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
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文檔簡(jiǎn)介
關(guān)于實(shí)驗(yàn)十人類(lèi)染色體核型分析第一頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、了解人類(lèi)外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)和染色體標(biāo)本的制備方法2、了解人類(lèi)染色體的形態(tài)和分組特征,學(xué)習(xí)染色體組型分析方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與原理:
1、人類(lèi)染色體標(biāo)本制作簡(jiǎn)介人類(lèi)外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制作技術(shù)淋巴細(xì)胞——G0期或G1期1960年Nowell和Morhead
植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)第二頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一
外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)和染色體標(biāo)本制作的步驟:
⑴培養(yǎng)液的分裝:培養(yǎng)液:RPMI1640或M199、小牛血清、PHA、肝素、雙抗(青霉素、鏈霉素)⑵采血:靜脈采血⑶培養(yǎng):37℃培養(yǎng)66~72h⑷秋水仙素處理:秋水仙素→分裂阻止劑⑸低滲處理:使紅細(xì)胞破碎,白細(xì)胞膨脹⑹離心:收集白細(xì)胞⑺固定:固定液——甲醇:冰醋酸=3:1⑻離心、再固定:⑼再離心:棄上清,留白細(xì)胞
⑽制片:
第三頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一⑾染色:Giemsa染液⑿鏡檢:⒀封片:⒁顯微攝影→進(jìn)行核型分析2、人類(lèi)染色體組型分析
*核型(karyotype)
*組型(idiogram)
*染色體組型分析
(1)染色體的數(shù)目人類(lèi)染色體2n=46核型:正常男性——46,XY正常女性——46,XX第四頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一
人類(lèi)染色體按其形態(tài)大小分7組:A、B、C(X)、D、E、F、G(Y),其主要特點(diǎn)和鑒別要求如下:組別編號(hào)形態(tài)大小著絲粒位置
隨體鑒別要求
A1~3最大1、3中部2近中無(wú)要求明確區(qū)分各號(hào)
B4~5次大近中無(wú)要求不與其他組相混
C6~12中等近中無(wú)要求6、7、8不與其他混
D13~15中等近端有要求不與其他組相混
E16~18較小16中17、18近中無(wú)要求明確區(qū)分各號(hào)
F19~20小中部無(wú)要求不與其他組相混
G21~22最小近端有要求21、22與Y區(qū)分第五頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一第六頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一第七頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一
染色體的排列規(guī)則:①染色體的大小,大→小②著絲粒位置,中部→端部
(2)染色體的長(zhǎng)度及著絲粒位置1μm:微型染色體1~4μm:小型染色體4~12μm:中型染色體12μm<:大型染色體①相對(duì)長(zhǎng)度:
第八頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一②臂率:
1.01~1.70中部著絲粒染色體m1.71~3.00近中著絲粒染色體sm3.01~7.00近端著絲粒染色體st7.01~∞端部著絲粒染色體t③著絲粒指數(shù)(3)隨體及次縊痕的有無(wú)第九頁(yè),共十一頁(yè),編輯于2023年,星期一實(shí)驗(yàn)材料與用具:*人類(lèi)染色體照片(復(fù)?。?剪刀、膠水、組型分析報(bào)告紙實(shí)驗(yàn)步驟:
1、染色體分組編號(hào)了解各染色體的特點(diǎn)一個(gè)照片作對(duì)照,另一分組編號(hào)用
2、核對(duì)、調(diào)整、粘貼
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