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實(shí)驗(yàn)一坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備骨骼肌收縮詳解演示文稿當(dāng)前1頁,總共33頁。(優(yōu)選)實(shí)驗(yàn)一坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備骨骼肌收縮當(dāng)前2頁,總共33頁。材料蟾蜍或蛙;蛙板、探針、粗剪刀、細(xì)剪刀、尖鑷子、玻璃分針、大頭針、培養(yǎng)皿、滴管、瓷碗、鋅銅弓或鋁銀電極、任氏液。當(dāng)前3頁,總共33頁。步驟1、毀腦脊髓
取蟾蜍一只,用左手握住,以示指壓其頭部前端使其盡量前俯,右手持探針自枕骨大孔處垂直刺入,到達(dá)椎管,即將探針改變方向刺入顱腔,向各側(cè)不斷攪動(dòng),徹底搗毀腦組織;再將探針原路退出,刺向尾側(cè),捻動(dòng)探針使逐漸刺入整個(gè)椎管內(nèi),搗毀脊髓。此時(shí)蟾蜍下頜呼吸運(yùn)動(dòng)應(yīng)消失,四肢松軟,即成為一毀腦脊髓的蟾蜍(pithedtoad)。否則須按上法再行搗毀。當(dāng)前4頁,總共33頁。當(dāng)前5頁,總共33頁。2.剪除軀干上部及內(nèi)臟用粗剪刀在顱骨后方剪斷脊柱。左手握住蟾蜍脊柱,右手將粗剪刀沿兩側(cè)(避開坐骨神經(jīng))剪開腹壁。此時(shí)軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干上部及內(nèi)臟組織,棄于瓷碗內(nèi)。當(dāng)前6頁,總共33頁。當(dāng)前7頁,總共33頁。當(dāng)前8頁,總共33頁。當(dāng)前9頁,總共33頁。3.剝皮避開神經(jīng),用左手持圓頭鑷子夾住脊柱,右手捏住皮膚邊緣,逐步向下牽拉剝離皮膚。拉至大腿時(shí),如阻力較大,可先剝下一側(cè),再剝另一側(cè)。將全部皮膚剝除后,將標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。當(dāng)前10頁,總共33頁。當(dāng)前11頁,總共33頁。4、分離兩腿:避開坐骨神經(jīng),用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨,然后沿中線將脊柱剪成左右兩半,再從恥骨聯(lián)合中央剪開(為保證兩側(cè)坐骨神經(jīng)完整,應(yīng)避免剪時(shí)偏向一側(cè))。將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。當(dāng)前12頁,總共33頁。當(dāng)前13頁,總共33頁。當(dāng)前14頁,總共33頁。5、游離坐骨神經(jīng):取腿一條,先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部,然后用大頭針將標(biāo)本背位固定于干凈蛙板上。再用玻璃分針循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝,縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分,直至分離至腘窩脛神經(jīng)分叉處。然后剪斷股二頭肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱,并繞至前方剪斷股四頭肌腱。自上向下剪斷所有坐骨神經(jīng)分支。將連著3~4節(jié)椎骨的坐骨神經(jīng)分離出來。當(dāng)前15頁,總共33頁。當(dāng)前16頁,總共33頁。6、完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本:將已游離的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上。用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周圍向上剪除并刮凈所有大腿肌肉,在距膝關(guān)節(jié)約1cm處剪斷股骨。棄去上段股骨,保留部分即為坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本當(dāng)前17頁,總共33頁。當(dāng)前18頁,總共33頁。當(dāng)前19頁,總共33頁。第二部分骨骼肌的單收縮與強(qiáng)直收縮當(dāng)前20頁,總共33頁。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握骨骼肌收縮的記錄方法觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系觀察骨骼肌的單收縮、收縮的總和以及強(qiáng)直收縮現(xiàn)象當(dāng)前21頁,總共33頁。二、原理腓腸肌由許多肌纖維組成,刺激腓腸肌時(shí),不同的刺激強(qiáng)度會(huì)引起肌肉的不同反應(yīng)。當(dāng)刺激強(qiáng)度過小時(shí),肌肉不發(fā)生收縮反應(yīng),刺激為閾下刺激。而能引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)的最小刺激為閾刺激,刺激的強(qiáng)度稱為閾強(qiáng)度,當(dāng)全部肌纖維同時(shí)收縮時(shí),出現(xiàn)最大的收縮反應(yīng),引起最大收縮反應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度稱為最適刺激強(qiáng)度。肌肉組織對(duì)于一個(gè)閾上強(qiáng)度的刺激發(fā)生一次迅速的收縮反應(yīng),稱為單收縮。單收縮的過程可分三個(gè)時(shí)期:潛伏期、縮短期和舒張期。兩個(gè)同等強(qiáng)度的閾上刺激,相繼作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本,如果刺激間隔小于單收縮的時(shí)程,則出現(xiàn)兩個(gè)收縮反應(yīng)的重疊,稱為收縮的總和。強(qiáng)直收縮:不完全強(qiáng)直收縮;完全強(qiáng)直收縮。當(dāng)前22頁,總共33頁。當(dāng)前23頁,總共33頁。abcd蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌單收縮曲線當(dāng)前24頁,總共33頁。當(dāng)前25頁,總共33頁。三、試劑與器材蛙、計(jì)算機(jī)、生物信號(hào)處理系統(tǒng)、解剖針、手術(shù)剪、圓頭手術(shù)鑷、尖頭手術(shù)鑷、玻璃分針、蛙板、肌槽、連接導(dǎo)線、張力換能器、刺激輸出線、任氏液、棉線、培養(yǎng)皿。當(dāng)前26頁,總共33頁。當(dāng)前27頁,總共33頁。肌槽張力換能器當(dāng)前28頁,總共33頁。1、剝制有活性的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(在任氏液中浸泡十分鐘左右,使其興奮性較穩(wěn)定)。2、連接實(shí)驗(yàn)裝置
將張力換能器和肌槽固定在鐵支架上,肌肉標(biāo)本的股骨固定于肌槽側(cè)面的小孔中,腓腸肌跟腱的結(jié)扎線連于張力換能器的受力片上,連線應(yīng)松緊適宜,并與桌面垂直,張力換能器的輸入端與第四通道相連四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(步驟)當(dāng)前29頁,總共33頁。3、調(diào)節(jié)刺激器,改變刺激強(qiáng)度(從弱到強(qiáng)),觀察刺激強(qiáng)度變化對(duì)肌肉收縮的影響四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(步驟)當(dāng)前30頁,總共33頁。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(步驟)4、單收縮的分析電極直接刺激腓腸肌,測(cè)量單收縮的3個(gè)時(shí)程:潛伏期、收縮期和舒張期刺激參數(shù)不變,刺激坐骨神經(jīng),再測(cè)量單收縮的三個(gè)時(shí)程當(dāng)前31頁,總共33頁。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(續(xù))5、復(fù)合收縮的分析刺激強(qiáng)度不變,調(diào)整刺激頻率,記錄不完全強(qiáng)直收縮曲線。逐漸增大刺激頻率,記錄腓腸肌的完全強(qiáng)直收縮曲線。當(dāng)前32頁,總共33頁。五、注意事項(xiàng)標(biāo)本制備時(shí)要注意保持標(biāo)本的濕潤標(biāo)本制備時(shí)盡量避免使用尖銳的器械,以免損傷神經(jīng)、肌肉使用電刺激時(shí),刺激強(qiáng)度不宜太大,否則可能導(dǎo)致
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