實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)課件

實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)1、血液樣本的采取

采血的部位和方法，根據(jù)檢驗(yàn)的項(xiàng)目、所需血量和動物種類的不同，可分為毛細(xì)血管采血、靜脈采血和心臟采血。毛細(xì)血管采血法除血沉測定和紅細(xì)胞壓積測定需較多量血液外，其他各項(xiàng)測定均可在耳尖、耳緣及耳靜脈處按毛細(xì)血管采血。采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精揮發(fā)后，用消毒的干燥的針頭迅速刺入2~3mm深，讓血液自然流出，且勿擠壓以免混入過多組織液。流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血液作紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測定，若利用第三滴血時，仍要將第二滴血擦干，否則流出的血不能形成滴狀，不易吸取。靜脈采血法犬、貓可于小腿外側(cè)跖背外側(cè)靜脈或前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈采血。局部剪毛消毒，用止血帶扎住采血部上端，使靜脈怒張，用消毒、干燥的注射器接上針頭，針頭斜上面刺入靜脈采血，待抽至所需量后，先放松止血帶，再用消毒棉球按住傷口，拔出針頭。除去針頭，將血液緩緩注入清潔的試管內(nèi)。需抗凝血液時，試管內(nèi)加抗凝劑，并立即混勻，以免凝固。第一節(jié)血液檢驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)

（1）．后肢外側(cè)跗外靜脈、內(nèi)側(cè)隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血（2）．股動脈采血（3）.心臟采血同大、小鼠心臟采血（4）．耳緣靜脈采血同兔耳緣靜脈采血3實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)4實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)采血方法的選擇，決定于實(shí)驗(yàn)?zāi)康乃柩恳约皠游锓N類。凡用血量較少的檢驗(yàn)如紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時可作靜脈采血。靜脈采血時，若需反復(fù)多次，應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。研究毒物對肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂、血液pH值以及K+、Na+、Cl-離子濃度，必須采取動脈血液。5實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)采血場所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃為宜；采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。

采血時要注意6實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)取少量血，犬貓耳靜脈。取中量血：ａ．后肢外側(cè)皮下小隱靜脈 ｂ．前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈 ｃ．頸靜脈取大量血

ａ．股動脈、頸動脈最多狗100ml、貓10ml ｂ．心臟 7實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)血液的抗凝草酸鈉是常用的抗凝劑，每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常規(guī)檢驗(yàn)。因?qū)t細(xì)胞大小有影響，故不能用紅細(xì)胞壓積測定，如測定紅細(xì)胞壓積時，可用雙草酸鹽抗凝劑或乙二胺四乙酸二鈉。雙草酸鹽抗凝劑

草酸鈉0.8g草酸銨1.2g蒸餾水加至100ml溶解后吸取0.5ml，加入供采血試管或小瓶中，置干燥箱內(nèi)（溫度不超過80℃）烘干備用，可供5ml全血抗凝。8實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)乙二胺四乙酸二鈉（EDTA－Na2）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成10%的溶液，每2滴可使5ml全血抗凝?？蛇m用于一般的血液學(xué)檢查，特別是血小板計(jì)數(shù)，但因?yàn)橛绊懷“寰奂桶准?xì)胞吞噬功能，不適合于血象及血小板功能檢查。3.8%枸櫞酸鈉溶液每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能檢查。因其毒性小又可作為血液保養(yǎng)液。但不適用于血液化學(xué)檢驗(yàn)。由于抗凝劑溶解緩慢，故只能配成溶液，不能用粉劑。血液的抗凝9實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)肝素肝素價(jià)格最貴，其優(yōu)點(diǎn)是抗凝作用強(qiáng)，不影響血細(xì)胞的體積，不致溶血等，可用于多種血液生物化學(xué)分析和紅細(xì)胞壓積測定。但過量的肝素可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少，故不適用于白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)，也不適用于血涂片檢查，因其在瑞氏染色時會出現(xiàn)藍(lán)色背景，更不能用于凝血象的檢查。血液的抗凝通常用肝素粉劑配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶內(nèi)，放于37～50℃中烘干后貯于冰箱內(nèi)保存。能使5ml血液不凝固，肝素抗凝劑應(yīng)及時使用，放置過久易失效。懷疑傳染病時，采血應(yīng)防止到處流散，檢后殘余血液及所用器皿應(yīng)進(jìn)行消毒處理。10實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測定魏氏法魏氏血沉管長30cm，內(nèi)徑2.5mm管上有0~200的刻度，每一刻度的距離為1mm，其溶積為1ml。先向10ml刻度試管中加入3.8%枸櫞酸1ml，再自靜脈采血4ml，顛倒混合數(shù)次，然后用魏氏血沉管吸取抗凝劑至刻度0處，擦去管外血液，在室溫條件下，垂直放于血沉管架上，經(jīng)15、30、45、60min，分別觀察并記錄細(xì)胞沉降數(shù)值。11實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測定“六五”型血沉管法“六五”型血沉管法內(nèi)徑0.9cm，全長17~20cm，管上有100個刻度容積為10ml。于血沉管中加入抗凝劑（草酸鈉0.015~0.02g，枸櫞酸鈉粉末0.04~0.05g）,自頸靜脈直接采血至刻度“0”處，立即充分混合，于室溫垂直立于試管架上，鏡15、30、45、60min各觀察一次，并記錄紅細(xì)胞沉降的數(shù)值。12實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)血紅蛋白測定紅細(xì)胞遇酸溶解，游離出血紅蛋白，并被酸化為褐色的酸性血紅素，稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色柱比色，即可求得血紅蛋白的含量。血紅蛋白試紙測定法器材應(yīng)備有測定血紅蛋白試紙和4g%~15g%血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)比色板。測定時，取試紙一條，吸附被檢血液一小滴，待血完全浸透后，立即置于所附標(biāo)準(zhǔn)色板的小孔下，肉眼與色板色澤進(jìn)行比較，選擇顏色相同或近似者，即得100ml血液所含血紅蛋白的克數(shù)。沙利氏血紅蛋白測定法沙利氏血紅蛋白計(jì)由比色架、標(biāo)準(zhǔn)比色柱、血紅蛋白測定管及血紅蛋白吸管組成。測定管有兩個刻度標(biāo)志，一側(cè)的2~24刻度表示100ml血液中含有的血紅蛋白克數(shù)；另一側(cè)有20~160刻度，表示100ml血液中所含血紅蛋白的百分?jǐn)?shù)。13實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)血紅蛋白測定血紅蛋白增高見于各種原因引起的血液濃縮，如腹瀉、嘔吐、大汗、多尿及腸梗阻等。血紅蛋白減少見于各種貧血，14實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是將一定量的供檢血液經(jīng)一定倍數(shù)稀釋后，計(jì)數(shù)一定容積的紅細(xì)胞數(shù)，并換算為每立方毫米血液內(nèi)含量。15實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)健康動物紅細(xì)胞數(shù)（萬/立方毫米）紅細(xì)胞增多可見于因各種原因引起的血液濃縮，如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的滲出期等。紅細(xì)胞減少多見于各種類型貧血16實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)用冰醋酸將紅細(xì)胞破壞后，計(jì)算每立方毫米內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。健康動物白細(xì)胞數(shù)（個/立方毫米）白細(xì)胞增多可見于多數(shù)細(xì)菌性感染和炎癥，如豬丹毒、豬肺疫、結(jié)核、馬鼻疽、馬腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病時以白細(xì)胞的顯著增多為特征。白細(xì)胞減少主要見于某些病毒性傳染病，某些重度疾病的后期；長期應(yīng)用某些藥物（如氯霉素等）。17實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)以百分率表示各種類型白細(xì)胞間的數(shù)量關(guān)系，稱為白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。18實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)血液檢驗(yàn)白細(xì)胞增多嗜中性白細(xì)胞增多：見于肺炎及化膿性感染等。嗜酸性白細(xì)胞增多：見于某些蠕蟲病、過敏性疾病及濕疹等。淋巴細(xì)胞增多：見于結(jié)核、鼻疽、布氏桿菌病。單核細(xì)胞增多：見于敗血性疾病，某些梨形蟲病及李氏桿菌等。白細(xì)胞減少嗜中性白細(xì)胞減少：見于病毒性傳染病、藥物中毒（如長期服用抗生素）、各種疾病的垂危期。嗜酸性白細(xì)胞減少：見于敗血癥、某些病毒病及牛梨形蟲病等。淋巴細(xì)胞減少：多為嗜中性白細(xì)胞增多而造成的相對性變化。臨床意義19實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿液檢驗(yàn)第二節(jié)尿液常規(guī)檢查20實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿常規(guī)檢查內(nèi)容透明度盛尿液于玻璃容器內(nèi)，透光觀察。尿液一般物理性狀的檢查，包括透明度、尿色及氣味等。尿液一般化學(xué)性狀的檢查，包括酸堿度、尿蛋白質(zhì)、血液、血紅蛋白的檢查。21實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿色正常尿?yàn)樯铧S色或淡黃色。病理情況下有紅尿，是泌尿系統(tǒng)出血、肌紅蛋白尿或血紅蛋白尿；尿呈黃綠褐色是膽紅質(zhì)尿、尿膽素原尿的特征。尿氣味尿發(fā)氨臭，是膀胱炎、膀胱麻痹的表現(xiàn)，是由于細(xì)菌作用，使尿液分解產(chǎn)生氨的結(jié)果；尿發(fā)腐敗臭，是膀胱、尿道有潰瘍、壞死或化膿性炎癥，由于蛋白質(zhì)腐敗分解而發(fā)生；22實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿酸堿度

犬貓動物食肉多，尿呈酸性。尿蛋白質(zhì)正常尿含微量蛋白質(zhì)，但用一般方法檢查不出來，若尿中證明含有蛋白質(zhì)時稱為蛋白尿。見于泌尿系統(tǒng)炎癥及熱性病。尿中血液尿中含有血液或血紅蛋白，稱為血尿。尿液中含有多量紅細(xì)胞時，見于腎及尿路出血；尿中糖23實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)紅細(xì)胞：尿中出現(xiàn)紅細(xì)胞，是泌尿系統(tǒng)出血的特征。紅細(xì)胞的形態(tài)，在新鮮尿液呈圓形淡紅綠色；酸性尿中，則紅細(xì)胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；堿性尿中，紅細(xì)胞膨脹或破壞，呈現(xiàn)陰影。白細(xì)胞：正常尿中僅有白細(xì)胞，尿液中最常見的是中性白細(xì)胞，而淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞均少見。尿中出現(xiàn)白細(xì)胞是腎、膀胱的炎癥。在新鮮尿中其形態(tài)比紅細(xì)胞大有核，易識別；酸性尿中其形態(tài)比較完整，加稀醋酸后其核更明顯；堿性尿中則膨脹而清晰。腎上皮細(xì)胞：比白細(xì)胞約大1/3，呈圓形，有一個較大的核，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有小顆粒，易識別。若尿中出現(xiàn)多量腎上皮細(xì)胞時，是腎實(shí)質(zhì)性炎癥。尾狀上皮細(xì)胞：呈梨形或梭形，比白細(xì)胞大2—4倍。有一個圓形或橢圓形的核，這種細(xì)胞，來自腎盂、膀胱、尿道粘膜的深層，尿中出現(xiàn)時是重劇炎癥，尿道炎的居多。

有機(jī)沉渣檢查24實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)扁平上皮細(xì)胞：細(xì)胞大而扁平，核小而圓，細(xì)胞邊緣稍卷起，或幾個在一起，容易與其他細(xì)胞區(qū)別。它來自膀胱、尿道的表層，出現(xiàn)時膀胱、尿道的炎癥，但膀胱炎居多。管型：管型是腎有炎癥的標(biāo)志。當(dāng)腎患病時，由腎小球?yàn)V出的蛋白質(zhì)在腎小管內(nèi)變性凝固或蛋白質(zhì)與其他成分相結(jié)合形成管型。尿中出現(xiàn)管型時，是腎病的特征。25實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)碳酸鈣馬尿中含有大量，是馬尿的正常成分。其結(jié)晶多為園形有放射線閃光，大的結(jié)晶呈黃色；有時可見啞鈴狀、餅干樣或“十”字無色小晶，加醋酸即產(chǎn)生二氧化碳?xì)馀荻芙?。草食獸無碳酸鈣時，說明尿液為酸性，是病理表現(xiàn)。見于骨軟癥或胃腸炎。若病畜尿中重新出現(xiàn)碳酸鈣時，是病勢好轉(zhuǎn)的象征。磷酸銨鎂結(jié)晶（三重磷酸鹽）其特征為無色而兩端帶有斜面的三棱角體或?yàn)榱?、多角棱柱或棺蓋狀結(jié)晶，偶有雪花或羽毛狀的，易溶于鹽酸及醋酸中，但不溶于鹼性液和熱水。新采取的尿中，若發(fā)現(xiàn)有磷酸銨鎂結(jié)晶，表示尿在膀胱或腎盂中，由于細(xì)菌作用，尿素被發(fā)酵分解產(chǎn)生氨，氨與磷酸鎂結(jié)合的結(jié)果。見于膀胱炎、膀胱麻痹及腎盂炎。無機(jī)沉渣檢查尿中無機(jī)鹽，主要指各種無機(jī)鹽結(jié)晶及一些無機(jī)結(jié)晶物。尿中如出現(xiàn)大量無機(jī)鹽沉渣，則是病理現(xiàn)象。尿中無機(jī)鹽沉渣，隨著尿酸堿度不同而不同。堿性尿無機(jī)鹽是碳酸鈣；酸性尿無機(jī)鹽沉渣是草酸鈣臨床檢查具有意義的是：草酸鈣，為四角八面體，呈信封狀，區(qū)光力強(qiáng)，易溶于鹽酸而不溶于醋酸，馬尿含有少量，若多量出現(xiàn)時，是慢性腎炎或代謝病之癥。26實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)

尿液檢查結(jié)果的分析判定尿液檢出蛋白質(zhì)時，可認(rèn)為是泌尿系統(tǒng)的疾病，但到底是什么部位發(fā)病或是什么病，還得經(jīng)過尿沉渣的檢查。腎臟本身疾病引起的尿蛋白，則尿沉渣可檢出腎上皮細(xì)胞及管型。尿路疾病引起的尿蛋白，則尿沉渣可檢出尾狀上皮細(xì)胞，扁平上皮細(xì)胞或磷酸銨鎂結(jié)晶，而無腎上皮細(xì)胞及管型。其他疾病引起的尿蛋白，如熱性病等則具有原發(fā)病癥狀，且尿蛋白出現(xiàn)時間短，隨原發(fā)病的治愈而消失。27實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿液檢查結(jié)果的分析判定紅尿紅尿即尿呈紅色，除泌尿系統(tǒng)出現(xiàn)出血性炎癥外，肌紅蛋白和血紅蛋白尿病，尿也呈紅色，應(yīng)注意鑒別。28實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)尿液檢驗(yàn)結(jié)果必須結(jié)合臨床癥狀才能作出正確判定1.尿中出現(xiàn)蛋白質(zhì)、尾狀上皮細(xì)胞，而臨床表現(xiàn)尿意頻頻，屢呈排尿姿勢，排尿時呻吟不安，僅有少量淋漓排出，插入導(dǎo)尿管而疼痛不安，直檢膀胱充滿尿液的，可確診為尿道炎。2.尿液中出現(xiàn)尿蛋白，扁平上皮細(xì)胞或磷酸銨鎂結(jié)晶，臨床表現(xiàn)尿意頻頻，屢呈排尿姿勢，排尿時疼痛不安，僅排出少量尿液或尿液淋漓排出時，直檢膀胱胱空虛而疼痛的，可確診為膀胱炎。29實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)3.尿液中出現(xiàn)扁平上皮及磷酸鎂結(jié)晶，臨床表現(xiàn)排尿失禁或淋漓，直檢膀胱充滿尿液，壓之尿液被動流出，停止壓迫，排尿即停止。是膀胱麻痹的特征。4.尿液中出現(xiàn)尿蛋白、腎上皮細(xì)胞、管型，臨床上病畜好站立，運(yùn)動時拱腰，后肢邁步強(qiáng)拘，碎步行走，尿少而色濃，胸、腹皮下常浮腫，主動脈壓升高，主動脈口第二心音增強(qiáng)，直檢腎臟腫脹而敏感的，是急性腎炎的特征。5.尿中出現(xiàn)尿蛋白、顆?；蛲该鞴苄?，臨床表現(xiàn)逐漸消瘦，尿多，病畜食欲減少，易疲勞出汗，直檢腎臟堅(jiān)硬而凸凹不平時，是慢性腎炎的特征。30實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)第三節(jié)糞便檢查1、糞便潛血2、寄生蟲31實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)第四節(jié)生化測定1、血清總蛋白測定（雙縮脲法）具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆有雙縮脲反應(yīng)，因此蛋白質(zhì)在堿性溶液中，也能與Cu2+形成紫紅色絡(luò)合物，顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，故可以用來測定蛋白質(zhì)的濃度。正常值犬54-89g/L，貓54-78g/L

32實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)雙縮脲試劑將0.175g硫酸銅（CuSO4?5H2O）溶于約15ml蒸餾水，置于100ml容量瓶中，加入30ml濃氨水，30ml冰冷的蒸餾水和20ml飽和NaOH溶液，搖勻，室溫放置1—2h，再以蒸餾水定容至100ml后，搖勻，備用。33實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)（1）.

標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液10mg/ml牛血清白蛋白溶液或相同濃度的酪蛋白溶液（用0.05mol/L氫氧化鈉溶液配制）。作為標(biāo)準(zhǔn)用的蛋白質(zhì)要預(yù)先用微量凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量，根據(jù)其純度稱量，配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。（2）.

待測蛋白質(zhì)溶液血清（稀釋10倍）。測試其他蛋白質(zhì)樣品應(yīng)稀釋適當(dāng)倍數(shù)，使其濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線測試范圍內(nèi)。

（3）.儀器UV-2000型分光光度計(jì)。34實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)2、血糖葡萄糖氧化酶法正常值：犬3.61-6.55mmol/L貓3.89-6.11mmol/L35實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)原理葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的作用下使鄰聯(lián)甲苯胺生成藍(lán)色物質(zhì)，此有色物質(zhì)在625nm波長下與葡萄糖濃度成正比。通過測定藍(lán)色物質(zhì)的吸光度可計(jì)算樣品中葡萄糖的含量。36實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)(1)糖尿?。翰±硇愿哐浅Ｒ娪谝葝u素絕對或相對不足。(2)內(nèi)分泌腺功能障礙：甲狀腺功能亢進(jìn)，腎上腺皮質(zhì)功能及髓質(zhì)功能亢進(jìn)。引起的各種對抗胰島素的激素分泌過多也會出現(xiàn)高血糖。注意升高血糖的激素增多引起的高血糖，現(xiàn)已歸入特異性糖尿病中。(3)顱內(nèi)壓增高：顱內(nèi)壓增高刺激血糖中樞，如顱外傷、顱內(nèi)出血、腦膜炎等。(4)脫水引起的高血糖：如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。(5)．生理性低血糖見于饑餓和劇烈運(yùn)動。(6)．病理性低血糖(特發(fā)性功能性低血糖最多見，依次是藥源性、肝源性、胰島素瘤等)

臨床意義37實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)礦物質(zhì)及其他（1）血清鈣（2）無機(jī)磷（3）血清鈉、氯、鉀（4）血清尿素氮（5）血清轉(zhuǎn)氨酶38實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)第四章給藥途徑與方法動物的給藥方法主要分為注射法和投入法兩種.注射法分為：皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、腹腔注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、靜脈注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。投入法可分為：鼻腔內(nèi)投入、胃腔內(nèi)投入、腸管內(nèi)投入、氣管內(nèi)投入和經(jīng)口腔投入。39實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)

（一）皮下注射（二）皮內(nèi)注射（三）肌肉注射（四）腹腔注射（五）靜脈注射（六）淋巴囊注射（七）經(jīng)口給藥（八）其它途徑給藥如呼吸道給藥、皮膚給藥、脊髓腔內(nèi)給藥、小腦延髓池給藥、腦內(nèi)給藥、直腸內(nèi)給藥、關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥等。

40實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)（四）腹腔注射用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時，以左手抓住動物，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下，使針頭向前推

0.5～1.0cm，再以45度角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使動物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。若實(shí)驗(yàn)動物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。42實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)（五）靜脈注射1．兔：兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動脈，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。43實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)2．小白鼠和大白鼠一般采用尾靜脈注射，操作時先將動物固定在鼠筒內(nèi)或扣在燒杯中，使尾巴露出，尾部用45～50℃的溫水浸潤半分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)張，并可使表皮角質(zhì)軟化，以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè)，使靜脈充盈，用中指從下面托起尾巴，以無名指和小指夾住尾巴的末梢，右手持注射器連4(1/2)號細(xì)針頭，使針頭與靜脈平行（小于30℃），從尾下四分之一處（約距尾尖2～3厘米）處進(jìn)針，此處皮薄易于刺入，先緩注少量藥液，如無阻力，表示針頭已進(jìn)入靜脈，可繼續(xù)注入。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射，應(yīng)盡可能從末端開始，以后向尾根部方向移動注射。44實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)3．狗狗靜脈注射多選前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈注射。注射前由助手將動物側(cè)臥，剪去注射部位的被毛，用膠皮帶扎緊（或用手抓緊）靜脈近端，使血管充盈，從靜脈的遠(yuǎn)端將注射針頭平行刺入血管，待有回血后，松開綁帶（或兩手），緩緩注入藥液。45實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2～1.01～32～55～105～15肌肉0.1～0.20.2～0.50.2～0.50.5～12～5靜脈0.2～0.51～21～53～105～15皮下0.1～0.50.5～10.5～21～33～10幾種動物不同給藥途徑的常用注射量（毫升）46實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)（六）經(jīng)口給藥多用灌胃法，此法劑量準(zhǔn)確，適用于小白鼠、大白鼠、家兔等動物。1．小鼠、大鼠（或豚鼠）灌胃時將灌胃針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時應(yīng)無阻力。若感到阻力或動物掙扎時，應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2～1ml，大鼠1～4ml，豚鼠為1～5ml。47實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)2．狗、兔、貓、猴

灌胃時，先將動物固定，再將特制的擴(kuò)口器放入動物口中，擴(kuò)口器之寬度可視動物口腔大小而定，如狗的擴(kuò)口器可用木料制成長方形，長約10～15cm，粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴，約2～3cm，中間粘一小孔，孔的直途為5～10cm。灌胃時將擴(kuò)口器放于上述動物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管（如導(dǎo)尿管），經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進(jìn)入食道，此時應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道，可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中，如不發(fā)生氣泡，即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。48實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)給狗、兔灌胃時，可不用擴(kuò)口器：狗灌胃時，用12號灌胃管，左手抓住狗嘴，右手中指由右嘴角插入，摸到最后一對臼齒后的天然空隙，胃管由此空隙順食管方向不斷插入約20cm，可達(dá)胃內(nèi)，將胃管另一端插入水中，如不出氣泡，表示確已進(jìn)入胃，而沒誤入氣管內(nèi)，即可灌入。兔灌胃時，將兔固定在木制固定盒內(nèi)左手虎口卡住并固定好兔嘴，右手取14號細(xì)導(dǎo)管，由右側(cè)唇裂避開門齒，將導(dǎo)管慢慢插入，如插管順利，動物不掙扎，插入約15cm時，即表示插入胃內(nèi)，將藥液注入。各種動物一次灌胃能耐受的最大容積小鼠為0.5～1.0ml，大鼠4～7ml，豚鼠為4～7ml，家兔為80～150ml，狗為200～500ml。49實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)（七）其它途徑給藥1．呼吸道給藥呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等癥狀存在藥物或毒氣，均需要通過動物呼吸道給藥。如一般實(shí)驗(yàn)時給動物乙醚作吸入麻醉，給動物吸一定量的氨氣、二氧化碳等觀察呼吸、循環(huán)等變化；給動物定期吸入一定量的SO2。鋸末煙霧等可造成慢性氣管炎動物模型等；特別在毒物學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用更為廣泛。2．皮膚給藥為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等，均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如家兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后，將一定藥液涂在皮膚上，藥液經(jīng)皮膚吸收。50實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)3．脊髓腔內(nèi)給藥此法主要用于椎管麻醉或抽取腦脊液。家兔椎管內(nèi)注射方法：將家兔作自然俯臥式，盡量使其尾向腹側(cè)屈曲，用粗剪將第七腰椎周圍背毛剪去，用3%碘酊消毒，干后再用79%酒精