藥理學實驗教學大綱

藥理學實驗教學大綱課程編號：10051330課程名稱：藥理學/pharmacology課程屬性：必修課實驗屬性：獨立設課開課學期：5學時：18適用專業(yè)：生物工程學分：0.5開課部門：化學與生物工程學院考核要求：操作+實驗報告課程簡介：實驗課是藥理學課程重要的教學環(huán)節(jié)，包括實習和示教。其目的在于通過實驗，不僅僅是驗證、鞏固和理解藥理學中的重要基本理論，牢固地掌握藥理學的基本概念，以便正確地應用于臨床；更重要的是加強智能培養(yǎng)，即了解獲得藥理學知識的科學途徑，使學生學習基本的藥理學實驗方法，掌握動物實驗的基本知識和技能及藥理實驗儀器的正確使用；培養(yǎng)與提高自學、獨立思考、獨立工作、科學思維、實驗設計與統(tǒng)計的能力，初步具備對事物進行客觀的觀察、比較、分析、綜合和解決實際問題的能力。同時，通過實驗培養(yǎng)學生對科學工作的嚴肅態(tài)度、嚴格的要求、嚴密的工作方法和實事求是的作風。實驗項目設置及學時分配項目編號實驗項目名稱實驗類型開出要求學時分配藥理學實驗基礎知識演示性必做3不同給藥途徑、不同劑量對藥物作用的影響驗證性必做3藥物的鎮(zhèn)痛作用驗證性必做3藥物的鎮(zhèn)咳作用驗證性必做3糖皮質(zhì)激素的抗炎作用驗證性必做3有機磷農(nóng)藥中毒及其解救綜合性必做3學時總計18二、實驗內(nèi)容及教學要求實驗項目1：藥理學實驗基礎知識1、教學內(nèi)容實驗動物的標記、實驗動物的捉持方法（大、小鼠）、實驗動物的給藥和取血方法（大、小鼠）、實驗動物給藥量的計算、實驗動物的處死方法、實驗記錄的內(nèi)容、實驗報告的寫作。2、教學目標（1）了解常見實驗動物及其生理特性。（2）熟悉藥理學實驗設計基本原則。（3）掌握實驗動物的基本技能和實驗技術基礎，掌握實驗記錄的內(nèi)容方法和實驗報告的寫作要求實驗項目2：不同給藥途徑、不同劑量對藥物作用的影響1、教學內(nèi)容實驗目的：不同劑量給藥，觀察藥物作用的差異；不同途徑給藥，觀察藥物作用的影響實驗儀器或試劑：1ml注射器，6號針頭，250ml燒杯，小鐵絲籠，天平秤。0.25%、0.15%和0.025%戊巴比妥鈉(pentobarbitalsodium)溶液，1%硫酸鎂溶液，灌胃針、注射器、鼠固定器、電子臺秤、3～5％黃色苦味酸溶液。實驗步驟：取體重接近的小白鼠3只，稱重并標記。觀察正?；顒雍螅?、2和3號小鼠分別腹腔注射0.25%、0.15%和0.025%戊巴比妥鈉溶液0.2ml/10g，觀察并比較三鼠有何不同現(xiàn)象發(fā)生，并解釋之。取體重接近的小白鼠2只，稱重并標記。觀察正?；顒雍螅?只小鼠分別肌肉注射、灌胃1%硫酸鎂溶液0.2ml/10g，觀察并比較三鼠有何不同現(xiàn)象發(fā)生，并解釋之。2、教學目標（1）了解不同劑量時藥物作用的差異，了解不同給藥途徑對藥物作用的影響。（2）熟悉小鼠實驗操作技巧。（3）掌握不同劑量不同給藥途徑對動物作用差異的原因。實驗項目3：藥物的鎮(zhèn)痛作用1、教學內(nèi)容實驗原理：小鼠腹腔注射刺激劑(如酒石酸銻鈉、醋酸溶液等)可誘導疼痛，動物表現(xiàn)出特征性的軀體伸縮行為稱之為扭體反應(表現(xiàn)為腹部內(nèi)凹、軀干與后腿伸張、臀部抬高等)。將給藥組與對照組相比，若使扭體反應發(fā)生率減少50%以上的，可認為有鎮(zhèn)痛作用。需要的儀器或試劑等：鼠籠，小動物電子秤(或天平)，注射器。0.1%鹽酸嗎啡(morphinehydrochloride)或0.4%鹽酸哌替啶(pethidinehydrochloride)，1%阿司匹林(aspirin)，0.6%醋酸(或1%酒石酸銻鉀)，生理鹽水。實驗步驟：取小鼠6只，稱重，均分為3組，分別為嗎啡組、阿司匹林組和生理鹽水組。觀察每組動物的正常活動情況，1組小鼠腹腔注射0.1%嗎啡0.1ml/10g，2組腹腔注射1%阿司匹林0.1ml/10g，3組注射等容量的生理鹽水。20min后，三組小鼠分別腹腔注射0.6%醋酸(或1%酒石酸銻鉀)0.1ml/10g，觀察15min內(nèi)各組出現(xiàn)扭體反應動物數(shù)及其平均扭體次數(shù)。

匯總各組實驗結果，記于下表內(nèi)，并依照下列公式計算藥物鎮(zhèn)痛百分率或抑制百分率。表24-2藥物對醋酸所致小鼠扭體反應的影響分組動物數(shù)(n)發(fā)生反應動物數(shù)(%)扭體次數(shù)(次)嗎啡組

阿司匹林組

生理鹽水組

2、教學目標（1）了解阿司匹林、嗎啡(或哌替啶)的鎮(zhèn)痛作用原理。（2）熟悉阿司匹林、嗎啡(或哌替啶)的鎮(zhèn)痛作用。（3）掌握鎮(zhèn)痛實驗化學刺激法的實驗原理及操作。實驗項目4：不同給藥途徑、不同劑量對藥物作用的影響1、教學內(nèi)容實驗原理：小鼠吸入刺激性化學物質(zhì)氣霧后，刺激呼吸道感受器，反射性引起咳嗽。需要的儀器或試劑等：動物：昆明種小白鼠，體重18-22g，♀♂兼用；器材：鼠籠、天平、灌胃器、棉球、大燒杯；’藥品：0.3％磷酸可待因，0.9％生理鹽水，濃氨水。實驗步驟：每組取8只小鼠，稱重，標記，隨機分兩組；給藥：實驗組i.g.

可待因0.2ml／l0g，對照組i.g.

生理鹽水0.2ml／l0g，每只小鼠給藥間隔4min左右；注意：磷酸可待因為混懸液，應混勻后再i.g.，以保證給藥均勻。給藥后30分鐘將小鼠扣入500ml燒杯中，再將注入0.2ml濃氨水的棉球迅速放入燒杯中，立即記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)。注意：

⑴

8個棉球的大小、松緊程度要適中，盡量一致；⑵

潛伏期即把棉球放入后至第一次咳嗽的時間；⑶

小鼠咳嗽很難聽到聲音，因此應注意觀察，表現(xiàn)為劇烈腹肌收縮并張嘴。2、教學目標（1）了解濃氨水致咳模型的制作原理。（2）熟悉藥物鎮(zhèn)咳作用原理。（3）掌握濃氨水引咳的實驗方法，觀察藥物的鎮(zhèn)咳作用。實驗項目5：糖皮質(zhì)激索的抗炎作用1、教學內(nèi)容實驗原理：二甲苯為致炎物質(zhì)，將其涂于耳廓，能引起局部細胞損傷，促進組胺、緩激肽等致炎物質(zhì)釋放，造成耳廓急性炎性水腫，由于毛細血管通透性增加，致使小鼠耳廓增厚，重量增加，根據(jù)兩耳重量的不同，判斷藥物的抗炎作用。需要的儀器或試劑等：動物：昆明種小白鼠，體重18-22g，♀♂兼用；器材：鼠籠、天平、灌胃器、電子天平，打孔器，螺旋測微尺，手術剪；藥品：醋酸地塞米松、0.9％生理鹽水、二甲苯、阿司匹林實驗步驟：每組取小鼠3只，稱重并做標記。甲鼠灌胃醋酸地塞米松溶液，乙鼠灌胃等容積的阿司匹林，丙鼠灌胃等容積的生理鹽水，60min后，3只小鼠均于左耳廓滴1滴二甲苯，涂勻，30min后用螺旋測微尺測兩耳的厚度，將其厚度差作為炎癥反應的強度。取相同大小耳片稱重，判斷耳片的腫脹程度。記錄結果，分析并比較結果。2、教學目標（1）了解二甲苯致炎癥模型的原理。（2）熟悉地塞米松與阿司匹林的抗炎作用的原理。（3）掌握二甲苯致炎實驗的實驗方法。實驗項目6：有機磷農(nóng)藥中毒及其解救1、教學內(nèi)容實驗內(nèi)容或原理：取禁食12h的家兔一只，稱重，觀察其正?；顒?包括一般活動、瞳孔、唾液分泌、呼吸、大小便、肌震顫等)。然后給予5％敵百蟲酒精溶液10ml/kg灌胃，觀察給藥后上述指標的變化情況。待中毒癥狀明顯后，經(jīng)耳緣靜脈注射0.2％阿托品1ml/kg，觀察中毒癥狀解除情況。5min后再從耳緣靜脈注射2.5％碘解磷定2ml/kg，再觀察殘存中毒癥狀的解除情況。需要的儀器或試劑等：2ml、5ml、10ml注射器，針頭，開口器，灌胃管，量瞳尺，50ml燒杯，濾紙，磅秤。5％敵百蟲酒精溶液(dipterex)，0.2％阿托品(atropine)，2.5％碘解磷定(pralidoximeiodide)。實驗步驟：家兔，稱重，觀察下列指標：呼吸（頻率、幅度、節(jié)律是否均勻），瞳孔大?。ㄓ糜螛丝ǔ邷y量）、唾液分泌、肌張力及有無震顫、活動情況等，分別記錄之。將家兔固定在兔盒中，找到耳緣靜脈，插入與注射器相連的頭皮靜脈注射針頭。按120mg/kg(5%溶液2.4ml/kg)劑量靜脈注射敵百蟲溶液，觀察各項指標，并記錄之。根據(jù)中毒癥狀，立即靜脈注射硫酸阿托品2.0mg/kg（0.2%溶液1.0ml/kg）或靜脈注射解磷定50mg/kg(2.5%溶液2.0ml/kg)，每隔5分鐘，檢查各項生理指標一次。將實驗結果填入下表。

用藥前5％敵百蟲0.2％阿托品2.5％解磷定一般情況

瞳孔大小

唾液分泌情況

呼吸頻率

大小便情況

肌震顫

2、教學目標（1）了解阿托品和碘解磷定對有機磷農(nóng)藥的解救作用原理。（2）熟悉阿托品和碘解磷定對有機磷農(nóng)藥的解救作用。（3）掌握家兔灌胃技術，觀察并分析有機磷農(nóng)藥的中毒癥狀和機理。三、考核方式及要求實驗成績分兩部分，各占50％。（1）平時成績：包括實驗操作及實驗報告成績，按百分制打分，學習結束時匯總平時實驗操作成績，占實驗總成績的