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中科院612生物化學與分子生物學2011年部分真題及參考答案一、名詞解釋(每題4分,共20分)抗體酶:是指通過改變抗體中與抗原結合的微環(huán)境,并在適當?shù)牟课灰胂鄳拇呋鶊F,所產生的具有催化活性的抗體。Sanger雙脫氧終止法:一種很有效的DNA測序的方法,基本原理是在DNA合成過程中加入ddNTP,參與DNA合成的ddNTP不含有3‘-OH不能與其他的核苷酸形成磷酸二酯鍵,DNA的合成便在此終止。在經(jīng)過放射性自顯影和凝膠電泳技術便可以讀出該DNA的核苷酸順序。DNA切除修復:是指通過切除-修復內切酶將DNA損傷部位切除,然后在DNA聚合酶的作用下,以露出的單鏈為模板重新合成互補鏈,再由連接酶將缺口連接起來的過程。光合作用:主要是綠色植物將太陽光能轉變成化學能(ATP和NADPH)并釋放氧,同時利用所生成的化學能將CO2和H2O同化為糖的過程。酵母人工染色體;是一種人工構建的利用酵母菌染色體的復制元件構成的基因工程載體。二、單選(每題1分,共20分)這里面的題全是基礎,比如產生ATP的是什么細胞器?(線粒體),合成DNA用什么底物?(dNTP)之類的,送分的,并無參考價值。三、判斷(每題1分,共30分)這一部分值得說一說,知識點有點偏,但很多人包括以前我的師兄都沒有提出重視,可能失分就在這里。做題技巧還是有的:首先,對錯各一半,這是出題原則。第二,出題點很多是小標題內容。第三,陷阱比較多,要細心,這個不解釋你懂的。四、簡答題(每題5分,共30分)1.DNA分子克隆的概念?簡述其流程。答:在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到復制與擴增,然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。其主要流程:(1)目的DNA的制備(2)載體DNA的篩選(3)目的DNA與載體的連接(4)將重組DNA分子導入受體(5)重組DNA的擴增選擇2.表觀遺傳學的概念,包括哪些方面。淺議表觀遺傳在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用。答:表觀遺傳學是研究基于非基因序列改變所致基因表達水平的變化的一門學科。主要包括DNA甲基化,染色質構象的變化,染色體失活,基因組印記,基因沉默等方面。3.真核生物中RNA聚合酶的種類以及主要功能。答:真核生物的RNA聚合酶有三種,RNA聚合酶=1\*ROMANI、RNA聚合酶=2\*ROMANII以及RNA聚合酶=3\*ROMANIII。其中RNA聚合酶=1\*ROMANI用來催化合成rRNA(5.8s,18s和28s),RNA聚合酶=2\*ROMANII用來催化合成mRNA和某些特殊的RNA,如snRNA,RNA聚合酶=3\*ROMANIII用來合成tRNA和5srRNA。4.糖蛋白中N-型糖肽鍵和O-型糖肽鍵的結構特征及二者生物合成的特點是什么?答案略5.某研究生做關于植物方面的實驗,遇到以下三種情況,請你給出實驗方法從而達到實驗目的:(1)檢測某一目的基因是否整合到植物的基因組上(2)檢測某一目的基因是否轉錄為mRNA(3)檢測某一目的基因是否表達為蛋白質答:從基因工程中轉基因技術里目的基因及其表達是否成功的檢測方面考慮。6.以乳酸脫氫酶為例說明同工酶的概念,并解釋其生理意義?答:來自同一生物的不同組織或者同一細胞的不同亞細胞結構,能催化相同反應的酶叫做同工酶。以動物體內的乳酸脫氫酶為例,來自哺乳動物的乳酸脫氫酶是一種四聚體蛋白,從不同組織提取物中可以分出五種不同的形式,并鑒定出不同的亞基,如骨骼肌型的A亞基和心肌型的B亞基。這五種不同的同工酶是有這兩種亞基以不同的比例裝配而成的四聚體。五、問答題(每題10分,共50分)1.研究蛋白質和蛋白質相互作用的分子生物學技術有哪些?并簡述其原理。答:(1)酵母菌雙雜交系統(tǒng)(2)噬菌體展示技術(3)免疫印跡或westernblotting(4)等離子共振技術(5)熒光能量轉移技術(6)pull-down技術2.RNA的功能多樣性?答:參照2012年答案。3.什么是操縱子?畫出乳糖操縱子的模型并解釋其調控機制。答:操縱子指編碼一特定代謝途徑酶的結構基因和控制這些基因轉錄的控制序列所構成的轉錄單位。其調控機制:操縱子有很多種,這里我們以乳糖操縱子為例。1、乳糖操縱子的組成:大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉移酶,此外還有一個操縱序列O,一個啟動子P和一個調節(jié)基因I。2、阻遏蛋白的負性調節(jié):沒有乳糖存在時,I基因編碼的阻遏蛋白結合于操縱序列O處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶;有乳糖存在時,乳糖作為誘導物誘導阻遏蛋白變構,不能結合于操縱序列,乳糖操縱子被誘導開放合成分解乳糖的三種酶。所以,乳糖操縱子的這種調控機制為可誘導的負調控。3、CAP的正性調節(jié):在啟動子上游有CAP結合位點,當大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時,cAMP濃度升高,與CAP結合,使CAP發(fā)生變構,CAP結合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結合位點,激活RNA聚合酶活性,促進結構基因轉錄,調節(jié)蛋白結合于操縱子后促進結構基因的轉錄,對乳糖操縱子實行正調控,加速合成分解乳糖的三種酶。4、協(xié)調調節(jié):乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負調控與CAP的正調控兩種機制,互相協(xié)調、互相制約。4.試述SDS技術的原理答:SDS即SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。其基本原理為:SDS是一種帶負電荷的陰離子去垢劑,在電泳之前,蛋白質樣品用SDS處理,SDS能拆散蛋白質的折疊結構,然后延伸展的多肽鏈的表面吸附,吸附在多肽鏈上的SDS使肽鏈帶凈負電荷,且吸附的量與肽鏈的大小成正比。導致結果是大小不同的多肽鏈的Q/r值相等,由于聚丙烯酰胺的分子篩的功能,較小的多肽比較大的多肽遷移的更快,達到根據(jù)分子量的大小來分離蛋白質的效果。5.簡述生物膜的“流體鑲嵌模型”的要點。答:膜的流動性是生物膜的基本特征之一,也是細胞進行生命活動
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