右鍵-目標(biāo)另存為

右鍵—目標(biāo)另存為第1頁/共83頁什么是產(chǎn)前診斷

為什么產(chǎn)前診斷產(chǎn)前診斷方法產(chǎn)前診斷新進(jìn)展第2頁/共83頁產(chǎn)前診斷是在遺傳咨詢的基礎(chǔ)上,通過遺傳學(xué)檢測和影像學(xué)檢查,對高風(fēng)險胎兒進(jìn)行明確診斷，通過對某些嚴(yán)重先天遺傳病的選擇性流產(chǎn),達(dá)到降低出生缺陷率，提高優(yōu)生質(zhì)量和人口素質(zhì)目的。什么是產(chǎn)前診斷

第3頁/共83頁遺傳疾病的分類

Thompson&ThompsonGeneticsinMedicine15%自然流產(chǎn)(50%染色體異常)

0.7%染色體異常0.36%單基因病

孟德爾遺傳病60%多基因病50-90%白血病5%多基因病3-6%不育癥

胎兒

新生兒兒童成人第4頁/共83頁

#1單基因遺傳病第5頁/共83頁單基因病遺傳病地中海貧血1/50to1/100SouthAsian鐮狀細(xì)胞病1/50incentralAfrica,遺傳性非息肉性大腸癌1/200血色?。ㄟz傳)1/300Caucasians家族性高膽固醇血癥1/500成人型多囊腎病1/1,000α1-抗胰蛋白酶缺乏癥1/2,500to1/10,000Caucasians囊性纖維化病1/2,000to1/4,000Caucasians家族性黑蒙癡呆,戴薩克斯癥1/3,000AshkenaziJews杜氏肌營養(yǎng)不良1/3,500males11型神經(jīng)纖維瘤病1/3,000to1/5,000成骨不全癥1/5,000to1/10,000脆性X染色體綜合征1/4,000males;1/8,000females甲型血友病1/5,000to1/10,000males腺瘤性結(jié)腸息肉病1/6,000強直性肌營養(yǎng)不良1/7,000to1/20,000Caucasians苯丙酮尿癥1/10,000to1/15,000Caucasians馬凡氏綜合征1/10,000to1/20,000視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤1/20,000亨廷頓舞蹈病1/20,000Caucasians第6頁/共83頁22

常染色體隱性遺傳

地中海貧血鐮狀細(xì)胞病家族性高膽固醇血癥苯丙酮尿癥囊性纖維化病血色病第7頁/共83頁常染色體顯性遺傳

1型神經(jīng)纖維瘤病強直性肌營養(yǎng)不良成人型多囊腎病視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤馬凡氏綜合征亨廷頓舞蹈病

成骨不全癥第8頁/共83頁

色盲蠶豆癥甲型血友病愛伯綜合癥杜氏肌營養(yǎng)不良脆性X染色體綜合征X染色體隱性遺傳

234232第9頁/共83頁22維生素D型無效性佝僂病腓骨肌萎縮癥蕾特氏癥X染色體顯性遺傳

第10頁/共83頁神經(jīng)管畸形（脊柱裂，無腦兒)

1/200to1/1,000唇裂或腭裂嬰兒1/500to1/1,000馬蹄內(nèi)翻足1/1,000先天性心臟病1/200to1/500老年性癡呆1/10兩極情感障礙,躁狂抑郁性精神病1/100to1/200癌癥1/3糖尿病1/10心臟病或中風(fēng)1/3to1/5精神分裂癥1/100多基因疾病第11頁/共83頁

染色體異常病類型基因擴(kuò)增

先天性(體細(xì)胞)后天性(體細(xì)胞)Prenatal產(chǎn)前Postnatal生后染色體內(nèi)結(jié)構(gòu)上染色體間多體非整倍體多倍體(三倍體,四倍體…)染色體異常數(shù)量上單體羅伯遜易位相互易位重迭缺失插入等臂染色體環(huán)狀染色體倒位插入第12頁/共83頁常見胎兒染色體異常第13頁/共83頁新生兒染色體異常出生率染色體異常出生率平衡易位不平衡易位臂間倒位21三體18三體13三體第14頁/共83頁雙側(cè)唇裂多指趾畸形前腦無裂畸形小腦癥47,XX,+1313三體綜合征帕突氏綜合征

心臟,腎臟異常重度智力發(fā)育遲緩耳聾,癲癇臍突出第15頁/共83頁18三體兒愛德華綜合征第二個和第五個重疊的第三和第四位緊握的拳頭套鉤底足和突出的跟骨大畸形低耳心臟,腎臟異常重度智力發(fā)育遲緩47,XX,+13第16頁/共83頁唐氏綜合征心臟病十二指腸的閉鎖智力發(fā)育遲延甲狀腺問題聽覺喪失增加白血病聽覺喪失癲癇危險達(dá)60歲或更老47,XX,+13第17頁/共83頁孕婦年齡與唐氏綜合征發(fā)生率的關(guān)系孕齡9-11周16周出生率

15-19--1/125020-24--1/140025-29--1/110030--1/90031--1/90032--1/750331/3701/4201/625341/2501/3331/500351/2501/2501/385361/1751/2001/300371/1751/1501/225381/1151/1151/175391/901/901/140401/801/701/100411/501/501/80421/301/401/65431/251/301/50441/251/251/4045andolder1/151/201/25第18頁/共83頁1520253035404550孕齡1:10001:1001:10發(fā)生率75％的唐氏綜合癥嬰兒:<35歲婦女孕婦年齡與唐氏綜合征發(fā)生率的關(guān)系第19頁/共83頁1.非創(chuàng)傷性方法B超掃描,MRI,CT母體外周血胎兒標(biāo)志物測定母血胎兒細(xì)胞freeDNA檢測流產(chǎn)產(chǎn)物2.創(chuàng)傷性方法羊膜腔穿刺絨毛取樣臍血取樣胎兒鏡和胚胎活檢產(chǎn)前診斷檢查方法第20頁/共83頁產(chǎn)前診斷測定物蛋白質(zhì)生化物RNADNA染色體組織,器官

第21頁/共83頁第一孕期篩查----11.5-13.5周

1.B超聲波測量孕婦胎兒頸部透明帶厚度

(NT,nuchaltranslucency)2.妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)3.絨毛膜促性腺激素(hCG)第二孕期----15-20周1.絨毛膜促性腺激素(hCG)2.不結(jié)合雌三醇(uE3),3.母血甲胎蛋白(MSAFP)4.抑制素A(InhibinA)產(chǎn)前篩查第22頁/共83頁胎兒頸部透明帶超聲波檢查測量10～13周的孕婦胎兒頸部透明帶厚度第23頁/共83頁孕早和孕中期篩查試驗的臨床意義孕早期孕中期NTPAPP-AhCGuE3AFPhCGInhibinA21三體↑↓↑↓↓↑↑18三體↑↓↓↓↓↓-13三體↑↓↓↓↓↓-神經(jīng)管缺陷----↑--NT:胎兒頸項透明帶,PAPP-A:妊娠相關(guān)血漿蛋白,hCG:絨毛膜促性腺激素,uE3:不結(jié)合雌激素,AFP:母血甲胎蛋白,InhibinA:抑制素A第24頁/共83頁正常均值的倍數(shù)(MoM)AFPhCGestriolinhibinAmultiplesofthemedian0.81.0正常唐氏綜合征第25頁/共83頁風(fēng)險度預(yù)測

妊娠早期唐氏綜合癥風(fēng)險度>1:20018三體兒風(fēng)險度>1:100需要

取絨毛膜或羊膜穿刺做染色體診斷

妊娠中期唐氏綜合癥風(fēng)險度>1:27018三體兒風(fēng)險度>1:100需要羊膜穿刺取羊水做染色體診斷第26頁/共83頁篩查試驗敏感性假陽性假陰性妊娠早期NT,PAPP-A,hCG84%5%16%妊娠中期三聯(lián)篩選72%5%28%四聯(lián)篩選81%5%19%整合檢驗法95%5%5%篩查試驗敏感性,假陽性,假陰性第27頁/共83頁創(chuàng)傷性方法羊膜腔穿刺絨毛取樣臍血取樣胎兒鏡和胚胎活檢產(chǎn)前診斷檢查方法第28頁/共83頁羊膜腔穿刺第29頁/共83頁絨毛取樣第30頁/共83頁絨毛取樣第31頁/共83頁臍血取樣第32頁/共83頁產(chǎn)前確診方法和進(jìn)展染色體核型熒光原位雜交多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)基因組微陣列雜交分析全基因組測序

第33頁/共83頁染色體核型分析

-Karyotyping第34頁/共83頁染色體異常類型基因擴(kuò)增先天性(體細(xì)胞)后天性(體細(xì)胞)Prenatal產(chǎn)前Postnatal生后染色體內(nèi)結(jié)構(gòu)染色體間多體非整倍體多倍體(三倍體,四倍體…)染色體異常數(shù)量單體羅伯遜易位相互易位重復(fù)缺失插入等臂染色體

環(huán)狀染色體倒位插入第35頁/共83頁染色體核型弱點有絲分裂細(xì)胞分辨率低:5-10Mb要求經(jīng)驗費時優(yōu)點單細(xì)胞直觀診斷金標(biāo)準(zhǔn)第36頁/共83頁熒光原位雜交-FISH第37頁/共83頁熒光原位雜交探針設(shè)計正常

異常LS(locusspecific)

特異位點

基因重排

BA(breakapart)

單易位SF(singlefusion)

雙重易位

DF(doublefusion)探針:1.YAC2.BAC3.Plasmid4.PCRproduct第38頁/共83頁產(chǎn)前診斷熒光原位雜交探針設(shè)計第39頁/共83頁產(chǎn)前診斷熒光原位雜交18x2,XX18x2,XY13x2,21x2正常結(jié)果第40頁/共83頁13x3,21x313x2,21x3異常結(jié)果唐氏綜合征Xx3,18x3三倍體13x2,21x213x2,21x321嵌合體XY,18x3XY,18x218嵌合體第41頁/共83頁

基因組微陣列雜交

-arrayCGH第42頁/共83頁部份染色體微小缺失異常綜合征染色體缺失

綜合征1p36.3 單體1p36的綜合征5q35 索托綜合征7q11.2威廉氏癥候群

高鈣血癥主動脈瓣上部狹窄癥候群

9q22.3 大綜合征,增生綜合征的例子包括神經(jīng)纖維瘤，索托斯扎克綜合癥11p13 WAGR綜合征,泌尿生殖系統(tǒng)異常,腎母細(xì)胞瘤,無虹膜,智力低下11p15.5 魏德曼綜合征,臍疝-巨舌-巨人癥綜合征,臍膨出綜合征15q11.2安格曼癥候群,智力和發(fā)育遲緩，睡眠障礙，癲癇發(fā)作,拍手,微笑15q11.2普瑞德威利綜合征,肌張力減退,身材矮小,多食,肥胖，性腺功能減退16p11.2自閉癥16p13.3 魯賓斯坦綜合征:智力和運動發(fā)育遲緩,拇指與大趾增寬,身材矮小17p13.3 米-迪綜合征,無腦回畸形,不完全神經(jīng)細(xì)胞遷移造成大腦發(fā)育缺陷17p11.2 史密斯馬蓋尼斯綜合征,精神發(fā)育遲滯，獨特的面部特征，睡眠障礙17q11.21型神經(jīng)纖維瘤病20p12 阿拉吉耶綜合征:影響肝臟，心臟和身體的其他系統(tǒng)

22q11.2 軟腭-心-面綜合征/迪格奧爾格綜合征

第43頁/共83頁部份染色體微小重復(fù)異常綜合征染色體重復(fù)

綜合征3q26.3 3q26.3重復(fù)綜合征,智力缺陷,上顎,鼻孔,心腎臟異常11p15.5魏德曼綜合征,巨舌,耳朵皺，低血糖癥，腫瘤,學(xué)習(xí)困難mosiso12p帕利斯特-基利安綜合征,高前額,粗面,頭發(fā)稀疏,眼距寬,

寬鼻梁有高腭穹,智力遲鈍,肌張力喪失第44頁/共83頁

基因組微陣列雜交分析程序ControlTestCo-HybridizationScanningDataAnalysisAluI/RsaICy3/Cy5labeling第45頁/共83頁46,XY/46,XY46,XX/46,XX46,XY/46,XX46,XX/46,XY47,XXX/46,XY47,XYY/46,XY全基因組模式

第46頁/共83頁Log2ratio-2-10+1+215q11-13.1deletion(缺失)-2-10+1+2Log2ratio15q11-13.1duplication(重復(fù))第47頁/共83頁-2-10+1+2Log2ratio4q34duplicationanddeletion(重復(fù)和缺失)-2-10+1+2Log2ratio7p21-22duplicationanddeletion(重復(fù)和缺失)第48頁/共83頁Xp22.31deletion(缺失)Fdel/FF/Fdel-2-10+1+2Log2ratioMdel/FF/Mdel-2-10+1+2Log2ratio第49頁/共83頁del(6)(q26q27)dup(6)(q24.1q25.3)del(6)(q26q27)14.6Mbdup9.95Mbdel9.45Mbdel6q缺失/重復(fù)第50頁/共83頁6q缺失圖第51頁/共83頁growthfailure,cardiacdefect,facialfeatures,earanomalies,thinupperlipDD,MR,microcephaly,shortstature,brainanomalies,seizure,hypotoniaPolymicrogyria,HetereotopiaSacral/anorectamalformationLimbdefect,cleftpalateCardiacdefects,genitalhypoplasia,shortneck,retinalabnormalitiesCNSmalformation,bullbousnose,downslantedfissures,lowearset,ectrodactylyLowernasalbridge,epicanthalfolds,prominentmalformedears,antevertednares,micrognathiaNophenotypedevelopmentaldelay,craniofacialdysmorphology,andfunctionaleyedisordersTransient

neonataldiabetes,paternaluniparentaldisomy(UPD)6q缺失的表型圖第52頁/共83頁6q缺失綜合征第53頁/共83頁6p缺失綜合征第54頁/共83頁AbnormalFemalewithadeletionof6p22.3-p24.3arr6p24.3-p22.3(7618718-20509888)x16p缺失綜合征第55頁/共83頁AbnormalFemalewithadeletionof6p22.3-p24.3arr6p24.3-p22.3(7618718-20509888)x16p缺失綜合征第56頁/共83頁并指肌無力頜后縮

顏口面裂

低位耳增生

心,腦,腎功能異常的各種缺陷6p缺失綜合征第57頁/共83頁

AbnormalFemalewithaduplicationof12p13.33-12q13.11

arr12p13.33-q13.11(20691-45437922)x3帕利斯特-基利安綜合征--嵌合四體12p第58頁/共83頁AbnormalFemalewithaduplicationof12p13.33-12q13.11arr12p13.33-q13.11(20691-45437922)x3帕利斯特-基利安綜合征--嵌合四體12p第59頁/共83頁帕利斯特-基利安綜合征--嵌合四體12p第60頁/共83頁高前額,粗面,頭發(fā)稀疏,眼距寬闊,內(nèi)眼角的皮膚褶折過度,寬鼻梁有高腭穹,智力遲鈍,肌張力喪失dcx帕利斯特-基利安綜合征--嵌合四體12p第61頁/共83頁帕利斯特-基利安綜合征族帕利斯特-基利安綜合征--嵌合四體12p第62頁/共83頁多聚酶鏈反應(yīng)-PCR第63頁/共83頁Lo,Y.M.D.etal.Prenataldiagnosis,NATUREREVIEWS|GENETICS,2007多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)第64頁/共83頁Figure1Schematicrepresentationofthenon-invasivedetectionoffetalDownsyndromeviatheanalysisofplacentallyderivedPLAC4cf-RNA.cff-RNA,placentallyderivedcell-freefetalmessengerRNA;mRNA,messengerRNA;MS,massspectroscopy;RT-PCR,real-timepolymerasechainreaction;SNP,singlenucleotidepolymorphism.圖1圖示胎兒唐氏綜合癥的非侵入性的偵查通過對胎盤的獲得的PLAC4锎核糖核酸的分析。Cff-RNA酸，胎盤的獲得的無細(xì)胞胎兒cf-RNA;mRNA，RNA;MS，質(zhì)譜分析;RT-PCR，實時聚合酶鏈反應(yīng);SNP，唯一核苷酸多形性。

多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)第65頁/共83頁Figure2Schematicrepresentationofthenon-invasivedetectionoffetaltrisomy18viatheanalysisoepigeneticallymodifiedmaspinsequences.cff-RNA,placentallyderivedcell-freefetalmessengerRNA;MS,massspectroscopy;PCR,polymerasechainreaction.多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)第66頁/共83頁DNARNASERPINB5PLAC4多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)PlacentalbloodMother’sblood第67頁/共83頁賴特cf和奇蒂儲蓄，無細(xì)胞胎兒dna和rna母血：更安全的產(chǎn)前檢查的影響WrightCFandChittyLS,Cell-freefetalDNAandRNAinmaternalblood:implicationsforsaferantenataltesting.BMJ2009;339:b2451多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)第68頁/共83頁全基因組測序WholeGenomeSe