農(nóng)藥殘留的快速檢測解析

農(nóng)藥殘留的快速檢測解析第1頁/共40頁2主要內(nèi)容前言國內(nèi)現(xiàn)行農(nóng)藥殘留快速檢測方法農(nóng)殘快速檢測方法展望第2頁/共40頁3一、前言

隨著人們環(huán)境意識的不斷加強，由農(nóng)藥引起的食品安全問題也越來越受到人們的關(guān)注。為了保障消費者的安全和健康，提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全水平，增強農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的國際競爭力，我國政府決定加強農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的監(jiān)控，建立健全農(nóng)藥殘留的檢測體系，實施對蔬菜、瓜果、茶葉生產(chǎn)全過程的農(nóng)藥監(jiān)控，從源頭抓起，加強農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)地檢測，把住農(nóng)產(chǎn)品的市場準入關(guān)。第3頁/共40頁4

（一）農(nóng)藥概念農(nóng)藥(pesticides)是指農(nóng)藥是指用于預防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及有目的地調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的藥物的通稱。

現(xiàn)在農(nóng)藥不僅應用于農(nóng)業(yè)，而且也廣泛應用于畜牧業(yè)、林業(yè)和公共衛(wèi)生事業(yè)等方面。第4頁/共40頁5（二）農(nóng)藥殘留的概念

農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于生物體、食品(農(nóng)副產(chǎn)品)和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。

第5頁/共40頁6（三）農(nóng)藥的分類

1.按化學成分可分為有機氯、有機磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類及砷、汞、銅、硫磺等制劑。

2.按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長調(diào)節(jié)劑和糧食熏蒸劑等。第6頁/共40頁7（四）農(nóng)藥的毒性及種類農(nóng)藥除了可造成人體的急性中毒外，絕大多數(shù)對人體產(chǎn)生的慢性危害，多是通過污染食品的形式造成。

某些農(nóng)藥對人和動物的遺傳和生殖造成影響，產(chǎn)生畸形和引起癌癥等方面的毒素作用。第7頁/共40頁81、有機氯農(nóng)藥容易在人體內(nèi)蓄積慢性毒性作用，主要表現(xiàn)在侵害肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)，動物實驗證實有致畸、致癌作用我國1983年停止生產(chǎn)，1984年停止使用這類農(nóng)藥

第8頁/共40頁9六六六，BHC滴滴涕，DDT第9頁/共40頁10滴滴涕：減少了蛋殼的厚度，從而降低了小鳥的孵出率。二惡英：進入機體后幾乎不被排泄、沉積在肝臟和脂肪組織中。屬于劇毒物質(zhì)，毒性比氰化鉀高50—1000倍，致癌毒性比黃曲霉毒素高10倍，會引起基因突變，影響繁殖力和智力發(fā)育。

第10頁/共40頁11早期的高效高毒品種：對硫磷（1605）、甲拌磷（3911）、內(nèi)吸磷（1059）后期使用得較多的為高效低毒低殘留的品種，如：樂果、敵百蟲、殺螟松、倍硫磷毒性極低的馬拉硫磷、雙硫磷、氯硫磷、鋅硫磷、碘硫磷、地亞農(nóng)、滅蜈松2、有機磷農(nóng)藥第11頁/共40頁12有機磷農(nóng)藥主要品種甲胺磷乙酰甲胺磷第12頁/共40頁13樂果一六0五第13頁/共40頁14急性毒性：有機磷農(nóng)藥化學性質(zhì)不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留時間短。抑制血液和組織中膽堿酯酶的活性，引起乙酰膽堿在體內(nèi)大量積聚而出現(xiàn)一系列神經(jīng)中毒癥狀，如神經(jīng)功能紊亂、出汗、震顫，精神錯亂、語言失常等。第14頁/共40頁15主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質(zhì)的植物如：水果、蔬菜，特別是葉菜類如小白菜、大白菜、雞毛菜、甘藍、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、綠花菜、茼蒿、枸杞菜和黃瓜等第15頁/共40頁163、氨基甲酸酯類農(nóng)藥西維因、殺滅威、速滅威、葉蟬散等除草劑：敵草隆、敵稗在作物上的殘留時間為4d，在動物的肌肉和脂肪中的明顯蓄積時間約為7d殘留量很低第16頁/共40頁17

氨基甲酸酯類殺蟲劑進入人體內(nèi)，在胃中酸性條件下可與食物中的亞硝酸鹽和硝酸鹽反應生成亞硝基化合物，具有致癌性。第17頁/共40頁

分析步驟

所需設備1.采集樣品2.稱取樣品分析天平3.搗碎樣品高速組織搗碎機4.樣品的提取分離漏斗等5.樣品的凈化SPE、SPME等6.樣品的濃縮氮吹儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等7.樣品的定性、定量測定GC、HPLC、GC-MS等（五）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)一般過程第18頁/共40頁19

優(yōu)點

缺點能夠?qū)γ恳环N農(nóng)藥進行準確的定性和定量檢驗分析周長長檢驗費用高需要消耗大量的有機溶劑、容易造成環(huán)境污染需要使用GC、HPLC等昂貴的大型儀器設備對檢驗分析人員的化學分析水平有較高要求檢驗分析過程繁瑣、影響因子復雜、不易掌控（六）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)的優(yōu)缺點第19頁/共40頁20

傳統(tǒng)的農(nóng)殘化學分析主要是氣相或液相色譜等儀器

優(yōu)點：敏感(10－l2

～10－6mol／L)、準確

缺點：操作復雜、費時及成本高。難以滿足需求－－怎么辦？－－發(fā)展適合我國的快速檢測技術(shù)第20頁/共40頁21生化檢測生物檢測化學比色法

二、適合我國的農(nóng)藥殘留快速檢測方法酶抑制法免疫分析法發(fā)光菌檢測法敏感家蠅檢測法速測卡速測儀主要為酶免疫法第21頁/共40頁22酶抑制法

酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、應用最廣泛快速的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，是根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶（AChE)的特異性生化反應建立起來的農(nóng)藥殘留的微量和痕量快速檢測技術(shù)。第22頁/共40頁231、速測卡法第23頁/共40頁24速測卡檢測結(jié)果“-”陰性（藍色）“+”弱陽性（淡藍）“++”強陽性（白色）第24頁/共40頁252、速測儀原理:在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應，產(chǎn)生黃色物質(zhì)。用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。第25頁/共40頁26農(nóng)藥殘留快速測試儀第26頁/共40頁27速測儀檢測結(jié)果

判定依據(jù)

說明抑制率小于等于50

合格抑制率大于50超標，說明含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制率與農(nóng)藥殘留量成正相關(guān)，抑制率越高說明殘留量越高第27頁/共40頁28免疫分析技術(shù)

免疫分析技術(shù)是將免疫反應與現(xiàn)代測試手段相結(jié)合而建立的超微量分析技術(shù)，是基于抗原抗體特異性結(jié)合和反應為基礎(chǔ)的分析方法。目前應用于農(nóng)殘檢測的是酶免疫分析(EIA)和放射性免疫分析(RIA)。其中酶聯(lián)免疫分析技術(shù)應用最為普遍。第28頁/共40頁293、酶聯(lián)免疫技術(shù)

ELISA是一種以酶作為標記物的免疫分析方法，也是目前應用最廣泛的免疫分析方法之一，它將酶標記在抗體／抗原分子上形成酶標抗體／酶標抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過儀器或肉眼進行辨別。第29頁/共40頁30ELISA法基本原理是預先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進行免疫學反應。該法因不需昂貴儀器設備，對人體無害等優(yōu)點而被廣泛采用，具有靈敏、特異、快速、穩(wěn)定以及易于自動化操作等特點。第30頁/共40頁31

目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶標板，常用的酶是辣根過氧化物酶，常用的底物是鄰苯二胺和四甲基聯(lián)苯胺等。酶標板u型96孔第31頁/共40頁324、發(fā)光菌檢測法

農(nóng)藥與細菌作用后可影響細菌的發(fā)光程度，通過細菌發(fā)光情況，可測出農(nóng)藥殘留量。

此方法簡便但是特異性差第32頁/共40頁335、敏感家蠅檢測法敏感家蠅對殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存活情況，根據(jù)家蠅的死亡率可知農(nóng)藥殘留情況。該技術(shù)方法直接、過程簡單、容易掌握，但定性粗糙，只對少數(shù)農(nóng)藥有效，而且由于其他生物對不同農(nóng)藥的毒性反應與人畜可能不同，因此影響對農(nóng)藥殘留量的判斷。如家蠅對毒性較低的除蟲菊酯類敏感，遠超過有機磷和氨基甲酸酯類中毒或高毒的農(nóng)藥。第33頁/共40頁346、化學比色法

目前常用的化學比色法包括各種檢測試劑和試紙，兩者都是利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學反應檢測待測物質(zhì)，可通過與標準比色卡比較進行目視定性或半定量分析。

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化學比色分析法與一般的儀器分析方法相比，具有價格低，操作相對簡便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護，有一定的靈敏度和專一性等優(yōu)點。隨著檢測儀器的不斷發(fā)展，與其相配套的微型檢測儀器也相應出現(xiàn)。如與試劑檢測方法相配套的微型光電比色計目前已發(fā)展得比較成熟。第35頁/共40頁36三、農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)展望

一些快速速檢測方法與國家標準方法和儀器法相比具有操作簡單、快速的優(yōu)點，但由于大多數(shù)快速檢測方法在食品樣品前處理、操作規(guī)范性方面還有許多待完善之處，目前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據(jù)，兼具快速和準確兩大優(yōu)點是快速檢測方法追求的目標。第36頁/共40頁37

目前的食品現(xiàn)場快速檢測主要呈現(xiàn)4大趨勢：1由于高新技術(shù)的應用，檢測能力不斷提高，檢測靈敏度越來越高，殘留物的超痕量分析水平已達到了10-7g2檢測速度不斷加快，智能化芯片和高速電子器件與檢測器的使用，使食品安全檢測周期大大縮短3選擇性不斷提高，高效分離分段、各種化學和生物選擇性傳感器的使用，使在復雜混合體中直接進行污染物選擇性測定成為可能；4由于微電子技術(shù)、生物傳感器、智能制造技術(shù)應用，檢測儀器向小型化、便攜化方向發(fā)展，使實時、現(xiàn)場、動態(tài)、快速檢測正在成為現(xiàn)實。針對我國的特殊國情，目前我國基層單位很多速測技術(shù)的應用還只處于定性或半定量水平，易用型的小型化儀器的應用是目前和今后快速檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢。

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儀器分析技術(shù)中的色譜技術(shù)被認為是最經(jīng)典、最常用的檢測技術(shù)。傳統(tǒng)色譜檢測時長、成本高，需要加快在樣品預處理技術(shù)和檢測技術(shù)方面的研究。如樣本預