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掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法 掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法 蛋白質(zhì)的分離與純化 無(wú)教學(xué)這些因素是如何影響泳動(dòng)速度的“蛋白醋酸纖維薄膜電泳”實(shí)驗(yàn)學(xué)生對(duì)上節(jié)存在問(wèn)題進(jìn)行討學(xué)生基礎(chǔ)知識(shí) ???? 白質(zhì)溶解度不同的分離方法——蛋白 同程度下降并先后析出,這種現(xiàn)象稱鹽的鹽離子(如硫酸銨的SO:一和NH})有沉淀析出。由于各種蛋白質(zhì)分子顆粒大②根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小的差別的分離方法——透析:透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質(zhì)分開(kāi)。③根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進(jìn)行分離——電泳法:各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下,因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場(chǎng)中的pH蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破醋酸纖維薄膜電泳的實(shí)驗(yàn)的等電點(diǎn)的pH位置就停止,此法可用于分析和各種蛋白質(zhì)。 薄膜(CAM)作支持物的一種區(qū)帶電泳技術(shù)將樣品點(diǎn)樣于醋纖膜上在pH為8.6的緩沖液中電泳時(shí)蛋白質(zhì)均和漂洗,可清晰呈現(xiàn)清蛋白、α1一球蛋 蛋白5條區(qū)帶,比色即可計(jì)算清各學(xué)生完成課外作業(yè)及下一節(jié)(學(xué)案板,,教學(xué) 根蛋白質(zhì)的不同特性,分別可選擇哪些抽提方法 、蛋白質(zhì)的純化主要是根據(jù) 之間以及 之間 、、 鹽析法分離蛋白質(zhì)的原理是 利用透析法將蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分離的原理 C.利用蛋白質(zhì)分子的膠體 [3].下列關(guān)于蛋白醋酸纖維薄膜電泳實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法不正確的是 A.實(shí)驗(yàn)所用比妥緩沖液的pH為8.6 [4].有一混合蛋白質(zhì)溶液,各種蛋白質(zhì)的pH分別為 三種泳向正極,則緩沖液的pH應(yīng)該是 1.(多選)在蛋白質(zhì)粗提取時(shí),破碎細(xì)胞的方法有()A.研磨法B.超聲波法C.酶解法D.機(jī)械破碎2.分離水溶性蛋白質(zhì)所選用的提取溶劑是()酸性溶 B.堿性溶液C.中性緩沖 3.(多選)純化蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)不同蛋白質(zhì)之間以及蛋白質(zhì)與其他分子之間在哪些等方面存 A.分子大,B.溶解度C.所帶電荷的多少D某蛋白質(zhì)等電點(diǎn)為7.5,在pH6.O的緩沖液中進(jìn)行自由界面電泳,其泳動(dòng)方向?yàn)? A.向負(fù)極移動(dòng)B.向正極移動(dòng)C.不運(yùn)動(dòng)D.同時(shí)向正極和負(fù)極移動(dòng)在pH5.12時(shí)進(jìn)行電泳,哪種蛋白質(zhì)既不向正極移動(dòng)也不向負(fù)極移動(dòng) A.血紅蛋白:pI(等電點(diǎn))一7.07 B.魚(yú)精蛋白:pI一12.20C.a(chǎn)1一球蛋白:pI一 D.B一球蛋白蛋白電泳時(shí)通常用pH8.6的緩沖液,此時(shí)各種蛋白質(zhì)所帶的電荷為 A.清蛋正電荷,其他蛋負(fù)電荷B.清蛋負(fù)電荷,其他蛋正電荷 B.醋酸纖維薄膜C.大分子凝膠 五、學(xué)結(jié)和課外作業(yè):1、學(xué)結(jié)3、:64頁(yè) 8.請(qǐng)根據(jù)蛋白醋酸纖維薄膜電泳實(shí)驗(yàn)回答下列問(wèn)題實(shí)驗(yàn)所用的緩沖液的pH ,因 在中蘸一下,在離薄膜一端 cm處實(shí)施電泳時(shí),所用電壓 ,時(shí) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),薄膜上 B.α1一球蛋白C.α2--球蛋白 D.β一球蛋白E.γ一球蛋白在正常人蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中泳動(dòng)最快的 在正常人蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中泳動(dòng)最慢的 在正常人蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中區(qū)帶最深的 在正常人蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中區(qū)帶最淺的 正常人中的各種蛋白質(zhì),在pH8.6的緩沖液中負(fù)電性最強(qiáng)的 正常人中的各種蛋白質(zhì),在pH8.6的緩沖液中負(fù)電性最弱的是 10.醋酸纖維薄膜電泳可把蛋白分成五條帶,由負(fù)極數(shù)起它們的順序是 A.γ一球蛋白、α1一球蛋白、
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