基因毒性雜質(zhì)全面信息資料

基因毒性雜質(zhì)

（GenotoxicImpurities）年5月基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第1頁主要內(nèi)容1背景知識介紹3確定毒性閾值步驟4最大程度地控制雜質(zhì)2雜質(zhì)與雜質(zhì)程度基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第2頁主要內(nèi)容1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)程度3確定毒性閾值步驟4最大程度地控制雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第3頁常見基因毒性物質(zhì)苯并芘、黃曲霉素、亞硝胺許多化療藥品也具基因毒性，它們不良反應(yīng)是由化療藥品對正常細胞基因毒性所致，如順鉑、卡鉑、氟尿嘧啶等。氨基糖甙類抗生素大劑量、長久使用會引發(fā)耳毒性有些尤其敏感病人，僅使用一次或短期使用，就出現(xiàn)了聽力損失。研究表明，他們一個基因上有一點(mtl555G)與他人不一樣，這使他們對氨基糖甙類藥品耳毒性易感性大大增加?；蚨拘噪s質(zhì)全面信息資料第4頁什么是基因毒性雜質(zhì)是指能直接或間接損傷細胞DNA，產(chǎn)生致突變和致癌作用物質(zhì)。慣用縮寫PGLs（potentiallygenotoxicimpurities有潛在基因毒性雜質(zhì)）GTLs（genotoxicimpurities基因毒性雜質(zhì)）可能產(chǎn)生基因毒性雜質(zhì)步驟：新藥合成原料純化儲存運輸（與包裝物接觸）。。。。。?；蚨拘噪s質(zhì)全面信息資料第5頁相關(guān)基因毒性雜質(zhì)指南EMEA（歐洲藥品局）年首先頒布了《基因毒性雜質(zhì)程度指南》，并自年1月1日起正式實施。該指南為限制新活性物質(zhì)中基因毒性雜質(zhì)提供了處理問題框架和詳細做法。ICH年，ICH也公布了對應(yīng)要求詳細內(nèi)容參見ICHQ3A(R2)

IMPURITIESINNEWDRUGSUBSTANCESQ3appendix2reference,Step4version(25.10.06)新藥原料藥中雜質(zhì)，Q3A(R2),步驟4（06年10月25日）版基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第6頁FDA于年12月正式簽發(fā)了類似指南：GuidanceforIndustry――GenotoxicandCarcinogenicImpuritiesinDrugSubstancesandProducts：RecommendedApproaches。主要內(nèi)容包含：指南公布背景原料藥和制劑中基因毒性雜質(zhì)生成預(yù)防方法基因毒性雜質(zhì)分析方法、處理方法和降低方法上市申請和臨床研究申請可接收程度草藥原料藥和制劑中基因毒性雜質(zhì)評定指南相關(guān)基因毒性雜質(zhì)指南基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第7頁主要內(nèi)容賴祖亮@小木蟲2雜質(zhì)與雜質(zhì)程度1背景知識介紹3確定毒性閾值步驟4最大程度地控制雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第8頁FDA原料雜質(zhì)程度StandardlimitsforimpuritiesinAPIsAPI中雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)程度/cber/gdlns/ichq3a.pdfMaximunDailyDose1每日最大劑量ReportingThreshold2,3匯報程度IdentificationThreshold*判定程度QualificationThreshold*毒性程度≤2g/天0.05%0.10%或者天天攝入量1.0mg（取最小值）0.15%或者天天攝入量1.0mg（取最小值）＞2g/天0.03%0.05%0.05%SFDA質(zhì)控程度：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中允許程度，制訂程度超出該值，應(yīng)有充分依據(jù)?；蚨拘噪s質(zhì)全面信息資料第9頁SFDA制劑雜質(zhì)程度匯報程度最大日劑量≤1g＞1g程度0.1%0.05%判定程度最大日劑量＜1mg1mg～10mg＞10mg～2g＞2g程度1.0%或5μg0.5%或20μg0.2%或2mg0.1%質(zhì)控程度最大日劑量＜10mg10mg～100mg＞100mg～2g＞2g程度1.0%或50μg0.5%或200μg0.2%或3mg0.15%考慮病例數(shù)與療程，同時考慮：遺傳毒性研究；常規(guī)毒性研究；其它特定毒性終點（酌情而定）。降低到判定程度以下降低到質(zhì)控程度以下NoNo是否與臨床不良反應(yīng)相關(guān)？合格NoYes降低到安全程度決議樹基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第10頁為何呀？基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第11頁毒性閾值假如一個物質(zhì)體內(nèi)試驗表明對DNA有潛在破壞性，可能造成腫瘤產(chǎn)生，我們是否能夠這么下結(jié)論：任何攝入水平都含有致癌風(fēng)險。不存在顯著閾值。××基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第12頁毒性閾值我們是不是做一個試驗：劑量從低到高，對其影響性進行線性推斷？生物系統(tǒng)糾錯功效使試驗不具備可操作性?！烈胍粋€新觀點：確定一個可接收其風(fēng)險攝入量突變機制：細胞水平：基因突變，染色體重排，其它分子水平：切斷或共價修飾DNA損傷生物系統(tǒng)糾正辦法：修復(fù)受損DNA程序性細胞死亡（凋亡）基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第13頁TTC概念TTCThresholdofToxicologicalConcern：毒性物質(zhì)限量，也能夠稱之為毒理學(xué)關(guān)注門檻，是一個默認值。一個未知基因毒性數(shù)據(jù)雜質(zhì)：TTC=1.5微克/天基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第14頁TTC概念天天攝入1.5微克基因毒性雜質(zhì)，被認為對于大多數(shù)藥品來說是能夠接收風(fēng)險。使得人一生致癌風(fēng)險小于十萬分之一?，F(xiàn)實生活中，人一生得癌癥概率是四分之一。必須要強調(diào)是TTC是一個風(fēng)險管理工具，它采取是概率方法。意思為：假如有一個基因毒性雜質(zhì)，而且我們對它毒性大小不太了解，假如它每日攝入量低于TTC值，那么它致癌風(fēng)險將不會高于10－5概率。所以TTC不能被了解為絕對無風(fēng)險保障?；蚨拘噪s質(zhì)全面信息資料第15頁主要內(nèi)容3確定毒性閾值步驟1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)程度4最大程度地控制雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第16頁確定毒性閾值步驟依據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)，將雜質(zhì)分為五類；Step1:Step2:Step3:按照分類，確定驗證策略(參見決議路線圖)；按照日劑量，確定原料藥中雜質(zhì)程度(參見表1：短期用藥推薦允許日攝入量)?；蚨拘噪s質(zhì)全面信息資料第17頁分類Class1:GenotoxicCarcinogens第1類：已知、含有基因毒性（突變性）和致癌性雜質(zhì)Step1:Class2:GenotoxicCarcunknow第2類：已知、含有基因毒性（突變性），但致癌性未知雜質(zhì)Class3:Alert-Unrelatedtoparent第3類：含有警示結(jié)構(gòu)、與API無關(guān)、基因毒性（突變性）未知雜質(zhì)Class4:Alert-Relatedtoparent第4類：含有警示結(jié)構(gòu)、與API相關(guān)、基因毒性（突變性）未知雜質(zhì)Class5:NoAlerts第5類：沒有警示結(jié)構(gòu)，沒有基因毒性（突變性）雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第18頁致癌警示結(jié)構(gòu)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第19頁決議路線圖Step2:雜質(zhì)分類、驗證和風(fēng)險評定Class1:GenotoxicCarcinogensNoClass2:GenotoxicCarcunknow(Staged)TTC(seeTable1)NoorunknowYesPDE(e.g.ICHQ3appendix2referenceYesNottestedClass3:Alert-UnrelatedtoparentClass4:Alert-RelatedtoparentControlasanordinaryimpurityEliminateImpurity?RiskAssessment3?ThresholdMechanism?ImpurityGenotoxic?1APIGenotoxic2Class5:NoAlertsNoNo去除雜質(zhì)風(fēng)險評定用閾值控制該雜質(zhì)是否有基因毒性？該原料是否有基因毒性？基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第20頁疑似基因毒素日攝入量用藥期限＜14天14天-1月1-3月3-6月6-12月>12月允許日攝入量(μg/日)12060201051.5Step3:FDAhttp:/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformation/Guidances/ucm079235.pdfTTC值短期用藥允許攝入量TTC=1.5微克/天表1：短期用藥推薦允許日攝入量基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第21頁最大日攝入量與濃度轉(zhuǎn)化表≥0.5%≥0.5%≤100ppm≤100ppmIncreasedduration=DecreasedADIofImpurity

IncreasingDoseofAPI可參考使用范圍可參考使用范圍RegulatorToxicologyandPharmacology.,44:198-211EMEA基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第22頁怎樣確定PDE？PDENOELF1F2F3F4F5允許日暴露量（mg/天）觀察不到影響限值物種之間外推法因子（F1=12，從小鼠到人類）個體差異因子毒性研究周期因子嚴(yán)重毒性因子假如只有LOEL（可觀察到效果最低限值）時因子ICHQ3CGuidelineforResidualSolvents殘留溶劑指南：/Regulatorylnformation/Guidances/ucm128223.htm/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformatio6n/Guidances/ucm073394.pdfNOEL×重量調(diào)整因子PDE=F1×F2×F3×F4×F5基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第23頁常見PDE值溶劑名稱PDE值（mg/天）程度（%）第一類溶劑（應(yīng)防止使用）苯0.020.0002四氯化碳0.040.00041,2-二氯乙烷0.050.00051,1-二氯乙烯0.080.00081,1,1-三氯乙烷15.00.15第二類溶劑（應(yīng)限制使用）乙腈4.10.041氯苯3.60.036氯仿0.60.006環(huán)己烷38.80.3881,2-二氯乙烯18.70.187溶劑名稱PDE值（mg/天）程度（%）第三類溶劑（GMP或其它質(zhì)量要求限制使用）乙酸50.00.5丙酮50.00.5甲氧基苯50.00.5正丁醇50.00.5仲丁醇50.00.5乙酸丁酯50.00.5叔丁基甲基醚50.00.5異丙基苯50.00.5二甲亞砜50.00.5乙醇50.00.5乙酸乙酯50.00.5藥品中常見殘留溶劑及其程度（節(jié)選）基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第24頁Goldcarcinogenicitydatabase()里面有1574種致癌物質(zhì)列表，結(jié)構(gòu)式，CAS號，作用部位，TTC值等等一系列信息。近30年關(guān)于基因毒性方面研究出版物（PDF版）用不一樣分類方法統(tǒng)計致癌物質(zhì)列表。不用注冊，能夠直接點擊查看、下載全文。基因毒性物質(zhì)列表基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第25頁目標(biāo)在于檢測試驗物質(zhì)是否直接或間接引發(fā)基因損傷，并測知其對基因損傷程度。測試潛在基因毒性雜質(zhì)次序：計算機篩選（軟件模擬計算）微生物試驗（比如：誘變可能性試驗）動物試驗（通常是小鼠和大鼠）基因毒性試驗

（genotoxicitystudy）能夠用于預(yù)測基因毒性軟件MultiCASE,Oncologic,DEREK,TOPKAT;’RTECS’(RegistryofToxicEffectsofChemicalSubstances,subscription);LeadScope;FDAdatabaseswww.emea.europa.eu/pdfs/human/swp/43199407en.pdf/fdmspublic/component/main?main=DocumentDetail&o=09000064807ddb80ToxTreesoftwarefordegradation:Railard,S.P.;Bercu,J.;Baertschi,S.W.;Riley,C.M.Org.ProcessRes.Dev.,14,1015.值得注意是：在活體動物試驗中，有時候，沒有表達出致突變性，是因為保護機制在起作用。比如：測試丙烯酸，丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯體外測試（小鼠淋巴瘤細胞）：發(fā)覺DNA損傷活體測試：無誘變作用證據(jù)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第26頁結(jié)構(gòu)不一樣單個雜質(zhì)程度應(yīng)該小于1.5微克/天。有相同作用機制、結(jié)構(gòu)相同雜質(zhì)，其含量總和程度應(yīng)該參考1.5微克/天限量進行評定。怎樣評定多個基因毒性雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第27頁主要內(nèi)容4最大程度地控制雜質(zhì)1背景知識介紹2雜質(zhì)與雜質(zhì)程度3確定毒性閾值步驟基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第28頁藥學(xué)評價應(yīng)該依據(jù)現(xiàn)有處方工藝，提供雜質(zhì)程度合理性。應(yīng)該列明全部包括到含有基因毒性或致癌性化學(xué)物質(zhì)，如全部試劑、中間體、副產(chǎn)品等。即使這些基因毒性反應(yīng)物或者有基因毒性結(jié)果物質(zhì)沒有在API上表達，也都應(yīng)該被考慮。原料藥合成基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第29頁藥學(xué)評價假如在合成路線、起始物料方面沒有更加好選擇，則需要提供一個正當(dāng)理由。即：“物質(zhì)中能引發(fā)基因毒性和致癌性結(jié)構(gòu)部分在化學(xué)合成中是不可防止”假如基因毒性雜質(zhì)被認為是不可防止，那么應(yīng)該采取技術(shù)伎倆盡可能降低基因毒性雜質(zhì)在產(chǎn)品中含量，使其符合安全需要或使其降低到一個合理水平。對于活性中間體、反應(yīng)物、以及其它化合物化學(xué)穩(wěn)定性都應(yīng)該進行評定。應(yīng)該有合理分析方法去檢測和量化這些雜質(zhì)殘留量。原料藥合成基因毒性雜質(zhì)全面信息資料第30頁決議樹基因毒性雜質(zhì)有充分證據(jù)用于評價基因毒性閾值由試驗數(shù)據(jù)得到毒性情況。eg.Ames檢測陽性/DNA反應(yīng)活性計算PDE是否為安全攝入量控制在安全程度以下基因毒性雜質(zhì)不能防止？否是不采取任何辦法