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文檔簡(jiǎn)介
植物組織培養(yǎng)的原理及特點(diǎn)第一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
1.植物細(xì)胞的全能性(totipotency)
及全能性的實(shí)現(xiàn)
根據(jù)細(xì)胞理論,細(xì)胞是生物有機(jī)體的基本結(jié)構(gòu)單位,特別是植物細(xì)胞又是在生理上,發(fā)育上具有潛在全能性的單位。所謂細(xì)胞全能性:是指植物的每個(gè)細(xì)胞都具有該植物的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的能力。換句話說(shuō),細(xì)胞的全能性是一個(gè)植物細(xì)胞產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力,不管是性細(xì)胞還是體細(xì)胞,在特定環(huán)境下仍能進(jìn)行表達(dá),而產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。第二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日植物細(xì)胞的全能性的具體含義
在植物的生長(zhǎng)發(fā)育中,從一個(gè)受精卵,以后可產(chǎn)生具有完整形態(tài)和結(jié)構(gòu)機(jī)能的植株,這是全能性,是該受精卵具有該物種全部遺傳信息的表現(xiàn)。植物的體細(xì)胞是從合子的有絲分裂產(chǎn)生的,也具有全能性,具備著遺傳信息的傳遞,轉(zhuǎn)錄和翻譯的能力。在一個(gè)完整的植株上,某部分的體細(xì)胞只表現(xiàn)一定的形態(tài),承受一定的功能,這是由于它們受到具體器官和組織的束縛,但其遺傳潛力并沒(méi)有喪失.
差異:①受精卵的全能性最高。②受精卵分化后的細(xì)胞中,體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞的低。
第三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
植物細(xì)胞在什么條件下表現(xiàn)出全能性呢?
一旦脫離原來(lái)所在的器官和組織,處于離體狀態(tài)時(shí),在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下,就可能表現(xiàn)出全能性,發(fā)育成完整的植株。人工條件下實(shí)現(xiàn)的這一過(guò)程,就是植物組織培養(yǎng)。生物體內(nèi)的細(xì)胞為什么沒(méi)有表現(xiàn)出全能性,而是分化成不同的組織、器官?
基因在特定時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果。第四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日高等植物是由無(wú)數(shù)不同形態(tài)、不同生理生化特點(diǎn)及執(zhí)行不同功能的細(xì)胞構(gòu)成:一部分細(xì)胞繼續(xù)保持分生能力,如分生組織;另一部分細(xì)胞逐漸分化失去分生能力而執(zhí)行其他功能,處于不分裂狀態(tài),如永久組織。植物組織培養(yǎng)不僅能使處于分生狀態(tài)的細(xì)胞繼續(xù)保持分裂能力,同時(shí)也可使永久組織恢復(fù)分裂能力,如同生殖細(xì)胞或合子胚一樣。一個(gè)已分化的細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性:首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)程,然后再經(jīng)歷分化過(guò)程。植物細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn)第五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
植物細(xì)胞的脫分化
一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象叫脫分化。即原已分化并具有一定功能的植物細(xì)胞脫離原有軌道,失去原有狀態(tài)和功能而回復(fù)到能分裂和增殖的愈傷組織狀態(tài),這就是植物組織培養(yǎng)中的去分化或脫分化過(guò)程。組織培養(yǎng)中,利用特定的條件,促進(jìn)細(xì)胞脫分化,脫分化(dedifferentiation):第六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
脫分化過(guò)程的難易與植物種類、組織和細(xì)胞狀態(tài)有關(guān)。一般單子葉植物和裸子植物比雙子葉植物難;成年細(xì)胞和組織比幼年細(xì)胞和組織難;單倍體細(xì)胞比二倍體細(xì)胞難。植物細(xì)胞的脫分化的難易第七頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日植物細(xì)胞的再分化
把原已分化的細(xì)胞,經(jīng)脫分化培養(yǎng)后再次進(jìn)行分化的現(xiàn)象叫再分化。
再分化有兩種方式:一種是器官發(fā)生,一種是胚胎發(fā)生。在大多數(shù)情況下,再分化過(guò)程是在愈傷組織細(xì)胞中發(fā)生的,但在有些情況下,再分化可以直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞中,無(wú)須經(jīng)歷愈傷組織階段。再分化(redifferentiation):第八頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
植物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)全能性的過(guò)程
經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下具有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的能力。切取的植物組織、器官和細(xì)胞,在人工培養(yǎng)條件下,可促進(jìn)脫分化,產(chǎn)生愈傷組織,然后經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng),通過(guò)人為控制又可產(chǎn)生分化,即再分化,產(chǎn)生分生組織,繼而進(jìn)行形態(tài)建成,最終分化出各器官,產(chǎn)生完整植株。第九頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日?qǐng)D示:備注:在有些情況下,再分化也可不經(jīng)愈傷組織階段,而直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞。外植體愈傷組織生長(zhǎng)點(diǎn)根、莖、葉或胚狀體小植株脫分化再分化生長(zhǎng)第十頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
小結(jié)應(yīng)當(dāng)著重指出的是,對(duì)于植物細(xì)胞來(lái)說(shuō),全能性是一個(gè)相當(dāng)基本的屬性,但全能性只是一種可能性.要把這種可能性變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)性必須滿足兩個(gè)條件:一是要把這些細(xì)胞從植物體其余部分的抑制性的影響下解脫出來(lái),即處于離體狀態(tài);二是要給予它們適當(dāng)?shù)拇碳?,即給予它們一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并使它們受到一定的激素的作用.一個(gè)已分化的細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性:首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)程,然后再經(jīng)歷分化過(guò)程。第十一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日2.植物離體分化過(guò)程的類型
1978年,羅士韋根據(jù)植物組織培養(yǎng)再分化過(guò)程的不同,將其劃分為以下五種類型:
①無(wú)菌短枝型②叢生芽增殖型③器官發(fā)生型④胚狀體發(fā)生型⑤原球莖發(fā)生型第十二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日具體做法是:將待繁殖的材料剪成帶一葉的單芽莖段,轉(zhuǎn)入成苗培養(yǎng)基,一定時(shí)間后可成苗,再剪成帶一葉的單芽莖段,繼代又可成苗。特點(diǎn):該方法一次成苗,遺傳性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)過(guò)程簡(jiǎn)單,適用范圍大,移栽容易成活。實(shí)例:這是葡萄試管苗繁殖最常用的,也是其它方法最后階段的常用方法,但繁殖初期速度較慢。
2.1無(wú)菌短枝型第十三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日無(wú)菌短枝切割第十四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日2.2叢生芽增殖型方法:莖尖或初代培養(yǎng)的芽,在適宜的培養(yǎng)基上誘導(dǎo),不斷發(fā)生腋芽,而成叢生芽,然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基,誘導(dǎo)生根成苗,擴(kuò)大繁殖。特點(diǎn):這種方法從芽到芽,遺傳性狀穩(wěn)定,繁殖速度快,是莖尖培養(yǎng)和脫毒苗初期必由之路,但過(guò)程較復(fù)雜,品種之間的差異較大。第十五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日芽(單芽、叢芽)第十六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
叢生芽分離第十七頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日頂芽腋芽叢生芽的發(fā)育I第十八頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日微型扦插頂芽CTK刺激帶芽的莖切段側(cè)芽接種培養(yǎng)形成的莖梢節(jié)長(zhǎng),直立向上呈小灌木叢狀獲得較多嫩莖梢莖段培養(yǎng)繼代擴(kuò)繁試管苗生根培養(yǎng)無(wú)愈傷組織產(chǎn)生初代繼代叢生芽的發(fā)育II第十九頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
2.3器官發(fā)生型方法:從植物葉片、子房、花藥、胚珠、葉柄等,誘導(dǎo)出愈傷組織,從愈傷組織上誘導(dǎo)不定芽,進(jìn)一步發(fā)育,形成完整植株特點(diǎn):這種方法從原來(lái)成熟組織上重新誘導(dǎo)出分生組織,發(fā)生單芽或叢生芽,可擴(kuò)大繁殖,也可創(chuàng)造有益突變體體,但可能會(huì)發(fā)生變異,用于良種繁殖時(shí)應(yīng)注意。第二十頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日愈傷組織培養(yǎng)愈傷組織具分裂能力的細(xì)胞已分化細(xì)胞脫分化繼代愈傷組織分裂誘導(dǎo)期分裂期形成期第二十一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日愈傷組織誘導(dǎo)期
誘導(dǎo)期是外植體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備時(shí)期,是愈傷組織形成的起點(diǎn)。
特點(diǎn):處在靜止?fàn)顟B(tài)的成熟細(xì)胞通過(guò)一些刺激因素和激素的誘導(dǎo)作用,使其細(xì)胞內(nèi)合成代謝活動(dòng)加強(qiáng),迅速進(jìn)行蛋白質(zhì)和核酸物質(zhì)的合成,RNA含量迅速增加,細(xì)胞核體積明顯增大,細(xì)胞大小變化不大。誘導(dǎo)期的長(zhǎng)短,因植物種類、外植體的生理狀況和外部因素而異。外源生長(zhǎng)物質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)細(xì)胞開始分裂效果最好。最常用的有2,4-D、NAA、IAA和細(xì)胞分裂素等。第二十二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日愈傷組織分裂期
指細(xì)胞通過(guò)一分為二的分裂,不斷增生子細(xì)胞,即發(fā)生脫分化的過(guò)程。特征:細(xì)胞分裂快,細(xì)胞體積迅速變?。?dāng)細(xì)胞體積最小,細(xì)胞核和核仁最大,細(xì)胞內(nèi)無(wú)大液泡,RNA含量最高時(shí),標(biāo)志細(xì)胞分裂進(jìn)入了高峰期.第二十三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日愈傷組織形成期形成期是指外植體細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)期和分裂期后形成無(wú)序結(jié)構(gòu)的愈傷組織。特征:細(xì)胞的平均大小相對(duì)穩(wěn)定,不再減?。?xì)胞分裂由原來(lái)局限在組織外緣的平周分裂轉(zhuǎn)為組織內(nèi)部的較深層局部細(xì)胞的分裂,形成瘤狀結(jié)構(gòu)的外表和內(nèi)部分化;出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。第二十四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日脫分化分化愈傷組織芽、芽叢切割芽叢繼代培養(yǎng)大量芽叢試管苗生根培養(yǎng)外植體初代繼代不定芽的發(fā)育①②第二十五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
2.4胚狀體發(fā)生型
指由培養(yǎng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化出具胚芽、胚根、胚軸的胚狀結(jié)構(gòu),進(jìn)而長(zhǎng)成完整植株。我們把由愈傷組織的類似薄壁組織細(xì)胞不經(jīng)有性過(guò)程而直接產(chǎn)生類似胚的這一結(jié)構(gòu),稱為胚狀體。胚狀體(somaticembryo):第二十六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日胚狀體在外觀上,這種方式和不定芽均有光滑、圓形突起的形狀。第二十七頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日外植體愈傷組織小孢子游離單細(xì)胞器官
胚狀體
試管苗體細(xì)胞胚狀體的發(fā)育第二十八頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日特點(diǎn):這種胚狀體具有數(shù)量多,結(jié)構(gòu)完整,易成苗和繁殖速度快的特點(diǎn),是植物離體無(wú)性繁殖最快的方法,也是人工種子和細(xì)胞工程的前提,受到國(guó)內(nèi)外的普遍重視。注意:能誘導(dǎo)胚狀體的植物種類及品種還不多,其發(fā)生機(jī)理尚不清楚,有的還存在一定變異,應(yīng)先經(jīng)試驗(yàn)后才能在生產(chǎn)上大量應(yīng)用。胚狀體發(fā)生型特點(diǎn)第二十九頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日原球莖特點(diǎn):縮短的、呈珠粒狀的、由胚性細(xì)胞組成的、類似嫩莖的器官。2.5原球莖發(fā)生型第三十頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
原球莖發(fā)生型
大部分蘭花的培養(yǎng)屬于這一類型。原球莖是一種類胚組織,培養(yǎng)蘭花類的莖尖或腋芽可直接產(chǎn)生原球莖,繼而分化成植株,也可以繼代增殖產(chǎn)生新的原球莖,這取決于培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基。第三十一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日3.植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)第三十二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日3.1培養(yǎng)材料經(jīng)濟(jì)3.2培養(yǎng)條件可人為控制3.3生長(zhǎng)周期短,繁殖率高3.4管理方便,利于自動(dòng)化控制植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)第三十三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日3.1培養(yǎng)材料經(jīng)濟(jì)
由于植物細(xì)胞具有全能性,故單個(gè)或小塊組織細(xì)胞培養(yǎng)即可再生植株,這在研究上有重大價(jià)值。在生產(chǎn)實(shí)踐中,由于取材少,培養(yǎng)效果好,對(duì)于新品種的推廣和良種復(fù)壯更新,都有重大的實(shí)踐意義。第三十四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日3.2培養(yǎng)條件可以人為控制
組織培養(yǎng)采用的植物材料完全是在人為提供的培養(yǎng)基質(zhì)和小氣候環(huán)境條件下進(jìn)行生長(zhǎng),擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災(zāi)害性氣候的不利影響,且條件均一,對(duì)植物生長(zhǎng)極為有利,便于穩(wěn)定地進(jìn)行周年培養(yǎng)生產(chǎn)。第三十五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日培養(yǎng)條件可以人為加以控制第三十六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
3.3生長(zhǎng)周期短,繁殖率高
植物組織培養(yǎng)是由于人為控制培養(yǎng)條件,根據(jù)不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養(yǎng)條件,因此生長(zhǎng)較快。另外,植株也比較小,往往20—30d為一個(gè)周期。所以,雖然植物組織培養(yǎng)需要一定設(shè)備及能源消耗,但由于植物材料能按幾何級(jí)數(shù)繁殖生產(chǎn),故總體來(lái)說(shuō)成本低廉,且能及時(shí)提供規(guī)格一致的優(yōu)質(zhì)種苗或脫病毒種苗。第三十七頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日繁殖系數(shù)大,培養(yǎng)周期短第三十八頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日3.4管理方便,利于工廠化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制
植物組織培養(yǎng)是在一定的場(chǎng)所和環(huán)境下,人為提供一定的溫度、光照、濕度、營(yíng)養(yǎng)、激素等條件,既利于高度集約化和高密度工廠化生產(chǎn),也利于自動(dòng)化控制生產(chǎn)。它是未來(lái)農(nóng)業(yè)工廠化育苗的發(fā)展方向。第三十九頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日管理方便,有利于實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制第四十頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.1植物所需必需元素的生理作用
植物需要若干礦質(zhì)元素、氣體元素及某些生理活性物質(zhì)等來(lái)維持自己的生存,這些必需元素有四個(gè)方面的生理作用:①作為結(jié)構(gòu)物質(zhì)參與機(jī)體的建造、如C、H、O、N等。②構(gòu)成特殊的生理活性物質(zhì),在代謝中起調(diào)節(jié)作用,如VB族等。③維持離子濃度的平衡,電荷平衡,膠體平衡等。④影響器官的形態(tài)發(fā)生和建成,如K、Fe等。
4.植物組織培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)與環(huán)境條件第四十一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.2植物組織培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)與環(huán)境條件
植物組織培養(yǎng)需要一定的營(yíng)養(yǎng)及環(huán)境條件,主要包括以下八方面內(nèi)容:
4.2.1無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)4.2.5能源和滲透壓
4.2.2有機(jī)營(yíng)養(yǎng)4.2.6其它成分
4.2.3植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)4.2.7溫度
4.2.4瓊脂4.2.8光照第四十二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.2.1無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)
無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)在植物發(fā)育中非常重要,鎂Mg是葉綠素分子的一部分,鈣Ca是細(xì)胞壁的組分之一,氮N是各種氨基酸、維生素、蛋白質(zhì)和核酸的重要組成部分。此外,鐵Fe、鉬Mo、鋅Zn等是某些酶的組成部分,植物除了C、H、O外,已知還有12種元素對(duì)于植物的生長(zhǎng)是必需的,它們是N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、Cu、Zn、B、AI。其中前6種元素需要的數(shù)量大,因此稱為大量元素或主要元素(一般指濃度大于0.5mmol/L);后6種元素需要的數(shù)量較小,因此稱為微量元素或次要元素(一般指濃度小于0.5mmol/L)。
第四十三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.2.2有機(jī)營(yíng)養(yǎng)植物組織培養(yǎng)中,經(jīng)常使用的維生素及其作用:VC:防止組織褐化;VB1:與愈傷組織的產(chǎn)生和生活力有關(guān);VB6:促進(jìn)根的生長(zhǎng);煙酸:促進(jìn)胚的發(fā)育;肌醇:利于胚和芽的形成。維生素類第四十四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
氨基酸:是重要的有機(jī)氮源。
(1)甘氨酸
(2)絲氨酸
(3)酪氨酸氨基酸類(4)谷氨酰胺(5)水解酪蛋白(CH)(6)水解乳蛋白(LH)第四十五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日有機(jī)添加物
椰乳香蕉馬鈴薯酵母提取液麥芽提取液蘋果汁番茄汁柑桔汁第四十六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.2.3植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)
植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)包括:
生長(zhǎng)素;
細(xì)胞分裂素;
赤霉素等。
第四十七頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日4.2.3.1生長(zhǎng)素
生長(zhǎng)素常用的有:2,4—二氯苯氧乙酸(2,4—D);萘乙酸(NAA);吲哚乙酸(IAA);吲哚丁酸(IBA)等。第四十八頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日生長(zhǎng)素的作用生長(zhǎng)素的主要作用是:誘導(dǎo)愈傷組織形成;誘導(dǎo)根的分化;促進(jìn)根、莖、芽的生長(zhǎng)。它們的作用大小為2,4-D>NAA>IBA>IAA。IAA為天然植物生長(zhǎng)素,也可用化學(xué)方法合成,它見(jiàn)光易分解,高溫高壓時(shí)也易破壞,故應(yīng)置于棕色瓶中,放在4℃~5℃下保存;IBA、NAA、2,4—D都是人工合成的物質(zhì),它在120℃下仍然穩(wěn)定。第四十九頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日NAAA:NAA0mg/L,芽(少),根(無(wú))B:NAA0.1mg/L,芽(少),根(無(wú)),愈傷組織(少量)C:NAA0.5mg/L,芽(少),根(多),愈傷組織(一定量)ABC第五十頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
4.2.3.2細(xì)胞分裂素
細(xì)胞分裂素的主要作用:
(1)有促進(jìn)細(xì)胞分裂和分化;
(2)延遲組織衰老;
(3)增強(qiáng)蛋白質(zhì)合成;
(4)抑制頂端優(yōu)勢(shì);
(5)促進(jìn)側(cè)芽生長(zhǎng);
(6)顯著地改變其它激素作用的特點(diǎn)。第五十一頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
細(xì)胞分裂素的種類細(xì)胞分裂素常用的有:激動(dòng)素(KT);6-芐基氨基嘌呤(6-BA);玉米素(ZT);2-異戊烯腺嘌呤(2ip)等。它們作用的強(qiáng)弱順序?yàn)椋篫T=2ip>6-BA>KT。它們經(jīng)高溫高壓滅菌后性能很穩(wěn)定,只是KT見(jiàn)光易分解,故應(yīng)在4℃~5℃低溫黑暗下保存。第五十二頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
BAA:BA(0mg/L),芽(減少),根(增多)愈傷組織(一定量)B:BA(0.1mg/L),芽(適量),根(適量)愈傷組織(一定量)AB第五十三頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
4.2.3.3赤霉素赤霉素—-在組織培養(yǎng)中使用的只有GA3一種,它是一種天然產(chǎn)物,能促進(jìn)已分化的芽的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。第五十四頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
小結(jié)2,4-D多用于誘導(dǎo)脫分化,而誘導(dǎo)再分化一般用NAA、IBA
及IAA、NAA有利于單子葉植物的分化,IBA誘導(dǎo)生根效果最好。低濃度的2,4-D有利于胚狀體的分化,但妨礙胚狀體進(jìn)一步發(fā)育。通常認(rèn)為:生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值大時(shí)有利于根的形成,這時(shí)生長(zhǎng)素起主導(dǎo)作用;比值小時(shí),則促進(jìn)芽的形成,這時(shí)細(xì)胞分裂素起主要作用。故應(yīng)根據(jù)植物的種類和培養(yǎng)部位,選擇適宜的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的種類和濃度,才能有效地控制器官的分化。第五十五頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
4.2.4瓊脂瓊脂是一種高分子碳水化合物,從海藻中提取。它的主要作用是使培養(yǎng)基在常溫下凝固,以作固體培養(yǎng)用.另外,瓊脂還可以吸附某些代謝有害物質(zhì)。第五十六頁(yè),共六十一頁(yè),2022年,8月28日
4.2.5能源和滲透壓
在培養(yǎng)基中添加糖,作為碳素來(lái)源和能量物質(zhì),同時(shí)糖對(duì)保持培養(yǎng)基的滲透壓也有重要作用。使用最普遍的是蔗糖,
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