超敏反應性疾病及其免疫檢測

關于超敏反應性疾病及其免疫檢測第一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四超敏反應分為四型

（依發(fā)生機制和臨床特點）：Ⅰ型超敏反應(速發(fā)型超敏反應)Ⅱ型超敏反應(細胞溶解型或細胞毒型)Ⅲ型超敏反應(免疫復合物型或血管炎型)Ⅳ型超敏反應(遲發(fā)型超敏反應)

第二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

Ⅰ型超敏反應

特點：發(fā)生快，恢復快；常引起生理功能紊亂，一般無組織損傷；由IgE介導，肥大細胞和嗜堿性粒細胞參與有明顯的個體差異和遺傳背景。第三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

Ⅰ型超敏反應一.參與Ⅰ型超敏反應的成分(一)變應原★藥物或化學物質(zhì)---青霉素、磺胺等

★

吸入性變應原---花粉、屋塵(塵螨、皮屑、真菌的孢子等

★食物變應原---魚、蝦、肉、蛋、牛奶等

★接觸性變應原---工業(yè)產(chǎn)品及合成物第四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

Ⅰ型超敏反應(二)抗體IgE(三)細胞肥大細胞和嗜堿性粒細胞IgEFc受體嗜酸性粒細胞

第五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四第六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

預先存在的介質(zhì)（脫顆粒）組織胺(histamine)趨化因子激肽原酶蛋白水解酶白三烯（Leucotrienes，LTs）前列腺素（PGD2）即刻\早期晚期I型超敏反應發(fā)生的機制

血小板活化因子（Plateletactivityfactor，PAF）

新合成的介質(zhì)第七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四Ⅰ型超敏反應的常見疾病

（一）過敏性休克藥物過敏性休克血清過敏性休克（二）呼吸道過敏反應過敏性鼻炎(枯草熱)、支氣管哮喘（三）消化道過敏反應（四）皮膚過敏反應蕁麻疹、濕疹、血管神經(jīng)性水腫。

第八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

蕁麻疹

濕疹第九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四結(jié)膜炎哮喘病第十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

I型超敏反應免疫學檢測項目第十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四皮膚試驗實驗原理：變應原致敏者皮膚Ag+IgE（M、B)皮膚挑刺、劃痕皮內(nèi)注射釋放生物活性介質(zhì)20-30m局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團

陽性第十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四皮膚試驗皮內(nèi)試驗方法皮膚消毒→變應原提取液注入前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)（0.01-0.02ml）→2-3mm的皮丘→兩種間距2.2-5.0cm→15-25分鐘觀察結(jié)果陰性對照--生理鹽水陽性對照--鹽酸組胺第十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四皮膚試驗假陽性原因變應原稀釋液偏酸或偏堿患者有皮膚劃痕癥抗原不純和被污染抗原量注射過多假陰性原因變應原抗原性喪失或濃度過低患者皮膚反應較低受試者正使用抗組胺類藥或激素類藥注射部位過深或注射量太少

第十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四Ⅰ型超敏反應臨床意義尋找變應原預防藥物或疫苗過敏應用評價過敏原有限食物過敏與皮膚試驗相關性較差選擇過敏原應結(jié)合實際情況第十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四Ⅰ型超敏反應血清總IgE檢測常用方法：免疫比濁法化學發(fā)光免疫法酶聯(lián)免疫吸附法---適用于中小實驗室臨床意義：升高見于Ⅰ型超敏反應性疾病，寄生蟲感染，

IgE型多發(fā)性骨髓瘤應用評價：應建立當?shù)厝巳篒gE水平的參考區(qū)間

臨床實驗室常用第十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四Ⅰ型超敏反應特異性IgE檢測（sIgE）放射變應原吸附試驗免疫印跡測定法第十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

斑點酶免疫印跡法實驗原理

用NC膜作為固相支持物，檢測區(qū)的不同區(qū)域包被有特異性的過敏原。檢測時將稀釋的病人血清加入反應槽內(nèi)，血清中的sIgE與NC膜上的相應過敏原結(jié)合，再加入酶標記的抗人IgE抗體，此抗體會與檢測區(qū)NC膜上的sIgE結(jié)合，然后加入底物顯色。通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。第十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四第十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四稀釋好的洗液將檢測條要充分浸透，放在搖床上搖10分鐘倒掉洗液，加入稀釋好的測試者血清，放于搖床室溫反應1.5小時倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震蕩10分鐘，重復三次

每槽加入堿性磷酸酶標記的抗人IgE，放于搖床上室溫反應30分鐘將堿性磷酸酶標記的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次10分鐘

加入堿性磷酸酶底物，放于搖床，避光反應約10分鐘去掉底物溶液，用純水洗三次，每次5分鐘操作步驟將檢測條放在干燥紙上，等檢測條完全干燥后判定檢測結(jié)果第二十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四結(jié)果分析通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。臨床意義

slgE測定是體外檢測變應原的重要手段，主要用于Ⅰ型超敏反應的診斷。該檢測條包被有多種特異性過敏原，通過檢測血漿（血清）中過敏原slgE，篩查待檢者對何種過敏原過敏，為臨床進行脫敏治療奠定基礎。第二十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

II型超敏反應定義：

II型超敏反應又稱細胞毒型（cytotoxictype）或細胞溶解型（cytolytictype）超敏反應，它是由靶細胞表面的抗原與相應IgG或IgM類抗體結(jié)合后，在補體、巨噬細胞和NK細胞參與下，引起的以細胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應。第二十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

II型超敏反應特點：1.直接或間接與細胞有關2.IgG或IgM介導3.補體、吞噬細胞、NK細胞參與4.造成細胞溶解或功能紊亂第二十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

II型超敏反應靶細胞：正常組織細胞、改變的自身組織細胞、修飾的自身組織細胞抗原：同種異型抗原、共同抗原、變性自身抗原、外來抗原抗體：IgG和IgM類抗體參與細胞損傷的物質(zhì)：補體、吞噬細胞、NK細胞第二十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四第二十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四變應原第二十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四輸血反應（transfusionreaction）新生兒溶血（hemolyticofthenewborn）自身免疫性溶血性貧血（autoimmunehemolyticanemia）藥物過敏性血細胞減少甲狀腺機能亢進（Gravesdisease）鏈球菌感染后腎小球腎炎TypeIIHypersensitivityReactions:ExamplesofDiseases第二十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四第二十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四甲狀腺機能亢進(Grave’s病)

第二十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四5第三十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四II型超敏反應免疫學檢測項目第三十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四＋患者紅細胞Coombs試劑檢測紅細胞上不完全抗體直接Coombs試驗第三十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四試管法操作步驟用生理鹽水配5%紅細胞懸液取潔凈小試管2支，1管加1滴5%紅細胞懸液，另一管加生理鹽水作對照

在生理鹽水和5%紅細胞懸液中分別加入診斷試劑一滴，使其混勻，室溫稍待片刻1000r離心1min或3000r離心15s。

取出試管先以肉眼觀察有無溶血，再輕輕搖動試管，如有凝集，則為陽性結(jié)果；如無凝集，應在室溫延長15~30min的反應時間，再離心看結(jié)果。第三十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四結(jié)果分析

生理鹽水對照不應發(fā)生凝集，為均勻渾濁的乳狀液。在紅細胞懸液中，如紅細胞凝集成片狀，邊緣皺褶如花邊狀或邊緣松散為陽性。如與對照相同，為陰性。第三十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

臨床意義

直接Coombs試驗用于檢測患者紅細胞上不完全抗體，Coombs試驗陽性可見于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕、惡性腫瘤等。第三十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四患者血清靶紅細胞致敏紅細胞Coombs試劑檢測血清中的抗紅細胞抗體間接Coombs試驗第三十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四微柱法操作步驟撕開微柱凝膠卡密封紙，標記加1%篩選紅細胞50μl及受檢者血清25μl37℃孵育15min離心機離心10min，1000r/min

觀察結(jié)果，如紅細胞懸浮在反應管頂部或凝膠中，則為陽性結(jié)果；反之，如紅細胞沉于凝膠底部（管底尖部），則為陰性結(jié)果。第三十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四結(jié)果分析

-100%的紅細胞沉在微管的底部+/-100%的紅細胞沉在微管的下端1/3之內(nèi)1+80%的紅細胞沉在微管的下端2/3之內(nèi)2+80%的紅細胞沉在微管的上端2/3之內(nèi)3+80%的紅細胞沉在微管的上端1/3之內(nèi)4+凝集的細胞全部處于微管的頂部d.p.雙群Hemo.溶血反應格局及判斷標準第三十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

臨床意義

間接Coombs試驗用于檢測患者游離血清中的不完全抗體。此實驗多用于檢測母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生，亦可對紅細胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進行檢測。第三十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

III型超敏反應

定義：

III型超敏反應是指由可溶性免疫復合物沉積于局部或全身多處毛細血管基底膜，通過激活補體,并在血小板、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要特征的炎癥反應和組織損傷。第四十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四BloodcellantigenAdsorbeddrugorDrugmetaboliteAntibodytodrugcomplementLysis藥物過敏性血細胞減少第四十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

III型超敏反應

特點：1.形成中等大?。?06Da）、可溶性（19s）復合物（IC)，IC沉積在血管基底膜上2.IgG,IgM或IgA介導3.補體、中性粒細胞參與4.造成血管及周圍組織炎癥第四十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

免疫復合物易于形成與沉積的因素1.抗原成分在體內(nèi)長期滯留2.血管通透性增強3.組織的解剖學及血流動力學

免疫復合物易沉積于靜脈壓較高及形成渦流的毛細血管迂回處，如腎小球基底膜及關節(jié)滑膜、肝、脾、血管等部位。4.免疫復合物的性質(zhì)

中等大小，可溶性免疫復合物組織內(nèi)沉積。

III型超敏反應第四十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四第四十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四Arthus反應及類Arthus反應(局部免疫復合物病)血清?。╯erumsickness）鏈球菌感染后腎小球腎炎類風濕性關節(jié)炎（rheumatoidarthritis）系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等臨床常見的III型超敏反應性疾病

III型超敏反應第四十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

RA患者手指關節(jié)實質(zhì)性損傷第四十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四III型超敏反應免疫學檢測項目第四十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

PEG比濁法實驗原理

本試驗是檢測抗原非特異性循環(huán)免疫復合物的一種方法。PEG是環(huán)氧乙烷和水的多聚物，為一種不帶電荷的直鏈大分子多糖。終濃度為3%～4%的PEG能相對選擇性地沉淀CIC。用分光光度計測定濁度，反應沉淀物含量。第四十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期四

臨床意義

循環(huán)免疫復合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又稱可溶性免疫復合物，分子量為50萬～100萬，沉降系數(shù)8.8～19S，它不易被吞噬細胞吞噬，又不能經(jīng)腎小球排出，可較長時間在血液中循環(huán)，一旦大量循環(huán)免疫復合物沉積于組織中，則引起組織損傷及相關的免疫復合物病。CIC陽性常見于：1.部分自身免疫性疾病，如SLE，類風濕關節(jié)炎等；2.膜增殖性腎炎，鏈球菌感染后腎