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第七節(jié)白喉棒狀桿菌當前1頁,總共17頁。
白喉棒狀桿菌(C.diphtheriae),俗稱白喉桿菌,是白喉的病原菌。白喉是一種急性呼吸道傳染病,患者咽喉部出現(xiàn)灰白色的假膜。該菌能產(chǎn)生強烈外毒素,進入血液可引起全身中毒癥狀。亞碲酸鉀培養(yǎng)基能使其菌落呈黑色。當前2頁,總共17頁。一、生物學特性1.形態(tài)與染色革蘭陽性,菌體細長微彎,一端或兩端膨大呈棒狀。直徑為0.3~0.8μm,菌體粗細不勻,著色不均,排列不規(guī)則,呈柵欄狀、V字形或L字形;無莢膜,無鞭毛,不產(chǎn)生芽孢;美藍或奈瑟染色,菌體兩端或一端可見著色較深的異染顆粒,在鑒定時有重要意義當前3頁,總共17頁。革蘭染色陽性異染顆粒當前4頁,總共17頁。2.培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求較高呂氏血清培養(yǎng)基上(含有凝固血清)上生長迅速——細小、灰白色S型小菌落(形態(tài)典型,異染顆粒明顯)亞碲酸鉀(K2TeO2·3H2O)血平板——黑色菌落當前5頁,總共17頁。亞碲酸鉀培養(yǎng)基輕型小菌落重型菌落departmentofmicrobiologyChenlingzhi2009/8當前6頁,總共17頁。對寒冷、干燥和日光的抵抗力強對濕熱抵抗力弱,100°C1min或58°C10min即可被殺死對一般消毒劑敏感,1%苯酚,3%來蘇兒10min均可被殺死對青霉素、氯霉素、紅霉素敏感等廣譜抗生素敏感,對磺胺不敏感在衣服,玩具,用具上可存活數(shù)日至數(shù)周。3.抵抗力當前7頁,總共17頁。二、致病性與免疫性1.致病物質(zhì)白喉毒素(主要致病因素):β棒狀桿菌噬菌體帶有編碼外毒素的tox基因,在溶原階段基因整合到染色體上即可產(chǎn)生A肽鏈——毒性功能結(jié)構(gòu)B肽鏈——與受體結(jié)合(心臟、神經(jīng)、腎上腺等)協(xié)助A鏈進入易感細胞內(nèi)毒性機制:蛋白質(zhì)合成中必需的延伸因子→滅活→抑制肽鏈延長→蛋白合成受阻→組織變性壞死索狀因子:細菌表面一種糖脂,破壞線粒體膜,影響細胞呼吸和能量產(chǎn)生K抗原:抗吞噬,有利定植當前8頁,總共17頁。2.所致疾病——白喉(急性呼吸道傳染?。﹤魅驹矗翰∪?、帶菌者傳播途徑:呼吸道(飛沫)或污染易感人群:6月-5歲,成人也有可能潛伏期:2-7天部位:咽、喉、氣管和鼻腔粘膜,也可侵犯眼結(jié)膜、陰道等處黏膜,甚至皮膚創(chuàng)口根據(jù)主要病變部位,臨床上有咽白喉、鼻白喉、氣管白喉之分。臨床表現(xiàn):引起局部炎癥:假膜;全身中毒癥狀:心肌炎、軟腭麻痹等。當前9頁,總共17頁。白喉棒狀桿菌(鼻咽腔)飛沫、污染物品白喉棒狀桿菌在呼吸道局部繁殖,產(chǎn)生白喉毒素局部細菌和毒素的作用(局部炎癥反應)灰白色假膜(纖維蛋白、壞死上皮細胞、白細胞、細菌組成,通過纖維蛋白凝結(jié)在一起)粘膜水腫及假膜脫落,引起呼吸道阻塞,甚至窒息死亡。外毒素入血毒血癥心肌肝腎上腺外周神經(jīng)內(nèi)臟出血心肌炎膈肌麻痹--呼吸困難聲帶麻痹--聲音嘶啞軟頜麻痹--吞咽困難
腎上腺功能障礙2-7天潛伏期作用機制當前10頁,總共17頁。當前11頁,總共17頁。感染后機體可獲得牢固的免疫力抗毒素的中和作用,因為外毒素入血,免疫原性很強抗毒素免疫免疫機制:抗毒素阻止白喉毒素B鏈與易感細胞結(jié)合,使A鏈不能進入細胞內(nèi)發(fā)揮毒性作用。機體還可通過其它方式獲得免疫力:六月以下嬰兒---------母親成人------------------隱性感染、疫苗3、免疫性當前12頁,總共17頁。錫克試驗(Schicktest)是測定人體對白喉桿菌的免疫狀態(tài)的一種皮內(nèi)試驗原理:是毒素與抗毒素中和反應。方法:試驗側(cè):一側(cè)前臂用0.1ml含1/50最小致死量(MLD)的白喉外毒素皮內(nèi)注射(毒性、蛋白質(zhì))對照側(cè):另一側(cè)前臂皮內(nèi)注射0.1ml加熱破壞的毒素(無毒、蛋白質(zhì))結(jié)果判定:24~48H后觀察結(jié)果,
局部出現(xiàn)紅腫陽性反應機體無免疫力
局部無紅腫陰性反應體內(nèi)有免疫力(有抗毒素)應用:檢查機體對白喉的免疫力預防接種前的篩選與接種后效果觀察
因觀察時間長現(xiàn)已很少采用目前有人采用白喉毒素致敏的紅細胞做凝集試驗來測定血清中的抗毒素,該方法比較簡便快速。
當前13頁,總共17頁。Schicktest結(jié)果分析
試驗側(cè)對照側(cè) 本質(zhì) 陰性反應
––
有免疫力陽性反應
24~48h
–無免疫力
4~7d達峰假陽性反應
6~18h紅腫同前有免疫力,超敏反應
1~2d消退
混合反應
6~18h紅腫6~18h紅腫
無免疫力,超敏反應
4~7d達峰3~4d反應消退當前14頁,總共17頁。三、微生物學檢查法標本:棉拭子取病變部位假膜邊緣直接涂片鏡檢—形態(tài),異染顆粒可輔助診斷分離培養(yǎng)--接種呂氏血清斜面(灰白色小菌落)或接種亞碲酸鉀血瓊脂平板(黑色菌落)毒力鑒定—鑒別白喉棒狀桿菌與其他無毒棒狀桿菌。體外法:Elek平板毒力實驗,SPA-協(xié)同凝集試驗體內(nèi)法:豚鼠做體內(nèi)中和試驗當前15頁,總共17頁。Elek平板試驗結(jié)果ElekTest沉淀線(陽性)含白喉抗毒素濾紙片白喉桿菌菌苔當前16頁,總共17頁。四、防治原則-與破傷風類似預防人工主動免疫:注射白喉類毒素(白百破三聯(lián)疫苗)我國擴大國家免
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