分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程

分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程第1頁/共39頁分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備分子生物學(xué)基本技術(shù)實驗準(zhǔn)備第2頁/共39頁分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程上課時間提前5分鐘進(jìn)入實驗室；不遲到、不早退，無故曠課累計3次沒成績；請假須醫(yī)院病假條或班主任簽字的假條；上課時需穿實驗服，不許在實驗室內(nèi)吃東西，不背著書包做實驗，不穿拖鞋進(jìn)實驗室；實驗課期間不許打鬧、閑聊等，不大聲喧嘩，保持課堂紀(jì)律，實驗過程中，至始至終需全組同學(xué)一起完成，任何人中途不得缺席。必須做到課前認(rèn)真預(yù)習(xí)，課間做好實驗記錄、課后詳細(xì)總結(jié)實驗結(jié)果并按時提交實驗報告；第3頁/共39頁公用試劑不得污染！每次都必須用新槍頭。公用臺上公用試劑不得私自拿到自己實驗臺上；不得私自拿走或亂放別人的實驗物品、實驗產(chǎn)品；不得擅自使用實驗室中非本實驗儀器、試劑。實驗廢液不隨便傾倒，隨時保持實驗臺的整潔；愛護(hù)實驗器材，實驗器材損壞必須按規(guī)定賠償；實驗前按儀器性能與要求，進(jìn)行儀器預(yù)熱；實驗完成后檢查電源插座，用完儀器后必須復(fù)位，儀器清潔干凈、擺放整齊；每組實驗物品齊全，需教師驗收，槍量程要?dú)w位，發(fā)現(xiàn)問題及時報修；第4頁/共39頁每位同學(xué)負(fù)責(zé)自己實驗臺面和柜體的衛(wèi)生，值日生負(fù)責(zé)公用實驗臺、地面等處衛(wèi)生；每次輪到打掃衛(wèi)生的小組，要認(rèn)真做好值日工作，離開實驗室須向教師聲明；同學(xué)與老師之間、同學(xué)與同學(xué)之間、實驗班與實驗班之間一定要互相協(xié)作配合保持公用房間衛(wèi)生，注意門窗水電的安全。遵守通用的實驗室規(guī)則。違反上述任何一條規(guī)則責(zé)任自負(fù)，并要扣分，造成損失要照價賠償。第5頁/共39頁實驗成績

實驗技能20分實驗報告20分實驗態(tài)度15分實驗室常識15分實驗實施30分第6頁/共39頁分子生物學(xué)實驗教程自編分子生物學(xué)實驗指導(dǎo)

魏群高等教育出版社分子生物學(xué)實驗指導(dǎo)劉進(jìn)元清華大學(xué)出版社參考書第7頁/共39頁實驗內(nèi)容實驗一分子生物學(xué)實驗的基本知識和基本技能培訓(xùn)實驗二大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備實驗三質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化實驗四堿裂解法提取質(zhì)粒DNA實驗五瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗六PCR基因擴(kuò)增第8頁/共39頁分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備分子生物學(xué)基本技術(shù)4實驗準(zhǔn)備第9頁/共39頁樣品、試劑和材料等的保存溫度控制系統(tǒng)--冰箱：4℃

、-20℃

、-70℃

第10頁/共39頁純水器第11頁/共39頁恒溫培養(yǎng)箱細(xì)菌平板的培養(yǎng)第12頁/共39頁恒溫空氣搖床菌體的培養(yǎng)第13頁/共39頁滅菌器培養(yǎng)基、試劑、耗材等的滅菌第14頁/共39頁P(yáng)CR儀PCR擴(kuò)增、保溫實驗等第15頁/共39頁恒溫水浴及微量加熱器保證實驗溫度的恒定第16頁/共39頁電泳儀電泳時提供電壓和電流第17頁/共39頁電泳槽核酸或蛋白質(zhì)的電泳定性分析時的凝膠支架第18頁/共39頁凝膠成像系統(tǒng)

電泳結(jié)果的定性和定量分析第19頁/共39頁紫外分析儀電泳結(jié)果的定性分析第20頁/共39頁臺式高速冷凍離心機(jī)樣品的分離第21頁/共39頁落地式高速冷凍離心機(jī)樣品的分離第22頁/共39頁分光光度計樣品的定量測定第23頁/共39頁超凈工作臺提供潔凈工作環(huán)境第24頁/共39頁電子天平樣品、試劑等的稱量第25頁/共39頁精確的pH值測定pH計第26頁/共39頁

液體試劑的精確取量移液器第27頁/共39頁制冰機(jī)第28頁/共39頁分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備分子生物學(xué)基本技術(shù)3.1實驗規(guī)范訓(xùn)練－儀器的操作3.2實驗規(guī)范訓(xùn)練－量程的選擇3.3實驗規(guī)范訓(xùn)練－標(biāo)簽3.4實驗規(guī)范－實驗操作4實驗準(zhǔn)備第29頁/共39頁3.1實驗規(guī)范訓(xùn)練－儀器的操作要求：儀器在未經(jīng)培訓(xùn)前，不得擅自使用嚴(yán)格按操作規(guī)程使用儀器，有些儀器必須有教師在場時才能使用，并由教師操作違反規(guī)定的使用者，造成的后果由使用者承擔(dān)第30頁/共39頁3.2實驗規(guī)范訓(xùn)練－量程的選擇天平燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶－－不同規(guī)格第31頁/共39頁量程的選擇－移液器第32頁/共39頁3.3實驗規(guī)范訓(xùn)練－標(biāo)簽所用的器皿上一定要做標(biāo)記標(biāo)簽一定要貼到固定的位置標(biāo)簽上應(yīng)包括具體的名稱、組別、實驗班、日期第33頁/共39頁3.4實驗規(guī)范－實驗操作詳細(xì)記錄和分析實驗結(jié)果并按時提交實驗報告實驗中一定要處處用心、勤動手，多問為什么仔細(xì)操作和觀察保留好每一步的實驗樣品，在確準(zhǔn)的情況下才能當(dāng)廢液扔掉第34頁/共39頁分子生物學(xué)實驗綜合規(guī)程分子生物學(xué)實驗常用儀器設(shè)備分子生物學(xué)基本技術(shù)實驗準(zhǔn)備4.1清點(diǎn)和熟悉常用玻璃器皿、耗材等4.2洗滌本學(xué)期實驗用玻璃器皿4.3配制試劑4.4高溫滅菌第35頁/共39頁4實驗準(zhǔn)備4.1清點(diǎn)和熟悉常用玻璃器皿、耗材等4.1洗滌本學(xué)期實驗用玻璃器皿4.3配制試劑1）0.1mol/LCaCl2100mL2）5mol/LNaOH100mL膠塞

3）LB液體培養(yǎng)基100mL

胰蛋白胨（typtone)1g

酵母提取物（yeastextract)0.5gNaCl1g

加部分水溶解后加20μL5mol/LNaOH，定容到100mL第36頁/共39頁4）10%(w/v)SDS儲液50mL，室溫保存5）1mol/LTris200mL6）2mol/LHCL100mL7）0.5mol/LEDTA100mL80mL水中加18.61gEDTA-Na2H2O，用NaOH調(diào)pH8（約需2gNaOH），后定容至100mL8）5xTAE1000mL9）70%乙醇500mL10）Amp：100mg/mL20ml，分裝每管1mL，－200C保存第37頁/共39頁4.4高溫滅菌LB液體培養(yǎng)基