

HIV膜區(qū)蛋白的結(jié)構(gòu)非常復雜，既含有復雜的立體構(gòu)像，中和性抗體多為構(gòu)像依賴性抗體，又含有多糖基化位點，過多的糖基化可能會掩蓋中和抗體位點的暴露，而且HIV自然感染機體后所誘導的中和抗體普遍較弱。

這些現(xiàn)象提示單純模仿HIV膜蛋白天然的抗原結(jié)構(gòu)研制的疫苗將不會產(chǎn)生較強的而且廣譜的中和抗體。因此，目前國際上研究的重點是根據(jù)HIV膜蛋白的基本特點設(shè)計新的免疫原，或?qū)μ烊坏哪さ鞍走M行改造，其目的是誘導機體產(chǎn)生廣譜而且較強的中和抗體。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀四、DNA疫苗

HIV是高度變異的，對如此高變異的病毒產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng)是艾滋病疫苗的一個發(fā)展方向。另一個難題是鑒定保護性免疫。近來的疫苗主要嘗試用重組的核心病毒序列，在小范圍內(nèi)突變而成。自體病毒來源的COT或CON序列(HIV-1env變異體編碼廣泛的多樣性)對評價抗病毒反應(yīng)的敏感性可能是有用的。近來科學家發(fā)現(xiàn)HIV制造的蛋白質(zhì)，稱為Vif，這種蛋白質(zhì)可以防止宿主的攻擊。

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NathanielLandau等發(fā)現(xiàn)了Vif的工作原理。Vif可以制約人體內(nèi)的一種稱為APOBEC3G的蛋白質(zhì)。人體內(nèi)，如果沒有Vif，APOBEC3G蛋白質(zhì)可以侵入病毒，取出病毒中的部分DNA的片段，這樣病毒就不能起作用了。但是，Vif可以阻止APOBEC3G工作。這對于研究抗HIV病毒藥品和疫苗有巨大的參考價值。

HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀2023/2/13

DNA疫苗進入細胞核內(nèi)部表達所攜帶的外源基因，在誘發(fā)細胞免疫反應(yīng)方面具有優(yōu)勢。HIVDNA疫苗研究中多采用包括多個病毒基因的方式來增加細胞免疫反應(yīng)的強度和廣泛性。如Fuller等使用gag-pol-env的DNA疫苗黏膜途徑免疫獼猴，在異源SHIV-1黏膜攻擊中，可保護4/7只獼猴免于感染。質(zhì)粒DNA進入細胞核表達外源蛋白，能進行正確的翻譯后加工并保持天然構(gòu)像，在誘發(fā)體液免疫反應(yīng)方面具有特殊優(yōu)勢。HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀五、病毒載體疫苗

為了增加外源基因進入宿主體細胞的能力和表達效率，增加疫苗誘發(fā)的免疫反應(yīng)強度，研究者發(fā)展了多種活病毒載體疫苗。其中最具代表性的是痘病毒(Vacciniavirus，VAC)載體。從安全性和免疫效果綜合考慮，MVA為其中的佼佼者，MVA為Ankara株痘病毒在雞胚細胞中經(jīng)過570次傳代，獲得丟失六處共長達10kb基因片斷限制了其宿主細胞譜系的減毒株。不同于一些保留較強復制能力的痘病毒減毒株通過刪除病毒的細胞因子(如IFN-γ)受體為減毒手段，并以宿主能產(chǎn)生足夠強度的特異性免疫反應(yīng)為前提來確保安全性。2023/2/13

MVA在人體內(nèi)復制水平很低，幾乎檢測不到。MVA多種途徑接種放射線照射和抗T細胞抗體清除T淋巴細胞的獼猴，雖然在動物全身多個器官檢出了MVA基因，但沒有分離到活病毒顆粒。同時，MVA可誘生IFN-γ、TNF-α等細胞因子，但它自身不表達IFN和TNF可溶性受體，從而可間接增強細胞免疫反應(yīng)。

使用rMVA-gag-pol-env89.6P免疫恒河猴，SHIV89.6P攻毒后，對照組動物出現(xiàn)明顯的AIDS樣癥狀，攻毒后168d半數(shù)死亡，免疫組動物表現(xiàn)出強的Gag-特異性細胞免疫反應(yīng)和高滴度的中和抗體，到168d觀察終點，CD4+T淋巴細胞保持正常水平，病毒載量控制在檢出范圍(500-1000拷貝/mL)以下，無1例出現(xiàn)AIDS樣癥狀。

現(xiàn)代探針技術(shù)帶著潛在的可產(chǎn)生保護性細胞免疫反應(yīng)的優(yōu)勢，已經(jīng)在臨床試驗上得到了證實。腺病毒探針的出現(xiàn)肯定了這種說法，而泡沫病毒在人體內(nèi)引起有效的細胞免疫反應(yīng)沒有得到證實。

2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀六、DNA-病毒載體疫苗聯(lián)合免疫

動物實驗表明，已經(jīng)存在的針對載體病毒的免疫反應(yīng)能夠嚴重影響免疫效果。以Prime-Boost方式,使用攜帶gag-pol-env的DNA/rMVA和rMVA/rMVA同時免疫獼猴，rMVA/rMVA方式免疫的獼猴其CTL反應(yīng)強度比DNA/rMVA方式低10倍。以腺病毒作為載體的疫苗中，這種現(xiàn)象比MVA還要明顯。使用DNA-活病毒載體疫苗,以Prime-Boost方式免疫，可以避免這種現(xiàn)象。2023/2/13HIV疫苗實驗研究的現(xiàn)狀七、治療性疫苗

艾滋病被稱為“世紀瘟疫”，人類至今尚未找到醫(yī)治這一頑癥的理想方法?，F(xiàn)在普遍采用的“雞尾酒”療法，就是讓患者服用抗逆轉(zhuǎn)錄酶等抗病毒藥物，以控制病情的進一步發(fā)展，但它無法完全殺滅病毒，而且還會產(chǎn)生毒副作用。用“治療疫苗”抑制艾滋病毒的新思路的原理是：既然艾滋病患者最主要的問題是免疫功能的喪失，那么只要找到一種能夠有效觸發(fā)并恢復其自身免疫能力的方法，病情應(yīng)該可以得到控制。艾滋病研究新消息2023/2/13感染HIV的T細胞（紅色為HIV病毒，綠色為宿主細胞）

加拿大和美國研究人員21日在英國《自然—醫(yī)學》發(fā)表論文稱，他們發(fā)現(xiàn)了可能會徹底治愈艾滋病的新方法，艾滋病將有可能不再是不治之癥。治愈艾滋病的關(guān)鍵在于找到艾滋病病毒潛伏池。研究人員說，他們找到了這種潛伏池，即記憶T細胞。他們提出了結(jié)合化學療法和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法來治療艾滋病的新方法，其中，抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法殺死人體內(nèi)大部分艾滋病病毒，而化學療法則專門針對“躲藏”在記憶T細胞中的艾滋病病毒，這使得艾滋病病毒在人體中再無藏身之地。HIV的新藏身之處2023/2/13

美國《科學》雜志發(fā)表了由浙江大學教授于曉方領(lǐng)導的科研小組的研究成果，揭示了艾滋病發(fā)病的新機理。該研究在國際上首先發(fā)現(xiàn)一組使HIV避過人體細胞天然防御系統(tǒng)而在人體細胞內(nèi)大量復制的蛋白，闡明了HIV突破宿主細胞防御系統(tǒng)分子機制，并提出了新的HIV防治策略。

這組蛋白的發(fā)現(xiàn)對于了解HIV如何戰(zhàn)勝宿主防御系統(tǒng)至為關(guān)鍵，有望成為HIV治療的新靶點，從而為預(yù)防和治療艾滋病提供了一種全新的理念和途徑，具有十分重大的理論意義和實際應(yīng)用價值。艾滋病病毒含有一種病毒感染因子，該因子通過一組蛋白復合體，增加了艾滋病的感染機會。一系列實驗發(fā)現(xiàn)，只要阻斷病毒感染因子和泛素連接酶的共同作用，艾滋病的感染率就降低了90％。這個新發(fā)現(xiàn)有可能開發(fā)出防治HIV感染的新藥和新療法。HIV突破宿主細胞防御系統(tǒng)分子機制2023/2/13

美國科研人員最近利用基因技術(shù)成功遏制老鼠體內(nèi)的艾滋病病毒，這一方法為控制艾滋病病毒增殖提供了新思路。

這一技術(shù)的關(guān)鍵在于負責指導合成CCR5蛋白的一種基因。CCR5蛋白是艾滋病病毒入侵機體細胞的“幫兇”?？蒲腥藛T很早就發(fā)現(xiàn)，如果CCR5蛋白基因發(fā)生有利的變異，那么人體就可能出現(xiàn)針對艾滋病病毒的免疫抵抗力。美國南加州大學的葆拉·坎農(nóng)等人在新一期英國《自然-生物工藝學》雜志上報告說，他們用老鼠做實驗時，借助一種名為cutter的酶，刪除了未成熟造血細胞中的CCR5蛋白基因，因此這些細胞成熟分化時不會產(chǎn)生CCR5蛋白。研究人員把這些細胞注入感染了艾滋病病毒的老鼠體內(nèi)，并把它們與感染艾滋病病毒的普通老鼠進行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)12周后在接受注射的老鼠體內(nèi)，免疫T細胞水平有所恢復，艾滋病病毒含量保持在較低水平。而對照組老鼠的免疫系統(tǒng)能力減弱，艾滋病病毒大量分裂增殖。基因技術(shù)遏制艾滋病毒2023/2/13“陰性艾滋病”的恐慌

日前傳言內(nèi)地多個省市發(fā)現(xiàn)一種“陰性艾滋病”的神秘病毒，據(jù)說這些患者出現(xiàn)類似艾滋病的癥狀，但是檢驗結(jié)果卻呈陰性，而這個人群大多有過高危性行為。

“陰性艾滋病”患者出現(xiàn)了淋巴腫脹、皮下出血、舌苔生絨毛等和艾滋病患者極為相像的癥狀，還有免疫力下降、頭疼等其他表現(xiàn)。但是，經(jīng)過多次HIV檢查卻仍然顯示陰性，臨床報告顯示他們是“無明顯的器質(zhì)性病變”，因此他們自稱是“艾滋病陰性感染者”。2023/2/13傳言一：“陰性艾滋病”是艾滋病的變異傳言二：“陰性艾滋病”是一種新病毒傳言三：“陰性艾滋病”是傳染病傳言四：“陰性艾滋病”無法根治，可致死關(guān)于“陰性艾滋病”的四大傳言2023/2/13傳言一：“陰性艾滋病”是艾滋病的變異【檢測結(jié)果可排除該人群感染艾滋病病毒或變種】

2009年7月，中國疾控中心開始啟動相關(guān)調(diào)查工作，至2010年1月，招募了59名自愿接受調(diào)查的“自述疑似艾滋病感染者”進行了第一次調(diào)查。調(diào)查結(jié)果表明，該人群艾滋病抗體檢測均為陰性，未檢測到相關(guān)致病病原體，缺乏新病毒或未知病原體感染的證據(jù)?？紤]到調(diào)