無菌制劑的生產與驗證第二季度培訓

第三章

干凈度級別及監(jiān)測(1)為了確定A級區(qū)的級別，每個采樣點的采樣量不得少于1m3。A級區(qū)空氣塵埃粒子的級別為ISO4.8，以≥0.5μm的塵粒為限度標準。B級區(qū)（靜態(tài)）的空氣塵埃粒子的級別為ISO5，同時包括表中兩種粒徑的塵粒。對于C級區(qū)（靜態(tài)和動態(tài)）而言，空氣塵埃粒子的級別分別為ISO7和ISO8。對于D級區(qū)（靜態(tài)）空氣塵埃粒子的級別為ISO8。測試方法可參照的標準為ISO14644-1空氣懸浮粒子的標準規(guī)定如下表：第三章

干凈度級別及監(jiān)測關于ISO14644-1的介紹1.最大允許濃度的設定Cn=10N×(0.1/D)2.081.1Cn—某等級下，≥D的懸浮粒子最大允許濃度（pc/m3）。Cn以有效數(shù)為3位四舍五入到最靠近的整數(shù)。1.2D—被考慮粒徑um1.3N—干凈度等級2.最少采樣點數(shù)目NL=2.1NL—最少采樣點數(shù)2.2A—干凈室或干凈區(qū)的面積，以立方米計。在水平單向層流時，面積A可以看作是與氣流方向呈垂直流淌空氣的截面積。3.每個點的最小采樣量VS=20×1000/(Cn.m)3.1VS—每個采樣點的每次最少采樣量，用升表示。3.2Cn.m—為相關等級規(guī)定的最大被考慮粒徑之等級限制（pc/m3）。即可用得出A級每個采樣點的最小采樣量為1立方米，B級靜態(tài)為690L，B級動態(tài)為6.9L關于最小采樣量有另一條規(guī)定：每個點的采樣量至少為2L，采樣時間為1分鐘。第三章

干凈度級別及監(jiān)測干凈區(qū)微生物監(jiān)測的動態(tài)標準(a)如下：注：(1)表中各數(shù)值均為平均值。(2)單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可運用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。第三章

干凈度級別及監(jiān)測第十二條

應制定適當?shù)膽腋×Ｗ雍臀⑸锉O(jiān)控警戒和糾偏限度。操作規(guī)程中應具體說明結果超標時需實行的糾偏措施。2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產品第一章范圍其次章原則第三章干凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術第五章吹罐封技術第六章人員第七章廠房第八章設備第九章消毒第十章生產管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質量限制第六章人員人體是最大的污染源，人體產生的污染占總污染數(shù)的35%制藥企業(yè)人員的基本要求：機構，組成，資源，職責，培訓，考核，人員衛(wèi)生附錄1對人員的要求：第十九條

干凈區(qū)內的人數(shù)應嚴加限制，檢查和監(jiān)督應盡可能在無菌生產的干凈區(qū)外進行。干凈區(qū)與關鍵區(qū)干凈區(qū)：須要對環(huán)境中塵埃及微生物數(shù)量進行限制的房間或區(qū)域。關鍵區(qū)：指在干凈區(qū)中，對工藝過程和產品質量起著關鍵作用的操作區(qū)域。第六章人員其次十條

凡在干凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設備修理工）都必需定期培訓，以使無菌藥品的操作符合要求，培訓的內容應包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎學問。未受培訓的外部人員（如外部施工人員或修理人員）在生產期間需進入干凈區(qū)時，應對他們進行特殊具體的指導和監(jiān)督。公司操作人員1.更衣過程的培訓與更衣測試2.無菌灌裝驗證的參與外來人員（包括檢查人員）進入關鍵區(qū)域時1.應盡可能支配更衣測試，測試合格后方可進入2.假如時間來不及，可以先進行更衣后的取樣，然后再依據結果進行評估。第六章人員其次十四條

工作服及其質量應與生產操作的要求及操作區(qū)的干凈度級別相適應，其式樣和穿著方式應能滿足疼惜產品和人員的要求。各干凈區(qū)的著裝要求規(guī)定如下：D級區(qū)：應將頭發(fā)、胡須等相關部位遮蓋。應穿合適的工作服和鞋子或鞋套。應實行適當措施，以避開帶入干凈區(qū)外的污染物。C級區(qū)：應將頭發(fā)、胡須等相關部位遮蓋，應戴口罩。應穿手腕處可收緊的連體服或衣褲分開的工作服，并穿適當?shù)男踊蛐住９ぷ鞣幻撀淅w維或微粒。A/B級區(qū)：應用頭罩將全部頭發(fā)以及胡須等相關部位全部遮蓋，頭罩應塞進衣領內，應戴口罩以防散發(fā)飛沫，必要時戴防護目鏡。應戴經滅菌且無顆粒物（如滑石粉）散發(fā)的橡膠或塑料手套，穿經滅菌或消毒的腳套，褲腿應塞進腳套內，袖口應塞進手套內。工作服應為滅菌的連體工作服，不脫落纖維或微粒，并能滯留身體散發(fā)的微粒。2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產品第一章范圍其次章原則第三章干凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術第五章吹罐封技術第六章人員第七章廠房第八章設備第九章消毒第十章生產管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質量限制第八章設備-濕熱滅菌設備濕熱滅菌設備第六十五條

全部的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設計應確保滅菌完全。第六十六條

應通過驗證確認滅菌設備腔室內待滅菌產品和物品的裝載方式。第八章設備-濕熱滅菌設備濕熱滅菌設備第六十八條

應有明確區(qū)分已滅菌產品和待滅菌產品的方法。每一車（盤或其它裝載設備）產品或物料均應貼簽，清晰地注明品名、批號并標明是否已經滅菌。必要時，可用濕熱滅菌指示帶加以區(qū)分。第六十九條

每一個滅菌批次都應有滅菌記錄。應把滅菌記錄作為該批產品放行的依據。第八章設備-濕熱滅菌設備濕熱滅菌設備冷凝水和空氣如何影響滅菌效率空氣比水的熱阻還要高例子：1.1/100英寸厚的氣體層2.1/4英寸的水層3.12.9英寸的鐵墻第八章設備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險限制措施熱分布：通過驗證得出壓差：隧道烘箱中壓差的梯度，從高到低依次是灌封間——高溫段——冷卻段——預熱段——洗瓶間，每個梯度之間須要保持正壓。第八章設備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險限制措施層流質量關于隧道烘箱在運用中出現(xiàn)的常見問題分析：產品中出現(xiàn)黑點緣由：國內的隧道烘箱在運用過程中，常常將溫度設定的偏高，比如320℃,340℃,360℃等，當溫度過高時，烘箱內的高效過濾器本身還可以耐受，但是高效邊框處的膠水會產生脫落，落到內包材中去預防：為了防止這種現(xiàn)象的產生，現(xiàn)在有的高效過濾器在邊框處進行負壓疼惜設計，當有脫落物產生時自動吸走。第八章設備-隧道烘箱隧道式滅菌干燥機風險限制措施無菌關于隧道式滅菌干燥機的除熱源效果確認，須要通過驗證來進行確認。在驗證過程中，應當對初始段，中間段，結束段三個階段進入隧道烘箱的過程進行驗證。清潔第八章設備-灌裝機灌裝機三大關鍵要素破瓶率灌裝精度加塞合格率1.對于膠塞鍋，應易于拆卸，清潔和滅菌2.膠塞鍋內部的膠塞數(shù)量應進行限制，放在相關碰撞過程中塵埃的產生。工藝限制六大要素1.風速(0.36-0.54m/S)2.層流流形3.塵埃粒子4.浮游菌，沉降菌5.風壓6.無菌操作第八章設備-軋蓋機軋蓋機對于西林瓶包裝的產品，均涉及到軋蓋工序。而對于非最終產品而言，該步驟通常是無菌藥品的最終處理工程。涉及到以下幾個方面的要求：第七十六條小瓶壓塞后應當盡快完成軋蓋，軋蓋前離開無菌操作區(qū)或房間的，應當實行適當措施防止產品受到污染。第八章設備-軋蓋機第七十七條無菌藥品容器的密封性應當經過驗證，避開產品遭遇污染。-藥害事務：完達山藥業(yè)公司生產的刺五加注射液部分藥品在流通環(huán)節(jié)中被雨水浸泡，使藥品收到細菌污染，后被更換包裝標簽并銷售。藥品檢驗所在被雨水浸泡藥品的部分藥品中檢出多種細菌。熔封的產品（如玻璃安瓿或塑料安瓿）應當作100%的檢漏試驗，其它包裝容器的密封性應當依據操作規(guī)程進行抽樣檢查。第八章設備軋蓋機容器密封完整性驗證將產品容器內灌入培育基，軋蓋密封后滅菌冷卻，然后將西林瓶倒置浸泡在菌液濃度為1*105-108cfu/ml的銅綠假單胞菌液中，4小時后，取出將容器外表面消毒，培育7天—14天，首次測試后，利用剩余樣品每隔12個月重復挑戰(zhàn)試驗1次，直至有效期滿。飽和鹽水法測試密封性亞甲基藍溶液法銅綠假單胞菌ATCC9027/CMCC101042010版ＧＭＰ附錄一：無菌產品第一章范圍其次章原則第三章干凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術第五章吹罐封技術第六章人員第七章廠房第八章設備第九章消毒第十章生產管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質量限制第十章生產管理第四十七條-1無菌生產工藝的驗證應包括培育基模擬灌裝試驗人員確認無菌操作技能無菌更衣確認廠房系統(tǒng)設備確認,HVAC,壓空系統(tǒng)（或氮氣）的確認，水系統(tǒng)，設備的在線清洗和滅菌CIP,SIP,凍干機物料瓶,膠塞濕熱、干熱滅菌環(huán)境消毒與監(jiān)控確認無菌檢測方法。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證培育基灌裝模擬驗證的適用范圍無菌藥品分為：無菌原料藥與無菌制劑無菌制劑分為：非最終滅菌與最終滅菌兩種類型其中無菌原料藥與非最終滅菌制劑均須要進行培育基灌裝模擬驗證第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證新版ＧＭＰ無菌附錄對培育基模擬灌裝的要求：１培育基選擇２最差條件的設計３頻次與變更４結果的評價５污染調查第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證第四十七條-2應依據產品的劑型以及培育基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培育基。應盡可能模擬常規(guī)的無菌生產工藝。1.劑型：無菌原料藥或無菌制劑2.選擇性：應選擇具有廣譜性和代表性的培育基，比如假如產品在灌裝過程中須要進行沖氮疼惜的話，就不能選擇TSB培育基（胰蛋白胨大豆肉湯培育基），而應當選擇厭氧性的培育基，比如FTM培育基（液體硫乙醇酸鹽培育基）第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證培育基的適用性檢查/陽性比照檢查在培育基灌裝驗證起先之前，須要做培育基的適用性檢查；陽性比照檢查時為了考察培育基模擬灌裝過程中是否有抑菌因素。注：應對干凈區(qū)檢測中出現(xiàn)的菌進行考察第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證第四十七條-3包括全部對產品的無菌特性有影響的關鍵操作，及生產中可能出現(xiàn)的各種干預和最差條件。

最差條件：高于或低于正常范圍的條件限度，與正常生產條件相比最有可能造成工藝或生產失敗的條件第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證培育基模擬灌裝試驗的代表性（1）時間代表性和批量的代表性（2）操作和運行的代表性（3）劑型與包裝容器代表性第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性最長灌裝的持續(xù)時間1最保守的設計：在培育基灌封試驗中，模擬生產用時最長的批量所須要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設備修理）。2其他的設計，有代表性的是過程。1）在生產完成后接著進行培育基灌封試驗2）為了削減灌封瓶數(shù)，在每批試驗起先、中間及結束前均灌裝培育基，其余時間設備空運行以達到所須要的時間，或在此時間灌裝WFI。任何干擾操作都應在培育基灌裝時進行，在正常生產過程中所需的最長時間，包括可能發(fā)生的事務，人員的換班等第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性儲存時間的驗證灌裝設備、部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌封前能夠放置的最長時間1.灌封設備、灌封部件、儲罐、無菌物料須要再滅菌（除菌）的時間間隔–用超出單項驗證后確定的最長保存時間的設備部件、儲罐、無菌物料參與培育基灌裝試驗2.產品從無菌過濾到灌封加塞完成所須要的時間–無菌過濾后存放在中間儲罐內的培育基模擬實際生產時產品的最大儲存時間后再灌封－產品在灌裝后密封前的儲存時間第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（1）時間與批量的代表性新版GMP指南一般5000-10000小于5000原則：培育基灌裝容器的數(shù)量應當足以保證評價的有效性。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（2）劑型與容器的代表性應當考慮到灌裝容器的極端尺寸。最大的容器：容器開口大，污染幾率大。最小的容器：容器體積小，簡潔發(fā)生倒瓶。同一條灌裝線灌裝不同品種的產品的狀況同一條灌裝線灌裝統(tǒng)一產品的不同規(guī)格的狀況*對于灌裝計量的要求，應位于容器體積的1/2到1/3處。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表應模擬包括“最差狀況”的生產條件下進行培育基灌裝。（如最大干預次數(shù)、模擬的加卸料、可能的生產線停機的訂正灌裝針/管的調整和更換、人工軋蓋、在線過濾器的更換以及所用人員的數(shù)量等）干預的次數(shù)應當?shù)扔诨虼笥谡Ｉa時發(fā)生的次數(shù)全部干預都應是預先設定和進行記錄須要留意的是，在培育基模擬灌裝驗證中，不須要模擬除菌過濾的實際過程，但應當模擬操作人員在無菌區(qū)在進行除菌過濾過程中的實際操作（如安裝和拆卸除菌過濾器的過程）第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表正常的—每班次都會發(fā)生（灌封線裝配，裝量調整，加膠塞/鋁蓋，處理倒瓶，中控取樣，環(huán)境監(jiān)測，手工補充軋蓋等）非正常的—非正常狀況才會發(fā)生（設備故障，灌封線堵塞，軌道調整，拆卸/替換破損的部件）非正常的干預至少每年模擬一次不允許的行為：SOP中應列出哪些干預是容許的。依據實際生產中可能發(fā)生的動作或操作來設計培育基灌裝的人為干預。企業(yè)應列出可能會在無菌加工過程中發(fā)生的、允許和禁止的干預事務的一覽表，并在試驗中進行模擬第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證（3）操作和運行的代表Ａ設備組裝，Ｂ自動加塞故障Ｃ加入膠塞，Ｄ玻瓶裂開,撿出Ｅ更換灌裝針頭，Ｆ灌裝針頭位置調整Ｇ設備故障，Ｈ取出卡住的膠塞Ｉ取走倒下的玻瓶，ＪＧＭＰ檢查員進入無菌區(qū)后的處理Ｋ手工裝載到凍干機，Ｌ操作人員進入無菌區(qū)忘帶雙層手套后的退出Ｍ放置熱電偶和真空探頭，Ｎ環(huán)境監(jiān)測-放置和取走培育皿Ｏ操作人員進出及更衣，Ｐ自動稱量故障Ｑ停電故障，Ｒ設備修理人員進入，Ｓ分裝中發(fā)覺消毒劑過期后的更換第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證第四十七條-4培育基模擬灌裝試驗的首次驗證，每班次應連續(xù)進行3次合格的試驗。空氣凈化系統(tǒng)、設備、生產工藝及人員重大變更后，應重復進行培育基模擬灌裝試驗。培育基模擬灌裝試驗通常應按生產工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證增補性培育基灌裝試驗變更及其評估-對產品或生產線的每一種變更，均應依據書面的變更限制系統(tǒng)進行評估。-假如通過評估認為此項變更會影響到無菌生產工藝產品的無菌保證水平，則須要進行增補性培育基灌封試驗。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證再驗證的要求頻率-對每條生產線，每年進行兩次再驗證，間隔時間為5-7個月。人員-人員至少每年參與一次再驗證，以進行資格再確認容器規(guī)格-每條生產線輪番運用最大和最小規(guī)格的容器。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證第四十七條-5培育基灌裝容器的數(shù)量應足以保證評價的有效性。批量較小的產品，培育基灌裝的數(shù)量應至少等于產品的批量。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證培育基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應遵循以下要求：1.灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品；2.灌裝數(shù)量在5000至10000支時：（1）有1支污染，需調查，可考慮重復試驗（2）有2支污染，需調查后，進行再驗證。3.灌裝數(shù)量超過10000支時：(1)有1支污染，需進行調查；(2)有2支污染，需調查后，進行再驗證4.發(fā)生任何微生物污染時，均應進行調查。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證結果與評價1外觀檢查，破損檢查2物料平衡3培育與視察，連續(xù)監(jiān)控20-25℃7天30-35℃7天1.灌裝結束時，為保證培育基與內包材充分接觸，應當將灌裝后的培育基輕輕搖擺。2.在20-25℃7天培育結束后，也須要將培育基輕輕搖擺。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證一：污染調查發(fā)生失?。ㄎ廴荆r，應盡可能找到最根本的緣由。二：評估后果三：糾偏與預防四：重新試驗當糾偏措施實施后，應當重新進行一次新的培育基灌裝試驗，以確認其有效性。但第一次試驗失敗后，重新作的運用必須要與第一次試驗的班次相同。第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證調查的范圍應包括人：人員操作技術培訓狀況人員衛(wèi)生狀況監(jiān)測數(shù)據第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證調查的范圍應包括機：CIP設備，清潔、滅菌程序的執(zhí)行狀況設備和零件的滅菌工藝，滅菌釜的驗證狀況第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證調查的范圍應包括料：除菌過濾器完好性已滅菌物品的儲存條件第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證調查的范圍應包括法：培育基灌裝試驗中的干預方式分析該區(qū)域近期是否有過修理活動，生產線的改造狀況培育基灌封過程中的異樣事務第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證培育基灌裝過程記錄文件記錄：過程限制檢測和試驗室檢測結果環(huán)境和人員監(jiān)測結果設備功能（批報警記錄，過濾器完整性測試）人員干擾操作、偏差、中斷等--發(fā)生時間和持續(xù)時間生產線清場記錄過程錄像第十章生產管理-培育基模擬灌裝驗證調查的范圍應包括環(huán)：環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據（Ａ／Ｂ），空氣懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據高效過濾器檢測(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，風速測量，密封系統(tǒng)檢查，運用年限等氣流方向和設備影響2010版ＧＭＰ附錄一：無菌產品第一章范圍其次章原則第三章干凈級別及監(jiān)測第四章隔離操作技術第五章吹罐封技術第六章人員第七章廠房第八章設備第九章消毒第十章生產管理第十一章滅菌工藝第十二章滅菌方法第十三無菌藥品的最終處理第十四章質量限制第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產品的過濾除菌應當符合以下要求：（一）對可最終滅菌的產品不得以除菌過濾工藝替代最終滅菌工藝。假如藥品不能在其最終包裝容器中滅菌，可用孔徑為0.22μm（或更?。┑某^濾器將藥液濾入預先滅菌的容器內。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可接受熱處理方法來彌補除菌過濾的不足。第十二章：滅菌方法并非全部的0.22μm的過濾器均可以稱為除菌過濾器澄清過濾器預過濾器除菌過濾器以上三種過濾器均有孔徑為0.22μm大小的。除菌過濾器的定義：能對缺陷假單胞菌的截留效果達到至少107CFU/c㎡的過濾器，才能稱為除菌過濾器第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產品的過濾除菌應當符合以下要求：（二）應當實行措施降低過濾除菌的風險。宜安裝其次只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液。最終的除菌過濾濾器應盡可能接近灌裝飾。第十二章：滅菌方法冗余過濾的概念一：兩個過濾器均為除菌過濾器二：兩個過濾器之間是無菌的三：兩個過濾器的完整性檢測均為合格的第十二章：滅菌方法第七十五條非最終滅菌產品的過濾除菌應當符合以下要求：（三）除菌過濾器運用后，必需接受適當?shù)姆椒⒖虒ζ渫暾赃M行檢查并記錄。常用的方法有起泡點試驗、擴散流試驗或壓力保