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文檔簡介
第二節(jié)細(xì)菌的生理第一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2、化學(xué)組分
1)水分
2)有機(jī)物蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類、維生素
3)無機(jī)物無機(jī)鹽類第二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
二)細(xì)菌的物理性質(zhì)
1、細(xì)菌的帶電現(xiàn)象
2、細(xì)菌的比面積
3、細(xì)菌的布朗運動
4、細(xì)菌的光學(xué)性質(zhì)
5、細(xì)胞膜的半滲透性
第三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
二、細(xì)菌的營養(yǎng)與繁殖一)細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能水碳源氮源無機(jī)鹽生長因子營養(yǎng)物質(zhì)第四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1、水生理功能主要有①作為細(xì)胞的組成成分。②起到溶劑與運輸介質(zhì)的作用;③參與細(xì)胞內(nèi)一系列化學(xué)反應(yīng);⑤維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象;④熱的良好導(dǎo)體;第五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
2、碳源在微生物生長過程中能為微生物提供碳素來源的物質(zhì)碳源譜有機(jī)碳無機(jī)碳異養(yǎng)微生物自養(yǎng)微生物第六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日目前在微生物工業(yè)發(fā)酵中所利用的碳源物質(zhì)主要是單糖、淀粉、麩皮、米糠等。對于為數(shù)眾多的化能異養(yǎng)微生物來說,有些碳源(雙功能營養(yǎng)物質(zhì))是兼有能源功能營養(yǎng)物。微生物利用的碳源物質(zhì)主要有糖類、有機(jī)酸、醇、脂類、烴、CO2及碳酸鹽等。第七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日凡是能被用來構(gòu)成菌體物質(zhì)中或代謝產(chǎn)物中氮素來源的營養(yǎng)物質(zhì)稱為氮源。3、氮源氮源譜{有機(jī)氮無機(jī)氮NH3銨鹽硝酸鹽N2{{蛋白質(zhì)核酸氨基酸尿素第八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日4、無機(jī)鹽作用{參與微生物中氨基酸和酶的組成(如P、S等)調(diào)節(jié)微生物的原生質(zhì)膠體狀態(tài),維持細(xì)胞的滲透與平衡(如Na+)酶的激活劑(如Mg2+)微量元素是指那些在微生物生長過程中起重要作用,而機(jī)體對這些元素的需要量極其微小的元素,通常需要量在10-6--10-8mol/L:鋅、錳、鈉、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、鎳、硼等。根據(jù)微生物對礦質(zhì)元素需要量大小可以把它分成大量元素:Na、K、Mg、Ca、S、P等。第九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日5、生長因子
生長因子:那些微生物生長所必需而且需要量很小,但微生物自身不能合成的或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物。包括維生素、嘌呤、某些氨基酸、嘧啶等。第十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日二)細(xì)菌吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式細(xì)胞膜由于有高度選擇透性而在營養(yǎng)物質(zhì)的進(jìn)入與代謝產(chǎn)物的排出上起著極其重要的作用。物質(zhì)主要通過簡單擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動運輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位進(jìn)出微生物細(xì)胞。簡單擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散主動運輸基團(tuán)移位第十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
1、簡單擴(kuò)散(simplediffusion)
簡單擴(kuò)散是物質(zhì)非特異性地從濃度較高一側(cè)被動或自由地透過膜向濃度較低一側(cè)擴(kuò)散的過程。
特點:
1)簡單擴(kuò)散驅(qū)動力是細(xì)胞膜兩側(cè)物質(zhì)的濃度差,即濃度梯度,不需要代謝能,物質(zhì)不能進(jìn)行逆濃度運輸。
2)物質(zhì)在運輸過程中,既不與膜上的分子發(fā)生反應(yīng),本身的分子結(jié)構(gòu)也不發(fā)生變化。
3)主要吸收的物質(zhì)是水,一些氣體(CO2,O2),一些水溶性小分子(乙醇,甘油)和某些離子(Na+)等。第十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2、促進(jìn)擴(kuò)散(facilitateddiffusion)
促進(jìn)擴(kuò)散是有些物質(zhì)借助細(xì)胞膜的一種載體蛋白從濃度較高的一側(cè)透過膜向濃度較低的一側(cè)擴(kuò)散。
特點:
1)需要膜上的載體蛋白與物質(zhì)結(jié)合并轉(zhuǎn)運。載體蛋白有特異性。
2)驅(qū)動力是濃度梯度,因此不需要代謝能量,不能逆濃度運輸。
3)物質(zhì)本身在分子結(jié)構(gòu)上也不會發(fā)生變化。
4)多見于真核微生物。第十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
3、主動運輸(activetransport)
主動運輸是微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的一種主要方式,物質(zhì)在運輸過程要消耗代謝能,由載體蛋白參與的逆濃度梯度的物質(zhì)轉(zhuǎn)運。
特點
1)載體蛋白與被轉(zhuǎn)運物質(zhì)有專一性。
2)物質(zhì)在膜外表面與載體蛋白親和力大,在膜內(nèi)表面親和力小,這種親和力大小的改變是由于載體蛋白構(gòu)型變化,這需要消耗能量。
3)主動運輸?shù)奈镔|(zhì)有許多無機(jī)離子(K+、SO42-、PO43-)、一些糖類(乳糖、葡萄糖)、氨基酸和有機(jī)酸等。
第十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日4、基團(tuán)轉(zhuǎn)位(grouptranslocation)
基團(tuán)轉(zhuǎn)位是在運輸過程中,除了物質(zhì)分子發(fā)生化學(xué)變化這一特點外,其他特點都與主動運輸相同。這種運輸方式主要存在于厭氧微生物中,用于許多單(或雙)糖與糖的衍生物以及核苷與脂肪酸的運輸,目前在好氧微生物中還未發(fā)現(xiàn)有這種運輸方式,也未發(fā)現(xiàn)用這種運輸方式運輸氨基酸。
第十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第二十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
異養(yǎng)型生物自養(yǎng)型生物生長利用的營養(yǎng)物質(zhì)的方式生物生長過程中能量的來源光能營養(yǎng)型化能營養(yǎng)型三)細(xì)菌的營養(yǎng)類型第二十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日三、微生物的營養(yǎng)類型第二十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
四)細(xì)菌的生長繁殖
一)細(xì)菌生長繁殖的條件
1.充足的營養(yǎng)物質(zhì)2、合適的酸堿度大多數(shù)細(xì)菌的最適嗜中性細(xì)菌嗜堿性細(xì)菌10.5嗜酸性細(xì)菌3.0第二十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日3、適宜的溫度
嗜溫菌37℃
嗜熱菌50-60℃
嗜低溫0-30℃4、必要的氣體環(huán)境(1)專性需氧菌如:結(jié)核分枝桿菌、枯草芽孢桿菌。(2)微需氧菌如:空腸彎曲菌、幽門螺桿菌。(3)耐氧菌乳酸菌(4)兼性厭氧菌大多數(shù)病原菌(5)專性厭氧菌如:破傷風(fēng)梭菌、脆弱類桿菌第二十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第二十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日細(xì)菌主要是通過無性繁殖產(chǎn)生后代。其繁殖方式是二分裂,簡稱裂殖。細(xì)菌的繁殖過程分為三個連續(xù)步驟:①核的分裂和隔膜的形成;②橫隔壁形成;③子細(xì)胞分裂。另外有的細(xì)菌還存在:三分裂和復(fù)分裂。二)細(xì)菌生長繁殖的方式和速度第二十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日(三)細(xì)菌的繁殖1、裂殖(fission)1)、二分裂(binaryfission)第二十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
細(xì)菌生長繁殖的速度多數(shù)細(xì)菌繁殖速度極快,每20—30min分裂一次少數(shù)細(xì)菌生長速度緩慢第二十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日五)細(xì)菌的人工培養(yǎng)(一)培養(yǎng)基培養(yǎng)基是人工配制的,適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基幾乎是一切對微生物進(jìn)行研究和利用工作的基礎(chǔ)任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長所需要六大營養(yǎng)要素:碳源、氮源、無機(jī)鹽、能源、生長因子、水任何培養(yǎng)基一旦配成,必須立即進(jìn)行滅菌處理;常規(guī)高壓蒸汽滅菌:
1.05kg/cm2,121.3℃15-30分鐘第二十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用培養(yǎng)基種類繁多,根據(jù)其成分、物理狀態(tài)和用途可將培養(yǎng)分成多種類型。按成分不同劃分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基含用化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基高氏1號培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基第三十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
可溶性淀粉2g
KNO30.1g
K2HPO40.05g
MgSO4?7H2O0.05g
NaCl0.05g
FeSO4?7H2O0.001g
瓊脂2g
自來水100mL
pH7.2~7.4
硝酸鈉3g磷酸氫二鉀1g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.5g氯化鉀0.5g硫酸亞鐵0.01g蔗糖30g瓊脂20g蒸餾水1000mL高氏一號培養(yǎng)基查氏培養(yǎng)基第三十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑,使其成為固體狀態(tài),瓊脂含量一般為1.5%-2.0%瓊脂含量一般為0.2%-0.7%不加任何凝固劑半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基常用來進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價測定
大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)及在實驗室進(jìn)行微生物的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用方面的研究第三十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日按用途不同劃分基礎(chǔ)培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培基。用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基用于鑒別不同類型微生物的培基。選擇培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培基。微生物產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物,與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征變化。加富培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要的微生物的生長,有利于所需微生物的生長。第三十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日常用培養(yǎng)基種類厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基依用途不同第三十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基2、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象第三十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1.細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象①均勻渾濁生長②菌膜生長③沉淀生長:第三十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日混濁沉淀菌膜液體培養(yǎng)基中沉淀生長混濁生長菌膜生長第三十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2.細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象3.細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象
菌落
菌苔在固體培養(yǎng)基上(內(nèi))的群體形態(tài)第三十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日各種細(xì)菌的菌落第三十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日3、細(xì)菌生長繁殖的規(guī)律——生長曲線
一)細(xì)菌群體生長規(guī)律
在不補充營養(yǎng)物質(zhì),保持整個培養(yǎng)液體積不變條件下,以時間為橫坐標(biāo),以菌數(shù)為縱坐標(biāo),根據(jù)不同培養(yǎng)時間時細(xì)菌數(shù)量的變化,可以作出一條反映細(xì)菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。
生長曲線第四十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日生長曲線可分:延緩期對數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期第四十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1.延緩期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點:分裂遲緩、代謝旺盛第四十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2.對數(shù)期
對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致,代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定,所以是研究微生物基本代謝的良好材料。以最大的速率生長和分裂,細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加。細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加,表現(xiàn)為平衡生長。第四十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日3.穩(wěn)定期
由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,逐步不適宜于微生物生長,導(dǎo)致生長速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量),從而結(jié)束對數(shù)生長期,進(jìn)入穩(wěn)定生長期。原因:獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物采取措施:補充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件,如對好氧菌進(jìn)行通氣、攪拌或振蕩等。第四十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日4.衰亡期
細(xì)菌代謝活性降低,細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶,產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物,如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài),有時產(chǎn)生畸形,大小懸殊,有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會使細(xì)菌死亡的速率降低?,F(xiàn)象:特點:第四十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
三、細(xì)菌的新陳代謝細(xì)菌代謝產(chǎn)物及其應(yīng)用一)細(xì)菌分解產(chǎn)物及生化反應(yīng)1.吲哚試驗
色氨酸酶+對二甲基苯甲醛色氨酸吲哚玫瑰吲哚
大腸埃希菌叫吲哚試驗為陽性.產(chǎn)氣腸桿菌為陰性第四十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
2、甲基紅試驗分解甲基紅葡萄糖產(chǎn)酸紅色(PH4.5以下)如大腸埃希菌陽性分解甲基紅葡萄糖乙酰甲基甲醇橙黃色
如產(chǎn)氣腸桿菌陰性第四十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
3、Y-P試驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰+含胍基化合物紅色如產(chǎn)氣腸桿菌為陽性大腸埃希菌為陰性第四十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
4.檸檬酸鹽利用試驗
檸檬酸鹽碳酸鹽+溴麝香草酚藍(lán)(綠色)藍(lán)色如產(chǎn)氣腸桿菌為陽性大腸埃希菌為陰性上述四種試驗合稱為IMvic試驗。第四十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第五十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
二)合成代謝產(chǎn)物及其應(yīng)用
1.熱原質(zhì):熱原質(zhì)又稱為致熱原,是細(xì)菌合成的一種注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱原質(zhì)的細(xì)菌大多數(shù)是G—菌如傷寒沙門菌、大腸埃希菌及少數(shù)G+菌如枯草桿菌等。熱原質(zhì)是細(xì)菌細(xì)胞壁的脂多糖。
制備注射藥物時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作第五十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
2.毒素和侵襲性酶
毒素內(nèi)毒素外毒素侵襲性酶:如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶、鏈激酶第五十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
3.細(xì)菌素:某些細(xì)菌產(chǎn)生對有親緣關(guān)系的細(xì)菌具有抗菌作用的蛋白質(zhì)稱細(xì)菌素。
4.抗生素:是某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能選擇性抑制或殺滅其他生物細(xì)胞的物質(zhì)。
5.色素
6.維生素第五十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第三節(jié)
微生物的分布與消毒滅菌
一、微生物的分布一)微生物在自然界的分布細(xì)菌在土壤、水和空氣中廣泛存在,是感染人體的重要來源。常見的病原菌有金黃色葡萄球菌、鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及腦膜炎奈瑟菌、白假絲酵母菌等,常引起傷口或呼吸道感染。第五十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日二)微生物在正常人體的分布
1、人體正常菌群
在正常人的體表和與外界相通的腔道中,存在著不同種類和數(shù)量的微生物,這些微生物通常對人體無害,為人體正常微生物群,通稱正常菌群。第五十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
部位主要菌群皮膚葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、銅綠假單胞菌、丙酸桿菌、白假絲酵母菌、非致病性分枝桿菌。
口腔葡萄球菌、甲型和丙型鏈球菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、乳桿菌、類白喉棒狀桿菌、放線菌、螺旋體、白假絲酵母菌、梭菌。
鼻咽腔葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、類桿菌。
外耳道葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、銅綠假單胞菌、非致病性分枝菌。
眼結(jié)膜葡萄球菌、干燥棒狀桿菌、奈瑟菌。
胃一般無菌
腸道大腸埃希菌、產(chǎn)氣腸桿菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、葡萄球菌、腸球菌、類桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、破傷風(fēng)梭菌、雙歧桿菌、乳桿菌、白假絲酵母菌
尿道葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、非致病性分枝桿菌。
陰道乳桿菌、大腸埃希菌、類白喉棒狀桿菌、白假絲酵母菌。第五十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第五十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2、正常菌群及其生理作用
(1)正常菌群的生理作用
A)生物拮抗作用①競爭黏附(占位性保護(hù))作用②產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物③營養(yǎng)競爭作用第五十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
B)營養(yǎng)作用
正常微生物群參與了機(jī)體的物質(zhì)代謝、營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化及合成,
C)免疫作用
正常菌群作為抗原既能促進(jìn)機(jī)體免疫器官的發(fā)育,也可刺激其免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答
D)延緩衰老作用
E)抗腫瘤作用第五十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日3、菌群失調(diào)及菌群失調(diào)癥:
菌群失調(diào)是指由于某種原因使正常菌群的種類、數(shù)量和比例發(fā)生較大的改變,導(dǎo)致機(jī)體微生態(tài)失去平衡。因嚴(yán)重菌群失調(diào)而使宿主發(fā)生的一系列臨床癥狀,則稱為菌群失調(diào)癥。第六十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
條件致病菌
在正常情況下,正常菌群具有相對穩(wěn)定性,但在特定條件下,正常菌群與機(jī)體之間的這種生態(tài)平衡可被破壞而引起疾病,這些能引起疾病的細(xì)菌稱條件致病菌。寄居部位改變機(jī)體免疫功能低下抗菌藥物(第六十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日二、消毒、滅菌一)有關(guān)概念:1、消毒:殺死物體上病原微生物的方法。
2、滅菌:殺滅物體上所有微生物(包括病原微生物、
非病原微生物以及細(xì)菌芽胞)的方法。
3、防腐:防止或抑制微生物生長繁殖的方法。
4、無菌:指不存在活的微生物的意思。
5、無菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或物品的操作技術(shù)。第六十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
消毒、滅菌的方法一般可分為:熱力滅菌法輻射殺菌法
物理學(xué)方法濾過除菌法超聲波殺菌法干燥和低溫抑菌法等
化學(xué)方法
第六十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日(一)物理消毒滅菌法1、熱力滅菌法:1)焚燒法2)燒灼法3)干烤法4)紅外線5)煮沸法6)流通蒸氣法7)高壓蒸氣法8)巴氏消毒法干熱滅菌法濕熱滅菌法9)間歇滅菌法第六十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日焚燒用焚燒爐燃燒(1)用于廢棄垃圾、感染的動物尸體等的滅菌燒灼用火焰燒灼接種環(huán)、接種針、試管口等的滅菌干烤加熱160~170℃2~3小時僅用于玻璃器皿、瓷器、油類制劑、粉劑藥品等的滅菌紅外線o.7—l000um波長的電磁波,多用于醫(yī)療器械的滅菌(1)干熱滅菌法第六十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日焚燒燒灼干烤第六十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1)煮沸消毒法:
100℃,5min-10min
2)巴氏消毒法:
61.1-62.8℃,30min71.7℃,15-30sec
3)流通蒸氣消毒法:
100℃,15-30min
4)間歇蒸汽滅菌法:
100℃,15-30min37℃過夜(3次)
5)高壓蒸氣滅菌法:
15磅(121.3℃),15-30min
(2)濕熱滅菌法第六十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日巴氏消毒法
62℃30秒
煮沸法
100℃5分鐘流通蒸氣消毒法
100℃15—30分鐘高壓蒸氣滅菌法
℃
15—20分鐘第六十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2、輻射殺菌法(1)紫外線
紫外線波長在265-266nm殺菌能力最強(qiáng),它能干擾DNA復(fù)制,導(dǎo)致細(xì)菌變異死亡,但穿透力弱,故只能用于房間空氣和物品表面的消毒。
(2)電離輻射β、γ射線細(xì)胞分子產(chǎn)生誘發(fā)輻射,干擾DNA合成;破壞細(xì)胞膜,引起酶系統(tǒng)紊亂;水分子經(jīng)輻射產(chǎn)生游離基和新分子,大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒和中草藥、中成藥的防霉變。第六十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
(3)濾過除菌法
0.22um,不耐熱血清抗毒素、抗生素、藥液和空氣等的除菌。①薄膜濾菌器②玻璃濾菌器③石棉濾菌器④陶瓷濾菌器第七十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
(4)超聲波消毒法
用于粉碎細(xì)胞,撮細(xì)胞組分.(5)干燥與低溫抑菌法干燥法常用于保存食物、中藥材等。低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢,故常用于保存細(xì)菌菌種。第七十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日(二)化學(xué)消毒滅菌法常用消毒劑的殺菌機(jī)制1、使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固2、干擾微生物酶系統(tǒng)和影響其代謝3、損傷細(xì)胞壁或細(xì)胞膜第七十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日常用消毒劑的種類、濃度、用途及作用機(jī)制(一)種類常用濃度用途作用機(jī)制1.酚類
石炭酸
2.醇類
乙醇
3.重金屬鹽類
硝酸銀
4.氧化劑
高錳酸鉀
過氧化氫
漂白粉
碘酒3%-5%
70%-75%
1%
0.1%
3%
10%-20%
2.0%-2.5%
器械、排泄物消毒
皮膚、體溫計消毒
新生兒滴眼
皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒
創(chuàng)口、皮膚粘膜消毒
飲水及游泳池消毒
地面、廁所與排泄物消毒
皮膚消毒
蛋白質(zhì)變性損傷細(xì)胞膜,滅活酶類
蛋白質(zhì)變性凝固、干擾代謝
氧化作用,蛋白質(zhì)變性與沉淀,滅活酶類
氧化作用,蛋白質(zhì)沉淀第七十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日種類常用濃度用途作用機(jī)制5.表面活性劑
新潔爾滅
6.染料
龍膽紫
7.烷化劑
甲醛
8.酸堿類
醋酸
生石灰0.05%-0.1%
2%-4%
10%
5-10ml/m加等量水蒸發(fā)
按1:4--1:8配成糊狀
外科手術(shù)洗手,皮膚粘膜消毒,浸泡手術(shù)器械
淺表創(chuàng)傷消毒
物體表面消毒,空氣消毒
空氣消毒
地面、排泄物消毒
損傷細(xì)胞膜,滅活氧化酶活性,蛋白質(zhì)沉淀
抑制細(xì)菌繁殖,干擾氧化過程
菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化
破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,蛋白質(zhì)凝固常用消毒劑的種類、濃度、用途及作用機(jī)制(二)第七十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日第四節(jié)微生物的遺傳與變異一、生物的變異現(xiàn)象形態(tài)與結(jié)構(gòu)的變異菌落變異毒力變異耐藥性變異第七十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日細(xì)菌的大小和形態(tài)
在不同的生長時期可不同,生長過程中受外界環(huán)境的影響也可發(fā)生變異。如:鼠疫耶氏菌在陳舊培養(yǎng)物上細(xì)菌的多形態(tài)性、細(xì)菌L型。細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)
如:莢膜(肺炎鏈球菌)、芽胞(炭疽芽孢桿菌)、鞭毛(變形桿菌H-O變異)也可發(fā)生變異。1.形態(tài)與結(jié)構(gòu)的變異第七十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日毒力增強(qiáng):無毒力的白喉棒狀桿菌常寄居在咽喉部,不致??;當(dāng)感染了β-棒狀噬菌體后變成溶原性細(xì)菌,則獲得產(chǎn)生白喉毒素的能力,引起白喉。毒力減弱:有毒菌株長期在人工培養(yǎng)基上傳代培養(yǎng),可是細(xì)菌的毒力減弱或消失。卡介苗(BCG)是有毒的牛分枝桿菌在含有膽汁的甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基上,經(jīng)過13年,連續(xù)傳230代,獲得的一株毒力減弱但仍保持免疫原性的變異株。2.毒力變異第七十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日耐藥性變異:細(xì)菌對某種抗菌藥物由敏感變?yōu)槟退幍淖儺悺S行┘?xì)菌還表現(xiàn)為同時耐受多種抗菌藥物,即多重耐藥性。從抗生素廣泛應(yīng)用以來,細(xì)菌對抗生素耐藥的不斷增長是世界范圍內(nèi)的普遍趨勢,給臨床治療帶來很大的困難,并成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)上的重要問題。3.耐藥性變異第七十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日細(xì)菌的菌落主要有光滑型和粗糙型兩種。S型菌落表面光滑、濕潤、邊緣整齊。經(jīng)人工培養(yǎng)多次傳代后菌落表面邊為粗糙、干燥、邊緣不整齊,稱S—R變異。S—R變異常見于腸道桿菌,是由于失去LPS的特異性寡糖重復(fù)單位而引起的。變異時不僅菌落的特征發(fā)生改變,且細(xì)菌的其它性狀也發(fā)生了變化。S型菌的致病性強(qiáng),但有少數(shù)R型菌的致病性強(qiáng),如結(jié)核分枝桿菌。4.菌落變異第七十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日S型菌落R型菌落第八十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日二、細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)染色體質(zhì)粒轉(zhuǎn)位因子噬菌體第八十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日質(zhì)粒(plasmid):是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì),是環(huán)狀閉合的雙鏈DNA。質(zhì)?;蚩删幋a多種重要的生物學(xué)性狀:1)致育質(zhì)粒(F質(zhì)粒)與有性生殖功能關(guān)聯(lián);2)耐藥性質(zhì)粒編碼細(xì)菌對抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性。分兩類,一是接合性耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒),另一是非接合耐藥性質(zhì)粒;3)毒力質(zhì)粒(Vi質(zhì)粒)編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子;4)細(xì)菌素質(zhì)粒編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素;質(zhì)粒第八十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日噬菌體定義:
生物學(xué)性狀:基本形態(tài):蝌蚪形、微球形、纖線形具有嚴(yán)格的宿主特異性,可用于對細(xì)菌分型等
噬菌體與宿主的相互關(guān)系:
1、毒性噬菌體:
2、溫和噬菌體:第八十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日溫和噬菌體第八十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日遺傳性變異:是由基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變所致,主要通過基因突變、基因損傷后的修復(fù)、基因的轉(zhuǎn)移與重組來實現(xiàn)。非遺傳性變異:是細(xì)菌在環(huán)境因素等影響下出現(xiàn)的變化,這種變化不是因基因結(jié)構(gòu)的變化而產(chǎn)生的。三、細(xì)菌變異的機(jī)制第八十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日突變(mutation):是細(xì)菌遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生突然而穩(wěn)定的改變,導(dǎo)致細(xì)菌性狀的遺傳性變異?;蛲蛔円?guī)律:突變率突變常自然發(fā)生,但突變率極低。突變與選擇突變是隨機(jī)的,不定向的?;貜?fù)突變細(xì)菌由野生型變?yōu)橥蛔冃褪钦蛲蛔?,有時突變株經(jīng)過又一次突變可恢復(fù)野生型的性狀。DNA的損傷修復(fù):當(dāng)細(xì)菌DNA受到損傷時,細(xì)胞會用有效的DNA修復(fù)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)致的修復(fù),使損傷降為最小。1.突變第八十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日基因轉(zhuǎn)移(genetransfer):外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程?;蛑亟M(recombination):轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起,使受體菌獲得供體菌某些特性。外源性遺傳物質(zhì):供體菌染色體DNA,質(zhì)粒DNA及噬菌體基因等。細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式:轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、細(xì)胞融合。2.基因的轉(zhuǎn)移與重組第八十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1)轉(zhuǎn)化:供體菌裂解,游離的DNA片段轉(zhuǎn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程。第八十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日2)
接合(conjugation)接合:是細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。第八十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日轉(zhuǎn)導(dǎo):是以溫和噬菌體為載體,將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),是受體菌獲得新的性狀。根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍,可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類:普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA可是供菌染色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA只限供菌染色體上的特定基因)。3)轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)第九十頁,共一百二十頁,2022年,8月28日普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)第九十一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)第九十二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日4)溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)當(dāng)噬菌體感染細(xì)菌時,宿主菌染色體中獲得了噬菌體的DNA片段,使其成為溶原狀態(tài)時,而使細(xì)菌獲得新的性狀。第九十三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日四、細(xì)菌變異的實際應(yīng)用一、在疾病診斷、治療、預(yù)防中的應(yīng)用:
二、在檢測致癌物質(zhì)方面的應(yīng)用:
三、在基因工程方面的應(yīng)用:四、在菌種復(fù)壯和保藏中的應(yīng)用:第九十四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日1、菌種的衰退和預(yù)防1)控制傳代次數(shù)2)創(chuàng)造良好的的培養(yǎng)條件3)采取更有效的菌種保藏方法2、菌種的復(fù)壯方法3、菌種保藏第九十五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
第五節(jié)細(xì)菌的感染與免疫
感染:
是指病原菌突破機(jī)體的防御屏障,侵入機(jī)體,在一定部位生長繁殖,釋放毒素性物質(zhì)等,導(dǎo)致不同程度的病理過程。第九十六頁,共一百二十頁,2022年,8月28日一、細(xì)菌的致病性
致病性細(xì)菌的致病因素機(jī)體的免疫力外因環(huán)境因素的影響第九十七頁,共一百二十頁,2022年,8月28日細(xì)菌的毒力細(xì)菌侵入宿主的數(shù)量細(xì)菌侵入的部位(侵入門戶)
致病因素侵襲力毒素第九十八頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
侵襲力:病原菌有突破宿主皮膚、黏膜
生理屏障等免疫防御機(jī)制,進(jìn)
入體內(nèi)定居、繁殖和擴(kuò)散的能
力,包括莢膜、粘附素和侵襲
性物質(zhì)。
毒素:含有損害宿主組織、器官并引起生理功能紊亂的大分子成分。毒力(一)細(xì)菌的毒力第九十九頁,共一百二十頁,2022年,8月28日莢膜、微莢膜。
黏附素:細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)。
菌毛分泌物
細(xì)菌的表面組分:如磷壁酸。2、侵襲性物質(zhì):協(xié)助病菌抗吞噬或向四周擴(kuò)散。如致病性葡萄球菌凝固酶、A群鏈球菌透明質(zhì)酸酶、鏈激酶等從而有利于細(xì)菌在組織中擴(kuò)散。(1)侵襲力1、菌體的表面結(jié)構(gòu)第一百頁,共一百二十頁,2022年,8月28日細(xì)菌在生長繁殖中產(chǎn)生和釋放的毒性成分,可直接或間接損傷宿主細(xì)胞、組織和器官,干擾其生理功能。外毒素內(nèi)毒素(2)毒素
第一百零一頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
外毒素甲醛類毒素馬抗毒素1)概念:是革蘭陽性菌和部分革蘭陰性菌產(chǎn)生并釋放到菌體外的毒性蛋白質(zhì)。2)產(chǎn)生菌:革蘭陽性菌,少部分革蘭陰性菌3)化學(xué)成分:蛋白質(zhì)4)穩(wěn)定性:不耐熱5)毒性:強(qiáng),有組織選擇性6)抗原性:強(qiáng)next第一百零二頁,共一百二十頁,2022年,8月28日破傷風(fēng)痙攣毒素中樞神經(jīng)系統(tǒng)阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)的釋放骨骼肌強(qiáng)直性痙攣白喉外毒素外周神經(jīng)末梢、心肌抑制靶細(xì)胞蛋白質(zhì)合成外周神經(jīng)麻痹、心肌炎霍亂腸毒素腸上皮細(xì)胞激活腺苷環(huán)化酶上皮細(xì)胞分泌增多破傷風(fēng)梭菌白喉棒狀桿菌霍亂弧菌不同的細(xì)菌不同的外毒素不同的部位不同的臨床癥狀不同細(xì)菌的外毒素毒素有選擇毒害作用,引起特殊臨床表現(xiàn)第一百零三頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
細(xì)菌
外毒素
作用機(jī)制癥狀與體征破傷風(fēng)桿菌肉毒桿菌白喉桿菌霍亂弧菌葡萄球菌痙攣毒素肉毒毒素白喉毒素腸毒素表皮剝脫毒素阻斷神經(jīng)元之間的抑制性沖動的傳導(dǎo)抑制乙酰膽堿能神經(jīng)釋放乙酰膽堿抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成激活腺苷酸環(huán)化酶,提高cAMP水平表皮與真皮脫離骨骼肌痙攣肌肉松馳性麻痹腎上腺出血、心肌損傷等小腸上皮細(xì)胞過度分泌、腹瀉、嘔吐表皮剝脫性病變第一百零四頁,共一百二十頁,2022年,8月28日外毒素的種類神經(jīng)毒素
破傷風(fēng)痙攣毒素、肉毒毒素細(xì)胞毒素
白喉毒素、葡萄球菌表皮剝脫毒素、葡萄球菌毒性休克綜合征毒素、A群鏈球菌致熱外毒素腸毒素
霍亂腸毒素、ETEC腸毒素、產(chǎn)氣莢膜梭菌腸毒素、葡萄球菌腸毒素第一百零五頁,共一百二十頁,2022年,8月28日
6)抗原性:弱1)概念:是革蘭陰性菌細(xì)胞壁中的結(jié)構(gòu)成分,在細(xì)菌裂解后才釋放出的毒性脂多糖。2)產(chǎn)生菌:革蘭陰性菌3)化學(xué)成分:脂多糖4)穩(wěn)定性:耐熱5)毒性:弱,無組織選擇性①致熱反應(yīng)②白細(xì)胞反應(yīng)③彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)④內(nèi)毒素血癥與休克第一百零六頁,
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