幽門螺桿菌及尿素呼氣試驗診斷

關于幽門螺桿菌及尿素呼氣試驗診斷第1頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn)

1982年Marshall（馬歇爾）等從人胃黏膜組織中培養(yǎng)出了幽門螺桿菌（HelicobacterPylori，Hp），認為該細菌可能是引起慢性胃炎和消化性潰瘍的致病菌。隨后，各國學者紛紛進行研究，證實了這種關系的存在，在臨床治療實踐中也取得了矚目的成就，被認為是近年來胃腸病學的重大進展。第2頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第3頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三幽門螺桿菌的生物學性狀

Hp在光鏡下是一種革蘭氏陰性桿菌，常作S形或弧形彎曲。電鏡下呈單極多鞭毛，末端鈍圓，菌體作螺旋彎曲。細菌長2.5～4.0μm，寬0.5～1.0μm。Hp的運動源于鞭毛的螺旋推進運動，而鞭毛在Hp的定居過程又起“拋錨”的作用。當延長培養(yǎng)時間或體內(nèi)抗生素作用時，Hp可發(fā)生球形體樣變化。第4頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三HP的傳播方式和途徑目前多數(shù)學者認為“人—人”是主要的傳播方式和途徑。亦可通過內(nèi)鏡傳播，而且Hp感染在家庭內(nèi)有明顯的聚集現(xiàn)象，父母感染了Hp其子女的感染機會比其它家庭高得多。對感染Hp的家庭調(diào)查提示。有Hp感染者家庭中的“健康人”，Hp抗體陽性率為64%，明顯高于同年齡組無Hp感染患者家庭的“健康人”第5頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三幽門螺桿菌的主要危害幽門螺旋桿菌具有很強的活性與繁殖能力，是一種嚴重影響公眾健康的細菌。其危害有：

——感染其它健康人口

——破壞胃的正常結(jié)構(gòu)及功能（100%）

——導致胃酸減少或缺乏（25%）

（A）增加腸道感染的機會

（B）減少人體對鐵質(zhì)及維生素B12的吸收

——急慢性胃炎（70—90%）

——發(fā)展成為消化性潰瘍及潰瘍綜合癥（17%）

——發(fā)展成為胃腺癌（1%-3%）

——發(fā)展成為胃淋巴癌

——發(fā)展成為原因不明的消化不良第6頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三幽門螺桿菌的感染和潰瘍的形成：幽門螺桿菌進入人胃后，首先通過菌膜表面的尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨，在菌體周圍形成氨云，并分泌酸性抑制蛋白降低胃部的PH值，以利于自身的存活。然后借助菌體一端的鞭毛運動穿過粘液層。研究表明，Hp在粘稠的環(huán)境下具有極強的運動能力，強動力性是Hp致病力的重要因素。Hp到達上皮表面后，通過粘附素，牢牢地與上皮細胞連接在一起。并分泌過氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶，以保護其不受中性粒細胞的殺傷作用。Hp感染使胃上皮表面PH值升高，干擾了正常的胃酸對胃泌素的反饋作用，使胃泌素水平升高，胃泌素升高又使胃酸分泌增加，胃部的高酸度極易使感染Hp后損傷的胃粘膜形成潰瘍。胃部的高酸度引起的十二指腸上端胃上皮化生，菌體分泌的細胞毒素及炎癥介質(zhì)，機體的持續(xù)免疫反應等共同造成十二指腸潰瘍。關于Hp引起十二指腸潰瘍的機制還有待進一步研究。第7頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三幽門螺桿菌的致病機制：a．菌體動力和粘附作用：是Hp能穿越粘液層并定植于胃竇上皮部的重要因素。b．抗酸能力和免疫保護：抵抗胃內(nèi)低酸度，使菌體能在酸性環(huán)境中生存，并抗中性粒細胞的清除作用，起作用的有：尿素酶，熱休克蛋白，胃酸分泌抑制蛋白，過氧化物歧化酶，過氧化氫酶等。c．損害胃粘膜屏障：通過細胞毒素，尿素酶，粘液酶等起作用。d．炎癥反應和免疫反應：Hp感染后各種炎癥細胞相繼被激活和趨化，從固有層移行至上皮內(nèi)，造成炎癥反應。炎癥細胞釋放的細胞因子、氧化自由基、水解酶、溶菌酶造成胃粘膜的損傷。慢性Hp感染造成T細胞和漿細胞浸潤，刺激這兩種細胞產(chǎn)生特異性抗體，參與體液免疫反應。Hp感染還能誘發(fā)機體的自身免疫反應。第8頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三14C-尿素呼氣試驗的臨床適應癥1、消化不良初診患者：

根據(jù)病史和體檢提示為上消化道疾病所致，雖然以往未作胃鏡檢查，若病史不長，年齡小于45歲，無報警征兆（明顯惡心、嘔吐、腹痛、厭食、出血、貧血、黃疸、腹塊、體重下降），可先作14C-尿素呼氣試驗診斷是否感染幽門螺桿菌，陽性者予以根除HP治療，無效時再考慮胃鏡或其他檢查。這就是目前國際上流行的“檢查—治療”方案。對消化不良初診者一律先行胃鏡檢查再治療，或一概先作抗酸、動力藥經(jīng)驗性試驗性治療，亦或全部先作抗HP治療的主張或行為都是不合適的。第9頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三2、消化不良復診者：

若已經(jīng)作過胃鏡檢查，并已確診,除非考慮胃癌,作14C-尿素呼氣試驗即可，不應重復胃鏡檢查.3、胃鏡檢查者：a）內(nèi)窺鏡的消毒效果目前尚無可靠保障，在病人經(jīng)濟條件許可的情況下，為降低致病病毒傳播的風險，用14C-尿素呼氣試驗代替活檢組織快速尿素酶試驗，活檢只用在疑診胃癌時。b）由于快速尿素酶假陰性高，所以對于胃鏡活檢組織快速尿素酶試驗陰性者，仍懷疑有HP感染，可加作一次14C-尿素呼氣試驗，以明確診斷，降低快速尿素酶試驗的誤診率。第10頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三4、拒絕胃鏡檢查者。5、不能耐受胃鏡檢查者：

如心臟病、高血壓、病毒性肝炎、急性咽喉炎等患者。6、療效跟蹤：

由于目前尚無抗HP的特效藥物，病人的個體差異大，首選的治療方案約有10～30%不能達到根除HP的目的。因此可將14C-尿素呼氣試驗用作病人服藥后的效果評價手段，給臨床治療方案的調(diào)整提供必要的參考。第11頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第12頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第13頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第14頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第15頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第16頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第17頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第18頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第19頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第20頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第21頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第22頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第23頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第24頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第25頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第26頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第27頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第28頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第29頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第30頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第31頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第32頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第33頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第34頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第35頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三第36頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三根據(jù)全國幽門螺桿菌學組成虹、胡伏蓮等最近的文章：中國幽門螺桿菌耐藥狀況以及耐藥對治療的影響

----全國多中心臨床研究（胃腸病學2007年12卷9期）

幽門螺桿菌根除率：

蘭索拉唑30mgbid克拉霉素500mgbid82.7%阿莫西林1000mgbid

蘭索拉唑30mgbid克拉霉素500mgbid68.6%甲硝唑400mgbid中國Hp菌株對甲硝唑和克拉霉素的耐藥率均較高，對阿莫西林的耐藥率較低，Hp對抗生素耐藥是治療失敗的主要原因。第37頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三公司主要產(chǎn)品１、YH01液體閃爍計數(shù)儀２、YH04卡式幽門螺桿菌檢測儀

3、YH630型光動力腫瘤治療系統(tǒng)4、13C紅外光譜儀第38頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三pH>9.25NH3呼氣試驗原理第39頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三尿素呼氣試驗(UBT)試劑：尿素：14C尿素（0.75mci）.受試條件：空腹3小時以上，試劑彌散時間：15分鐘。檢測儀器：

14C幽門螺桿菌檢測儀第40頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三二、尿素呼氣試驗及檢測儀器原理1、尿素呼氣試驗原理膠囊NH3CONH314陰性患者NH3CONH314尿素原型尿中排除72h呼氣中無CO2陽性患者無尿素酶Hp產(chǎn)生尿素酶尿素被水解為

CO214呼氣中含

CO21414儀器檢測口服低計數(shù)儀器檢測高計數(shù)第41頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三2、卡式檢測儀原理、結(jié)構(gòu)、改進原理GM管GM管C衰變→β射線14電脈沖計數(shù)分析顯示打印結(jié)果第42頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三三、儀器操作、校正和校準、故障1、儀器操作簡單直觀無需特殊培訓第43頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三2、質(zhì)控方法（校正和校準）YH04幽門螺桿菌檢測儀應用質(zhì)控方法指南１４Ｃ尿－素呼氣試驗診斷幽門螺桿菌感染的原理幽門螺桿菌（Hp）產(chǎn)生高活性的尿素酶。當受檢者服用14C標記尿素后，如存在Hp感染，胃中的尿素酶可將14C標記尿素分解為氨和14CO2，14CO2通過血液經(jīng)呼氣排出，如胃中不存在Hp感染，則受檢者服用的14C標記尿素將以原型從尿中排出，14C為一種天然放射性同位素，采集受檢者呼氣樣本并測量其中14C的放射性活度，Hp感染者呼氣樣本中的放射性活度遠高于本底計數(shù)，而Hp陰性者的呼氣樣本的放射性活度在本底的正常漲落范圍內(nèi)，從而可準確判斷是否感染幽門螺桿菌，該方法高度的特異度和靈敏度已通過大量臨床研究證實并得到廣泛認可。第44頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三

YH04幽門螺桿菌檢測儀的應用及技術原理１、采樣本儀器采用一個一次性的呼氣采樣卡采集受檢者的呼氣樣本，在卡片內(nèi)涂有固體吸收劑，可有效吸收呼氣中的CO2成份，在卡上還有一個變色指示窗口，可直觀的判斷呼氣卡是否失效，并保證采集到足夠的呼氣量。采樣卡密封在一個鋁箔包裝袋內(nèi)，在未拆封的情況下可長期保存，拆封后必須立即使用。２、測量儀器采用兩個具有鉛屏蔽的云母薄窗ＧＭ管探測14C衰變時產(chǎn)生的弱β射線，并由一個脈沖計數(shù)器進行計數(shù)。第45頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三３、判斷儀器對呼氣樣本進行測量計數(shù)后，將樣本測量計數(shù)值與實時本底測量計數(shù)值進行比較，若樣本的計數(shù)在本底計數(shù)的正常漲落范圍內(nèi)，給出陰性（受檢者未感染幽門螺桿菌）的診斷結(jié)果，若樣本測量計數(shù)值超出本底計數(shù)的正常漲落范圍，給出陽性（受檢者感染幽門螺桿菌）的診斷結(jié)果。根據(jù)臨床統(tǒng)計的數(shù)據(jù)，在本底漲落的上限臨界點，設置了一個不確定的區(qū)間，可能有極少的樣本將會落在這個區(qū)間，這部分樣本應予以重復測量，出現(xiàn)少量不確定的樣本并不能否定本方法和本儀器的準確性，而是一種負責任的科學的態(tài)度。第46頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三系統(tǒng)質(zhì)量控制措施系統(tǒng)的質(zhì)量控制措施應結(jié)合14C尿素膠囊生產(chǎn)廠家的操作指南和本儀器的使用說明書，在這些文件上有詳細的記載，嚴格按照其中的事項進項操作，方可確保質(zhì)量。１、標記藥物的控制措施本儀器必須配合專業(yè)生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的14C尿素膠囊來診斷幽門螺桿菌感染，請閱讀產(chǎn)品所附的說明文件，按照規(guī)定進行保管和使用。特別是其中規(guī)定了產(chǎn)品的適應范圍和適應癥，請嚴格按規(guī)定使用。第47頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三２、呼氣卡的質(zhì)量控制措施及原理呼氣卡上的變色指視窗不僅能指示采樣量，而且，可直觀的判斷呼氣卡是否失效，如果呼氣卡超過有效期，或包裝破損，指示窗內(nèi)顏色會從藍色變?yōu)榘咨?，提示呼氣卡已?jīng)失效。因此，當拆開呼氣卡的包裝袋后，觀察指示窗的顏色，發(fā)現(xiàn)顏色變白則不能使用，可有效保證質(zhì)量。第48頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三3、儀器的控制措施及原理在儀器的測量原理中已經(jīng)闡明，本儀器是基于樣本計數(shù)與本底計數(shù)的相對偏離程度來判斷結(jié)果，根據(jù)儀器的結(jié)構(gòu)和設計原理，使用者并不需要用一個標準樣本來對儀器進行校準，這一點，可通過醫(yī)療器械檢測中心的檢測報告和臨床驗證報告反映出來。簡單的說，儀器并不是像一桿秤一樣精確稱出某個物體的重量，它類似于一只試電筆，只需要確定物體不帶電時的基準，本儀器的基準就是通過實時探測得到的環(huán)境本底，因此本儀器采用了對本底計數(shù)進行實時校準的方式來保證環(huán)境本底基準的可信度。第49頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三在儀器內(nèi)部的單片機中運行著一個專門的實時本底校準程序，在儀器初次使用時即進行本底適應，該程序在儀器每次啟動時，或在操作的空閑時間，均自動對本底進行探測和校準，當儀器探測到本底異常，即超出正常的漲落范圍時立即報警，專門的實時本底校準程序還對電子計數(shù)器和傳感器的任何異常進行實時監(jiān)測并報警。因此，環(huán)境因素、儀器的電子線路、傳感器等出現(xiàn)的任何異常，都是顯而易見的，一旦出現(xiàn)異常顯示，應立即通知本公司售后服務人員，對儀器進行修理和更換，嚴格按照操作說明使用本儀器，可保證質(zhì)量。作為用戶，總有疑問，公司計劃提供校準標簽，要求業(yè)務員每年親自到每個用戶那里去幫助校正一次，貼上標簽，無論是否必要都應完成這項工作，讓用戶心安。第50頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三四、各種已有HP診斷方法和設備的對比

項目名稱檢驗方法設備價格創(chuàng)傷性準確性交叉感染實時性環(huán)境污染臨床收費快速尿素酶試驗胃鏡取材－有70～85%

存在實時無

15～30元14C尿素呼氣試驗（液閃）

服藥呼氣65000元無95%以上無實時閃爍廢液

80～120元14C尿素呼氣試驗（卡式）

服藥呼氣89000元無95%以上無

實時無80～120元13C尿素呼氣試驗

服藥呼氣

無

95%以上無實時無

180～260元組織學檢查胃鏡取材－有70～90%

存在

實時

－

100～120元單克隆糞便抗原糞便－

無95%以上無實時

－

～元未普遍接受血清學檢驗采血樣－

有

90%以上無不實時－

40～60元700000元

第51頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三13C-尿素呼氣試驗尚在14C-尿素呼氣試驗之前投入的臨床應用，這是因為最初的探索僅限于消化病學科的專家學者，人們對14C的放射性確實心存疑慮。而對科學問題的討論，由非專業(yè)領域的專家進行，往往會得出帶有偏見的結(jié)論。那么，13C-尿素呼氣試驗與14C-尿素呼氣試驗究竟有什么差別呢？下面是兩者異同點的比較：六、13C-尿素呼氣試驗與14C-尿素呼氣試驗的比較第52頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三1、二者的相同點（1）二者的原理相同

二者都是將尿素（含一個C原子，分子式NH2CONH2）中的C原子用它的同位素取代后作為標記藥物，口服標記藥物，以檢驗人的胃中是否存在大劑量強活性的尿素酶，從而判斷是否感染Hp。（2）二者的準確性相同

二者基于同樣的基本原理進行診斷，雖然采樣方式不同，分析樣本采用的儀器的原理也不同，但其實質(zhì)都是分析呼氣樣本中標記同位素的含量。以不同的技術手段，實現(xiàn)對同位素的含量進行準確測定，都是早已成熟的技術，其準確性是完全相同的。（3）二者同樣安全

前已述及，經(jīng)過包括《美國國家核管理委員會》在內(nèi)的許多國家的專業(yè)機構(gòu)的專業(yè)評估，都證實了14C-尿素呼氣試驗對環(huán)境、受檢者、操作者是安全的，任何人都不應該再談核色變。因為沒有任何理由認為，人一生中喝了幾杯橙汁、坐了一次飛機就受到了核輻射的危害，所以，13C-尿素呼氣試驗與14C-尿素呼氣試驗同樣是安全的。第53頁，共57頁，2023年，2月20日，星期三2、二者的不同點（1）二者的標記同位素不同

13C-尿素呼氣試驗與14C-尿素呼氣試驗分別采用13C和14C作為標記物。14C的半衰期為5730年，當它生成后在5730年的時間內(nèi)，有一半會衰變?yōu)?4N，并伴隨發(fā)射能量不等（0～157KeV分布）的?射線。而13C與12C，由于其半衰期幾乎是無窮的長，人們根本探測不到它的衰變，所以稱為穩(wěn)定同位素，但它實際上也是在衰變，現(xiàn)代科學已經(jīng)從理論上闡明，宇宙中沒有永恒不變的物質(zhì)。（2）二者的采樣方法不同

13C-尿素呼氣試驗一般是往一個空的采樣集袋內(nèi)呼氣，而14C-尿素呼氣試驗過去一般是往一個存有液體吸收劑的采樣瓶內(nèi)呼氣，新型卡式檢測法，則是用一個片狀的呼氣卡采集樣本。第54頁，共57頁，2