鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座

二、試驗原理1.方法原理

鄰二氮菲(phen)是光度法測定微量鐵很好試劑。該法靈敏度高，穩(wěn)定性好，干擾易消除，故應用廣泛。在pH為2~9（普通維持在pH=5-6）溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲（phen）生成穩(wěn)定桔紅色Fe(phen)32+:

Fe2++3(phen)=Fe(phen)3

其lgk=21.3，摩爾吸光系數(shù)?508

=1.1×104

L·mol-1·cm-1。在還原劑存在下，F(xiàn)e(phen)3桔紅色可保持幾個月不變。Fe3+與鄰二氮菲作用形成淡藍色配合物穩(wěn)定性較差，實際應用中加入還原劑鹽酸羥胺使Fe3+還原為Fe2+，再與顯色劑鄰二氮菲作用顯色。鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第1頁二、試驗原理

2、光度法原理

本方法選擇性高。

Ca2+、Hg2+、Zn2+及Ag+等離子與鄰二氮菲作用生成沉淀，干擾測定;

相當于鐵量40倍Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍Co2+、Ni2+、Cu2+等離子不干擾測定。共存金屬離子量大需掩蔽或分離。鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第2頁二、試驗原理

3、條件試驗(略)（1）入射光波長：普通情況下，應選擇被測物質最大吸收波長光為入射光。（2）顯色劑用量：顯色劑適當用量可經過試驗確定。（3）溶液酸度：選擇適合酸度，能夠在不一樣pH緩沖溶液中加入等量被測離子和顯色劑，測其吸光度，作A-pH曲線，由曲線上選擇適當pH范圍。（4）有色配合物穩(wěn)定性：有色配合物顏色應該穩(wěn)定足夠時間。（5）干擾排除：當被測試液中有其它干擾組分共存時，必須采取一定辦法排除干擾。吸光光度法試驗條件，如測量波長、溶液酸度、顯色劑用量等，都是經過試驗來確定。本試驗在測定試樣中鐵含量之前，先做部分條件試驗，方便初學者掌握確定試驗條件方法。

鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第3頁二、試驗原理

條件試驗簡單方法是：變動某試驗條件，固定其余條件，測得一系列吸光度值，繪制吸光度-某試驗條件曲線，依據曲線確定某試驗條件適宜值或適宜范圍。 鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第4頁三、試驗儀器1.721型分光光度計；pH計；50mL-1比色管2.鐵標準溶液100ug·mL-13.鄰二氮菲1.5g·L-14.鹽酸羥胺100g·L-15.NaAc1mol·L-16.NaOH

1mol·L-17.HCl6mol·L-1鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第5頁四、試驗步驟樣品鐵含量測定

1、鐵標準曲線繪制標準貯備液配制：移取10.00mL100ug·mL-1鐵標準溶液于100mL容量瓶，加2mL6mol·L-1HCl溶液，加水至刻度，搖勻。溶液Fe3+濃度為10.00μg·mL-1。標準系列配制：分別移取0.0mL（試劑空白），2.0mL，5.0mL，8.0mL，10.0mL

10.00ug·mL-1鐵標準溶液于50mL比色管中，分別加入1mL鹽酸羥胺，搖勻，再加入2mL鄰二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，搖勻放置10min（顯色）。吸光度測定：用1cm比色皿，以試劑空白為參比(調整吸光度A為0），在510nm波長下，測定各溶液吸光度A。標準曲線繪制：以鐵質量為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制標準曲線。*注意：每加入一個試劑均需搖勻。下同。鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第6頁四、試驗步驟2、樣品鐵含量測定移取適量鐵樣品液(5.00mL)于50mL比色管中，加入1mL鹽酸羥胺，搖勻，再加入2mL鄰二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，搖勻放置10min，用1cm比色皿，以試劑空白為參比，在510nm波長下，測定樣品溶液吸光度。從標準曲線上查出或由回歸方程計算樣品液中鐵含量（mg/L）。3、光度計與比色皿使用4、結束工作測量完成,關閉電源,取出吸收池,清洗晾干保留.清理工作臺,罩上鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第7頁五、數(shù)據統(tǒng)計與處理繪制工作曲線，從工作曲線上找出未知試樣含量，并計算水樣中鐵含量（μg?mL-1）鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第8頁六、注意事項1．不能顛倒各種試劑加入次序。2．每改變一次波長必須重新調零3．讀數(shù)據時要注意A和T所對應數(shù)據。4．最正確波長選擇好后不要再改變。5．每次測定前要注意校正。6．試驗匯報中要進行數(shù)據統(tǒng)計，并進行處理，最終要得出結論。鄰氮菲分光光度法測鐵專家講座第9頁七、思索題1．本試驗量取各種試劑時應分