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關(guān)于酶的生產(chǎn)條件的優(yōu)化以及常用酶的應(yīng)用第一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四一、酶的生產(chǎn)方法
1、提取法(Extraction)
酶作為生物催化劑普遍存在于動(dòng)物、植物、微生物中,可以直接從生物體中分離提純而獲得,早期酶的生產(chǎn)多是以動(dòng)植物為主要原料提取而得。
動(dòng)、植物等原料中提取。例:胰臟——胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶;動(dòng)物胃——胃蛋白酶;動(dòng)物小腸——堿性磷酸酶;木瓜——木瓜蛋白酶;菠蘿皮——菠蘿蛋白酶;檸檬酸發(fā)酵的廢菌體——果膠酶等。第二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四利用動(dòng)物、植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)方法來(lái)生產(chǎn)酶,由于周期較長(zhǎng)、成本較高,也存在一定難度。50年代以來(lái)酶生產(chǎn)的主要方法。80年代以來(lái),植物細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞發(fā)酵。主要方式:固態(tài)發(fā)酵和液體發(fā)酵法2、發(fā)酵生產(chǎn)法(Biosynthesis)第三頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四1、氧化-還原酶(1)葡萄糖氧化酶 (來(lái)源于霉菌)(2)D氨基酸氧化酶 (來(lái)源于霉菌、腎臟)(3)尿激酶 (來(lái)源于酵母菌、腎臟)(4)過(guò)氧化氫酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌、紅血球)(5)近氧化物酶 (來(lái)源于植物)2、轉(zhuǎn)移酶(1)轉(zhuǎn)氨基酶 (來(lái)源于細(xì)菌、動(dòng)物肝臟)(2)核苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 (來(lái)源于細(xì)菌)3、水解酶脂肪酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌、胰臟)
5`-磷酸二酯酶 (來(lái)源于霉菌)
淀粉酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌、胰臟、麥芽)
果膠酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌)
纖維素酶 (來(lái)源于霉菌、蘑菇)
半纖維素酶 (來(lái)源于霉菌)
溶菌酶 (來(lái)源于細(xì)菌、雞卵白)
蜜二糖酶 (來(lái)源于霉菌)
乳糖酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌)
轉(zhuǎn)化酶 (來(lái)源于細(xì)菌、酵母)
透明質(zhì)酸酶 (來(lái)源于細(xì)菌、動(dòng)物睪丸)
凝乳酶 (來(lái)源于霉菌、小牛胃、羊胃)
天冬酰胺酶 (來(lái)源于細(xì)菌)
脲酶 (來(lái)源于豆科植物)
青霉素?;? (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌)
氨基?;? (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌、牛腎臟)
橙皮苷酶 (來(lái)源于霉菌)
蛋白酶 (來(lái)源于霉菌、放線菌、動(dòng)物內(nèi)臟、植物瓜果)第四頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四4、裂合酶裂合酶天冬氨酸-β-脫羧酶 (來(lái)源于細(xì)菌)β-酪氨酸酶 (來(lái)源于細(xì)菌)延胡索酸酶 (來(lái)源于細(xì)菌)谷氨酸脫羧酶 (來(lái)源于細(xì)菌)5、異構(gòu)酶氨基酸消旋酶 (來(lái)源于細(xì)菌、霉菌、酵母)葡萄糖異構(gòu)酶 (來(lái)源于細(xì)菌、放線菌
第五頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四(1)酶的液體發(fā)酵生產(chǎn)一般過(guò)程液體酶制劑生產(chǎn)流程圖第六頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四①微生物種類多、酶種豐富;②微生物生長(zhǎng)繁殖快,酶易提取;③微生物培養(yǎng)基來(lái)源廣泛、價(jià)格便宜;④酶發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程可實(shí)現(xiàn)規(guī)?;B續(xù)化。(2)微生物產(chǎn)酶的優(yōu)點(diǎn)第七頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四3、化學(xué)合成法:60年代中期出現(xiàn)的新技術(shù)。人工合成酶的方法
1969年,美國(guó)首次用化學(xué)合成法得到含有124個(gè)氨基酸的核糖核酸酶。要求氨基酸純度高,合成成本高昂。至今停留在實(shí)驗(yàn)室階段。目前還受到試劑、設(shè)備條件的限制。第八頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四1、中心法則(CentralDogma)二、酶的生物合成過(guò)程Reversetranscription第九頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四2、RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄)-Transcription
在RNA的合成中,DNA的二條鏈中僅有一條鏈可作為轉(zhuǎn)錄的模板,稱為轉(zhuǎn)錄的不對(duì)稱性。轉(zhuǎn)錄所需酶依賴DNA的RNA聚合酶又稱為轉(zhuǎn)錄酶。原核生物的轉(zhuǎn)錄酶由1種RNA聚合酶催化所有RNA的生物合成。真核生物中RNA聚合酶分別為RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ3種,它們都屬于寡聚酶,酶的亞基數(shù)目為4~10個(gè),亞基種類有4~6種。第十頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四過(guò)程:RNA聚合酶DNA啟動(dòng)基因,DNA雙螺旋部分解開(kāi),以其中一條鏈為模板,通過(guò)堿基互補(bǔ)方式結(jié)合進(jìn)入第一個(gè)核苷酸,然后,RNA聚合酶移動(dòng),DNA逐漸解開(kāi),按模板堿基順序逐個(gè)加入核苷酸并聚合成多聚核苷酸鏈。轉(zhuǎn)錄成的RNA按結(jié)構(gòu)和功能的不同分為mRNA,tRNA和rRNA。RNA聚合酶第十一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四3、翻譯:以mRNA為模板,以氨基酸為底物,在核糖體上通過(guò)各種tRNA,酶和輔助因子,合成多肽。分四個(gè)過(guò)程:A、氨基酸活化生成氨酰-tRNAB、肽鏈合成的起始C、肽鏈的延長(zhǎng)D、肽鏈合成的終止第十二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四A、氨基酸活化生成氨酰-tRNA氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下,與特定的tRNA結(jié)合,由ATP供給能量;第十三頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四AAULeucineACUAsparticAcidAUGThreonineTRANSFERRNAAMINOACIDS第十四頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四AAULeucineACUAsparticAcidAUGThreonineAminoacidscombinewiththetRNAsusingtheenergyfromthesplittingofADP.第十五頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四AAULeucineACUAsparticAcidAUGThreonineAminoacidscombinewiththetRNAsusingtheenergyfromthesplittingofADP.第十六頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四AAULeucineACUAsparticAcidAUGThreonineANTICODON第十七頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四B、肽鏈合成的起始:在GTP和起始因子參與下核糖體30S亞基、甲酰甲硫氨酰-tRNAF(fMet-tRNAF)、mRNA和50S亞基結(jié)合組成起始復(fù)合物。第十八頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四①30S與起始因子IF3結(jié)合;②30S與mRNA結(jié)合形成30S-IF3-mRNA復(fù)合物;③fMet-tRNAF與起始因子IF2以及GTP結(jié)合;過(guò)程可分為五個(gè)階段進(jìn)行:第十九頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四④在起始因子IF1的參與下,fMet-tRNAF-IF2-GTP與30S-IF3-mRNA結(jié)合生成30S起始復(fù)合物,fMet-tRNAF正好位于mRNA的起始密碼子AUG上;第二十頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四⑤50S與30S起始復(fù)合物結(jié)合,形成具有完整結(jié)構(gòu)的70S核糖體。同時(shí)放出IF1、IF2、IF3并使GTP水解生成GDP和Pi;第二十一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四C、肽鏈的延長(zhǎng):在延伸因子的參與下,與mRNA上的密碼子對(duì)應(yīng)的氨酰-tRNA進(jìn)入70S核糖體之中的“A”位。第二十二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四通過(guò)肽合成酶的作用,P位上fMet-tRNAF的甲酰甲硫氨酰(fMet)與A位上的氨酰-tRNA(aa1-tRNA:)以肽鍵結(jié)合,形成肽酰-tRNA。第二十三頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四mRNA和核糖體作相對(duì)移動(dòng),A位上的肽酰t-RNA轉(zhuǎn)至P位,而原在P位上的t-RNAF游離出去。然后下一個(gè)氨酰-tRNA進(jìn)入A位,再重復(fù)上述過(guò)程,使肽鏈不斷延伸,直至終止密碼子為止。
第二十四頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四D、肽鏈合成的終止:隨著肽鏈的延伸,mRNA與70s核糖體不斷地作相對(duì)移動(dòng)。當(dāng)mRNA分子中的終止密碼子(UAA,UAG,UGA)移動(dòng)到核糖體的A位時(shí),沒(méi)有相應(yīng)的氨酰-tRNA進(jìn)入,此時(shí)釋放因子(ReleaseFactor)進(jìn)入A位,并與終止密碼子結(jié)合。第二十五頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四新合成的肽鏈釋放出來(lái)需經(jīng)過(guò)加工形成完整空間結(jié)構(gòu)的酶或蛋白質(zhì)。先經(jīng)過(guò)肽脫甲酰酶的作用,使甲酰甲硫氨酸殘基上的甲?;?。有時(shí)還需在氨肽酶的作用下從肽鏈的N-末端切除一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸殘基。然后自動(dòng)折迭彎曲成完整的空間結(jié)構(gòu)。第二十六頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四三、酶生物合成的調(diào)節(jié)
雅各布(Jacob)和莫諾德(Monod)于1960年提出的操縱子學(xué)說(shuō)來(lái)闡明酶生物合成的調(diào)節(jié)。操縱子調(diào)節(jié)基因Regulatorgene啟動(dòng)基因Promotergene操縱基因Operatorgene結(jié)構(gòu)基因Struturalgene第二十七頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四(1)基因調(diào)控模式3種調(diào)控模式:分解代謝物阻遏作用;酶合成的誘導(dǎo)作用;酶合成的反饋?zhàn)瓒糇饔谩5诙隧?yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四
1)分解代謝物阻遏作用易利營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)代謝使細(xì)胞內(nèi)ATP濃度增加,從而使AMP濃度降低。cAMP可通過(guò)磷酸二酯酶水解成AMP致使cAMP的濃度之而降低。cAMP-CRP復(fù)合物的濃度跟著降低。結(jié)果,在啟動(dòng)基因(P)上沒(méi)有cAMP-CRP復(fù)合物結(jié)合,RNA聚合酶也就無(wú)法結(jié)合到啟動(dòng)基因的位點(diǎn)上。結(jié)構(gòu)基因(S)上的遺傳信息無(wú)法轉(zhuǎn)錄,酶的合成無(wú)法進(jìn)行。第二十九頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四當(dāng)易利用基質(zhì)不存在或用完后,隨著細(xì)胞中ATP濃度的下降,而使ADP,AMP,cAMP的濃度增加。當(dāng)cAMP-CRP的濃度增加到一定量的時(shí)候,cAMP-CRP復(fù)合物結(jié)合到啟動(dòng)基因的特定位點(diǎn)上,RNA聚合酶也隨著結(jié)合到它的位點(diǎn)上,酶的生物合成就有可能進(jìn)行。第三十頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四2)酶生物合成的誘導(dǎo)作用無(wú)誘導(dǎo)物時(shí),阻抑蛋白與操縱基因的結(jié)合較強(qiáng),啟動(dòng)基因上的RNA聚合酶無(wú)法進(jìn)入結(jié)構(gòu)基因上轉(zhuǎn)錄,酶不能合成。有誘導(dǎo)物時(shí),誘導(dǎo)物與阻抑蛋白結(jié)合,阻抑蛋白的結(jié)構(gòu)改變,不能與操縱基因結(jié)合,RNA聚合酶可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄生成mRNA,再進(jìn)一步翻譯成酶蛋白多肽鏈。第三十一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四3)酶生物合成的反饋?zhàn)瓒糇饔卯?dāng)沒(méi)有共阻遏物(酶催化產(chǎn)物或途徑的末端產(chǎn)物)時(shí),阻抑蛋白不能與操縱基因結(jié)合,啟動(dòng)基因上的RNA聚合酶能順利通過(guò)操縱基因位置,結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而合成酶蛋白多肽鏈。當(dāng)有共阻遏物時(shí)與阻抑蛋白特異結(jié)合形成完全阻遏物,與操縱基因的親和力增強(qiáng),阻止RNA聚合酶通過(guò),結(jié)構(gòu)基因無(wú)法轉(zhuǎn)錄,酶合成受阻。第三十二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四四、酶生物合成的模式細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程:調(diào)整期、生長(zhǎng)期、平衡期和衰退期等4個(gè)階段比較細(xì)胞生長(zhǎng)與酶產(chǎn)生的關(guān)系,酶生物合成的模式分為:同步合成型、延續(xù)合成型、中期合成型和滯后合成型。第三十三頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四1、同步合成型
酶的生物合成與細(xì)胞生長(zhǎng)同步進(jìn)行。酶的合成速度與細(xì)胞生長(zhǎng)速度緊密聯(lián)系,又稱為生長(zhǎng)偶聯(lián)型。屬于該合成型的酶,細(xì)胞進(jìn)入旺盛生長(zhǎng)期時(shí),酶大量生成;當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后,酶的合成隨著停止。
細(xì)胞濃度mg/ml酶濃度U/ml總細(xì)胞濃度活細(xì)胞濃度胞外酶濃度胞內(nèi)酶濃度大部分組成酶的生物合成屬于同步合成型,有部分誘導(dǎo)酶也按照此種模式進(jìn)行生物合成。例如米曲霉在含有單寧或者沒(méi)食子酸的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),在單寧或沒(méi)食子酸的誘導(dǎo)作用下,合成單寧酶(tanaseEC3.1.1.20)。
第三十四頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四2、延續(xù)合成型
酶的生物合成在細(xì)胞的生長(zhǎng)階段開(kāi)始,在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后,酶還可以延續(xù)合成一段較長(zhǎng)時(shí)間。
屬于該類型的酶可以是組成酶,也可以是誘導(dǎo)酶。例如,在黑曲霉在以半乳糖醛酸或果膠為單一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng),可以誘導(dǎo)聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,EC3.2.1.15)的生物合成。細(xì)胞濃度mg/ml酶濃度U/ml細(xì)胞濃度mg/ml酶濃度U/ml以半乳糖醛酸為誘導(dǎo)物以含有葡萄糖的果膠為誘導(dǎo)物第三十五頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四3、中期合成型
該類型的酶在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間以后才開(kāi)始,而在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期以后,酶的生物合成也隨著停止。
細(xì)胞濃度mg/ml酶濃度U/ml例如,枯草桿菌堿性磷酸酶(Alkalinephophatase,EC3.1.3.1)的生物合成模式屬于中期合成型。由于該酶的合成受到其反應(yīng)產(chǎn)物無(wú)機(jī)磷酸的反饋?zhàn)瓒簦子质羌?xì)胞生長(zhǎng)所必不可缺的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),培養(yǎng)基中必須有磷的存在。在細(xì)胞生長(zhǎng)的開(kāi)始階段,培養(yǎng)基中的磷阻遏堿性磷酸酶的合成,只有當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間,培養(yǎng)基中的磷幾乎被細(xì)胞用完(低于0.01mmol/L)以后,該酶才開(kāi)始大量生成。又由于堿性磷酸酶所對(duì)應(yīng)的mRNA不穩(wěn)定,其壽命只有30min左右,所以當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入平衡期后,酶的生物合成隨著停止。第三十六頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四4、滯后合成型
此類型酶是在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間或者進(jìn)入平衡期以后才開(kāi)始其生物合成并大量積累。又稱為非生長(zhǎng)偶聯(lián)型。許多水解酶的生物合成都屬于這一類型。酶合成受到培養(yǎng)基中存在的阻遏物的阻遏作用。只有隨著細(xì)胞的生長(zhǎng),阻遏物幾乎被細(xì)胞用完而使阻遏解除后,酶才開(kāi)始大量合成。
若培養(yǎng)基中不存在阻遏物,該酶的合成可以轉(zhuǎn)為延續(xù)合成型。該類型酶所對(duì)應(yīng)的mRNA穩(wěn)定性很好,可以在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后的相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi),繼續(xù)進(jìn)行酶的生物合成。黑曲霉羧基蛋白酶生物合成放線菌素D對(duì)產(chǎn)酶的影響細(xì)胞濃度mg/ml酶濃度U/ml酶濃度U/ml酶濃度U/ml30℃22℃不加加入不加加入第三十七頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四5、理想的酶合成模式mRNA穩(wěn)定性好的,平衡期以后繼續(xù)合成酶;不受阻遏物影響;生產(chǎn)中,最理想的合成模式應(yīng)是延續(xù)合成型。同步合成型要盡量提高其對(duì)應(yīng)的mRNA的穩(wěn)定性,為此適當(dāng)降低發(fā)酵溫度是可取的措施;滯后合成型要設(shè)法降低培養(yǎng)基中阻遏物的濃度,盡量減少甚至解除產(chǎn)物阻遏或分解代謝物阻遏作用,使酶的生物合成提早開(kāi)始;中期合成型則要在提高mRNA的穩(wěn)定性以及解除阻遏兩方面下功夫,使其生物合成的開(kāi)始時(shí)間提前,并盡量延遲其生物合成停止的時(shí)間。第三十八頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四6、酶生產(chǎn)過(guò)程中細(xì)胞生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)
細(xì)胞生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)主要研究細(xì)胞生長(zhǎng)速度以及外界環(huán)境因素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)速度影響的規(guī)律。1950年,法國(guó)的Monod首先提出了表述微生物細(xì)胞生長(zhǎng)的動(dòng)力學(xué)方程。在培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞生長(zhǎng)速率與細(xì)胞濃度成正比。假設(shè)培養(yǎng)基中只有一種限制性基質(zhì),而不存在其他生長(zhǎng)限制因素時(shí),μ為這種限制性基質(zhì)濃度的函數(shù)。KS為Monod常數(shù),是指比生長(zhǎng)速率達(dá)到最大比生長(zhǎng)速率一半時(shí)的限制性基質(zhì)濃度。第三十九頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四限制性基質(zhì)的物料平衡式連續(xù)培養(yǎng)時(shí)的方程變化形式第四十頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四7、酶生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)酶動(dòng)力學(xué)
第四十一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四與生長(zhǎng)相關(guān)與生長(zhǎng)部分相關(guān)與生長(zhǎng)無(wú)關(guān)第四十二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四常用的幾種模型第四十三頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四五、酶的生產(chǎn)菌種枯草桿菌:淀粉酶、蛋白酶;巨大芽孢桿菌:葡萄糖異構(gòu)酶;大腸桿菌:谷氨酸脫羧酶、青霉素?;傅取F【平湍福恨D(zhuǎn)化酶、醇脫氫酶;假絲酵母:脂肪酶、轉(zhuǎn)化酶;黑曲酶:果膠酶、酸性蛋白酶、糖化酶;根霉:糖化酶、轉(zhuǎn)化酶;毛霉菌:蛋白酶、糖化酶、脂肪酶;青霉:纖維素酶、葡萄糖氧化酶;米曲霉:糖化酶、蛋白酶;鏈霉菌:青霉素?;?、堿性蛋白酶、幾丁質(zhì)酶。
第四十四頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四六、酶的發(fā)酵生產(chǎn)工藝過(guò)程1、種子擴(kuò)大培養(yǎng)目的:為每次發(fā)酵罐的投料提供一定數(shù)量代謝旺盛的菌種。種子擴(kuò)大培養(yǎng)級(jí)數(shù)分為多級(jí)流程(一般三級(jí)):斜面菌種……搖床……一級(jí)種子培養(yǎng)------二級(jí)種子罐培養(yǎng)------發(fā)酵罐第四十五頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四2、發(fā)酵方法(1)固體發(fā)酵法:第四十六頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四(2)液體發(fā)酵法:第四十七頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四(3)固定化細(xì)胞(4)固定化原生質(zhì)體第四十八頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四3、發(fā)酵工藝條件的控制(液體發(fā)酵為例)(1)pH值的調(diào)節(jié)細(xì)胞產(chǎn)酶的最適pH通常接近于該酶反應(yīng)的最適pH。如:堿性蛋白酶最適pH為pH8.5-9.0;中性蛋白酶最適pH為pH6.0-7.0;酸性蛋白酶最適pH為pH4-6;不同細(xì)胞需不同pH值;同一細(xì)胞不同pH值條件下產(chǎn)物也不一樣.黑曲霉中性時(shí)產(chǎn)α-淀粉酶多于產(chǎn)糖化酶,偏酸時(shí)產(chǎn)糖化酶提高而產(chǎn)α淀粉酶減少。第四十九頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四(2)溫度的調(diào)節(jié):產(chǎn)酶速度:分段控溫。產(chǎn)熱因素:生物熱+攪拌熱-蒸發(fā)熱-顯熱-輻射熱控制:冷卻(3)溶解氧的調(diào)節(jié)N=KLα·C(C*-C)影響:菌體生長(zhǎng);代謝途徑因素:菌體生長(zhǎng)代謝;發(fā)酵異常(染菌:好氧雜菌、噬菌體;設(shè)備故障:加油器失靈、攪拌停止、溫控失靈、空氣管堵塞)控制:供氧角度(罐結(jié)構(gòu)L/D、攪拌、氣體成分、通氣速率、罐壓);耗氧角度(基質(zhì)濃度、溫度、表面活性劑)。第五十頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四4、提高酶產(chǎn)量的措施(1)添加誘導(dǎo)物:酶作用底物、酶反應(yīng)產(chǎn)物、酶的底物類似物。(2)控制阻遏物濃度:流加難利用碳源;降低未端產(chǎn)物濃度。(3)添加表面活性劑:非離子表面活性劑(吐溫等)可增加細(xì)胞通透性。(4)添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑:植酸鈣鎂——霉菌蛋白酶;PVA——糖化酶;醋酸鈉——纖維素酶第五十一頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四1、激肽釋放酶(1)藥理功能----具有擴(kuò)張血管的功能,并能提高血管通透性,起到改善血液循環(huán)的作用。(2)臨床應(yīng)用----治療動(dòng)脈硬化、血管炎、四肢皮膚潰瘍。(3)生產(chǎn)方法
提取法生產(chǎn)----以豬的頷下腺為原料進(jìn)行提取。
提取法生產(chǎn)----以豬的胰臟為原料進(jìn)行提取。七、常見(jiàn)藥用酶的生產(chǎn)第五十二頁(yè),共六十頁(yè),編輯于2023年,星期四2、雙鏈酶(1)藥理作用----內(nèi)含二種酶,二者合用可清除炎癥物、膿塊、瘀血,促進(jìn)外傷傷愈合。
鏈激酶(SK)、又稱為溶栓酶。能溶解血栓和滲出物的纖維部分。
鏈道酶(SD)、又稱為脫氧核糖核酸酶。能夠液
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