東北師范大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)

東北師范大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)第1頁(yè)/共59頁(yè)1、溶酶體的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1955年deDuve與Novikoff首次發(fā)現(xiàn)。結(jié)構(gòu)：?jiǎn)螌幽@、含多種酸性水解酶類(lèi)的囊泡狀細(xì)胞器。主要功能:是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)消化。標(biāo)志酶：酸性磷酸酶，最適pH5.0。特征：具有異質(zhì)性，形態(tài)大小及內(nèi)含的水解酶種類(lèi)。第2頁(yè)/共59頁(yè)

初級(jí)溶酶體（primarylysosome）

次級(jí)溶酶體（secondarylysosome）溶酶體后溶酶體（殘?bào)w）（

residualbody）根據(jù)完成生理功能的不同階段可分為第3頁(yè)/共59頁(yè)1）初級(jí)溶酶體直徑約0.2~0.5μm，膜厚7.5nm，內(nèi)含物均一，無(wú)明顯顆粒，是高爾基體分泌形成的。含有多種水解酶，但沒(méi)有活性，只有當(dāng)溶酶體破裂，或其它物質(zhì)進(jìn)入，才有酶活性。其水解酶包括蛋白酶，核酸酶、脂酶、磷酸酶、硫酸酯酶、磷脂酶類(lèi)，已知60余種，這些酶均屬于酸性水解酶。溶酶體膜雖然與質(zhì)膜厚度相近，但成分不同，主要區(qū)別是：①膜上有質(zhì)子泵，將H+泵入溶酶體，使其pH值降低，②膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白降解，③具有多種載體蛋白用于將水解的產(chǎn)物向外轉(zhuǎn)運(yùn)。第4頁(yè)/共59頁(yè)溶酶體酶多數(shù)為可溶性酶溶酶體膜整合蛋白，能抗御酸變性作用溶酶體的酶具有同源序列溶酶體酶共同標(biāo)志：甘露糖-6-磷酸（M6P）催化相關(guān)反應(yīng)溶酶體酶與非溶酶體酶的蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)相似第5頁(yè)/共59頁(yè)2）次級(jí)溶酶體

是正在進(jìn)行或完成消化作用的溶酶體，內(nèi)含水解酶和相應(yīng)的底物，1）異噬溶酶體（phagolysosome），消化的物質(zhì)來(lái)自外源2）自噬溶酶體（autophagolysosome），消化的物質(zhì)來(lái)自細(xì)胞本身的各種組分。消化后的小分子物質(zhì)通過(guò)膜上載體蛋白運(yùn)送到基質(zhì)，供細(xì)胞利用。未被消化的物質(zhì)殘存在溶酶體中形成殘余體。第6頁(yè)/共59頁(yè)第7頁(yè)/共59頁(yè)3）殘?bào)w又稱(chēng)后溶酶體（post-lysosome）已失去酶活性，僅留未消化的殘?jiān)?，殘?bào)w可通過(guò)類(lèi)似胞吐作用將內(nèi)容物排出細(xì)胞，也可能留在細(xì)胞內(nèi)逐年增多，如肝細(xì)胞中的脂褐質(zhì)。第8頁(yè)/共59頁(yè)脂褐質(zhì)：結(jié)構(gòu)致密，不能被徹底水解，又不能排出細(xì)胞，結(jié)果在細(xì)胞內(nèi)沉積增多，阻礙細(xì)胞的物質(zhì)交流和信號(hào)傳遞，最后導(dǎo)致細(xì)胞衰老。脂褐質(zhì)色素出現(xiàn)在皮膚上，醫(yī)學(xué)上稱(chēng)“脂褐質(zhì)色素”，俗稱(chēng)老年斑。出現(xiàn)在腦細(xì)胞上，便會(huì)引起智力和記憶力的減退；如老年性癡呆（AD）就是由β-淀粉樣蛋白沉積引起的，因此β-AP可做為AD的鑒定指標(biāo)。一個(gè)37歲的成人早衰癥患者第9頁(yè)/共59頁(yè)脂褐質(zhì)形成：主要是機(jī)體中不飽和脂肪酸被氧化后產(chǎn)生的氧化脂質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合，變成黑褐色的脂褐質(zhì)，積聚于細(xì)胞內(nèi)，形成斑點(diǎn)。脂褐質(zhì)不僅存在于皮膚表面，也積存于心、肝、腦等組織的細(xì)胞里，大量積聚會(huì)嚴(yán)重影響機(jī)體的代謝功能。第10頁(yè)/共59頁(yè)2.溶酶體的功能1）清除無(wú)用的生物大分子、衰老的細(xì)胞器及衰老損傷和死亡的細(xì)胞（1）清除暫時(shí)不需要的酶或某些代謝產(chǎn)物。（2）清除衰老的細(xì)胞器和生物大分子（3）清除發(fā)育和成體中凋亡的細(xì)胞，主要由溶酶體和蛋白媒體共同承擔(dān)，是細(xì)胞的“清道夫”。（4）清除衰老的細(xì)胞：巨噬細(xì)胞完成。異常：溶酶體酶缺失或溶酶體酶代謝環(huán)節(jié)異常，影響代謝，導(dǎo)致儲(chǔ)積癥。第11頁(yè)/共59頁(yè)2）防御作用：是某些細(xì)胞特有的功能，可以識(shí)別并吞噬入侵的病毒或細(xì)菌，在溶酶體作用下將其殺死并降解。如巨噬細(xì)胞可吞入病原體，在溶酶體中將病原體殺死和降解。單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞殺死細(xì)菌異常：病原體進(jìn)入吞噬泡或胞飲泡，抑制了吞噬泡的酸化從而抑制了溶酶體酶的活性，導(dǎo)致病原體未被殺死并在巨噬細(xì)胞的吞噬泡中繁殖，如麻瘋桿菌，利什曼原蟲(chóng)。第12頁(yè)/共59頁(yè)第13頁(yè)/共59頁(yè)3）其它重要的生理功能（1）細(xì)胞內(nèi)消化為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)：血液中的大分子物質(zhì)通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，如內(nèi)吞血清脂蛋白獲得膽固醇，單細(xì)胞真核生物，如黏菌，變形蟲(chóng)，吞噬細(xì)菌和微生物而生存。饑餓狀態(tài)下分解生物內(nèi)生物大分子保證機(jī)體所需能量。如將蛋白質(zhì)分解成為二肽或游離的氨基酸，將碳水化合物分解為寡糖類(lèi)或單糖，使核酸分解為核苷和磷酸，使中性脂肪或磷脂分解成為游離脂肪酸、甘油或甘油磷酸二酯等。最終均成為可溶性、可彌散的分子，并透過(guò)溶酶體膜，在胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)繼續(xù)代謝被再利用。第14頁(yè)/共59頁(yè)（2）參與分泌過(guò)程的調(diào)節(jié)：如將甲狀腺球蛋白降解成有活性的甲狀腺素（3）細(xì)胞凋亡：個(gè)體發(fā)生過(guò)程中往往涉及組織或器官的改造或重建，如昆蟲(chóng)和蛙類(lèi)的變態(tài)發(fā)育等等。這一過(guò)程是在基因控制下實(shí)現(xiàn)的，稱(chēng)為程序性細(xì)胞死亡，注定要消除的細(xì)胞以出芽的形式形成凋亡小體，被巨噬細(xì)胞吞噬并消化。第15頁(yè)/共59頁(yè)（4）

形成精子的頂體：頂體相當(dāng)于特化的溶酶體，可溶穿卵子的皮層，使精子進(jìn)入卵子。

第16頁(yè)/共59頁(yè)動(dòng)物細(xì)胞溶酶體系統(tǒng)示意圖第17頁(yè)/共59頁(yè)3.溶酶體的發(fā)生多途徑，不同種類(lèi)細(xì)胞或同一種類(lèi)細(xì)胞都可采取不同的方式。M6P特異標(biāo)志是目前研究高爾基體分選最為清除的一條途徑。酸性水解酶類(lèi)N-連接糖基化寡糖鏈結(jié)合于酸性水解酶的天冬酰胺殘基N-乙酰葡糖胺磷酸轉(zhuǎn)移酶N-乙酰葡糖胺磷酸糖苷酶甘露糖磷酸化M6PM6P受體識(shí)別M6P分選濃縮初級(jí)溶酶體出芽第18頁(yè)/共59頁(yè)溶酶體的發(fā)生第19頁(yè)/共59頁(yè)

酸性磷酸酶高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞膜初級(jí)溶酶體酸性磷酸酶的轉(zhuǎn)運(yùn)第20頁(yè)/共59頁(yè)4.溶酶體與疾病1）矽肺二氧化硅塵粒（矽塵）肺泡巨噬細(xì)胞吞噬吞噬小體與溶酶體融合次級(jí)溶酶體溶酶體崩解矽塵釋出又被其他巨噬細(xì)內(nèi)吞噬，如此反復(fù)進(jìn)行。受損或已破壞的巨噬細(xì)胞釋放“致纖維化因子”，并激活成纖維細(xì)胞，導(dǎo)致膠原纖維沉積，肺組織纖維化。2）肺結(jié)核菌體成分抵抗胞內(nèi)的溶菌殺傷作用，使結(jié)核桿菌在肺泡內(nèi)大量生長(zhǎng)繁殖，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞裂解，釋放出的結(jié)核桿菌再被吞噬而重復(fù)上述過(guò)程，最終引起肺組織鈣化和纖維化。

第21頁(yè)/共59頁(yè)3）麻風(fēng)病麻風(fēng)分枝桿菌是一種典型胞內(nèi)菌，病人滲出物標(biāo)本涂片中可見(jiàn)大量麻風(fēng)分枝桿菌存在于細(xì)胞內(nèi)。這種細(xì)胞的胞漿呈泡沫狀，稱(chēng)麻風(fēng)細(xì)胞?？稍诰奘杉?xì)胞中逃離吞噬體，自身抗體和受損組織釋放的抗原結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。沉淀在皮膚或粘膜下，形成紅斑和結(jié)節(jié)，稱(chēng)為麻風(fēng)結(jié)節(jié)(leproma)，是麻風(fēng)的典型病灶。面部結(jié)節(jié)融合可呈獅面狀。第22頁(yè)/共59頁(yè)4）各類(lèi)貯積癥

貯積癥（storagedisease）：是由于遺傳缺陷引起的，由于溶酶體的酶發(fā)生變異，功能喪失，導(dǎo)致底物在溶酶體中大量貯積，進(jìn)而影響細(xì)胞功能，常見(jiàn)的貯積癥主要有以下幾類(lèi)。臺(tái)-薩氏綜合征（Tay-Sachsdiesease）：又叫黑蒙性家族癡呆癥，溶酶體缺少氨基已糖酯酶A（β-N-hexosaminidase），導(dǎo)致神經(jīng)節(jié)甘脂GM2積累，影響細(xì)胞功能，造成精神癡呆，2－6歲死亡?；颊弑憩F(xiàn)為漸進(jìn)性失明、病呆和癱瘓，該病主要出現(xiàn)在猶太人群中。

第23頁(yè)/共59頁(yè)臺(tái)－薩氏綜合癥神經(jīng)元細(xì)胞溶酶體第24頁(yè)/共59頁(yè)II型糖原累積?。≒ompe病）：溶酶體缺乏α-1,4-葡萄糖苷酶，糖原在溶酶體中積累，導(dǎo)致心、肝、舌腫大和骨骼肌無(wú)力。屬常染色體缺陷性遺傳病，患者多為小孩，常在兩周歲以前死亡。腦苷脂沉積病,是巨噬細(xì)胞和腦神經(jīng)細(xì)胞的溶酶體缺乏β-葡萄糖苷酶造成的。大量的葡萄糖腦苷脂沉積在溶酶體內(nèi),患者的肝、脾、淋巴結(jié)等腫大，中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生退行性變化，常在1歲內(nèi)死亡。細(xì)胞內(nèi)含物?。╥nclusion-celldisease，I-celldisease）：N-乙酰葡糖胺磷酸轉(zhuǎn)移酶單基因突變引起的，導(dǎo)致溶酶體前酶上不能形成M6P分選信號(hào)，酶被運(yùn)出細(xì)胞。這類(lèi)病人成纖維細(xì)胞的溶酶體中沒(méi)有水解酶，導(dǎo)致底物在溶酶體中大量貯積，形成所謂的“包涵體（inclusion）”。另外這類(lèi)病人肝細(xì)胞中有正常的溶酶體，說(shuō)明溶酶體形成還具有M6P之外的途徑。4）類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎溶酶體膜很易脆裂，其釋放的酶導(dǎo)致關(guān)節(jié)組織損傷和發(fā)炎。第25頁(yè)/共59頁(yè)4.溶酶體與過(guò)氧化物酶體

過(guò)氧化物酶體（peroxisome）又稱(chēng)微體（microbody），由單層膜圍繞而成。由J.Rhodin（1954）首次在鼠腎小管上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)。異質(zhì)性的細(xì)胞器，在不同生物及不同發(fā)育階段有所不同。直徑約0.2-1.5μm，通常為0.5μm，呈圓形，橢圓形或啞呤形不等，標(biāo)志酶：氧化酶和過(guò)氧化氫酶，已發(fā)現(xiàn)40多種氧化酶，如L-氨基酸氧化酶，D-氨基酸氧化酶等等，其中尿酸氧化酶（urateoxidase）的含量極高，以至于在有些種類(lèi)形成酶結(jié)晶構(gòu)成的核心。第26頁(yè)/共59頁(yè)人肝細(xì)胞過(guò)氧化物酶體第27頁(yè)/共59頁(yè)煙草葉肉細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體第28頁(yè)/共59頁(yè)1）過(guò)氧化物酶體與溶酶體的區(qū)別特征溶酶體過(guò)氧化物酶體形態(tài)大小多呈球形,直徑0.2~0.5μm,無(wú)酶晶體球形,直徑多在0.15~0.25μm,內(nèi)常有酶晶體酶種類(lèi)酸性水解酶氧化酶、過(guò)氧化氫酶類(lèi)pH約為5約為7是否需氧不需要需要功能細(xì)胞內(nèi)消化多種功能發(fā)生在rER中合成經(jīng)Golgi出芽形成酶在細(xì)胞基質(zhì)中合成，經(jīng)分裂裝配形成標(biāo)志酶酸性水解酶過(guò)氧化氫酶第29頁(yè)/共59頁(yè)2）過(guò)氧化物酶體的功能動(dòng)物體內(nèi)：

1）參與脂肪酸的氧化

2）解毒作用：酒精氧化成乙醛植物體內(nèi)：

1）乙醛酸循環(huán)體

使脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)樘恰Ｖ舅嵫趸螽a(chǎn)生的乙酰輔酶A,與乙醛酸結(jié)合形成蘋(píng)果酸，蘋(píng)果酸離開(kāi)過(guò)氧化物酶體合成糖。

2）光合作用的副產(chǎn)物的氧化。乙醇酸氧化成乙醛酸和過(guò)氧化氫。第30頁(yè)/共59頁(yè)3）過(guò)氧化物酶體的發(fā)生

組成過(guò)氧化物酶體的氧化酶：由核基因編碼，在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成。

蛋白分選信號(hào)PTS

(peroxisomaltargetingsignal）PTS1在蛋白質(zhì)的C端:ser-lys-leu-COOH;

PTS2在蛋白質(zhì)的N端:Arg/lys-leu/Ile-5X-His/Gln-leu

過(guò)氧化物酶體中膜脂：在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成，以磷脂轉(zhuǎn)換蛋白途徑，運(yùn)至過(guò)氧化物酶體膜。

過(guò)氧化物酶體以生長(zhǎng)分裂的形式增殖第31頁(yè)/共59頁(yè)過(guò)氧化物酶體發(fā)生示意圖

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑基質(zhì)途徑第32頁(yè)/共59頁(yè)過(guò)氧化物酶體與疾病

Zellweger綜合征也叫腦肝腎綜合征，患者細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體中，酶蛋白輸入有關(guān)的蛋白質(zhì)變異，過(guò)氧化物酶體是“空的”。腦、肝、腎異常，出生3-6個(gè)月內(nèi)后死亡。第33頁(yè)/共59頁(yè)第三節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分選與膜泡運(yùn)輸?shù)鞍椎姆诌x（proteinsorting）：除線(xiàn)粒體、葉綠體內(nèi)自身合成的蛋白質(zhì)外，機(jī)體絕大多數(shù)蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中開(kāi)始合成。隨后，或在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，或轉(zhuǎn)運(yùn)到粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)繼續(xù)合成。然后，通過(guò)不同的途徑，轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的特定部位。問(wèn)題的提出：

1、為什么有的核糖體游離在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成蛋白質(zhì)，而有的與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合形成粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)？

2、是什么指令蛋白質(zhì)合成的部位，并指導(dǎo)蛋白質(zhì)最終命運(yùn)？第34頁(yè)/共59頁(yè)一、信號(hào)假說(shuō)與蛋白質(zhì)的分選信號(hào)信號(hào)假說(shuō)

1972年，C.Milstein等在研究骨髓瘤細(xì)胞中的發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞中提取的IgG分子N端比分泌到細(xì)胞外IgG分子N端多。

1975年，G.Blobel和D.sabatini提出了信號(hào)假說(shuō)。

1999年，G.Blobel獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎(jiǎng)?，F(xiàn)已確定：蛋白質(zhì)N端的信號(hào)序列，控制蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)移與定位，是蛋白質(zhì)在粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的決定因素。第35頁(yè)/共59頁(yè)一、信號(hào)假說(shuō)與蛋白質(zhì)分選1975年Blobel和Sabatini等提出信號(hào)假說(shuō)（Signalhypothesis）分泌性蛋白N-端序列作為信號(hào)肽，指導(dǎo)分泌性蛋白到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成，然后在信號(hào)肽引導(dǎo)下蛋白質(zhì)邊合成，邊通過(guò)易位子蛋白復(fù)合體進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，在蛋白質(zhì)合成結(jié)束之前信號(hào)肽被切除。Blobel獲1999年諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎(jiǎng)第36頁(yè)/共59頁(yè)核糖體是合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器主要成分——蛋白質(zhì)和ｒRNA功能：按照mRNA的指令合成多肽鏈mRNA核糖體第37頁(yè)/共59頁(yè)第38頁(yè)/共59頁(yè)第39頁(yè)/共59頁(yè)A部位：氨基酸部位或受位，接受氨?；鵷RNAP部位：肽基部位或放位，肽基tRNA移交肽鏈后，tRNA被釋放的部位T因子：肽基轉(zhuǎn)移酶催化P位上的氨?；Y(jié)合到A位的氨酰tRNA上G因子：GTP酶，催化tRNA從A位→P位第40頁(yè)/共59頁(yè)核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所5’tRNA循環(huán)3’mRNA第41頁(yè)/共59頁(yè)附著的多聚核糖體，主要合成分泌性Protein游離的多聚核糖體，主要合成結(jié)構(gòu)性ProteinRERmRNA第42頁(yè)/共59頁(yè)指導(dǎo)分泌性蛋白在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的決定因素：1.蛋白質(zhì)N端的信號(hào)肽（signalsequenceortargetingsequence）2.信號(hào)識(shí)別顆粒（Signalrecognitionparticle,SRP）3.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的信號(hào)識(shí)別顆粒的受體（又稱(chēng)停泊蛋白，dockingprotein,DP）。信號(hào)肽－信號(hào)識(shí)別顆粒－顆粒受體第43頁(yè)/共59頁(yè)信號(hào)肽：存在于蛋白質(zhì)N端，通常16-26個(gè)氨基酸殘基，包括疏水核心區(qū)、信號(hào)肽的C端和N端SRP：是一種核糖核蛋白復(fù)合體：6種蛋白質(zhì)和一個(gè)300個(gè)核苷酸組成的7SRNA結(jié)合組成。SRP即能與新生肽信號(hào)序列和核糖體結(jié)合，又能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)SRP受體結(jié)合。SRP受體:位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上，特異地與SRP結(jié)合。第44頁(yè)/共59頁(yè)分泌性蛋白的合成與跨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)圖解第45頁(yè)/共59頁(yè)分泌性蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的共翻譯過(guò)程：

1.游離核糖體上信號(hào)肽合成，約80個(gè)aa時(shí)，信號(hào)肽延伸出核糖體；

2.胞質(zhì)中SRP識(shí)別信號(hào)肽，形成SRP-核糖體復(fù)合體，從而使多肽鏈合成暫停，防止新生肽N端損傷和成熟前折疊。

3.SRP與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜SRP受體結(jié)合，形成SRP-SRP受體-核糖體復(fù)合體；第46頁(yè)/共59頁(yè)4.核糖體/新生肽與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上易位子結(jié)合，SRP脫離信號(hào)序列和核糖體，返回細(xì)胞基質(zhì)并參加再循環(huán)。

5.信號(hào)肽與易位子結(jié)合并使孔道打開(kāi)，信號(hào)肽穿入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并引導(dǎo)肽鏈以袢環(huán)形式進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，同時(shí)，ER膜上的信號(hào)肽酶切除信號(hào)肽并使之降解。

6.核糖體上的多肽鏈合成繼續(xù)進(jìn)行，直至蛋白質(zhì)合成終止，蛋白質(zhì)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)管腔。

7.附著核糖體脫離內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，大小亞基分開(kāi)，回到胞質(zhì)基質(zhì)中。

8.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的易位子關(guān)閉。第47頁(yè)/共59頁(yè)開(kāi)始轉(zhuǎn)移序列與停止轉(zhuǎn)移序列：開(kāi)始轉(zhuǎn)移序列（starttransfersequence）：

肽鏈上的一段序列，與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的親合力較低，肽鏈能進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。引導(dǎo)肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的一段信號(hào)肽序列。停止轉(zhuǎn)移序列（stoptransfersequence

）：

肽鏈上的一段序列，與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的親合力很高，能阻止肽鏈繼續(xù)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，使其成為跨膜蛋白質(zhì)。意義：含信號(hào)肽，而無(wú)停止轉(zhuǎn)移序列，多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。含信號(hào)肽，中部有停止轉(zhuǎn)移序列，形成跨膜蛋白。含多個(gè)引導(dǎo)肽序列和多個(gè)停止轉(zhuǎn)移序列，形成多次跨膜蛋白。第48頁(yè)/共59頁(yè)跨膜蛋白合成第49頁(yè)/共59頁(yè)①附著核糖體：主要合成分泌性蛋白質(zhì)

②游離核糖體：主要合成結(jié)構(gòu)性蛋白質(zhì)

③功能狀態(tài)都為多聚核糖體，非功能狀態(tài)為大、小亞基分開(kāi)核糖體的存在形式第50頁(yè)/共59頁(yè)二、蛋白質(zhì)分選的基本途徑與類(lèi)型第51頁(yè)/共59頁(yè)

蛋白的分選（proteinsorting）：除線(xiàn)粒體、葉綠體內(nèi)自身合成的蛋白質(zhì)外，絕大多在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中開(kāi)始合成。隨后，或在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，或轉(zhuǎn)運(yùn)到粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)繼續(xù)合成。然后，通過(guò)不同的途徑，轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的特定部位。問(wèn)題的提出：

1、為什么有的核糖體游離在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成蛋白質(zhì)，而有的與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合形成粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)？

2、是什么指令蛋白質(zhì)合成的部位，并指導(dǎo)蛋白質(zhì)最終命運(yùn)？第52頁(yè)/共59頁(yè)基質(zhì)中核糖體半合成－粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)－高爾基體－溶酶體或膜或胞外全合成－轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞器第53頁(yè)/共59頁(yè)蛋白質(zhì)兩條分選途徑：溶酶體分泌泡細(xì)胞質(zhì)膜線(xiàn)粒體葉綠體過(guò)氧化物酶體細(xì)胞核基質(zhì)特定部位，可溶性駐留蛋白和支架蛋白高爾基體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)2.翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)途徑胞外1.共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)途徑第54頁(yè)/共59頁(yè)共轉(zhuǎn)移與后轉(zhuǎn)移共轉(zhuǎn)移（co-translation）：肽鏈邊合成邊向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔轉(zhuǎn)移的方式。后轉(zhuǎn)移（posttranslation）：蛋白質(zhì)在細(xì)胞基質(zhì)中合成，然后再轉(zhuǎn)移到特定位置。如：葉綠體、線(xiàn)粒體、過(guò)氧化物酶體中的蛋白。第55頁(yè)/共59頁(yè)二、蛋白質(zhì)分選、運(yùn)輸?shù)耐緩?/p>

從蛋白質(zhì)分選的轉(zhuǎn)運(yùn)方式分類(lèi)：1.跨膜運(yùn)輸：蛋白質(zhì)線(xiàn)粒體、葉綠體、過(guò)氧化物酶體高爾基體分泌泡2.膜泡運(yùn)輸內(nèi)