雜質(zhì)研究和案例分析專家講座

提要一、序言二、雜質(zhì)研究基本要求及研究思緒三、案例分析四、小結(jié)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第1頁一、序言一、雜質(zhì)研究在藥品研發(fā)中地位二、存在主要問題和差距雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第2頁雜質(zhì)研究主要地位雜質(zhì)—任何影響藥品純度物質(zhì)包含有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、殘留溶劑本講主要討論有機雜質(zhì)雜質(zhì)起源—工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物等工藝雜質(zhì)：工藝過程中引入雜質(zhì)，包含起始原料及可能帶入雜質(zhì)、中間體、副產(chǎn)物等降解產(chǎn)物：藥品降解產(chǎn)生，如水解、氧化、開環(huán)、聚合等反應產(chǎn)物，與藥品結(jié)構(gòu)特征親密相關(guān)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第3頁雜質(zhì)研究主要地位★確保藥品安全有效是研發(fā)及評價所要遵照基本標準★雜質(zhì)研究是藥學研究（CMC）主要內(nèi)容，同時也直接包括到藥品安全有效性藥理活性或毒性雜質(zhì)—安全性普通雜質(zhì)，控制純度—有效性雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第4頁存在主要問題和差距★雜質(zhì)譜未分析或分析不到位；★雜質(zhì)分析檢驗方法缺乏針對性；★雜質(zhì)程度確實定依據(jù)不足；★忽略雜質(zhì)研究與其它研究工作聯(lián)絡(luò)；★……

雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第5頁質(zhì)量研究主要問題分析源自過渡期集中審評品種（個）

雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第6頁二、雜質(zhì)研究基本要求及研究思緒●相關(guān)技術(shù)指導標準●雜質(zhì)譜分析●研究建立檢驗方法●進行充分方法驗證●確定合理雜質(zhì)程度●超出目標程度時考慮●仿制藥雜質(zhì)研究特點●雜質(zhì)研究與其它研究工作關(guān)系雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第7頁相關(guān)技術(shù)指導標準化學藥品雜質(zhì)研究技術(shù)指導標準化學藥品質(zhì)量控制分析方法驗證技術(shù)指導標準已經(jīng)有國家標準化學藥品研究技術(shù)指導標準ANDAs：ImpuritiesinDrugSubstances，F(xiàn)DAANDAs：ImpuritiesinDrugProducts，F(xiàn)DAQ2ATextonValidationofAnalyticalProceduresQ2BValidationofAnalyticalProcedures：MethodologyQ3A(R)ImpuritiesinNewDrugSubstancesQ3B(R)ImpuritiesinNewDrugProducts雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第8頁雜質(zhì)譜分析★可能雜質(zhì)★原料藥生產(chǎn)過程中可能引入工藝雜質(zhì)★原料藥貯存過程中可能產(chǎn)生降解產(chǎn)物★制劑生產(chǎn)、貯存過程中可能產(chǎn)生降解產(chǎn)物雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第9頁雜質(zhì)譜分析★依據(jù)合成工藝，分析可能產(chǎn)生工藝雜質(zhì)起始原料及可能引入雜質(zhì)、中間體、副產(chǎn)物例：鹽酸曲美他嗪中哌嗪雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第10頁雜質(zhì)譜分析★基于結(jié)構(gòu)特征，分析可能降解產(chǎn)物例：羅庫溴銨中雜質(zhì)C雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第11頁雜質(zhì)譜分析★經(jīng)過強降解試驗，分析研究降解產(chǎn)物考查樣品在酸、堿、高溫、光照、氧化等原因影響下降解產(chǎn)物。必要時，可依據(jù)情況進行以上原因綜合存在時強制降解試驗?！锱c理論分析結(jié)果進行對比雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第12頁雜質(zhì)譜分析★研發(fā)過程中檢測到實際存在雜質(zhì)對超出判定程度雜質(zhì)判定結(jié)構(gòu)，分析研究其起源工藝雜質(zhì)？降解產(chǎn)物？其它起源？雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第13頁雜質(zhì)譜分析★參考信息：經(jīng)過被仿藥品質(zhì)量標準（仿制藥）國家標準中已知雜質(zhì)EP、BP、USP、JP等標準中已知雜質(zhì)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第14頁雜質(zhì)譜分析★參考信息：經(jīng)過被仿藥品實際測定結(jié)果獲取雜質(zhì)信息（仿制藥）采取適當檢驗方法（LC/MS等），對被仿藥品進行實際測定，對其雜質(zhì)情況（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量）進行研究分析應關(guān)注被仿藥品是否有良好研究基礎(chǔ)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第15頁研究建立檢驗方法★基礎(chǔ)和經(jīng)驗明確雜質(zhì)檢驗目標（基于雜質(zhì)分析）了解慣用方法（比如HPLC、TLC、GC等）特點了解雜質(zhì)和藥品特征充分文件調(diào)研既往雜質(zhì)分析研究經(jīng)驗方法優(yōu)化和調(diào)整各種方法相互比較、相互補充雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第16頁研究建立檢驗方法例：氟哌利多注射液BP及USP均采取HPLC法檢驗相關(guān)物質(zhì)BP程度：單一雜質(zhì)0.25％，總雜質(zhì)0.5％原料藥原國家標準，TLC法（除主斑點外不得有其它雜質(zhì)斑點）雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第17頁TLC法試驗結(jié)果光照10天含量（UV法）下降10％，未檢出雜質(zhì)斑點影響原因、加速和長久試驗，樣品均未檢出雜質(zhì)斑點HPLC法試驗結(jié)果雜質(zhì)達7％以上

方法比較研究顯示，TLC法不適于本品相關(guān)物質(zhì)檢驗CP版，改用HPLC法雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第18頁例：鹽酸舍曲林有7個已知雜質(zhì)A-G雜質(zhì)A:非對映異構(gòu)體雜質(zhì)B、C、D：工藝雜質(zhì)雜質(zhì)E（扁桃酸）：拆分試劑雜質(zhì)F：降解產(chǎn)物雜質(zhì)G：對映異構(gòu)體雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第19頁例：鹽酸舍曲林采取一個方法不能有效控制全部雜質(zhì)針對不一樣雜質(zhì)，采取不一樣方法進行控制HPLC法：雜質(zhì)E（拆分試劑）0.2％GC法：雜質(zhì)C和D總量0.8％雜質(zhì)A、B、F均0.2％其它單一雜質(zhì)0.1％，總雜質(zhì)1.5%手性HPLC，雜質(zhì)G（對映異構(gòu)體）1.5％雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第20頁充分方法驗證靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等定量試驗：關(guān)注和驗證準確度、精密度、專屬性、定量限、線性、范圍、耐用性程度試驗：最少應關(guān)注和驗證專屬性、檢測限、耐用性雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第21頁充分方法驗證專屬性研究原料藥合成中間體、粗品等分離度考查原料藥及其制劑強制破壞試驗制劑輔料干擾試驗雜質(zhì)加入試驗和藥典方法或經(jīng)論證其它方法進行比較峰純度檢驗（二極管陣列檢測、質(zhì)譜檢測）雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第22頁充分方法驗證線性、定量限、檢測限等采取雜質(zhì)進行相關(guān)試驗關(guān)注雜質(zhì)紫外吸收特征，確定適宜檢測波長關(guān)注雜質(zhì)對應因子雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第23頁例：鹽酸左布比卡因注射液2,6-二甲基苯胺為毒性降解產(chǎn)物BP（布比卡因注射液）：對照品比色法，400ppm上市同品種：采取HPLC雜質(zhì)對照品法研制產(chǎn)品：方法學研究未針對該已知雜質(zhì)進行驗證雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第24頁確定合理雜質(zhì)程度關(guān)鍵是雜質(zhì)安全性相關(guān)技術(shù)指導標準要求（決議樹）論證雜質(zhì)安全性相關(guān)文件資料雜質(zhì)安全性研究資料上市產(chǎn)品中雜質(zhì)量不能超出進行安全性研究樣品中雜質(zhì)量被仿藥品質(zhì)量標準，雜質(zhì)種類和水平（仿制藥）雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第25頁確定合理雜質(zhì)程度原料藥雜質(zhì)程度..\..\化學藥品指導標準\化學藥品雜質(zhì)研究技術(shù)指導標準.pdf雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第26頁例：鹽酸帕羅西汀EP、USP收載，列出7個已知雜質(zhì)A-GHPLC法：控制雜質(zhì)A（去氟物）0.3％，其它單一雜質(zhì)0.1%，總雜質(zhì)不得過0.5％手性HPLC控制雜質(zhì)D（對映異構(gòu)體）不得過0.2％雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第27頁例：鹽酸帕羅西汀雜質(zhì)G：遺傳毒性雜質(zhì)，為工藝雜質(zhì)EP、USP均要求該雜質(zhì)不得過1ppm詳細品種：依據(jù)采取工藝進行分析，是否存在該雜質(zhì)假如存在，應研究建立適當方法進行控制，程度：不得過1ppm雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第28頁超出目標程度時考慮采取辦法降低雜質(zhì)至目標程度以下（首選）完善精制方法優(yōu)化合成工藝控制原料及中間體純度變更合成路線完善包裝及貯藏條件（針對降解產(chǎn)物）完善制劑處方工藝（針對降解產(chǎn)物）進行雜質(zhì)安全性研究采取含有雜質(zhì)原料藥或制劑采取分離雜質(zhì)單體雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第29頁超出目標程度時考慮雜質(zhì)結(jié)構(gòu)決議樹..\..\化學藥品指導標準\化學藥品雜質(zhì)研究技術(shù)指導標準.pdf雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第30頁仿制藥雜質(zhì)研究特點參考信息：被仿產(chǎn)品相關(guān)信息（質(zhì)量標準、實測結(jié)果等）目標：雜質(zhì)水平不超出被仿產(chǎn)品雜質(zhì)對比研究：主要研究伎倆前提：被仿品雜質(zhì)已得到充分研究，安全性已得到論證雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第31頁仿制藥雜質(zhì)研究特點雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品一致或雜質(zhì)種類較被仿品少，無超出判定程度新雜質(zhì)；各雜質(zhì)含量不超出被仿品——試制品雜質(zhì)控制到達了研究目標雜質(zhì)譜與被仿品一致或雜質(zhì)種類較被仿品少，無超出判定程度新雜質(zhì)；但已知雜質(zhì)含量超出了被仿品——改進工藝，降低雜質(zhì)含量雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第32頁仿制藥雜質(zhì)研究特點雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品不一致，有超出判定程度新雜質(zhì)；但已知雜質(zhì)含量不超出被仿品——判定新雜質(zhì)結(jié)構(gòu)——分析其產(chǎn)生原因，改進工藝，降低雜質(zhì)含量至判定程度以下——若經(jīng)過改進工藝，雜質(zhì)含量不能降低至判定程度以下，應依據(jù)雜質(zhì)研究決議樹，進行后續(xù)研究。雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第33頁仿制藥雜質(zhì)研究特點雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品不一致，有超出判定程度新雜質(zhì)；且已知雜質(zhì)含量亦超出被仿品——改進工藝，降低雜質(zhì)水平工藝路線：起始原料，中間體質(zhì)量控制；反應條件控制；精制方法等。雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第34頁仿制藥雜質(zhì)研究特點雜質(zhì)程度確實定指導標準要求被仿品質(zhì)量標準（該質(zhì)量標準是否完善）被仿品實測結(jié)果（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量）試制樣品研究結(jié)果（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量）相關(guān)文件資料雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第35頁雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系與原料藥制備工藝研究制備工藝決定雜質(zhì)水平（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量）雜質(zhì)研究結(jié)果驗證制備工藝可行性雜質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)果為優(yōu)化制備工藝提供主要信息雜質(zhì)檢驗方法驗證需制備工藝相關(guān)信息支持雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第36頁雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系與制劑處方工藝研究處方工藝對雜質(zhì)水平有主要影響

在原料藥符合要求前提下，制劑處方工藝實際上決定了產(chǎn)品雜質(zhì)水平是否可接收雜質(zhì)研究是評價處方工藝合理可行性主要依據(jù)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)果為優(yōu)化制備工藝提供主要信息若制劑中雜質(zhì)水平超出預期目標，應改進完善處方工藝雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第37頁雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系與穩(wěn)定性研究雜質(zhì)研究（降解路徑、降解產(chǎn)物）是穩(wěn)定性研究主要內(nèi)容是貯藏條件選擇主要依據(jù)穩(wěn)定性研究中雜質(zhì)考查結(jié)果是評價制劑處方工藝合理可行性主要依據(jù)雜質(zhì)程度需要結(jié)合穩(wěn)定性考查結(jié)果確定（在符合安全性要求前提下）雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第38頁三、案例分析阿托伐她汀鈣雜質(zhì)研究羅庫溴銨雜質(zhì)研究鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)分析雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第39頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究基本情況阿托伐他汀鈣（AtorvastatinCalcium）是一個人工合成HMG-CoA還原酶抑制劑，是臨床慣用降血脂藥原研發(fā)企業(yè)為輝瑞企業(yè)（Pfizer）當前國內(nèi)有原研發(fā)企業(yè)產(chǎn)品及仿制藥上市原料藥及其制劑質(zhì)量標準收載于國家新藥轉(zhuǎn)正標準USP33、EP7.1收載原料藥雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第40頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究雜質(zhì)程度要求最大日劑量：口服80mg/天匯報程度判定程度質(zhì)控程度原料藥0.05％0.1％0.15%制劑0.1％0.2％0.25%雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第41頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究雜質(zhì)控制方法比較國家標準EP7.1USP33原料藥方法HPLC等度HPLC梯度手性HPLC法同EP7.1程度總雜質(zhì)2.0％雜質(zhì)ABCD均0.3％，其它0.1％，總雜質(zhì)1.5％。對映體雜質(zhì)E0.3％同EP7.1制劑方法同上，總雜質(zhì)3.0％未收載未收載雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第42頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究雜質(zhì)譜分析工藝雜質(zhì)：雜質(zhì)A（去氟阿托伐他?。╇s質(zhì)C（雙氟阿托伐他?。㈦s質(zhì)F、雜質(zhì)G工藝雜質(zhì)及降解產(chǎn)物雜質(zhì)B（非對映異構(gòu)體）雜質(zhì)E（對映異構(gòu)體）降解產(chǎn)物：雜質(zhì)D（環(huán)氧化物）雜質(zhì)H（內(nèi)酯化降解產(chǎn)物）EP中8個已知雜質(zhì)結(jié)構(gòu)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第43頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究本品慣用制備工藝為先分別合成主環(huán)和側(cè)鏈，然后縮合、脫保護、成鹽。在常規(guī)條件下前述8個雜質(zhì)均可能出現(xiàn)可作為雜質(zhì)研究主要參考依據(jù)需要注意存在雜質(zhì)并不限于前述8個已知雜質(zhì)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第44頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究原料藥雜質(zhì)研究思緒以EP標準中檢驗方法及程度為參考依據(jù)，進行必要方法驗證試制樣品雜質(zhì)檢驗結(jié)果符合EP標準要求，無超出判定程度其它雜質(zhì)——到達研究目標若雜質(zhì)譜與EP標準一致，但雜質(zhì)量超出程度要求——完善工藝（精制：優(yōu)化工藝參數(shù)；控制起始原料及中間體質(zhì)量）出現(xiàn)超出判定程度（0.1％）新雜質(zhì)——判定結(jié)構(gòu)，分析原因，修改完善工藝，降低雜質(zhì)量至0.1％以下。若新雜質(zhì)不超出質(zhì)控程度（0.15％），且經(jīng)判定結(jié)構(gòu)明確不是毒性雜質(zhì)，可訂入質(zhì)量標準中進行控制雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第45頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究制劑雜質(zhì)研究思緒應選擇質(zhì)量符合要求原料藥若原料藥質(zhì)量符合要求，制劑雜質(zhì)研究重點考查降解產(chǎn)物關(guān)注降解路徑及降解產(chǎn)物阿托伐他汀主要降解路徑為內(nèi)酯化降解及氧化降解，氧化降解產(chǎn)物除環(huán)氧化物（雜質(zhì)D）外，還有其它降解產(chǎn)物。EP、USP等未收載制劑。與原研廠產(chǎn)品對比研究對評價雜質(zhì)檢驗方法及程度合理性尤其主要雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第46頁阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究申報品種雜質(zhì)研究情況已經(jīng)有多家企業(yè)申報，研究工作系統(tǒng)性和深入性參差不齊，有品種差距較大有以下幾個情況僅按照國家標準進行相關(guān)物質(zhì)檢驗在國家標準基礎(chǔ)上，增加了對映異構(gòu)體檢驗在分析雜質(zhì)譜基礎(chǔ)上，對各已知雜質(zhì)、光學異構(gòu)體均進行了研究與控制，并與上市產(chǎn)品進行了質(zhì)量對比。雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第47頁羅庫溴銨雜質(zhì)研究制備工藝：（2β，3α，5α，16β，17β）-16-（1-吡咯烷基）-2-（4-嗎啉基）-雄甾-3，17-二醇

（雄甾二醇）為起始原料，對17位進行?；玫叫坨薮紗未姿狨?，再與烯丙基溴反應成鹽。雄甾二醇合成：以雄甾-2-烯-17-酮為起始原料，經(jīng)?；?、環(huán)氧化、加成、開環(huán)等反應制得雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第48頁羅庫溴銨雜質(zhì)研究EP/BP收載，共列出8個已知雜質(zhì)..\..\藥品注冊資料\羅庫溴銨原料及制劑\羅庫溴銨申報資料\羅庫溴銨雜質(zhì)結(jié)構(gòu).docHPLC法，控制雜質(zhì)A不得過0.2％；雜質(zhì)B，雜質(zhì)C不得過0.3％；雜質(zhì)D、E、F、G、H不得過0.1％；其它單一雜質(zhì)不得過0.1％；總雜質(zhì)不得過1.5％雜質(zhì)譜分析在前述合成工藝下，EP中八個雜質(zhì)均可能出現(xiàn)雜質(zhì)A、B、D、E、F、G工藝雜質(zhì)雜質(zhì)C、H：工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第49頁羅庫溴銨雜質(zhì)研究申報品種雜質(zhì)研究情況品種1采用EP色譜條件，實測最大雜質(zhì)約2.1％，總雜質(zhì)約2.6％。未進行雜質(zhì)定性研究，程度定為單個雜質(zhì)3.0％，總雜質(zhì)5.0％品種2參考EP色譜條件，實測最大雜質(zhì)約1.7％，總雜質(zhì)約2.4％，未進行雜質(zhì)定性研究，程度定為單個雜質(zhì)3.5％，總雜質(zhì)5.0％存在問題雜質(zhì)研究不深入：未進行雜質(zhì)譜分析，未進行方法驗證，雜質(zhì)程度缺乏依據(jù)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第50頁羅庫溴銨雜質(zhì)研究申報品種雜質(zhì)研究情況品種3采用EP色譜條件，對雜質(zhì)A、G、C進行了方法學研究品種4對EP色譜柱進行了變更，對雜質(zhì)A、B、C、F、G進行了方法學研究存在問題雜質(zhì)譜分析不充分，方法學驗證不完善。應參考EP，最少對八個雜質(zhì)進行研究。雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第51頁鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究基本情況為β1受體阻滯劑，是心血管臨床慣用藥品之一原研發(fā)企業(yè)為百特企業(yè)國內(nèi)外均已上市，劑型為注射液當前國內(nèi)上市產(chǎn)品為仿制產(chǎn)品原料藥及其制劑質(zhì)量標準均未收入藥典（中國藥典及國外藥典）雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第52頁鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究雜質(zhì)控制標準原料藥國家標準WS1-(X-232)--ZTLC法，雜質(zhì)不得過1.0％注射液國家標準WS1-（X-272）-Z未控制相關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)研究和案例分析專家講座第53頁鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究雜質(zhì)譜分析本品原料藥為苯丙酸甲酯衍生物，酯類藥品易水解，在水溶液不穩(wěn)定，主要降解產(chǎn)物為酯鍵水解產(chǎn)物。