不良環(huán)境對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害

不良環(huán)境對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害一、 原理植物組織在受到各種不利的環(huán)境條件（如干旱、低溫、高溫、鹽漬和大氣污染）危害時(shí)，細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能首先受到傷害，細(xì)胞膜透性增大。若將受傷害的組織浸入無離子水中，其外滲液中電解質(zhì)的含量比正常組織外滲液中含量增加，組織受傷害越嚴(yán)重，電解質(zhì)含量增加越多。用電導(dǎo)儀測(cè)定外滲液電導(dǎo)率的變化，可反映出質(zhì)膜受傷害的程度。在電解質(zhì)外滲透的同時(shí)，細(xì)胞內(nèi)可溶性有機(jī)物也隨之滲出，引起外滲液可溶性糖、氨基酸、核苷酸等含量增加，氨基酸和核苷酸對(duì)紫外光有吸收，對(duì)紫外分光光度計(jì)測(cè)定受傷害組織外滲液消光值，同樣可反映出質(zhì)膜受傷害的程度。用電導(dǎo)儀法和紫外法測(cè)定結(jié)果有很好的一致性。二、 材料與儀器設(shè)備1、 儀器設(shè)備⑴DDS—11A型電導(dǎo)儀法；⑵751—型紫外分光光度計(jì)；⑶真空泵；⑷真空干燥器；⑸三用水??；⑹打孔器⑺剪刀；⑻洗瓶；⑼試管；⑽移液管；（11）玻棒；（⑵濾紙2、 試劑去離子水3、 材料低溫處理過的黃瓜、番茄三、 方法步驟1、 清洗器具由于電導(dǎo)儀變化非常靈敏，稍有雜質(zhì)即產(chǎn)生很大誤差。因此所用玻璃器具均需先用熱肥皂水洗，再用洗液洗滌，然后用自來水、無離子水各沖四到五遍（最好是容器口朝下用水沖）。向洗凈的試管中加入去離子水，用電導(dǎo)儀測(cè)定電導(dǎo)值，檢查試管是否確實(shí)冼凈。2、 取樣及處理選取果品，一份放入適溫下貯藏，另一份放入過低溫度下使其受冷害，作為處理。用打孔器及切片器將樣品制成厚薄均勻，大小一致的組織圓片，精確稱取2克（或10個(gè)圓片），放入試管內(nèi)，用去離子水沖洗三次，然后加入30ml去離子水。對(duì)照和處理均設(shè)3?4個(gè)重復(fù)。將試管放入真空干燥器內(nèi)，開動(dòng)真空泵抽氣lOmin,以抽出細(xì)胞間隙空氣。緩慢放入空氣，水即滲入細(xì)胞間隙，組織圓片變成透明狀，細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)易于滲出，取出試管，間隔幾分鐘振蕩一次，在室溫下保持30min。3、測(cè)定：將DDS—11A型電導(dǎo)儀電極插入試管，測(cè)定外滲液的電導(dǎo)值。測(cè)定之后，將試管放入水浴鍋沸水中5min以殺死組織。待冷至室溫后，再次測(cè)定外滲液的電導(dǎo)值。計(jì)算：以細(xì)胞膜相對(duì)透性大小表示細(xì)胞受害的程度。通常按下式計(jì)算：細(xì)胞膜相對(duì)透性(％)=L1/L2X100式中：L1：組織殺死前外滲液的電導(dǎo)值；L2組織殺死后外滲液的電導(dǎo)值。直接計(jì)算細(xì)胞膜傷害率，通常采用下式計(jì)算:傷害率(%)=(1-1』T2)*100式中：C1：對(duì)照組織殺死前外滲液的電導(dǎo)值；C2:對(duì)照組織殺死后外滲液的電導(dǎo)值；T1：處理組織殺死前外滲液的電導(dǎo)值；T2處理組織殺死后外滲液的電導(dǎo)值。附電導(dǎo)儀使用方法:將電極引線接到儀器相應(yīng)接線柱上。接上穩(wěn)壓器，接通電源，打開電源開關(guān)。將開關(guān)撥向“校正”位置，調(diào)整調(diào)節(jié)器，使指針達(dá)到滿偏。將開關(guān)撥向“測(cè)定”位置。指針應(yīng)回到0點(diǎn)。撥動(dòng)選擇測(cè)定范圍旋鈕，使其處于測(cè)定范圍之內(nèi)，如不知測(cè)量范圍，應(yīng)先放在最大量程位置上，由大到小逐級(jí)調(diào)整。將電極用量蒸餾水沖洗干凈，并用濾紙吸去附著的水分。放在需測(cè)組織提取液中，待指針穩(wěn)定后，讀出指針?biāo)笖?shù)值，此數(shù)值即該提取液的電導(dǎo)度。按上述方法測(cè)定組織圓片殺死后提取液電導(dǎo)度。將電極用蒸餾水沖洗干凈，放在水中，如長期不用，則應(yīng)將電極洗凈晾干包裝收藏。注意事項(xiàng)：電導(dǎo)率測(cè)定的整個(gè)過程均需在恒溫下進(jìn)行，因?yàn)闇囟炔粌H影響細(xì)胞內(nèi)離子內(nèi)外滲透速度，而且影響提取的電導(dǎo)率，一般每升高1°C，電導(dǎo)率約增加2%,

通常以25°C為標(biāo)準(zhǔn)溫度,如不在25°C下測(cè)定，則要求把電導(dǎo)率換算為標(biāo)準(zhǔn)溫度25°C的電導(dǎo)率。五.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)未加入到沸水水浴鍋電導(dǎo)度紫外分光度低溫處理的黃瓜0.16*1032.175未處理過的黃瓜0.4*1020.320對(duì)照組00加入到沸水水浴鍋電導(dǎo)度紫外分光度低溫處理的黃瓜0.31*1040.709未處理過的黃瓜0.34*1040.665對(duì)照組00六?數(shù)據(jù)處理（1）細(xì)胞膜相對(duì)透性（％）=厶*100L2由公式帶入數(shù)據(jù)的：L 016*103細(xì)胞膜相對(duì)透性（％） =」*100= *100二5.16%（低溫處理的黃瓜）細(xì)胞膜相對(duì)透性（％）丄*100=0.4*102L20.34*104*100二細(xì)胞膜相對(duì)透性（％）丄*100=0.4*102L20.34*104*100二W6%（2）傷害率（％）=（1-由公式帶入數(shù)據(jù)的:傷害率（低溫處理的黃瓜）（％）=（1-七.實(shí)驗(yàn)結(jié)論（未處理過的黃瓜）傷害率（未處理的黃瓜）（％）=（1-)*100)*100二(1-1-0.16*10人3—匚嚴(yán)1)二”