微生物的鑒定-病原性真菌鑒定（臨床微生物檢驗課件）

微生物檢驗技術

----病原性真菌鑒定案例導入1.了解病原性真菌的概念及分類2.掌握真菌的生物學性狀3.掌握病原性真菌的檢測程序及鑒定試驗學習目標單元細目要點要求科目真菌學總論1.分類與命名（1）分類熟悉1，2（2）命名熟悉1，22.生物學特性（1）形態(tài)特性掌握1，3（2）培養(yǎng)特性掌握1，33.真菌感染的病原學診斷（1）標本采集和檢驗流程掌握3，4（2）直接檢查掌握3，4（3）分離培養(yǎng)掌握3，4（4）鑒定掌握3，4（5）藥敏試驗掌握3，4（6）其他非培養(yǎng)檢測技術掌握3，4臨床醫(yī)學檢驗技術考試大綱淺部感染真菌1.毛癬菌屬（1）分類熟悉1，3（2）臨床意義熟悉2，3（3）生物學特性熟悉1，3（4）微生物學檢測熟悉3，42.表皮癬菌屬（1）分類了解1，3（2）臨床意義了解2，3（3）生物學特性了解1，3（4）微生物學檢測了解3，43.小孢子菌屬（1）分類熟悉1，3（2）臨床意義熟悉2，3（3）生物學特性熟悉1，3（4）微生物學檢測熟悉3，4單元細目要點要求科目臨床醫(yī)學檢驗技術考試大綱單元細目要點要求科目深部感染真菌

1.假絲酵母菌屬

（1）分類了解1，3（2）臨床意義熟悉2，3（3）生物學特性掌握1，3（4）微生物學檢測掌握3，42.隱球菌屬

（1）分類了解1，3（2）臨床意義熟悉2，3（3）生物學特性掌握1，3（4）微生物學檢測掌握3，4臨床醫(yī)學檢驗技術考試大綱真菌學總論第一部分0真菌學總論真菌是一類真核細胞型微生物。有典型的細胞核和完善的細胞器。真菌廣泛分布于自然界，種類繁多，有10余萬種。大多數(shù)對人無害，只有少數(shù)可引起人類疾病，稱病原性真菌。白假絲酵母菌引起的口腔炎0真菌學總論皮膚癬真菌引起的感染0真菌學總論皮膚癬真菌引起的感染0真菌學總論皮膚癬真菌引起的感染0真菌學總論皮膚癬真菌引起的感染1分類與命名分類（熟悉）1-1命名（熟悉）1-21-1分類（熟悉）真菌分類系統(tǒng)較多,目前尚未統(tǒng)一,比較有影響的是安斯沃斯(Ainsworth)于1973年提出的分類系統(tǒng)。與醫(yī)學有關的真菌為真菌門中的四個亞門,即接合亞門(Zygomycotina)、子囊菌亞門(Ascomycotina)、擔子菌亞門(Basidiomycotina)、半知菌亞門(Deutermycotina)。在臨床醫(yī)學中,致病真菌按其侵犯部位不同,習慣將其分為淺部真菌和深部真菌兩類。按菌落形態(tài)不同可分為酵母菌、霉菌和雙相真菌。酵母菌、霉菌和雙相真菌。1-2命名（熟悉）真菌的命名采用生物學中一貫沿用的以“雙名制”為基礎的國際植物學命名法，即屬名加種名，構成學名。真菌的學名用拉丁詞或拉丁化的詞構成。第一個詞是屬名，用拉丁文名詞，第一個字母必須大寫。第二個詞是種名加詞，用拉丁文形容詞，字母一律小寫。2生物學特性形態(tài)特性（掌握）2-1培養(yǎng)特性（掌握）2-22-1形態(tài)特性（掌握）真菌比細菌大幾倍至幾十倍,用普通光學顯微鏡放大幾百倍就可看清。真菌結構比細菌復雜,細胞壁不含肽聚糖,主要由多糖與蛋白質組成,故不受青霉素或頭孢菌素的作用。真菌按形態(tài)、結構可分為單細胞真菌和多細胞真菌兩大類。單細胞真菌：圓形或卵圓形，常見于酵母菌或類酵母菌。單細胞真菌2-1形態(tài)特性（掌握）類酵母菌—白假絲酵母菌2-1形態(tài)特性（掌握）多細胞真菌：菌絲+孢子交織成團—菌絲體（霉菌）2-1形態(tài)特性（掌握）菌絲和孢子的形態(tài)特點是鑒定真菌的主要依據(jù)生長現(xiàn)象、生化反應是鑒定病原性真菌的依據(jù)二相性真菌：可因營養(yǎng)、溫度、氧氣等環(huán)境條件的改變，而發(fā)生酵母型和絲狀型兩種形態(tài)互變。2-1形態(tài)特性（掌握）紫色毛癬菌感染頭發(fā)的壓片標本紅色毛癬菌感染皮屑標本2-1形態(tài)特性（掌握）大分生孢子的形態(tài)芽生孢子厚膜孢子2-1形態(tài)特性（掌握）關節(jié)孢子孢子囊孢子2-2培養(yǎng)特性（掌握）■常用培養(yǎng)基：營養(yǎng)要求不高，常用沙保羅培養(yǎng)基（基本成分：葡萄糖、蛋白胨、瓊脂）■生長條件：培養(yǎng)基pH值：4.0～6.0培養(yǎng)溫度：淺部22～28C℃，生長慢：1～4W；深部37℃，生長快：3～4d較高的濕度，O2■菌落類型：酵母型菌落；絲狀型菌落。酵母型菌落白假絲酵母菌菌落(類酵母型)絲狀菌落2-2培養(yǎng)特性（掌握）絲狀菌落酵母樣菌落絲狀菌落2-2培養(yǎng)特性（掌握）絲狀菌落3真菌感染的病原學診斷標本采集和檢驗流程（掌握）3-1直接檢查（掌握）3-2其他非培養(yǎng)檢測技術（掌握）分離培養(yǎng)（掌握）3-2鑒定（掌握）3-3藥敏試驗（掌握）3-63-43-53-1標本采集和檢驗流程（掌握）■采集標本注意事項1.標本來源要適宜2.用藥前采集標本3.采集的標本量要充足4.嚴格無菌操作5.采集的標本立即送檢。不同真菌感染應采取不同的臨床標本。懷疑為淺部真菌感染如體癬，應刮取病變邊緣的痂、皮屑，發(fā)癬應取折斷了的病發(fā)。懷疑為深部真菌感染應取血液、腦脊液、痰、膿汁等。最長不超過2h血液和腦脊液標本5ml，胸腔液20ml，皮屑標本兩塊，活體組織兩份■根據(jù)真菌感染部位采集不同的標本。淺部真菌感染---毛發(fā)、皮屑、指（趾）甲等深部真菌感染---痰液、膿汁、血液、腦脊液等3-2直接檢查（掌握）■直接鏡檢直接鏡檢是實驗室最簡單最有用的診斷方法,標本不需染色,直接鏡下觀察。鏡檢若發(fā)現(xiàn)有真菌菌絲或孢子存在時,可初步判定為真菌感染,但不能確定到種,需要做進一步的檢驗?！鋈旧R檢在載玻片上滴1滴生理鹽水,將所采集的標本均勻涂在載玻片上,自然干燥后,火焰或甲醇固定。選擇適當?shù)娜旧椒?染色后以高倍鏡或油鏡觀察。真菌標本直接檢查3-2直接檢查（掌握）1.革蘭染色所有真菌均為革蘭染色陽性,被染成深紫色。適用于酵母菌、孢子絲菌、組織孢漿菌及諾卡菌的檢測。2.乳酸酚棉藍染色用于各種真菌培養(yǎng)物的鏡檢,被染成藍色。3.印度墨汁用于檢測腦脊液中的新型隱球菌。背景染成黑色,菌體不著色,在黑色背景下,可見球形透亮菌體外有折光性強的寬厚莢膜。4.熒光染色通常有三種方法,即直接涂片、培養(yǎng)涂片和組織切片染色。5.瑞氏染色用于組織胞漿菌和馬內菲青霉的檢測。6.過碘酸希夫染色用于體液滲出液和組織勻漿等染色。真菌胞壁中的多糖染色后呈紅色,組織內的糖原成分亦應染成紅色,但經(jīng)淀粉酶消化后消失。7.嗜銀染色真菌可染成黑色,主要用于檢測組織內真菌。常用染色方法有七種3-3分離培養(yǎng)（掌握）1．常用工具除常用的平皿、試管及培養(yǎng)箱外，還需制作接種針、接種環(huán)和接種鉤2．培養(yǎng)基真菌營養(yǎng)要求不高，在一般細菌培養(yǎng)基上即可生長。最適pH4.0～6.0。在不同的培養(yǎng)基上真菌菌落形態(tài)變化很大，一般以在沙保羅培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象來描述真菌菌落形態(tài)?；緱l件3-3分離培養(yǎng)（掌握）平皿培養(yǎng):表面較大可使標本散布，便于觀察菌落形態(tài)，但水分易蒸發(fā)，只能培養(yǎng)生長繁殖較快的真菌，如假絲酵母菌、隱球菌。大試管培養(yǎng):水分不易蒸發(fā)，主要用于皮膚癬菌的培養(yǎng)和真菌菌種的保存。玻片培養(yǎng)(微量培養(yǎng)、小培養(yǎng)):可用于真菌菌種的鑒定。培養(yǎng)方法3-3分離培養(yǎng)（掌握）(1)生長速度:緩慢生長菌:7~14天;快速生長菌:2~7天。一般淺部真菌超過2周,深部真菌超過4周仍無生長,可報告陰性。(2)表面形態(tài):扁平、凸起或凹陷、皺褶等。(3)大?。壕浯笮∮美迕讈肀硎?菌落大小與生長速度和培養(yǎng)時間有關。(4)菌落質地:平滑狀、粉狀、粒狀、棉花狀、粗毛狀、皮革狀、黏液狀、膜狀。(5)菌落顏色:不同的菌種表現(xiàn)出不同的顔色。致病性真菌的顏色多較淡,呈白色或淡黃色,而且其培養(yǎng)基也可變色,如馬爾尼菲青霉等。有些真菌菌落不但正面有顏色,其背面也有深淺不同的顔色。菌落的顏色與培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、移種代數(shù)等因素有關。(6)菌落的邊緣:有些菌落的邊緣整齊,有些不整齊。觀察指標每周至少檢查2次,觀察六項指標。3-4鑒定（掌握）KOH透明法標本（膿、痰、尿、糞）皮屑等血、腦脊液沙保弱培養(yǎng)基、BA增菌培養(yǎng)鑒定：形態(tài)染色生長現(xiàn)象生化反應形態(tài)結構結果初報結果報告3-5藥敏試驗（掌握）按美國國家臨床實驗室標準化委員會標準,抗真菌藥物敏感性試驗常用肉湯稀釋法,包括常量稀釋法和微量稀釋法。根據(jù)化學結構分類多烯類：如兩性霉素B、制霉菌素等。吡咯類：如酮康唑、伊曲康唑等。其他：如氟胞嘧啶。根據(jù)作用機制分類作用于真菌細胞膜：如兩性霉素B等。作用于真菌細胞壁：如尼可霉素Z等。干擾真菌DNA合成：如5-氟胞嘧啶等。其他：如大蒜新素及冰醋酸等3-6其他非培養(yǎng)檢測技術（掌握）真菌的非培養(yǎng)檢測技術免疫學檢驗分子生物學檢驗G/Gm試驗思考練習1.能夠引起______部或深部感染的真菌，稱為病原性真菌。2.多細胞真菌的結構可分為______和______兩部分，前者為真菌營養(yǎng)體，按是否有橫膜分為______和______；后者是真菌的繁殖體，按細胞核是否融合，分為______和______；兩者都是真菌在分類和鑒定時的重要參考依據(jù)。3.病原性真菌常形成______孢子，可分為_______、_______和_______三種。4.致病性真菌，可用______或沙氏液體培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，最適PH為_____，培養(yǎng)時，需要較高的_______和_______。5.真菌感染的發(fā)生與機體天然屏障被破壞、_______和_______有密切關系。淺部感染真菌第二部分0淺部感染真菌淺部真菌主要侵犯機體皮膚、毛發(fā)和指（趾）甲，寄生和腐生于表皮、毛發(fā)和甲板的角質組織中，引起淺部真菌病。淺部感染真菌包括表面感染真菌、皮膚癬真菌和皮下組織感染真菌三類。臨床上最多見的淺部真菌為皮膚癬真菌，包括毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子菌屬。體癬股癬手癬0淺部感染真菌頭癬足癬甲癬1毛癬菌屬分類（熟悉）1-1臨床意義（熟悉）1-2生物學特性（熟悉）1-3微生物學檢測（熟悉）1-41-1分類（熟悉）子囊菌門下的一種真菌,共有20種,其中十幾種對人致病,常見的有紅色毛癬菌、紫色毛癬菌、須毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌和許蘭毛癬菌。紅色毛癬菌菌落正面紅色毛癬菌菌落背面紫色毛癬菌菌落1-1分類（熟悉）須毛癬菌菌落斷發(fā)毛癬菌菌落許蘭毛癬菌菌落1-2臨床意義（熟悉）毛癬菌屬易侵犯人體皮膚、指（趾）甲、毛發(fā)的角蛋白組織并生長繁殖，能產(chǎn)生數(shù)種角質溶解酶致病，可引起頭癬、體癬、股癬、疊瓦廯、手癬、足癬及甲癬等。頭癬足癬甲癬1-3生物學特性（熟悉）在沙保弱培養(yǎng)基上,菌落呈顆粒狀、絨毛狀、粉末狀或蠟狀。菌落顏色可為白、紅、黃、橙等顏色。鏡檢可見呈棒狀或紡錘狀的大分生孢子,呈葡萄狀或梨狀、散在或側生的小分生孢子,以及螺旋狀、球拍狀、鹿角狀或結節(jié)狀菌絲。紅色毛癬菌小分生孢子紫色毛癬菌菌絲紅色毛癬菌大分生孢子1-3生物學特性（熟悉）斷發(fā)毛癬菌小分生孢子及菌絲許蘭毛癬菌菌絲須毛癬菌大、小分生孢子1-4微生物學檢測（熟悉）（一）標本采集（二）直接顯微鏡檢查皮屑+10%KOH液指甲+25%KOH/25%NaOH含5%甘油處理常用濕標本，不加染色，直接顯微鏡鏡檢2表皮癬菌屬分類（了解）2-1臨床意義（了解）2-2生物學特性（了解）2-3微生物學檢測（了解）2-42-1分類（了解）只有絮狀表皮癬菌對人致病。絮狀表皮癬菌菌落絮狀表皮癬菌大分生孢子、厚膜孢子絮狀表皮癬菌菌落2-2臨床意義（了解）絮狀表皮癬菌是表皮癬菌屬內唯一的致病菌。絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起皮膚感染，如股癬、足癬、體癬、手癬和甲癬。頭癬足癬甲癬2-3生物學特性（了解）在沙保弱培養(yǎng)基上,菌落初呈白色鵝毛狀,后轉變?yōu)辄S綠色粉末狀。鏡檢可見卵圓形或粗大的棒狀薄壁大分生孢子、球拍狀菌絲,在陳舊培養(yǎng)物中可見厚膜孢子。絮狀表皮癬菌菌落絮狀表皮癬菌大分生孢子、厚膜孢子絮狀表皮癬菌菌落2-4微生物檢測（了解）（一）標本采集（二）直接顯微鏡檢查皮屑+10%KOH液指甲+25%KOH/25%NaOH含5%甘油處理常用濕標本，不加染色，直接顯微鏡鏡檢3小孢子菌屬分類（熟悉）3-1臨床意義（熟悉）3-2生物學特性（熟悉）3-3微生物學檢測（熟悉）3-43-1分類（熟悉）有8種對人致病，常見的致病菌有鐵銹色小孢子菌、石膏樣小孢子菌、犬小孢子菌等。鐵銹色小孢子菌菌落石膏樣小孢子菌菌落犬小孢子菌菌落3-2臨床意義（熟悉）小孢子菌屬感染皮膚和毛發(fā)，很少感染指（趾）甲。鐵銹色小孢子菌可引起頭白癬，多見于兒童，成人極為少見，是一些地方流行區(qū)少年兒童中頭癬的常見原因。頭癬3-3生物學特性（熟悉）小孢子癬菌屬：鏡下可見菌絲、厚壁梭形大分生孢子。犬小孢子菌大分生孢子石膏樣小孢子菌大分生孢子鐵銹色小孢子菌菌絲3-4微生物檢測（熟悉）（一）標本采集（二）直接顯微鏡檢查皮屑+10%KOH液指甲+25%KOH/25%NaOH含5%甘油處理常用濕標本，不加染色，直接顯微鏡鏡檢3

感染部位與傳染源（熟悉）4其它淺部真菌分類（了解）4-1臨床意義（了解）4-2生物學特性（了解）4-3微生物學檢測（了解）4-44-1分類（了解）秕糠馬拉癬菌著色真菌孢子絲菌4-2臨床意義（了解）秕糠馬拉癬菌：侵犯皮膚角質層可引起皮膚表面出現(xiàn)黃褐色的花斑癬。著色真菌：經(jīng)破損皮膚而感染，引起病損的皮膚變黑，產(chǎn)生著色真菌病申克孢子絲菌：主要通過微小傷口侵入皮膚，引起孢子絲菌性下疳?；ò甙_著色真菌病孢子絲菌下疳4-3生物學特性（了解）秕糠馬拉癬菌：鏡下可見臘腸樣有隔菌絲和圓形厚壁孢子。秕糠馬拉癬菌秕糠馬拉癬菌菌落4-3生物學特性（了解）著色真菌：菌落從灰黑色至黑色，有絨毛狀或天鵝絨狀氣生菌絲。疣狀瓶霉菌落卡氏枝孢霉菌落鏈格孢霉菌落4-3生物學特性（了解）著色真菌：鏡檢可見單個或成群的厚壁孢子，有橫隔。疣狀瓶霉卡氏枝孢霉鏈格孢霉4-3生物學特性（了解）申克孢子絲菌：25℃培養(yǎng)，形成絲狀菌落，鏡下可見分枝菌絲及小分生孢子。申克孢子絲菌菌落申克孢子絲菌小分生孢子4-3生物學特性（了解）申克孢子絲菌：37℃培養(yǎng)，形成酵母型菌落，鏡下可見梭形孢子。申克孢子絲菌孢子申克孢子絲菌菌落4-4微生物檢測（了解）（一）標本采集（二）直接顯微鏡檢查皮屑+10%KOH液指甲+25%KOH/25%NaOH含5%甘油處理常用濕標本，不加染色，直接顯微鏡鏡檢思考練習1.皮膚絲狀菌的直接檢查法，最常用_______透明處理，一旦發(fā)現(xiàn)_______或/和______，即可報告。2.欲觀察真菌的生長情況、孢子和菌絲等結構，通常選用________來進行培養(yǎng)觀察。3.引起皮膚癬?。ɑ虬Y）的表淺真菌主要有_______、________和_______三屬，其中，不侵犯毛發(fā)的是________屬，不侵犯指甲的為_________屬。4.皮膚絲狀菌檢查，一般不采用（）A.直接培養(yǎng)B.小培養(yǎng)C.動物接種D.大培養(yǎng)深部感染真菌第三部分0深部感染真菌（熟悉）深部真菌一般是指侵害人體內臟和深部組織及引起全身感染的真菌。多數(shù)能引起慢性肉芽腫樣炎癥、潰瘍及壞死等病變。由該類真菌引起的疾病統(tǒng)稱為深部真菌病。深部感染真菌可分為兩大類:①條件致病性真菌:是人體正常菌群的成員,當機體抵抗力下降時才致病,如白假絲酵母菌、卡氏肺孢子菌、曲霉菌和毛霉菌等;②致病性真菌:多由外界侵入機體,導致機體感染,其中以新型隱球菌病最為常見。1假絲酵母菌屬分類（了解）1-1臨床意義（熟悉）1-2生物學特性（掌握）1-3微生物學檢測（掌握）1-41-1分類（了解）假絲酵母菌有81個種,其中有11種對人有致病性,白假絲酵母菌為最常見的致病菌。此外,熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌也引起較多疾病。以下主要介紹白假絲酵母菌。 白假絲酵母菌菌落1-2臨床意義（熟悉）白假絲酵母菌廣泛分布于自然界,是正常人體體表、上呼吸道、胃腸道及陰道的正常菌群失調。當機體免疫力下降時,可侵犯人體很多部位,引起各種疾病。1-3生物學特性（掌握）白假絲酵母菌呈圓形或卵圓形，直徑3~6μm。革蘭陽性，著色不均勻。出芽方式繁殖，在組織內可見芽生孢子、假菌絲。在玉米粉培養(yǎng)基中可產(chǎn)生假菌絲和厚膜孢子。1-4微生物檢測（掌握）標本直接檢查分離培養(yǎng)鑒定藥物敏感試驗1-4微生物檢測（掌握）分離培養(yǎng)鑒定菌落特征:標本沙氏培養(yǎng)基上25℃或37℃培養(yǎng)1~4d后，培養(yǎng)基表面可出現(xiàn)奶油色類酵母型菌落，鏡檢可見假菌絲和芽生孢子。鑒定試驗：芽管形成試驗厚膜孢子形成試驗糖同化或發(fā)酵試驗產(chǎn)色培養(yǎng)基鑒定1-4微生物檢測（掌握）白色念珠菌，膿汁涂片白色念珠菌，鵝口瘡白色念珠菌，血培養(yǎng)涂片，亞甲藍染色1-4微生物檢測（掌握）沙氏斜面血平板白色念珠菌革蘭染色結果1-4微生物檢測（掌握）熱帶念珠菌白色念珠菌在玉米吐溫80培養(yǎng)基上形成的厚膜孢子（400×）1-4微生物檢測（掌握）芽管形成試驗假菌絲和厚膜孢子1-4微生物檢測（掌握）半乳糖發(fā)酵試驗+葡萄糖發(fā)酵試驗1-4微生物檢測（掌握）產(chǎn)色培養(yǎng)基2隱球菌屬分類（了解）2-1臨床意義（熟悉）2-2生物學特性（掌握）2-3微生物學檢測（掌握）2-42-1分類（了解）包括17個種和8個變種，其中對人致病的最主要是新生隱球菌（Cryptococcusneoformans）及其變種。2-2臨床意義（熟悉）新生隱球菌經(jīng)呼吸道侵入人體,由肺經(jīng)血行播散時可侵犯所有臟器組織,主要侵犯肺、腦及腦膜,也可侵犯皮膚、骨和關節(jié)。新型隱球菌病好發(fā)于細胞免疫功能低下者,如艾滋病、惡性腫瘤、糖尿病、器官移植及大劑量使用糖皮質激素者。因此,臨床上隱球菌性腦膜炎常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病、淋巴瘤等患者中發(fā)生。2-3生物學特性（掌握）形態(tài)與染色圓形或卵圓形,菌體直徑一般為2~15μm,革蘭染色陽性。菌體外有寬厚莢膜,莢膜比菌體大1~3倍,折光性強。一般染色法不易著色,常用墨汁負染色法染色,可見圓形菌體,外繞有一較寬闊的空白帶(莢膜)。革蘭染色墨汁負染色2-3生物學特性（掌握）直接鏡檢：用病人腦脊液作墨汁負染色檢查是診斷隱球菌腦膜炎最簡便、快速之方法。涂片墨汁染色2-3生物學特性（掌握）墨汁染色，培養(yǎng)物涂片×1000墨汁染色，腦脊液涂片×1000墨汁染色，痰液涂片×20002-3生物學特性（掌握）痰液涂片，革蘭染色×2000痰液涂片，抗酸染色2-3生物學特性（掌握）腦脊液涂片，莢膜染色×20002-3生物學特性（掌握）培養(yǎng)特性該菌營養(yǎng)要求不高,在沙保弱培養(yǎng)基或血瓊脂培養(yǎng)基上于25℃和37℃下皆可生長(非致病菌37℃下不生長),數(shù)天后生成酵母型菌落,表面黏稠、混濁,由乳白色漸轉為橘黃色,最終為棕褐色。在動物體內易形成莢膜,莢膜由多糖組成,根據(jù)其抗原性分為A~D4個血清型。經(jīng)分離培養(yǎng)后,莢膜消失。2-4微生物檢測（掌握）鏡檢：寬厚莢膜標本（腦脊液、痰）涂片墨汁染色初步報告結果分離培養(yǎng)脲酶：+酚氧化酶：+37℃生長+糖同化試驗乳糖：－半乳糖：+新型隱球菌思考練習1.白色念珠菌的細胞呈圓形或卵圓形，它可形成_______和______。它屬于一種_____致病菌，可引起人體全身多個部位的感染。2.新型隱球菌，因用一般染色______而難以發(fā)現(xiàn)，故而得名“隱球菌”。其屬于_____（部位）真菌，可累及全身各個臟器。其直接檢查時，最常用_______染色，當看到_____即可報告。3.白色念球菌最常見于下列哪項標本（）A.血液B.腦脊液C.心包積液D.陰道或尿道分泌物4.簡述真菌的結構與形態(tài)？5.怎樣進行皮膚絲狀菌直接（KOH法）檢查方法？6.說出白色念珠菌的鑒定依據(jù)？7.說出新型隱球菌的鑒定依據(jù)？《微生物檢驗技術》----真菌的生物學特性教學培訓課件袁媛1真菌概述真菌是一類真核細胞型微生物，有典型的細胞核和完善的細胞器。真菌廣泛分布于自然界，種類繁多，有10余萬種。大多數(shù)對人無害，只有少數(shù)可引起人類疾病，稱病原性真菌。對人致病的真菌分為四類：病原性真菌、條件致病性真菌、產(chǎn)毒真菌及致癌真菌。目前大多數(shù)真菌的鑒定，形態(tài)學（包括真菌形態(tài)、菌落形態(tài)）檢查仍有重要意義。2真菌的生長特性營養(yǎng)要求不高，常用沙保氏培養(yǎng)基基本成分：葡萄糖、蛋白胨、瓊脂生長條件：pH4.0~6.0溫度22~28℃（深部真菌37℃）較高的濕度O23菌落類型酵母型/類酵母型（單細胞真菌菌落形式）濕潤、柔軟而致密，形態(tài)似一般細菌菌落鏡下：酵母型----卵圓孢子、芽生孢子類酵母型----芽生孢子、假菌絲絲狀菌落（多細胞真菌菌落形式）棉絮狀、絨毛狀、粉末狀菌落正背面呈不同顏色（可為鑒定依據(jù)）玻片小培養(yǎng)----鏡下棉蘭染色----孢子、菌絲及完整菌絲體4培養(yǎng)特性絲狀菌落白假絲酵母菌菌落(類酵母型)酵母型菌落5絲狀菌落6變異性多次傳代或孵育過久，容易變異（形態(tài)、結構、菌落性狀、色素以及生理性狀(毒力)）。

7抵抗力熱：不強。孢子一般60℃經(jīng)1h即被殺滅（不同于芽胞）。干燥、日光、紫外線等耐受性較弱。1%～3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛液、水楊酸較敏感。教學培訓課件袁媛《微生物檢驗技術》----淺部感染真菌鑒定1淺部感染真菌概述淺部真菌主要侵犯機體皮膚、毛發(fā)和指（趾）甲，寄生和腐生于表皮、毛發(fā)和甲板的角質組織中，引起淺部真菌病。淺部感染真菌包括表面感染真菌、皮膚癬真菌和皮下組織感染真菌三類。臨床上最多見的淺部真菌為皮膚癬真菌，包括毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子菌屬。真菌種類感染部位傳染源皮膚毛發(fā)甲板人動物表皮癬菌屬+-+絮狀表皮癬菌無小孢子菌屬++-奧杜安小孢子菌犬小孢子菌石膏樣小孢子菌毛癬菌屬+++石膏樣毛癬菌紅色毛癬菌石膏樣毛癬菌2真菌的檢測程序KOH透明法標本（膿、痰、尿、糞）皮屑等血、腦脊液沙保弱培養(yǎng)基、BA增菌培養(yǎng)鑒定：形態(tài)染色生長現(xiàn)象生化反應形態(tài)結構結果初報結果報告3真菌標本直接檢查10%KOH加熱或不加熱放置10分鐘鏡檢4分離培養(yǎng)真菌培養(yǎng)是目前鑒定真菌的唯一方法。培養(yǎng)成功與否與采集的標本是否適當、是否新鮮、培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)溫度與時間等有關。大多數(shù)真菌培養(yǎng)的溫度為28℃，但深部真菌為37℃。5毛癬菌6表皮癬菌屬7小孢子菌屬《微生物檢驗技術》----白假絲酵母菌鑒定教學培訓課件袁媛1假絲酵母菌屬假絲酵母菌