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作物雜技技術講稿遺傳育種教研室第一節(jié)小麥人工雜交的方法和步驟一、親本的選擇按即定的雜交組合,選擇發(fā)育良好、健壯、無病蟲害,穗柄抽出離基部葉鞘約3?6cm,但尚未開花,即花藥未成熟的植株主穗作為母本。二、整穗去雄前先用剪刀剪去穗子上部和基部的小穗,只保留中部的8~10個發(fā)育健壯的小穗,然后用鑷子夾去每個小穗中部發(fā)育不良的小花,每個小穗只留基部的兩朵花。再用剪刀剪去每朵小花的芒和外穎頂端1/4?1/3。三、去雄將整穗后的麥穗夾在左手大拇指和中指之間,用食指輕壓外穎頂部使內外穎張開,右手用鑷子輕輕插入內外穎的合縫里,夾住三個花藥的頂部,輕緩地夾出。注意不要把花藥夾破,也不能碰傷柱頭和內外穎。如果一旦夾破花藥,這時應摘除這朵花,并用酒精棉球擦洗鑷子尖端,以殺死附在上面的花粉。夾時要數(shù)清三個花藥是否已全部取凈。去雄要有一定的順序,由下而上或由上而下都可以,去完一側再去另一側,依次進行,以免遺漏。去雄時如發(fā)現(xiàn)花藥變黃,則需要注意花藥是否已經(jīng)破裂,一般情況下,這樣的小花已不能再用,應把它去掉。夾過變黃的花藥或做完一個品種另換一個品種時,也要把用過的鑷子用酒精消毒,以防把花粉帶到其他花朵或品種上。母本穗子去雄完畢后,必須立即用羊皮紙袋套住隔離,以防其他花粉傳入。套上的紙袋要折疊住,用回形針或大頭針別住,以免被風吹掉。之后把紙牌掛在去雄穗旗葉下面的莖稈上。紙牌上應注明母本品種名稱或行號、去雄日期、操作者的姓名等。紙牌寫法如下:早X占(注:早:代表母本品種&:代表父本品種E:月日E:代表去雄日期P:月日P:代表授粉日期XXXXXX:代表操作者姓名)四、花粉的采集和授粉去雄花朵的柱頭呈羽狀分叉時,表示柱頭已經(jīng)成熟,應及時進行授粉。一般在去雄后2~4天的上午9時前和下午4時以后進行授粉較好。一般采用捻穗法進行授粉,雜交工作效率高,結實率也高。捻穗法授粉的步驟為:首先選擇父本穗。父本穗應為發(fā)育良好、健壯、無病蟲害,且中部小穗已有少部分小花開過的穗子。用剪刀剪下父本穗(留3cm穗柄),馬上剪去芒和當天不能開花的小穗,并將小花的穎殼剪掉1/3,用手握1分鐘后,用剪刀剪開母本紙袋頂部,將整好的父本穗倒插在紙袋內,穗柄應露在紙袋外邊,封好紙袋上口。5?10分鐘后,用手輕輕捻動穗柄,使其圍繞母本穗轉動數(shù)圈。之后,取出父本穗,立即用大頭針把紙袋上口折疊別好,并在紙牌上注明父本品種名稱和授粉日期。一般父本穗只要有2?3個花藥良好散粉就可滿足授粉的需要。母本穗上的紙袋可以一直保留到收獲時連同穗子一起收回。如果父母本開花期不一致,在播種時要調整好播種期,盡量做到花期相遇。第二節(jié)玉米自交和雜交的方法和步驟一、雌穗套袋隔離玉米是異花授粉作物,要達到自交的目的,必須嚴格控制散粉和授粉過程。在雌穗抽出后、花絲抽出前,用羊皮紙袋套住雌穗,套袋時應將袋口夾實于雌穗與莖稈之間,不讓風吹掉,且每天要檢查。有的雌穗苞葉長,應在套袋之前將頂端苞葉剪去3~4cm,以斷口處能見到少量花絲為宜。這樣做可使花絲整齊一致抽出苞葉,有利于快速授粉,而且一次授粉能全部結實。但雌雄抽穗不協(xié)調的單株應注意,可不剪去苞葉。二、雄穗套袋及采集花粉花絲抽出后3~4天,即套袋的雌穗在袋內吐出大量花絲后,如果同一株雄穗已經(jīng)開花,即可進行人工自交;如果擬定的父本采粉株已經(jīng)開花,可進行人工雜交。在授粉的前一天下午14~16時,用剪刀剪去雌穗頂端的花絲,以便第二天授粉。同時,用大紙袋套在采粉株的雄穗上,袋口折疊兩次并用曲別針夾住疊口。三、授粉剪絲后次日上午露水干后花粉散出時進行授粉。注意:不能在當天隨便套袋采集花粉后立即授粉,以免散落在雄穗上的其它花粉也參與授粉而造成混雜。采粉時先用左手輕輕彎曲植株和雄穗使袋口向下,右手輕拍紙袋,將花粉抖落于紙袋內,然后摘下曲別針,取下紙袋,迅速將袋口折疊,防止空氣中其它花粉進入。給雌穗花絲授粉時,袋口向下微傾斜,用手輕拍紙袋,將花粉集中于袋口。這時一手摘下雌穗上的紙袋,另一手迅速將花粉均勻地撒在花絲上,隨即迅速套上雌穗袋。(也可用直接把盛有花粉的雄穗袋套在雌穗上的辦法。)授粉后將寫好的紙牌套在雌穗上,紙牌上注明自交符號或雜交組合、授粉日期和操作者姓名。自交紙牌:AO雜交紙牌:AXB授粉日期:授粉日期:操作者:操作者:注:A、B為親本自交系名稱,O為自交符號,X為雜交符號。四、授粉后的管理和注意事項1、授粉后要經(jīng)常到田間觀察,防止因果穗膨大或風雨影響使果穗上的紙袋破裂或掉落。一般授粉后15~20天可摘除雌穗紙袋,或成熟后將果穗連同紙袋、紙牌一起收回。2、在整個操作過程中,各個環(huán)節(jié)手都不能伸入花粉袋或接觸花絲,避免花粉混雜。3、授粉時謹防觸動鄰近植株的花粉飛散,造成混雜。4、授粉時如遇花絲過長,可剪短到3cm左右,如遇苞葉過長或天氣干旱,花絲抽出緩慢,可再剪去苞葉,到第二天再授粉。第三節(jié)大豆人工雜交的方法和步驟大豆的花很小,雜交工作比較困難,一般成活率只有20?30%。如果雜交技術熟練,成活率可達50%以上。大豆的落花率高達40?70%,因此,雜交時要多做些花朵。一、母本植株和花朵的選擇首先確定母本行。為了便于在F]植株中鑒別偽雜種,應選擇帶有一個隱性性狀的親本做母本(如白花),而帶有相對顯性性狀的親本做父本(如紫花)。之后,在即定的母本行中選擇具有品種典型性、生長發(fā)育良好而健壯、無病蟲害的植株作為雜交的母本株。無限結莢類型應選基部1~2個花簇已開放的植株,取中下部5~6個花蕾去雄;有限結莢類型選取主莖上中部或頂端的花朵去雄。因為這些部位的花朵結莢良好。適宜去雄的花蕾必須是花冠已露出萼隙1~2mm,但還沒有伸出萼尖的。這樣的花蕾雌蕊已經(jīng)成熟,雄蕊還沒有散粉?;ǘ溥x定后,應將該花簇上其余的花朵全部摘除。一般在一棵植株上可選2?4個花簇,一個花簇中只留2~4朵花做雜交。二、去雄去雄時間最好是在授粉前一天的下午15~19時,或是在授粉當天的早晨7時以前。首先,用左手的拇指和食指扶花,右手拿鑷子將萼片夾住,向下一一撕去萼片的上部,兩個較短萼片著生的地方應多摘除一些,因為雌蕊柱頭正好對著這兩個萼片。萼片摘除后,花冠大都露出,再用鑷子斜夾花冠,以免碰到柱頭,將鑷子向上一提,5個花瓣有時連帶10個花藥全部拔除,未成熟的花藥呈黃綠色。如果還有少數(shù)花藥沒有去凈,可用鑷尖一一挑出,注意不要碰傷柱頭。如果去雄時不慎將花藥夾破,應摘除這朵花,并且用酒精擦洗鑷子。去雄后可用放大鏡檢查鑒定柱頭是否適于授粉。成熟的柱頭周圍有乳狀突起而且分泌象露珠似的粘液;未成熟的柱頭顏色晦暗無光澤,不宜當天做雜交用,應在第二天早晨再授粉。三、父本的選擇及授粉去雄后,可在當天上午7~10時授粉,也可待次日上午授粉。授粉用的父本,宜選擇生長健壯、花初開而龍骨瓣尚未分開的花朵。在植株上摘下選中的父本花朵,用鑷子摘除萼片和花冠,露出黃色的已經(jīng)成熟開裂的花藥,將花藥輕輕在指甲上點一點,見有淺黃色花粉開始散出,就可將該花藥在母本柱頭上輕輕涂抹授粉。授粉后,用連在雜交花附近的新鮮葉片(不要摘下)將授粉的花簇包好,用大頭針或葉柄別住。這樣既可避免異花授粉,又因鮮葉的水分蒸發(fā)而保持雜交花朵周圍的濕度,以防日曬和風雨吹打,使柱頭干枯或花朵掉落。最后,在雜交花的下一節(jié)間掛上紙牌。紙牌上用鉛筆寫明雜交組合、雜交日期和操作者姓名。四、雜交后的管理和注意事項授粉后4?5天,應將包著的葉片打開進行檢查。如果雜交花朵已經(jīng)發(fā)育成幼莢,要摘除新生的花蕾,以免混雜;如果雜交花已經(jīng)干枯脫落,應將紙牌摘掉。以后,每隔?5天再檢查幾次。成熟時,將同一雜交組合的豆莢連同紙牌收在一個紙袋內,按組合混合脫粒。第四節(jié)水稻人工雜交的方法和步驟一、選穗應選取形態(tài)特征具有品種典型性,生長健壯,無病蟲害,稻穗已抽出葉鞘2/3?3/4,穗尖前一天已開過幾朵花的主莖穗或第一分蘗穗做母本穗,選穗中、上部的穎花去雄。選穗時,可對光透視稻穗,如果上、中部穎花內的花藥已接近頂端,約占穎花長度的2/3以上,即為當天開花最多的稻穗。這樣的穗可以邊去雄邊授粉,雜交效果也很好。二、去雄選好母本穗后即可去雄。水稻人工去雄的方法有很多種,通常采用的有以下幾種:1、溫湯去雄原理:利用花粉比柱頭更敏感的特性,控制一定的水溫和持續(xù)時間,恰好能殺死花粉而對柱頭無影響,達到集體殺雄、簡化去雄手續(xù)的目的。方法:在暖水瓶中調好45r水溫的水,在水稻自然開花前0.5?1小時,先將選好的母本植株的稻穗上開過的花剪去,然后小心地將稻穗和暖水瓶相對傾斜,將穗子全部浸入溫水中(注意勿折斷穗頸和稻稈),5分鐘后移去暖水瓶(秈稻43r時不應超過5分鐘,粳稻45r時不得超過5分鐘。如水溫已下降為42?44r,則處理8?10分鐘)。稻穗取出后稍晾干,大約十幾分鐘,既有部分穎花陸續(xù)開放。這些開放的穎花,其花粉已被溫水殺死。用剪刀把未開花的穎花全部剪去,并立即用羊皮紙袋套上,已防串粉。掛上紙牌。2、溫氣殺雄原理:與溫湯殺雄相同。方法:將保溫瓶盛滿50r的溫水,殺雄時將溫水倒入另一個空保溫瓶中。這時該瓶內氣溫約在40r左右。將該瓶倒置套入選好的母本穗,瓶口用棉塞塞住保溫,8?10分鐘取出稻穗。兩個保溫瓶可以交替使用。3、遮光去雄原理:水稻開花前,由于光強度驟然變暗,可促使提前開花,花絲伸長,但花藥不開裂,便于去雄。方法:在開花前2小時,用特制的黑紙袋將選好的母本穗套住,或將盆栽植株移入暗室。由于穗子局部光度變暗,刺激了當天要開的花提前開穎。大約在遮光10?15分鐘,花穎陸續(xù)開放。此時取下黑紙袋,用鑷子摘除花藥。然后即可套袋、授粉、掛紙牌。此法對柱頭沒有損傷和不良影響,但自交率較高。同時需注意,當水稻自然開花時應停止去雄,否則容易產生自交或混雜。4、剪穎去雄去雄時間宜在雜交前一天下午16~17時后,或在雜交當天早晨7~8時前進行。選擇露出葉鞘1/2或2/3的母本穗子,剝開葉鞘,進行整穗疏花。用剪刀剪去已經(jīng)開過的花和下部未成熟的花,留下中部預計第二天能開的穎花(可將穎花在陽光下透視,當穎花內花藥伸長已達穎殼的1/2以上時,即為次日要開的花)20?30朵,用剪刀剪去穎殼的1/4?1/3,最好剪成斜面,內穎少剪,以免影響子房發(fā)育。從截口處用鑷子輕輕取出6枚花藥,注意不要夾破花藥或損傷柱頭。立即套袋,避免穎殼和柱頭干枯。注意,袋口用曲別針夾緊并附著在劍葉上,以防穗梗折斷。之后,掛上紙牌,紙牌上寫明母本名稱或行號、去雄時間和操作者姓名。本實驗采用剪穎去雄的方法。三、授粉用溫湯去雄、溫氣殺雄和遮光去雄后,隨即可以授粉。如果采用剪穎去雄,則在去雄后1~2天內進行授粉。授粉的方法主要有以下兩種:1、彈落花粉法:自然開花時,將開而未散粉的父本稻穗輕輕剪下,置于已去雄的母本穗上方,用手抖動,使花粉彈落在母本柱頭上,可連續(xù)進行2?3次。如果父母本相鄰種植,或盆栽的母本可以搬到父本處,則不必剪穗,可就近振動授粉,但要注意防止母本品種內授粉和其他品種傳粉。如果母本已經(jīng)去雄,而父本尚未開花時,則利用黑紙袋罩住父本穗,經(jīng)10分鐘左右,揭開黑紙袋即可授粉。授粉后,再套上母本紙袋,再在紙牌上寫明父本名稱、授粉時間和授粉者姓名。2、授入花藥法:用鑷子夾取成熟的父本花藥2~3個,在已經(jīng)去雄的母本穎殼上方輕輕摩擦;或用鑷子將花藥捏破,使花粉散落在柱頭上。如果母本穎花已經(jīng)關閉,可將2~3個花藥塞進穎殼內,使其自然開裂散粉,落到柱頭上授粉。但要注意,不能損傷母本的花器。最后,套回母本袋,在紙牌上寫明父本、授粉時間和操作者姓名。第五節(jié)高粱人工雜交的方法和步驟一、選穗和整穗為了避免天然雜交,整穗和去雄應在上午8時?下午18時進行,上午11時?下午17時去雄最好。在高粱抽穗后3?4天,在母本行中選擇符合本品種典型性,生長健壯、發(fā)育正常、無病蟲害,穗子頂部小花剛開始開放的植株作為母本去雄株。一般在穗頂部開花后的第二天整穗去雄最好。整穗時,先用剪刀剪去穗子頂部已經(jīng)開過的花的穗軸和下部發(fā)育較晚的枝梗,一般只留上中部將要開花的4?6個枝梗,然后,再在留下的枝梗上疏剪去一部分過密的小穗,僅留30?50個小穗即可。二、去雄去雄時,用左手的小指、無名指和中指握住高粱穗和穗梗,拇指和食指捏住準備去雄的無柄小穗的護穎下部,右手拿鑷子用鑷尖輕輕撥開護穎,伸入內穎的下方,輕輕挑出3個花藥。注意不要損傷柱頭,不要遺留下花藥或弄破花藥。若不小心弄破了花藥,要將該花去掉,并用酒精擦洗鑷子尖部,殺死沾上的花粉。每個無柄小穗去雄后,隨即將有柄小穗用鑷子摘掉,用它作為已經(jīng)去雄的標志。這樣從上到下,逐個分枝逐個小穗地去雄,直至全部去雄完畢。然后套上羊皮紙袋隔離,用取別針別住,掛上紙牌,寫明母本名稱、去雄時間和操作者姓名。三、授粉去雄后2~

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